Универсальный внешний накопитель для всех iOS-устройств, совместим с PC/Mac, Android
Header Banner
8 800 100 5771 | +7 495 540 4266
c 9:00 до 24:00 пн-пт | c 10:00 до 18:00 сб
0 Comments

Содержание

Микком-ИСБ — Комплекс безопасности AS101

Разработка, производство и монтаж, с последующим обслуживанием, систем безопасности является основным видом деятельности ООО «МИККОМ-ИСБ». Высокий уровень профессионализма наших сотрудников, выпускников ведущих ВУЗов России (МГУ, МИФИ, МИРЭА, МВТУ), большая часть которых имеет ученые степени, позволяет создавать системы безопасности создать интегрированную систему безопасности AS101.
Первоначальным основополагающим решением было - возложить функции хранения, отображения, обработки информации и управления на компьютер.
Первым продуктом , представленным нами на рынке технических средств безопасности, была система охранной сигнализации AS 501 (Alarm Systems — AS) , выполняющий контроль только за охранными датчиками. Несмотря на всю ограниченность выполняемых функций, в 1992г. это была одной из первых в России компьютеризированных систем.
Следующим шагом стало создания системы создание системы контроля для депозитарных ячеек –AS102. Наряду с функциями охраны в ней были представлены некоторые возможности СКУД. Так снятия депозитной ячейки с охраны осуществлялось набором цифрового кода.

Дальнейшие разработки привели к созданию первой версии интегрированной системы безопасности AS101, сочетающий в себе функции ОПС и СКУД. Важно отметить, что интеграция происходила не только на программном уровне, но и на уровне «железа», что выгодно отличает данный продукт от других якобы интегрированных систем, которые по существу являются лишь сборкой упомянутых выше систем.
Постоянная модификация оборудования и программного обеспечения, внедрение уникальных инновационных решений – залог того, что вот уже на протяжении более чем 20 лет, наша интегрированная система отвечает всем современным требованиям и безотказно работает на более чем 1000 объектах.
Также мы проводим монтаж и пуско-наладку любых слаботочных систем различного назначения. Большой опыт, накопленный на нескольких десятках объектах, позволяет решать поставленные задачи в требуемые сроки и с высоким качеством.

AS101 - современная интегрированная система безопасности

В рубрику "Системы контроля и управления доступом (СКУД)" | К списку рубрик  |  К списку авторов  |  К списку публикаций

МИККОМ-ИСБ, ООО

Компания "МИККОМ-ИСБ" представляет современную интегрированную систему безопасности AS101. Отличное соотношение цены и качества обеспечили нашей системе довольно широкий круг клиентов (около 1500 объектов на конец 2012 г.), а высокие технические характеристики отмечены золотой медалью Национальной отраслевой премии "ЗУБР-2011". В этой статье мы рассмотрим работу AS101 с адресно-аналоговыми пожарными датчиками и информационно-навигационную систему ParkManager

Михаил Мадарисов
Генеральный директор
OOO "МИККОМ-ИСБ", к.т.н.

Наша система AS101 представляет собой современный комплекс безопасности, подсистемы которого, в отличие от отдельных отечественных систем, интегрированы не только на программном уровне, но и на уровне "железа". Это позволяет существенно уменьшить количество необходимых для создания типов устройств, что сильно упрощает процессы обучения и эксплуатации. Так, например, потребуется всего три типа устройств (контроллер, концентратор, адаптер), чтобы сформировать систему безопасности AS 101 с функциями СКУД и ОПС для объекта любого уровня сложности и объема. Распределенная сетевая структура и резервирование серверов - залог высокой надежности комплекса.

AS101 - пожарная сигнализация на адресно-аналогововых устройствах

Система AS101 может работать как с традиционными неадресными пожарными извещателями, так и с адресно-аналоговыми устройствами. В качестве партнера была выбрана компания с мировым именем - Apollo Fire Detectors Ltd., производящая адресно-аналоговые извещатели, интерфейсные модули и оповещатели серий ХР95 и XPlorer. С помощью полученных по договоренности от Apollo Fire Detectors Ltd. протоколов обмена и параметров работы наша фирма разработала соответствующие сетевые контроллеры различной емкости, позволяющие осуществлять работу с устройствами указанных серий в полном объеме.

Высокая достоверность обнаружения пожара достигается за счет программирования пороговых уровней извещателей для разного времени суток и дней недели и возможности адаптации их чувствительности в процессе эксплуатации. Автокомпенсация дрейфа позволяет поддерживать эффективность функционирования дымовых извещателей, даже если они загрязняются в процессе эксплуатации, что увеличивает период между техническими обслуживаниями. Применение адресных модулей управления и контроля различных типов дает возможность управлять и контролировать работу систем пожарной автоматики и инженерных систем объекта любой сложности.

Объединение нескольких систем в единый комплекс (с поэтапным наращиванием при необходимости) позволяет защитить объекты с практически неограниченной площадью и удаленностью. При аварии кольцевого шлейфа осуществляется автоматический переход на два полукольца кольцевого шлейфа и возврат в норму при устранении аварии.

Сегодня выпускаются контроллеры емкостью от двух кольцевых шлейфов (252 адреса) до восьми (1024 адреса). Корпуса контроллеров имеют два типа: для монтажа в стойку 19" высотой 4U (до 1008 адресов) и в боксах для настенного монтажа (до 504 адресов).

AS101 - информационно-навигационная система ParkManager

Автоматизированная информационно-навигационная система ParkManager предназначена для точного определения количества и расположения свободных мест на парковке и информирования об этом водителей и персонала. В основу данной системы (концепция, структура, протоколы обменов, отдельные блоки, часть ПО) заложена интегрированная система безопасности AS 101. Учитывая опыт многолетней эксплуатации AS101, можно с полной уверенностью утверждать, что такое решение определило высокую надежность, удобство и простоту обслуживания.

В рамках данного проекта специалисты "МИККОМ-ИСБ" создали ряд новых устройств (ультразвуковой датчик, выносные индикаторы, информационные табло, датчик въезда/выезда, счетчики-сумматоры) и ПО.

Принцип работы заключается в подсчете количества въехавших и выехавших машин и в точном определении расположения свободных и занятых мест. Световая индикация каждого парковочного места и информационные табло указывают водителю на свободные места и оптимальный маршрут к ним. Обеспечиваются оперативный и постоянный контроль загруженности с предоставлением персоналу всей необходимой информации, управление светофорами, табло и шлагбаумами.


Очевидно, что оснащение парковочного комплекса предложенной системой даст владельцам (администрации) следующие преимущества:

  • повышение уровня лояльности клиентов, которые, без сомнения, оценят комфорт и безопасность;
  • постоянный мониторинг ситуации, в том числе и с помощью удобных графических планов. Хранение информации для дальнейшего анализа и выработки оптимальной стратегии управления;
  • оптимизация поиска свободного места, минимальное время и маршрут и, как следствие, меньшая загазованность;
  • на больших паркингах из-за невнимательности водителей обычно не заполнены до 20% мест. Наша система позволит избежать этого;
  • обычно поток машин неравномерен как в течение дней недели, так и в различные часы. Система ParkManager позволяет выбрать оптимальное управление парковкой в любой момент времени. Например, когда машин мало, можно последовательно заполнять этажи или зоны парковки. При этом часть паркинга остается совершенно свободной, что существенно экономит расходы на освещение, вентиляцию и уборку;
  • на этапе проектирования, а в некоторых случаях и на действующей парковке применение нашей системы позволяет увеличить количество мест до 10%. Это достигается за счет четкого информирования водителей о наличии свободных мест.

115201 Москва,
Каширское ш., 22,
корп. 3, офис 309
Тел.: (495) 727-0838, 727-1918
Факс: (495) 727-0838
E-mail: micсо[email protected]
www.miccom.ru

Опубликовано: Каталог "СКУД. Антитерроризм"-2013
Посещений: 7312

В рубрику "Системы контроля и управления доступом (СКУД)" | К списку рубрик  |  К списку авторов  |  К списку публикаций

AS101–СОВРЕМЕННАЯ ИНТЕГРИРОВАННАЯ СИСТЕМА БЕЗОПАСНОСТИ

Компания «МИККОМ-ИСБ» представляет современную интегрированную систему безопасности AS101.

Отличное соотношение цены и качества обеспечили нашей системе довольно широкий круг клиентов, а высокие технические характеристики отмечены золотой медалью Национальной отраслевой премии «ЗУБР-2011».

В этой статье мы рассмотрим работу AS101 с адресно-аналоговыми пожарными датчиками и информационно-навигационную систему ParkManager.

Система AS101 представляет собой современный комплекс безопасности, подсистемы которого, в отличие от отдельных отечественных систем, интегрированы не только на программном уровне, но и на уровне «железа». Это позволяет существенно уменьшить количество необходимых для создания типов устройств, что сильно упрощает процессы обучения и эксплуатации. Так, например, потребуется всего три типа устройств (контроллер, концентратор, адаптер), чтобы сформировать систему безопасности AS101 с функциями СКУД и ОПС для объекта любого уровня сложности и объёма. Распределённая сетевая структура и резервирование серверов – залог высокой надёжности комплекса.

Пожарная сигнализация на адресно-аналоговых устройствах


Система AS101 может работать как с традиционными неадресными пожарными извещателями, так и с адресно-аналоговыми устройствами. В качестве партнёра была выбрана компания с мировым именем – Apollo Fire Detectors Ltd, производящая адресно-аналоговые извещатели, интерфейсные модули и оповещатели серий ХР95 и XPlorer. С помощью полученных по договоренности от Apollo Fire Detectors Ltd протоколов обмена и параметров работы наша фирма разработала соответствующие сетевые контроллеры различной ёмкости, позволяющие осуществлять работу с устройствами указанных серий в полном объёме. Высокая достоверность обнаружения пожара достигается за счёт программирования пороговых уровней извещателей для разного времени суток и дней недели и возможности адаптации их чувствительности в процессе эксплуатации. Автокомпен-сация дрейфа позволяет поддерживать эффективность функционирования дымовых извещателей, даже если они загрязняются в процессе эксплуатации, что увеличивает период между техническими обслуживаниями.

Применение адресных модулей управления и контроля различных типов даёт возможность управлять и контролировать работу систем пожарной автоматики и инженерных систем объекта любой сложности. Объединение нескольких систем в единый комплекс (с поэтапным наращиванием при необходимости) позволяет защитить объекты с практически неограниченной площадью и удалённостью.

При аварии кольцевого шлейфа осуществляется автоматический переход на два полукольца кольцевого шлейфа и возврат в норму при устранении аварии. Сегодня выпускаются контроллеры ёмкостью от двух кольцевых шлейфов (252 адреса) до восьми (1024 адреса). Корпуса контроллеров имеют два типа: для монтажа в стойку 19" высотой 4U (до 1008 адресов) и в боксах для настенного монтажа (до 504 адресов).

Информационно-навигационная система ParkManager
Автоматизированная информационно-навигационная система ParkManager предназначена для точного определения количества и расположения свободных мест на парковке и информирования об этом водителей и персонала. В основу данной системы (концепция, структура, протоколы обменов, отдельные блоки, часть ПО) заложена интегрированная система безопасности AS101. Учитывая опыт многолетней эксплуатации AS101, можно с полной уверенностью утверждать, что такое решение определило высокую надёжность, удобство и простоту обслуживания. В рамках данного проекта специалисты «МИККОМ-ИСБ» создали ряд новых устройств (ультразвуковой датчик, выносные индикаторы, информационные табло, датчик въезда/выезда, счётчики-сумматоры) и ПО.

Принцип работы заключается в подсчёте количества въехавших и выехавших машин и в точном определении расположения свободных и занятых мест. Световая индикация каждого парковочного места и информационные табло указывают водителю на свободные места и оптимальный маршрут к ним. Обеспечиваются оперативный и постоянный контроль загруженности с предоставлением персоналу всей необходимой информации, управление светофорами, табло и шлагбаумами.

Очевидно, что оснащение парковочного комплекса предложенной системой даст владельцам (администрации) следующие преимущества:
• повышение уровня лояльности клиентов, которые, без сомнения, оценят комфорт и безопасность;
• постоянный мониторинг ситуации, в том числе и с помощью удобных графических планов. Хранение информации для дальнейшего анализа и выработки оптимальной стратегии управления;
• оптимизация поиска свободного места, минимальное время и маршрут и, как следствие, меньшая загазованность;
•на больших паркингах из-за невнимательности водителей обычно не заполнены до 20% мест. Наша система позволит избежать этого;
• обычно поток машин неравномерен как в течение дней недели, так и в различные часы. Система ParkManager позволяет выбрать оптимальное управление парковкой в любой момент времени;
• например, когда машин мало, можно последовательно заполнять этажи или зоны парковки. При этом часть паркинга остаётся совершенно свободной, что существенно экономит расходы на освещение, вентиляцию и уборку;
• на этапе проектирования, а в некоторых случаях и на действующей парковке, применение нашей системы позволяет увеличить количество мест до 10%. Это достигается за счёт чёткого информирования водителей о наличии свободных мест.

М.Р. Мадарисов,
генеральный директор, к. т.н.

ООО «МИККОМ-ИСБ»
115201, г. Москва,
Каширское ш., д. 22, корп. 3,
оф. 309, 408
тел.: +7 (495) 727 0838
+7 (495) 727 1918
e-mail: micсом@miccom.ru
www.miccom.ru

 

Информация о рейсе Alaska Airlines AS101: Сиэтл — Анкоридж

Информация о рейсе Alaska Airlines AS101: Сиэтл — Анкоридж

 

Сб. 13 фев

Сиэтл → Анкоридж



Рейс Alaska Airlines AS101 (Сиэтл — Анкоридж) выполняется из аэропорта Такома (SEA), в аэропори Анкоридж (ANC). Рейс осуществляется на самолетах семейства Boeing 737-900, Boeing 737-700 Passenger, Boeing 737-800. Расстояние полета в среднем составляет 1481 миль / 2383 км. Время полета в среднем составляет 3 час. 16 мин.

Информация о задержках рейса AS101


Задержки вылета

Средняя задержка вылета


Задержка вылета в %


Задержки прибытия

Средняя задержка прибытия


Задержка прибытия в %


Статистика задержек построена на информации о задержках 11 рейсах.

Календарь низких цен на авиабилеты





История рейса Alaska Airlines - AS101


Сб. 13 фев
- -
SEABoeing 737-900 (N284AK) ANC
Пн. 10 авг
15:46 17:57
SEABoeing 737-900 (N293AK) ANC
Вс. 9 авг
15:40 17:45
SEABoeing 737-900 (N293AK) ANC
Ср. 25 мар
16:38 18:54
SEA

+31 м.

Boeing 737-900 (N309AS) ANC

+47 м.

Ср. 18 сен
07:18 09:34
SEABoeing 737-900 (N319AS) ANC
Вт. 17 сен
07:38 09:54
SEABoeing 737-900 (N486AS) ANC
Вт. 23 июл
07:04 09:00
SEABoeing 737-900 (N274AK) ANC
Пн. 22 июл
07:11 09:05
SEABoeing 737-700 Passenger (N615AS) ANC
Вт. 16 июл
07:11 09:25
SEABoeing 737-700 Passenger (N612AS) ANC
Пн. 15 июл
07:13 09:17
SEABoeing 737-800 (N586AS) ANC
Ср. 19 июн
07:20 09:39
SEABoeing 737-700 Passenger (N614AS) ANC
Вт. 18 июн
07:35 09:50
SEABoeing 737-700 Passenger (N607AS) ANC

Показать еще


Код-шеринг рейсы


Korean Air

Korean Air

American Airlines

American Airlines

Korean Air

American Airlines

Emirates

Типы и модели воздушных судов выполняющие рейс AS101


Информация о типах, моделях и бортовых номерах воздушных судов выполняющие рейс AS101. Также данный раздел содержит информация о процентном соотношение по типам и бортовым номерам воздушных судов чаще всего выполняющие рейс AS101. Проще говоря какие воздушные суда чаще выполняют рейс.

Boeing 737-900

25%


Boeing 737-800

20%


Boeing 737-700 Passenger

54%



Другие рейсы по маршруту Сиэтл — Анкоридж




Статистика по рейсу Сиэтл — Анкоридж


График отображает кол-во рейсов по маршруту Сиэтл — Анкоридж за последние 30 дней.

 

AS101 осциллограф 10 МГц, 1 канал, OWON

Модель

AS101

Полоса пропускания

DC 0-10 MHz, AC 10 Hz-10MHz

Количество каналов

1

Горизонтальная

система

Частота выборки

100 Ms/sec

Интерполяция

Sinx/x

Скорость сканирования (s/div)

0. 05 µs/div – 0.1 sec/div, пошагово 1, 2, 5

Точность в реальном времени

+/-100 ppm

Коэффициент обрезки

≥2.5:1

Вертикальная

система

Чувствительность

5 mV/div – 10V/div

Смещение

+/- 10 div

Аналоговая полоса пропускания

10 MHz

Нижний порог частоты

≥10 Hz (на входе, АС сопряжение, - 3 dB)

Время нарастания фронта импульса

≥30 ns

Коэффициент обрезки

≥2.5:1

Сопряжение на входе

AC, DC, Заземление

Входной импеданс

1 MΩ +/-2% параллельно с 20 pF +/- 5pF

Макс. Напряжение на входе

400 V (DC+AC, PK-PK)

X-Y модель

Чувствительность

X: 0.5 V/div; Y: 0.1 V/div – 1V/div

Полоса пропускания (- 3dB)

DC: 0-1 MHz; AC: 10 Hz- 1MHz

Триггер

Диапазон уровня триггера

+/- 4 div от центра экрана

Точность уровня триггера (стандартная)

+/- 0.3 div

Источники триггера

Внутренний/линейный/внешний

Режимы  триггера

Norm, Auto, TV

Синхронизация по краю сигнала

Нарастание, падение

Синхронизация по видео сигналам

Поддержка стандартного NTSC, PAL/SECAM

Частота выборки/ реле времени

+/- 100 ppm

Блокировка триггера

Поддерживается

Входное сопротивление внешнего триггера

1 MΩ +/- 2% параллельно с 20 pF +/- 5pF

Макс. Напряжение от внешнего триггера

400 Vpp

Триггерный выход зонда-компенсатора

Выходное напряжение (стандартное)

Квадратичное, 0.5 Vpp +/- 2%

Частота (стандартная)

Квадратичная волна 1KHz (+/- 1%)

Экран

3.7 дюйма цветной ЖКИ

Источник питания

100V – 240V AC, 50-60 Hz, Cat II

Потребляемая мощность

≤15 W

Предохранитель

1A, class 250V

Размеры (ширина х высота х длина)

117 х 192 х 288

Вес

1.8 кг

AS101 осциллограф 1 х 10 МГц

AS101 -  одноканальный осциллограф начального уровня, производства компании OWON.  

 

Осциллограф AS-101 OWON является, пожалуй самым простым, если таковое определение уместно, осциллографом. обладает полосой пропускания  10 МГц, и скоростью выборки в 100 МВ/с. Доступны для пользователя основные условия синхронизации – по уровню.

Но так как предназначен для учебных заведений то реализована одна из важных функций для обучения – фигуры Лиссажу.

ОСОБЕННОСТЬ осциллогафа OWON AS101:

• одноканальный осциллограф +  внешний вход синхронизации EXT.
• Входная чувствитеьность: 5 мВ – 10 В/дел
• Частота дискретизации: 100 МВ/с в реальном масштабе времени
• Диапазон входных напряжений: до 400 В.
 

Технические особенности виртуального осциллографа OWON AS101:

• Полоса пропускания, и количество каналов: 10 МГц х 1 канал,  +  вход внешней синхронизации

• Импеданс входа: 1МОм, 25пФ

• Скорость выборки (АЦП): 100 МВ/с (в реальном масштабе времени) 

• Чувствительность по вертикали: 5 мВ/дел – 10 В/дел 

• Развёртка во времени: 50 нс/дел – 0,1 с/дел.

• Режим отображения осциллограмм: XY (для построения фигур Лиссажу) , XT.

 Режим синхронизации: по уровню

• Габариты:  117 мм  x 192 мм x 288 мм, масса: 1,8  кг.

• Питание: 220В, 50 Гц, 15 Вт.

Детальные технические характеристики и руководство пользователя  осциллографа OWON AS101 (pdf. eng.)

Купить виртуальный осциллограф OWON AS101 можете в нашем интернет магазине cityset.com.ua.

Стандартная комплектация:

• Осциллограф OWON AS101 - 1 шт. • Пробники осциллографические -1 шт. • Руководство пользователя - 1 шт. • Гарантийный талон - 12 месяцев.

В случае имеющихся вопросов относительно функциональных возможностей, просьба обратится к нашему техническому специалисту по указанным выше телефонам.

USB-флэш накопитель A-Data Superior S101 16GB (AS101-16G-RBK)

Основные характеристики

Объем памяти, Гб ?

Выдвижной коннектор

Пылевлагозащитный корпус

Аппаратное шифрование данных ?

Заметили ошибку или неточность в описании товара? Сообщите нам, пожалуйста.

Влияние нового соединения теллура AS101 на аутоиммунные заболевания

Основные моменты

Небольшое нетоксичное соединение теллура AS101 снижает аутоиммунную активность.

AS101 подавляет функцию Th27 / IL-17 в аутоиммунной среде.

AS101 ингибирует специфические интегрины, которые имеют решающее значение для экстравазации лейкоцитов.

Соединение Te (такое как AS101) является многообещающим кандидатом для лечения аутоиммунных заболеваний.

Abstract

Теллур - редкий элемент, который считается второстепенным микроэлементом, несмотря на его относительное содержание в организме человека. Химический состав теллура поддерживает множество активностей, но его биохимия до сих пор четко не установлена. Небольшое соединение теллура IV , трихлор (диоксоэтилен- o, o ′) теллурат (AS101) аммония, разработанное и первоначально исследованное нами, в настоящее время проходит клинические испытания фазы II у пациентов с псориазом. AS101 - первое соединение теллура, испытанное на клиническую эффективность. Это соединение является мощным иммуномодулятором как in vitro, так и in vivo с множеством потенциальных терапевтических применений. Настоящий обзор будет сосредоточен на иммуномодулирующих свойствах AS101 и, в частности, на его влиянии на уменьшение аутоиммунных заболеваний. AS101 обладает несколькими активностями, которые действуют на иммунную систему, включая: 1) его способность снижать уровни IL-17 и ингибировать функцию клеток Th27; 2) его специфическая уникальная редокс-модулирующая активность, позволяющая ингибировать специфические интегрины лейкоцитов, такие как α4β1 и α4β7, которые имеют решающее значение для диапедеза макрофагов и CD4 + T воспалительных / аутореактивных клеток в аутоиммунные ткани; и 3) его способность усиливать активность регуляторных Т-клеток (Treg).Эти действия в сочетании с отличным профилем безопасности позволяют предположить, что AS101 может быть многообещающим кандидатом для лечения аутоиммунных заболеваний.

Сокращения

IBD

воспалительные заболевания кишечника

CNS

центральная нервная система

EAE

экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит

MADCAM

адгезия слизистой оболочки молекула клеточной адгезии

DSS

декстран натрия сульфат

09

Tellur 9000

Tellur

Tellur

Интегрины

Цитокины

IL-17

Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (0)

Полный текст

Copyright © 2014 Elsevier B.V. Все права защищены.

Рекомендуемые статьи

Ссылки на статьи

AS101 улучшает экспериментальный аутоиммунный увеит, регулируя ответы Th2 и Th27 и индуцируя Treg-клетки

Основные моменты

AS101 - новый нетоксичный иммуномодулятор с плейотропными эффектами.

AS101 стимулирует регуляторные Т-клетки in vivo и in vitro независимо от TGF-β.

AS101 подавляет дифференцировку эффекторных клеток Th2 и Th27.

Лечение AS101 ослабляет экспериментальный аутоиммунный увеит.

Реферат

AS101 - это целлюлозоорганическое соединение с многогранными иммунорегуляторными свойствами, которое отличается отсутствием токсичности. Мы протестировали терапевтический эффект AS101 при экспериментальном аутоиммунном увеите (EAU), модели аутоиммунного увеита человека. Неожиданно обработка AS101 вызвала генерацию Treg in vivo у мышей, не подвергавшихся манипуляциям.У мышей, иммунизированных против EAU ретинальным антигеном IRBP и обработанных AS101, развилось ослабленное заболевание, также как и у получавших AS101 реципиентов ретина-специфических Т-клеток, активированных in vitro . В обоих случаях количество эффекторных Т-клеток, инфильтрирующих глаз, было уменьшено, тогда как регуляторных Т (Treg) -клеток в селезенке увеличивалось. Механистические исследования in vitro показали, что AS101 ограничивает поляризацию ретина-специфических Т-клеток по отношению к клонам Th2 или Th27 путем репрессии активации их соответствующих клон-специфичных факторов транскрипции и нижестоящих сигналов. Специфические для сетчатки Т-клетки, поляризованные in vitro и по направлению к Th2 или Th27 в присутствии AS101, имели нарушенную способность индуцировать EAU у наивных реципиентов. Наконец, AS101 способствовал дифференцировке специфичных для сетчатки Т-клеток в Tregs in vitro независимо от TGF-β. Мы пришли к выводу, что AS101 модулирует аутоиммунные Т-клетки, ингибируя приобретение и экспрессию эффекторной функции и способствуя генерации Treg, и предполагаем, что AS101 может быть полезен в качестве терапевтического подхода при аутоиммунном увеите.

Ключевые слова

AS101

Регуляторные Т-клетки

Th27 клетки

Экспериментальный аутоиммунный увеит

Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (0)

Полный текст

Опубликовано Elsevier Ltd.

0003 Рекомендуемые статьи

Citing 101 »Академики

История развития астрономии и движения планет. Формирование солнечной системы. Солнце и его влияние на землю. Описание планет и спутников нашей Солнечной системы, включая недавние результаты космической программы. Использование обсерватории. Имеет зачетные единицы по естественным наукам (с лабораторией) в CAS. Начиная с осени 2018 года, этот курс включает в себя единый блок в каждой из следующих областей BU Hub: научное исследование I, количественное мышление I, критическое мышление.

ОСЕНЬ 2021 График
Раздел Инструктор Место нахождения График Банкноты
A1 Espaillat CAS B18 MWF 11:15–12: 05 Класс Полный
ОСЕНЬ 2021 График
Раздел Инструктор Место нахождения График Банкноты
A2 Espaillat CAS 521 Пн 14:30 - 15:45 Класс Полный
ОСЕНЬ 2021 График
Раздел Инструктор Место нахождения График Банкноты
A3 Espaillat CAS 521 T 11: 00-12: 15 Класс Полный
ОСЕНЬ 2021 График
Раздел Инструктор Место нахождения График Банкноты
A4 Espaillat CAS 521 T 14: 00-15: 15 Класс Полный
ОСЕНЬ 2021 График
Раздел Инструктор Место нахождения График Банкноты
A5 Espaillat CAS 521 В 15:30 - 16:45 Класс Полный
ОСЕНЬ 2021 График
Раздел Инструктор Место нахождения График Банкноты
A6 Espaillat CAS 521 Т 17: 00-18: 15
ОСЕНЬ 2021 График
Раздел Инструктор Место нахождения График Банкноты
A7 Espaillat CAS 521 Вт 16:30 - 17:45 Класс Полный
ОСЕНЬ 2021 График
Раздел Инструктор Место нахождения График Банкноты
A8 Espaillat CAS 521 R 11: 00–12: 15 Класс Полный
ОСЕНЬ 2021 График
Раздел Инструктор Место нахождения График Банкноты
A9 Espaillat CAS 521 R 14: 00-15: 15

Примечание: этот курс также предлагается во время летнего семестра

.

Обратите внимание, что эта информация может измениться в любое время.Посетите ссылку для студентов, чтобы получить самую последнюю информацию о курсе.

Бактерицидная активность теллурового соединения AS101 против Enterobacter cloacae | Журнал антимикробной химиотерапии

Аннотация

Цели

В этом исследовании впервые показано антибактериальное действие теллурового соединения AS101 на грамотрицательную бактерию Enterobacter cloacae .

Методы

Антимикробный эффект препарата проявлялся в ингибировании роста, в ингибировании образования биопленок и в его способности проникать в бактериальную клетку и вызывать повреждения и ультраструктурные изменения.

Результаты

AS101 оказался бактерицидным препаратом с МИК и МБК 9,4 мг / л. Он подавляет рост бактерий и вызывает снижение жизнеспособности на шесть порядков в богатой белком среде, но не в среде с более низким содержанием белка, если не добавить 2-меркаптоэтанол. Субингибирующие концентрации подавляют подвижность и образование биопленок. AS101 проникает в бактерии через свои порины и вызывает бактериальное повреждение насосов Na + / K + и утечку калия, фосфора и серы.Ультраструктурные изменения внутри бактериальной клетки и на ее поверхности демонстрируют неполную поверхность с вогнутостью в центре, которая выглядит как отверстие, из которого высвобождаются агрегаты, а также происходит лизис клеток.

Выводы

AS101 обладает антибактериальной активностью, которая может быть полезна против E. cloacae и других видов Enterobacteriaceae в качестве замены существующих антибиотиков, которые стали неэффективными из-за повышения устойчивости бактерий.

Введение

Нетоксичный иммуномодулятор трихлор (диоксиэтилен- O , O ′) теллурат аммония (AS101) представляет собой низкомолекулярное (312 Да) синтетическое теллуровое соединение. 1 AS101 обладает иммуномодулирующими свойствами 2–5 и, как было показано в нескольких доклинических и клинических исследованиях, оказывает положительное воздействие. Также было показано, что он обладает антибактериальной способностью в модели перевязки слепой кишки и пункции (CLP) за счет увеличения выживаемости мышей с сепсисом 6 и снижения смертности и количества ран в модели золотой рыбки, инфицированной бактериями Aeromonas salmonicida . и подвергался стрессу. 7 Приведенные выше модели предполагают косвенное действие AS101 на грамотрицательные бактерии.Эта лаборатория недавно продемонстрировала прямой антимикробный эффект AS101 на бета-лактамазу расширенного спектра (БЛРС) и не продуцирующие БЛРС штаммы Klebsiella pneumoniae . 8

Enterobacter cloacae составляют часть нормальной флоры желудочно-кишечного тракта 40–80% населения и широко распространены в окружающей среде. 9,10 Как и большинство представителей семейства Enterobacteriaceae, эти микроорганизмы являются важными внутрибольничными патогенами, способными вызывать оппортунистические инфекции среди госпитализированных или ослабленных 9,11–14 пациентов и пациентов с ослабленным иммунитетом. 14 E. cloacae также оказался важным патогеном, вызывающим бактериемию 9,13–16 и инфекции высокого риска в отделениях интенсивной терапии новорожденных. 11–13,17 В связи с увеличением числа нечувствительных к антибиотикам штаммов, действие иммуномодулятора AS101 было также исследовано на E. cloacae . В настоящем исследовании антимикробный потенциал AS101 на E. cloacae , ингибирование образования биопленок и его способность проникать в клетки E.cloacae , а также повреждения, вызванные этим соединением.

Материалы и методы

Штаммы бактерий

В данном исследовании были изучены девять клинических штаммов E. cloacae . E. cloacae штаммов были выделены в Лаборатории клинической микробиологии из гноя (четыре штамма) и из культур крови (пять штаммов) и были любезно предоставлены доктором З. Лазаровичем, руководителем лаборатории клинической микробиологии в Медицинском центре Ассаф Арофе, Зерифин. , Израиль.Штаммы были протестированы на их чувствительность к антибиотикам с помощью стандартной методики диффузии в агаре на агаре Мюллера – Хинтона (Difco, Детройт, штат Мичиган, США). Диски с антибиотиками были приобретены у Becton-Dickinson, и их содержание в микрограммах на диск, а также их символ указаны в скобках. Все девять штаммов были нечувствительны к ампициллину (AM 10), цефалотину (CF 30), цефокситину (FOX 30), эритромицину (E 15) и триметоприму / сульфаметоксазолу (SXT 25). Они были чувствительны к тетрациклину (TE 30), полимиксину B (PB 300) и аминогликозидам тобрамицину (NN 10) и амикацину (AN 30).Эти штаммы также были чувствительны к хинолонам, ципрофлоксацину (CIP 5) и офлоксацину (OFX 5).

Рост бактерий и условия лечения

Все девять штаммов выращивали в течение ночи при 37 ° C в аэробных условиях на агаре с мозгом и сердцем (BHA). Культуры переносили в жидкую среду для инфузии мозга и сердца (BHI) для получения начальной оптической плотности (OD) 0,1 при 660 нм (примерно 1,2 × 10 8 КОЕ / мл). Культурам давали возможность расти дальше при перемешивании со скоростью 180 об / мин.В большинстве экспериментов обработка AS101 начиналась, когда культуры достигли ОП 0,4 при 660 нм (около 5 × 10 8 КОЕ / мл). В некоторых экспериментах лекарство добавляли к бактериальным культурам в начале инкубации, когда OD составляла 0,1 при 660 нм. Рост бактерий определяли при 660 нм с помощью спектрометра Biochrom LKB (Novaspec, Кембридж, Великобритания). Жизнеспособные бактерии отслеживали и рассчитывали путем подсчета количества КОЕ после соответствующего разведения на чашках с агаром. Бактериальные культуры, выращенные в тех же условиях, но без препарата, служили контролем.

Теллурорганическое соединение AS101

AS101 (рис. 1) был предоставлен профессором М. Альбеком с кафедры химии Университета Бар-Илан, Рамат-Ган, Израиль, в виде раствора 150 мг / л в PBS при pH 7,4, и его поддерживали при 4 °. C пока не использовал.

Рисунок 1.

Химическая структура AS101.

Рисунок 1.

Химическая структура AS101.

Тест диффузии в агаре

Тест диффузии в агаре проводили с использованием метода диффузии Кирби-Бауэра. 18 Культуры E. cloacae выращивали в аэробных условиях в течение ночи при 37 ° C на чашках BHA, затем суспендировали в BHI до получения OD 0,1 при 660 нм (примерно 1,2 × 10 8 КОЕ / мл) и позволяли расти при перемешивании со скоростью 180 об / мин для получения экспоненциального роста до OD 0,4 при 660 нм. Затем клетки разбавляли 1: 100 и равномерно распределяли по чашкам с агаром, содержащим указанную среду. Для тестирования антибактериальной активности 10 мкл капель AS101, содержащих конечное количество 0. 094, 0,1875, 0,375, 0,75 и 1,5 мкг / капля помещали на поверхность чашек BHA или в сравнительных тестах на питательном агаре (NA). Затем планшеты инкубировали в аэробных условиях в течение 24 ч при 37 ° C и измеряли диаметры зон ингибирования в миллиметрах.

Определения MIC и MBC

MIC AS101 определяли методом разбавления бульона. 19 Культуры E. cloacae выращивали в аэробных условиях в течение ночи на чашках BHA при 37 ° C, затем суспендировали в BHI для получения OD 0.1 при 660 нм и перемешивали при 180 об / мин для получения культур экспоненциального роста (около 5 × 10 8 КОЕ / мл). Пробирки, содержащие среду BHI и 2-кратные разведения AS101 от концентрации 75 мг / л до 2,3 мг / л, инокулировали ∼10 5 бактерий и инкубировали в аэробных условиях в течение 24 часов при 37 ° C. МИК определяли как самую низкую концентрацию AS101, которая предотвращала рост бактерий. МБК определяли путем отбора проб из всех пробирок без визуального помутнения по результатам теста MIC. Аликвоты 0.На планшеты BHA наносили 1 мл. MBC считался самой низкой концентрацией AS101, которая полностью подавляла рост любых КОЕ в течение 24 часов инкубации при 37 ° C. В качестве положительного контроля использовали культуру, содержащую PBS в том же объеме, что и лекарственное средство, и инокулированную тем же инокулятом клеток E. cloacae .

Исследование подвижности и способности E. cloacae образовывать биопленку

Анализы подвижности выполняли, как описано Marr et al . 20 и Оверхэдж и др. . 21 с небольшими изменениями. Ночные культуры E. cloacae выращивали на чашках с агаром Лурия-Бертани (LB) (Difco). Одиночные колонии E. cloacae высевали в специальные чашки с плавающим, роящимся или дергающимся агаром в виде аликвот 1-2 мкл. Плавательную моторику оценивали на чашках с глюкозой BM2 +. Последняя среда содержала 62 мМ калий-фосфатный буфер при pH 7 в дополнение к 7 мМ (NH 4 ) 2 SO 4 , 2 мМ MgSO 4 , 10 мкМ FeSO 4 и 0.4% (мас. / Об.) Глюкозы. К этой среде добавляли агар (Becton-Dickinson), 0,3% (мас. / Об.). Роевость исследовали на чашках с модифицированной глюкозой BM2 +, где 0,5% казаминокислоты заменяли 7 мМ (NH 4 ) 2 SO 4 . Модифицированная среда содержала 0,5% (мас. / Об.) Агара (Becton-Dickinson). Подергивание оценивали на чашках LB (Difco), содержащих 1% агара. Для обработки AS101 лекарство добавляли в среду до затвердевания во всех трех типах планшетов при конечных концентрациях 4.7 или 9,4 мг / л. Планшеты без препарата служили контролем. Планшеты инкубировали в течение 20 ч при 37 ° C, после чего измеряли плавание или роение. Подергивание измеряли через 24–48 ч инкубации при 37 ° C. 22 Все эксперименты повторяли трижды.

Формирование биопленки было обнаружено, как описано в недавней работе, 23,24 с некоторыми модификациями. Ночные культуры разводили 1: 100 в свежей среде BHI в боросиликатных стеклянных пробирках (75 × 12 мм), которые содержали концентрации AS101, уменьшающиеся в 2 раза по сравнению с 9.От 4 мг / л (МИК) до 0,55 мг / л. Культура без AS101 служила контролем. Все культуры инкубировали при 37 ° C в течение 15 ч. Статическую биопленку выявляли, отбрасывая среду и дважды промывая пробирки бидистиллированной водой. В пробирки загружали 4 мл 1% кристаллического фиолетового на 15 мин. Краситель промывали бидистиллированной водой, и о появлении биопленки свидетельствовало наличие фиолетового кольца в пробирках.

Восстановление порообразующих белков в липосомах и анализ набухания

Белки наружных мембран E.cloacae были разделены согласно методу, описанному Tada и Yamaguchi. 25 Порообразующие белки (порины) очищали методом, описанным Wexler и Getty. 26 Очищенные молекулы порина были восстановлены в липосомах, которые были получены в соответствии с процедурами Nikaido и Rosenberg 27 и Wexler et al . 28 Анализ набухания липосом проводился, как описано Nikaido и Rosenberg 27 и также был описан в нашей лаборатории. 29–31 Набухание липосом было обнаружено с помощью сканирующего спектрометра Cary 200 в сочетании с компьютерной программой.

Рентгеновский микроанализ (XRMA)

XRMA в сочетании со сканирующей электронной микроскопией (SEM) использовали для элементного анализа отдельных клеток, содержание которых было зафиксировано глубокой заморозкой сразу после обработки. Метод был описан для бактериальных культур ранее Daniel-Hoffmann et al ., 8 Malik et al . 32 и Ницан и др. . 33 Все рентгеновские спектры сняты с одинаковой скоростью счета. 34

Обнаружение масс-спектрометрией с индуктивно связанной плазмой (ICPMS)

Анализ методом ICPMS, который представляет собой аналитическую атомную спектрометрию, проводили в водной гомогенной среде. Культуры E. cloacae на логарифмической фазе обрабатывали в течение 10 минут 9,4 мг / л AS101 или PBS в качестве контроля и центрифугировали в течение 5 минут при 5000 g .Супернатанты отбрасывали, а осадки обрабатывали 1 М HNO 3 в течение 15 минут и дважды промывали. Химические элементы анализировали с помощью ICPMS (Ultima-2; Ji Jobin Yvon Horiba, Longjumeau, Франция) и рассчитывали их концентрации. Калибровочные стандарты 0,1, 1,0 и 10,0 ppm использовались для каждой серии анализов. Данные среднего и стандартного отклонения были основаны на трех повторах для каждого образца. Некоторые образцы были повторно разбавлены и проанализированы как дубликаты для обеспечения воспроизводимости. 35

Просвечивающая электронная микроскопия (ПЭМ)

Бактериальные клетки на логарифмической фазе обрабатывали 9,4 мг / л AS101 в течение 0,5 ч и обрабатывали для анализа с помощью электронной микроскопии. Осадки клеток сначала промывали 0,05 M какодилатным буфером (pH 7,2), а затем фиксировали в течение 2 часов в 0,05 M какодилат 1,5% (мас. / Об.) Глутаровым альдегидом (pH 7,2). Затем тот же буфер использовали для промывки образца в течение ночи с последующими 2 ч фиксации 2% (мас. / Об.) Тетроксидом осмия и дегидратацией этанолом.Наконец, образцы были залиты в Durcupan, и тонкие срезы были приготовлены на LKB Ultratome Nova. Срезы дважды окрашивали уранилацетатом и цитратом свинца. 36 Образцы исследовали с помощью просвечивающего электронного микроскопа Philips CM-100.

SEM

Бактериальные клетки на логарифмической фазе обрабатывали 9,4 мг / л AS101 в течение 20 мин и обрабатывали для анализа с помощью электронной микроскопии. Осадки клеток сначала трижды промывали фосфатным буфером без Ca 2+ и Mg 2+ , а затем фиксировали в течение 1 часа в 2.6% глутарового альдегида (pH 7,2) при комнатной температуре. После фиксации образцы оставляли для осаждения в течение 24 ч при 4 ° C. 100 мкл образца суспендировали на стеклянной сетке, покрытой ɛ-поли-L-лизином, в течение 1 часа, затем 1 час фиксации 2% (мас. / Об.) Тетроксидом осмия и обезвоживание этанолом и фреоном. Наконец, образцы были покрыты углеродом, и образцы были исследованы в сканирующем электронном микроскопе JSM-35C.

Статистический анализ

Представленные данные представляют собой средние значения минимум трех экспериментов для каждого штамма.Различия между бактериальными штаммами анализировали с помощью теста Стьюдента t , при этом P <0,05 считали статистически значимым.

Результаты

Антибактериальная активность AS101

На антибактериальную активность соединения теллура AS101 указывало ингибирование роста девяти изолятов E. cloacae при тестировании зоны ингибирования лекарственного средства на богатой среде (BHA).При выращивании бактерий на более бедной среде (NA) чувствительность к AS101 не проявлялась, за исключением небольшого и незначительного диаметра ингибирования (8 мм), наблюдаемого при 1,5 мкг (рис. 2). Было обнаружено, что MIC и MBC AS101 составляют 9,4 мг / л AS101 для всех девяти изолятов E. cloacae (таблица 1). Поскольку значения MIC и MBC для AS101 были одинаковыми, можно сделать вывод, что AS101 действует как бактерицидный агент для E. cloacae . Согласно определению МИК, культуры E.cloacae обрабатывали в BHI 9,4 мг / л AS101 в начале лаг-фазы и в начале лог-фазы. Такое же подавление роста было очевидным, когда AS101 был добавлен в лаг-фазе, и дальнейшего роста не наблюдалось. Когда AS101 был добавлен в логарифмической фазе (фиг. 3, верхняя панель), ингибирование начиналось сразу после добавления AS101, и наблюдалось снижение OD. Такие же результаты были получены, когда культуры (в лаг-фазе или лог-фазе) обрабатывали AS101 в питательном бульоне (NB) с добавлением 2-меркаптоэтанола (0.012 мМ).

Таблица 1. Тесты

MIC и MBC AS101 на E. cloacae

. Концентрация AS101 (мг / л)
.
0,00 . 1,17 . 2,35 . 4,70 . 9,40 . 18,75 . 37,5 . 75,0 .
Рост + + + + - - - -
+ - - - -
. Концентрация AS101 (мг / л)
.
0,00 . 1,17 . 2,35 . 4,70 . 9,40 . 18,75 . 37,5 . 75,0 .
Рост + + + + - - - -
+ - - - -
Таблица 1.

Тесты MIC и MBC AS101 на E. cloacae

. Концентрация AS101 (мг / л)
.
0,00 . 1,17 . 2,35 . 4,70 . 9,40 . 18,75 . 37,5 . 75,0 .
Рост + + + + - - - -
+ - - - -
. Концентрация AS101 (мг / л)
.
0.00 . 1,17 . 2,35 . 4,70 . 9,40 . 18,75 . 37,5 . 75,0 .
Рост + + + + - - - -
+ - - - -

Рисунок 2.

Тест диффузии в агаре E. cloacae , обработанных различными дозами AS101. Диаметр зон ингибирования измеряли, когда бактерии обрабатывали AS101 на BHA или NA.

Рисунок 2.

Испытание диффузии в агаре E. cloacae , обработанных различными дозами AS101. Диаметр зон ингибирования измеряли, когда бактерии обрабатывали AS101 на BHA или NA.

Рисунок 3.

Верхняя панель: Кривые роста E.cloacae , обработанные AS101 (9,4 мг / л) в лаг-фазе или в лог-фазе. Культуры без добавления AS101 служили контролем. Стрелки указывают на добавление AS101. Нижняя панель: Кривые жизнеспособности E. cloacae после обработки AS101 (9,4 мг / л) на логарифмической фазе. Культуры без добавления AS101 служили контролем.

Рисунок 3.

Верхняя панель: Кривые роста E. cloacae , обработанных AS101 (9,4 мг / л) в лаг-фазе или в лог-фазе.Культуры без добавления AS101 служили контролем. Стрелки указывают на добавление AS101. Нижняя панель: Кривые жизнеспособности E. cloacae после обработки AS101 (9,4 мг / л) на логарифмической фазе. Культуры без добавления AS101 служили контролем.

Кривая гибели E. cloacae , обработанных в BHI с 9,4 мг / л AS101, четко показала, что жизнеспособность снизилась более чем на два порядка в течение первых 30 минут воздействия AS101 (рис. 3, нижняя панель).Количество бактерий продолжало уменьшаться до тех пор, пока бактериальная культура полностью не уменьшилась (уменьшение более чем на восемь порядков) в течение 2 ч от начала обработки.

Влияние AS101 на подвижность и образование биопленок

Были протестированы три параметра подвижности E. cloacae : плавание, роение и подергивание. Каждый параметр измеряли в чашке особого типа и в специальной концентрации агара (см. Раздел «Материалы и методы»).На плавание в основном влияли МИК (9,4 мг / л) и 2-кратно разведенные (4,7 мг / л) концентрации AS101 по сравнению с необработанным контролем (таблица 2). Рой и подергивание также полностью подавлялись указанными выше концентрациями AS101.

Таблица 2. Анализы подвижности

(плавание, роение и подергивание) и способность образования биопленок E. cloacae до и после обработки МПК (9,4 мг / л) и снижения субингибиторных концентраций AS101

0,06
Тест . Обработка AS101 (мг / л)
.
0 . 0,58 . 1,17 . 2,35 . 4,7 . 9,4 .
Плавание (мм) 90 ± 1.0 ND ND ND 1.0 1.0
Swarming (мм) 7 ± 0.3 ND ND ND 0,0 * 0,0 *
Подергивание (мм) 5 ± 0,3 ND ND ND ND
Формирование биопленки + + + ± - -
Тест . Обработка AS101 (мг / л)
.
0 . 0,58 . 1,17 . 2,35 . 4,7 . 9,4 .
Плавание (мм) 90 ± 1.0 ND ND ND 1.0 1.0
Swarming (мм) 7 ± 0,3 НД 0.0 * 0,0 *
Подергивание (мм) 5 ± 0,3 ND ND ND 0,0 * 0,0 *
Формирование биопленки + ± - -
Таблица 2.

Анализы подвижности (плавание, роение и подергивание) и способность образования биопленок E. cloacae до и после обработки МПК (9.4 мг / л) и уменьшение субингибиторных концентраций AS101

Test . Обработка AS101 (мг / л)
.
0 . 0,58 . 1,17 . 2,35 . 4,7 . 9,4 .
Плавание (мм) 90 ± 1.0 ND ND ND 1.0 1.0
Swarming (мм) 7 ± 0,3 ND ND ND 9015 * ND 9015 * 0,0 Подергивание (мм) 5 ± 0,3 ND ND ND 0,0 * 0,0 *
Формирование биопленки + + ±
0,06
Тест . Обработка AS101 (мг / л)
.
0 . 0,58 . 1,17 . 2,35 . 4,7 . 9,4 .
Плавание (мм) 90 ± 1.0 ND ND ND 1.0 1.0
Swarming (мм) 7 ± 0.3 ND ND ND 0,0 * 0,0 *
Подергивание (мм) 5 ± 0,3 ND ND ND ND
Образование биопленок + + + ± - -

Статическое образование биопленок подавлялось при концентрациях AS101 9,4 и 4,7 мг / л (таблица 2).При концентрации, которая в 4 раза ниже, чем МПК (2,35 мг / л), образование биопленок было очень слабым. При еще более низких концентрациях AS101 (1,17 и 0,58 мг / л) образование биопленок было очень значительным и было равно таковому для положительного контроля (без AS101).

Проникновение AS101 в бактериальную клетку

Вопрос о том, проникает ли соединение в клетку, был исследован, чтобы получить представление о механизме действия AS101 на бактериальные клетки E. cloacae .Проникновение AS101 было продемонстрировано с помощью анализа набухания липосом. В этом анализе молекулы порина были вставлены на поверхность липосомы. Порин, использованный для этого анализа, экспрессируется на внешней мембране штамма E. cloacae . Он был очищен, и было показано, что он представляет собой тримерный порин с молекулярной массой 120 кДа. Результаты, показанные на фиг. 4, демонстрируют, что AS101 (молекулярная масса 312 Да) проявляет способность проникать в липосомы через специфический порин E. cloacae .Арабиноза (молекулярная масса 150 Да) имела гораздо более высокую скорость проникновения, чем AS101, поскольку она имеет более низкую молекулярную массу. С другой стороны, стахиоза (MW 666 Да) не могла проникнуть в эти липосомы из-за своей высокой молекулярной массы. AS101 не может проникать в липосомы, поверхность которых не содержит поринов. То же самое было верно, когда белок BSA был включен вместо порина, то есть AS101 не проникал в липосомы. Эти результаты предполагают, что AS101 проникает в бактериальную клетку E. cloacae через порин, а не через фосфолипидную оболочку внешней мембраны, и действует внутриклеточно на жизнеспособность этой бактерии.

Рисунок 4.

Анализ набухания липосом для AS101 с использованием поринов, очищенных с внешней мембраны E. cloacae , которые были преобразованы в липосомы. Сахарная стахиоза служила отрицательным контролем, а сахарная арабиноза служила положительным контролем. БСА, восстановленный в липосомы, и невосстановленные липосомы служили контролем.

Рисунок 4.

Анализ набухания липосом для AS101 с использованием поринов, очищенных от внешней мембраны E.cloacae , которые были преобразованы в липосомы. Сахарная стахиоза служила отрицательным контролем, а сахарная арабиноза служила положительным контролем. БСА, восстановленный в липосомы, и невосстановленные липосомы служили контролем.

Обнаружение XRMA и ICPMS

Ионные потоки во время активности AS101 могут быть определены с помощью XRMA-SEM. Как видно выше, AS101 проникал через порин и проникал в периплазму и цитоплазматическую мембрану. Этот вид помех может изменить переносимость некоторых элементов в ячейку.Результаты XRMA (таблица 3) показывают, что E. cloacae , обработанные 9,4 мг / л AS101, показали увеличение притока Na и Cl, что может указывать на повреждение насосов Na + / K + , расположенных в цитоплазматическая мембрана. Наблюдалось увеличение Mg, указывающее на нарушение стабильности клеточной мембраны. С другой стороны, наблюдалось снижение уровня P, что указывает на потерю АТФ или даже повреждение ДНК.

Таблица 3.

XRMA E.cloacae после обработки AS101

лечения . Атомный вес образцов в процентах
.
Na . мг . П .
Нет (контроль) 0,36 1,63 1,72
AS101 (9,4 мг / л) 0,54 2.82 1,08
Лечение . Атомный вес образцов в процентах
.
Na . мг . П .
Нет (контроль) 0,36 1,63 1,72
AS101 (9,4 мг / л) 0,54 2.82 1.08
Таблица 3.

XRMA E. cloacae после обработки AS101

Лечение . Атомный вес образцов в процентах
.
Na . мг . П .
Нет (контроль) 0,36 1,63 1,72
AS101 (9.4 мг / л) 0,54 2,82 1,08
Лечение . Атомный вес образцов в процентах
.
Na . мг . П .
Нет (контроль) 0,36 1,63 1,72
AS101 (9.4 мг / л) 0,54 2,82 1,08

Для подтверждения предыдущих результатов использовался метод обнаружения ICPMS. ICPMS - это метод аналитической атомной спектрометрии, который может идентифицировать большинство элементов (кроме H, N, O, C и F) и определять их концентрацию в единицах ppm (мг / л). Культуры E. cloacae обрабатывали 9,4 мг / л AS101 в течение 10 мин, а затем обрабатывали HNO 3 , и концентрации элементов измеряли с помощью прибора для обнаружения ICPMS.Таблица 4 демонстрирует приток Na и отток K, P и даже S, где последний указывает на потерю белка из-за AS101. Необработанные клетки E. cloacae продемонстрировали более высокие количества K, P и S, в то время как количества натрия были ниже, чем в обработанных бактериальных клетках.

Таблица 4. Элементный анализ

методом ICPMS E. cloacae до и после обработки 9,4 мг / л элементом AS101

. Концентрация элемента (мг / л)
.
контроль . после обработки AS101 .
P 2,05 ± 0,23 1,42 ± 0,11 *
Na 4,94 ± 0,18 5,79 ± 0,20 *
0,69 ± 0,015 0,015 * 0,23 K
S 0,48 ± 0,06 0,35 ± 0,05 *
Элемент . Концентрация элемента (мг / л)
.
контроль . после обработки AS101 .
P 2,05 ± 0,23 1,42 ± 0,11 *
Na 4,94 ± 0,18 5,79 ± 0,20 *
0,69 ± 0,015 0,015 * 0,23 K
S 0,48 ± 0.06 0,35 ± 0,05 *
Таблица 4.

Элементный анализ методом ICPMS E. cloacae до и после обработки 9,4 мг / л AS101

0,06 0,05 *
Элемент . Концентрация элемента (мг / л)
.
контроль . после обработки AS101 .
P 2,05 ± 0,23 1.42 ± 0,11 *
Na 4,94 ± 0,18 5,79 ± 0,20 *
K 0,68 ± 0,08 0,21 ± 0,10 *
S
Элемент . Концентрация элемента (мг / л)
.
контроль . после обработки AS101 .
P 2,05 ± 0,23 1,42 ± 0,11 *
Na 4,94 ± 0,18 5,79 ± 0,20 *
0,69 ± 0,015 0,015 * 0,23 K
S 0,48 ± 0,06 0,35 ± 0,05 *

Электронно-микроскопическое исследование

Результаты показали, что возможное действие соединения теллура AS101 на E.клетки cloacae в конечном итоге приведут к цитотоксическому деструктивному процессу, который может быть продемонстрирован с помощью ПЭМ. Изолят E. cloacae выращивали до логарифмической фазы на среде BH и обрабатывали 9,4 мг / л AS101 в течение 30 мин. На Фигуре 5 (а) показан лизис клеток после обработки AS101 по сравнению с контролем, который не обрабатывали AS101 (Фиг.5b). Похоже, что обработка AS101 не только повредила поверхность клеток, но и вызвала острые повреждения внутри клетки, что в конечном итоге привело к их гибели.

Рисунок 5.

ТЕМ культуры E. cloacae , обработанной в середине логарифмической фазы 9,4 мг / л AS101 (а). Та же культура без AS101 служила контролем (б). СЭМ культуры E. cloacae , обработанной 9 мг / л AS101 (c). Та же культура без AS101 служила контролем (г). СЭМ клеток E. cloacae , обработанных 9 мг / л AS101, при этом агрегаты высвобождаются из полости (е). Увеличение клетки, в которой фаг выходит из полости (f).

Рис. 5.

ТЕМ культуры E. cloacae , обработанной в середине логарифмической фазы 9,4 мг / л AS101 (а). Та же культура без AS101 служила контролем (б). СЭМ культуры E. cloacae , обработанной 9 мг / л AS101 (c). Та же культура без AS101 служила контролем (г). СЭМ клеток E. cloacae , обработанных 9 мг / л AS101, при этом агрегаты высвобождаются из полости (е). Увеличение клетки, в которой фаг выходит из полости (f).

Морфологию клеток E. cloacae , обработанных AS101, наблюдали с помощью SEM, анализировали в тех же условиях, что и для TEM. Клеточная стенка бактерий, обработанных соединением теллура, была повреждена (рис. 5c). В центре обработанных клеток наблюдалась вогнутость, похожая на отверстие, что указывает на перфорацию клеточной стенки. Эта вогнутость не наблюдалась в необработанных клетках (рис. 5d). В некоторых клетках агрегаты высвобождались из впадины, и казалось, что содержимое бактериальной клетки вылилось наружу (рис. 5e).Увеличение таких клеток указывало на форму неидентифицированного фага, выходящего из впадины в клеточной стенке (рис. 5f).

Обсуждение

Ранее было показано, что AS101 обладает антимикробным потенциалом в отношении K. pneumoniae . 8 В текущем исследовании спектр антибактериального действия AS101 был расширен на другие виды семейства Enterobacteriaceae. На этот раз препарат исследовали против E.Клоаки . Инфекционные заболевания, вызываемые Enterobacteriaceae, в настоящее время лечат аминогликозидными антибиотиками, такими как гентамицин или тобрамицин. Однако эти антибиотики могут быть токсичными, особенно для пациентов с почечной недостаточностью. Кроме того, длительное лечение этими антибиотиками может привести к развитию резистентности. Напротив, было показано, что AS101 нетоксичен в различных культурах клеток, а также в in vivo моделях 39 с использованием концентраций, упомянутых в этом исследовании.AS101 также использовался в клинических испытаниях фазы II с онкологическими пациентами без токсичности 40 и в настоящее время используется в клинических испытаниях фазы II при псориазе и атопическом дерматите. Таким образом, кажется, что AS101 может служить потенциальной заменой или дополнением к лечению антибиотиками.

Потенциальная активность AS101 против E. cloacae была впервые охарактеризована несколькими методами. Обработка изолятов E. cloacae AS101 вызвала ингибирование роста бактерий на агаре, которое зависело от среды.В этом исследовании AS101 подавлял рост E. cloacae , особенно в богатой среде (BHI), и не действовал в NB, если 2-меркаптоэтанол не был добавлен с лекарством. То же явление было обнаружено у K. pneumoniae . 8 Кажется, что причина не только в том, что BHI содержит более высокую концентрацию белка, чем среда NB (в 15 раз), 41 , но и потому, что он содержит высокий уровень тиолов. Это результат того факта, что соединения Те (IV) легко взаимодействуют с тиолами с образованием соединений Те (тиол) 4. 42 Все эти открытия привели нас к предположению, что AS101 может потребовать носителя для преодоления барьеров бактериальных клеток и что он использует свободные тиолы в качестве носителя. Эти результаты показывают, что тиолы играют важную роль в механизме действия AS101 и поддерживают его клинический потенциал AS101.

МИК и МБК AS101 в богатой белком среде оказались равными 9,4 мг / л для всех девяти испытанных изолятов. Эта концентрация препарата немедленно подавляла рост бактерий, когда их лечили в лаг-фазе.Когда бактерии обрабатываются на ранней стадии логарифмической фазы, рост останавливается, и уменьшение OD наблюдается в течение 30 минут от начала лечения. Жизнеспособность также сразу же снизилась, и полное уничтожение культуры было достигнуто менее чем за 2 часа (снижение более чем на семь порядков).

Результаты, полученные в этом исследовании, показывают, что AS101 может проникать в клетки E. cloacae через внешнюю мембрану. Основная роль внешней мембраны грамотрицательных бактерий - служить барьером проницаемости для предотвращения проникновения вредных соединений и, в то же время, обеспечивать приток молекул питательных веществ 27,43 через порообразующие белки ( порины).Проникновение AS101 через порины, которые были очищены из E. cloacae и включены в липосомы, имитируя внешнюю мембрану, привело нас к предположению о возможном механизме, посредством которого AS101 проникает в клетку E. cloacae . Пора в порине E. cloacae достаточно велика (в диаметре), чтобы позволить молекуле размером AS101 (молекулярная масса 312 Да) проникнуть через нее. Альтернативная возможность, что AS101 может проникать непосредственно во внешнюю мембрану, была исключена, поскольку AS101 не проникал в липосомы, не включенные с порином, или в липосомы, в которые был включен BSA вместо порина.Эти результаты могут быть экстраполированы на других членов семейства Enterobacteriaceae и могут быть верными для других грамотрицательных бактерий.

Одна из проблем инфекций в больницах - это способность бактерий образовывать биопленку на поверхностях, оборудовании и внутри катетеров. 44–46 Образование биопленки внутри катетера может быть опасным для жизни, когда бактериальная масса отрывается от внутренней стенки катетера и смывается инфузионной жидкостью непосредственно в кровоток пациента, вызывая сепсис. 44 Важным процессом в развитии биопленки является подвижность бактерий на поверхностях. 47 В настоящем исследовании было недвусмысленно продемонстрировано, что подвижность E. cloacae подавляется после обработки AS101. Все три характерные формы подвижности, плавание через жгутики, 47 роение через жгутики и пили 46 и подергивание через пили 46 , были нарушены после лечения AS101. Обесценение очевидно не только на ВПК (9.4 мг / л) препарата, но также при 2-кратной субингибирующей концентрации (4,7 мг / л) препарата против E. cloacae . Также было обнаружено, что бактерий E. cloacae не смогли сформировать биопленку даже при субингибирующей концентрации, равной половине (4,7 мг / л) МПК (9,4 мг / л) и одной четверти (2,35 мг / л). L) МПК биопленка была очень слабой. Способность AS101 подавлять факторы вирулентности для подвижности и прикрепления к поверхностям клеток или искусственных устройств (образование биопленок) очень важна, поскольку она может быть очень полезной для клинициста.Это открытие также подтверждает вышеприведенные результаты о том, что молекулы AS101 проникают через порины и действуют внутриклеточно на компоненты внутри клетки, которые ответственны за производство жгутиков и пилей.

Еще одно доказательство того, что молекулы AS101 действуют внутри клетки, было получено с помощью XRMA и ICPMS. Оба метода показали, что при проникновении в бактериальную клетку AS101 повреждает цитоплазматическую мембрану, а также связанные с ней насосы. Кажется, что AS101 может вызвать повреждение насосов Na + / K + , что вызывает утечку ионов через поврежденную мембрану.Приток Na + в клетку и утечка P или даже S четко указывают на утечку АТФ, нуклеотидов и даже белков из клеток. Клетки не могут размножаться в таких условиях, и их жизнеспособность снижается. 48 Результаты XRMA для E. cloacae аналогичны результатам, продемонстрированным для K. pneumoniae с тем же препаратом. 8 Изображения ПЭМ и СЭМ подтверждают результаты, полученные с помощью XRMA и ICPMS. Пустые ячейки, видимые ПЭМ, вероятно, являются результатом утечки содержимого ячейки.В некоторых клетках видны агрегаты в хромосомной области, что может указывать на повреждение бактериальной хромосомы. Эти агрегаты были показаны в нашей предыдущей работе с обработанным AS101 K. pneumoniae . 8 Аналогичная картина агрегатов в хромосомной области была получена в другой работе этой лаборатории. 48 Предполагалось, что эти агрегаты являются центрами репарации двухцепочечной ДНК посредством RecA из-за активации SOS-ответа. 49 СЭМ продемонстрировал отверстие в центре обработанных клеток, что означает перфорацию клеточной стенки.Это также наблюдалось у обработанного AS101 K. pneumoniae . 8 Было замечено, что некоторые обработанные AS101 клетки E. cloacae высвобождают небольшие тела из этого отверстия. Эти маленькие тела, которые вытекают из клетки, могут быть фрагментами эндотоксина, которые, как известно, высвобождаются во время лечения антибиотиками инфекций, вызванных грамотрицательными микроорганизмами. 50 Другая возможность заключается в том, что обработка AS101 вызывает стрессовую реакцию, которая приводит к индукции профагов внутри бактериальной клетки, и потомство высыпается через отверстие.Это подтверждается нашими наблюдениями за фаговой частицей, появляющейся из поврежденной бактериальной клетки. На сегодняшний день не было получено экспериментальных доказательств этого явления, вероятно, из-за отсутствия надлежащего размножающегося бактериального штамма, который будет показывать бляшки на чашках с агаром или лизис в жидкой среде.

Антимикробный потенциал AS101 продемонстрирован в этом исследовании на E. cloacae , другом члене семейства Enterobacteriaceae. Известно, что это семейство содержит множество патогенных видов, вызывающих тяжелые инфекции у госпитализированных пациентов, и сейчас они проходят испытания с помощью AS101.AS101 может стать потенциальной заменой или дополнением к текущему лечению антибиотиками, устойчивость которого растет.

Финансирование

Эта работа была частично поддержана кафедрой онкологических исследований д-ра Тови Комет-Валерстайн, кафедрой онкологических исследований Дейва и Флоренс Мусковиц и Мемориальным фондом рака Фриды Столлман. Это исследование также было частично поддержано Фондом микробиологии Раппапорта, Университет Бар-Илан, Израиль (Ю.Н.).

Заявления о прозрачности

Не подлежат декларированию.

Благодарности

Мы хотим поблагодарить г-жу Рэйчел Дрор за ее отличную техническую помощь и полезные комментарии, д-ра Изабеллу Печатникову за помощь в анализе липосомного набухания и г-на Офира Авидана за его помощь в подготовке образцов для ТЕА, а также за полезные обсуждения и помощь.

Некоторые материалы, включенные в эту рукопись, касаются бактерии E.cloacae ранее была опубликована в следующем реферате: Hoffman-Daniel M, Albeck M, Sredni B, Nitzan Y. Бактерицидная активность соединений теллура AS 101 на Enterobacter cloacae . Ежегодное собрание Израильского общества микробиологов, Реховот, Израиль, 2008 г. P-26. п. 76.

Это исследование было проведено в рамках требований для получения докторской степени M. D.-H.

Список литературы

1,,.

Синтез и свойства трихлор (диоксиэтилен-O-O) теллурата аммония (AS-101) - нового иммуномодулирующего соединения

,

Synthesis Stuttgart

,

1989

, vol.

8

(стр.

635

-

6

) 2`` и др.

Новое иммуномодулирующее соединение (AS-101) с потенциальным терапевтическим применением

,

Nature

,

1987

, vol.

330

(стр.

173

-

6

) 3`` и др.

Биологическая активность и иммунотерапевтические свойства синтетического теллурового соединения AS-101

,

Nat Immun Cell Growth Regul

,

1988

, vol.

7

(стр.

163

-

8

) 4`` и др.

Восстановление миелосупрессии мышиного цитомегаловируса (MCMV) с помощью AS101

,

Immunol Lett

,

1994

, vol.

43

(стр.

159

-

65

) 5`` и др.

Иммуномодулятор AS101 восстанавливает T (h2) -тип ответа, подавленный Babesia rodhaini у мышей BALB / c

,

Cell Immunol

,

1998

, vol.

184

(стр.

12

-

25

) 6`` и др.

Терапевтическая стратегия против IL-10 с использованием иммуномодулятора AS101 для защиты мышей от смерти, вызванной сепсисом: зависимость от времени иммуномодулирующего вмешательства

,

J Immunol

,

2002

, vol.

169

(стр.

384

-

92

) 7`` и др.

Иммуномодулятор AS101 защищает от инфекций Aeromonas salmonicida у золотых рыбок, подвергшихся стрессу, регулируя IL-10-цитокин

,

2003

Приложение III: опубликованная статья, перепечатанная с Ежегодного собрания Международного цитокинового общества

Дублин, Ирландия

(стр.

157

-

61

) 8`` и др.

Возможное противомикробное лечение против ESBL-продуцента Klebsiella pneumoniae с использованием соединения теллура AS101

,

Arch Microbiol

,

2009

, vol.

191

(стр.

631

-

8

) 9.

Enterobacter - появляющийся внутрибольничный патоген

,

J Hosp Infect

,

1988

, vol.

11

(стр.

197

-

208

) 10,. ,.

Enterobacteriaceae

,

Инфекционные заболевания

,

2004

Лондон

Мосби

(стр.

2189

-

99

) 11,,, et al.

Расследование вспышки Enterobacter cloacae в неонатальном отделении и обзор литературы

,

J Hosp Infect

,

2008

, vol.

70

(стр.

7

-

14

) 12,,, et al.

Цитотоксическая активность Enterobacter cloacae человеческих изолятов

,

FEMS Immunol Med Microbiol

,

2009

, vol.

56

(стр.

248

-

52

) 13`` и др.

Позднее начало Enterobacter cloacae сепсис у новорожденных с очень низкой массой тела при рождении: опыт работы в медицинском центре

,

Pediatr Neonatol

,

2009

, vol.

50

(стр.

3

-

7

) 14`` и др.

Вспышка катетер-ассоциированных Klebsiella oxytoca и Enterobacter cloacae инфекций кровотока в онкологическом центре химиотерапии

,

Arch Intern Med

,

2005

, vol.

165

(стр.

2639

-

43

) 15,,.

Бактериемия, вызванная Enterobacter —15 лет опыта в онкологической больнице

,

Rev Infect Dis

,

1991

, vol.

13

(стр.

550

-

8

) 16.

Enterobacter в больнице

,

J Hosp Infect

,

1992

, vol.

20

(стр.

137

-

40

) 17,,, et al.

Эпидемиология Enterobacteriaceae , вызывающих инфекции кровотока у пациентов отделения интенсивной терапии новорожденных

,

Enferm Infec Microbiol Clin

,

2010

, vol.

28

(стр.

227

-

32

) 18,,, et al.

Тестирование чувствительности к антибиотикам стандартным методом простого диска

,

Am J Clin Pathol

,

1966

, vol.

45

(стр.

493

-

6

) 19,.

Метод микроразбавления для тестирования чувствительности к антибиотикам - оценка

,

Am J Clin Pathol

,

1970

, vol.

53

(стр.

880

-

5

) 20`` и др.

Протеаза Lon Pseudomonas aeruginosa индуцируется аминогликозидами и участвует в образовании и подвижности биопленок

,

Microbiology

,

2007

, vol.

153

(стр.

474

-

82

) 21`` и др.

Человеческий защитный пептид-хозяин LL-37 предотвращает образование бактериальной биопленки

,

Infect Immun

,

2008

, vol.

76

(стр.

4176

-

82

) 22`` и др.

Рой Pseudomonas aeruginosa зависит от передачи сигналов от клетки к клетке и требует жгутиков и пилей

,

J Bacteriol

,

2000

, vol.

182

(стр.

5990

-

6

) 23`` и др.

Формирование и распространение биопленок под действием глобального регулятора CsrA Escherichia coli

,

J Bacteriol

,

2002

, vol.

184

(стр.

290

-

301

) 24,.

Формирование биопленок у мутантов Escherichia coli cra нарушено из-за подавления биосинтеза curli

,

Arch Microbiol

,

2011

, vol.

193

(стр.

711

-

22

) 25,.

Главный белок внешней мембраны Serratia marcescens , который легко растворялся и обладал способностью связываться с кальцием

,

FEMS Microbiol Lett

,

1990

, vol.

58

(стр.

115

-

8

) 26,.

Выделение и характеристика белка порина из Bacteroides fragilis

,

Anaerobe

,

1996

, vol.

2

(стр.

305

-

12

) 27,.

пориновых каналов в Escherichia coli : исследования с липосомами, восстановленными из очищенных белков

,

J Bacteriol

,

1983

, vol.

153

(стр.

241

-

52

) 28,,.

Выделение и характеристика основного белка внешней мембраны из Bacteroides distasonis

,

J Med Microbiol

,

1992

, vol.

37

(стр.

165

-

75

) 29,,, et al.

Порин, выделенный из внешней мембраны Erwinia amylovora и его кодирующий ген

,

Curr Microbiol

,

2007

, vol.

54

(стр.

155

-

61

) 30`` и др.

Клонирование и характеристика гена, кодирующего порин OMP-PD: основной белок внешней мембраны Photobacterium damsela

,

Curr Microbiol

,

2004

, vol.

48

(стр.

167

-

74

) 31`` и др.

Выделение и характеристика порина Omp-PA из Porphyromonas asaccharolytica , определение последовательности гена omp-PA и прогноз структуры белка Omp-PA

,

Anaerobe

,

2007

, vol.

13

(стр.

74

-

82

) 32`` и др.

Коллапс K + и ионного баланса при фотодинамической инактивации лейкозных клеток, эритроцитов и Staphylococcus aureus

,

Int J Biochem

,

1993

, vol.

25

(стр.

1399

-

406

) 33,.

Фотоинактивация Deinococcus radiodurans : необычный грамположительный микроорганизм

,

Photochem Photobiol

,

1999

, vol.

69

(стр.

505

-

10

) 34,.

Подготовка культивируемых и изолированных клеток для рентгеновского микроанализа

,

Scanning Microsc

,

1988

, vol.

2

(стр.

1775

-

90

) 35`` и др.

In vivo исследования токсичности наностержней гидроксида европия на мышах

,

Toxicol Appl Pharmacol

,

2009

, vol.

240

(стр.

88

-

98

) 36,.

Биофизика структуры и функции поринов

,

Q Rev Biophys

,

1990

, vol.

23

(стр.

367

-

403

) 37,,.

Токсичность гентамицина и других антибиотиков

,

Ophthalmol Clin North Am

,

2001

, vol.

14

(стр.

611

-

24

) 38`` и др.

Ототоксичность препаратов гентамицина для местного применения

,

Ларингоскоп

,

1999

, т.

109

(стр.

1088

-

93

) 39`` и др.

Исследование токсичности иммуномодулирующего препарата на основе теллура AS-101: потенциальное лекарство для больных СПИДом и раком на крысах

,

Arch Toxicol

,

1989

, vol.

63

(стр.

386

-

93

) 40`` и др.

Сохранение костного мозга и профилактика алопеции с помощью AS101 у пациентов с немелкоклеточным раком легкого, получавших карбоплатин и этопозид

,

J Clin Oncol

,

1995

, vol.

13

(стр.

2342

-

53

) 41,,.

Ликвидация Acinetobacter baumannii фотосенсибилизированными агентами in vitro

,

J Photochem Photobiol B

,

1998

, vol.

42

(стр.

211

-

8

) 42`` и др.

Соединения теллура: селективное ингибирование цистеиновых протеаз и модельная реакция с тиолами

,

Inorg Chem

,

1998

, vol.

37

(стр.

1704

-

12

) 43.

Еще раз о молекулярных основах проницаемости бактериальной внешней мембраны

,

Microbiol Mol Biol Rev

,

2003

, vol.

67

(стр.

593

-

656

) 44,,.

Бактериальные биопленки: от окружающей среды к инфекционным заболеваниям

,

Nat Rev Microbiol

,

2004

, vol.

2

(стр.

95

-

108

) 45.

Медицинские биопленки

,

Biotechnol Bioeng

,

2008

, т.

100

(стр.

1

-

18

) 46`` и др.

Роль фимбрий 1 и 3 типов в формировании биопленок Klebsiella pneumoniae

,

BMC Microbiol

,

2010

, vol.

10

(стр.

179

-

89

) 47,.

Подвижность жгутиков и подергивание необходимы для развития биопленки Pseudomonas aeruginosa

,

Mol Microbiol

,

1998

, vol.

30

(стр.

295

-

304

) 48,,.

Низкоинтенсивная фотосенсибилизация может увеличить продукцию RecA

,

Curr Microbiol

,

2006

, vol.

52

(стр.

317

-

23

) 49.

Регуляция функции бактериального белка RecA

,

Crit Rev Biochem Mol Biol

,

2007

, vol.

42

(стр.

41

-

63

) 50`` и др.

Клиническая значимость индуцированного антибиотиками высвобождения эндотоксина

,

Противомикробные агенты Chemother

,

1994

, vol.

38

(стр.

1211

-

8

)

Заметки автора

© Автор 2012.Опубликовано Oxford University Press от имени Британского общества антимикробной химиотерапии. Все права защищены. Для получения разрешений обращайтесь по электронной почте: [email protected]

.

AS101: Введение в IDEA | Audimation

AS101: Введение в IDEA | Аудимация

IDEA Пользователи, работающие удаленно: Мы здесь, чтобы помочь! Пожалуйста, свяжитесь с нашей службой поддержки IDEA, чтобы гарантировать минимальное нарушение вашего повседневного рабочего процесса.

Это событие прошло

300 долларов США.00

ПРОДАНО

Статус

Это событие ПРОДАНО

12 продал


Введение в IDEA - это практический семинар продолжительностью полдня, который предоставит подробный обзор функций анализа данных на платформе, включая индексирование, обобщение, объединение и фильтрацию. Участники сначала импортируют и выполняют проверку данных, а также базовый анализ файла главной книги. Затем файл дебиторской задолженности будет выдержан и оценен по файлу кредитного лимита AR.Также будут рассмотрены возможности IDEA по навигации, визуализации и арсенал онлайн-ресурсов, чтобы обеспечить ваш индивидуальный успех после этого курса. Мы рекомендуем вам пройти веб-семинар «Начало работы с IDEA» перед посещением этого курса, поскольку вам необходимо будет ознакомиться с основными функциями и функциями IDEA.

** Обратите внимание, что участники должны активно участвовать в занятиях и выполнять курсовую работу, чтобы иметь право на получение кредита CPE. **

Уровень курса Новичок
Длина Полдня (4 CPE)
Специализация Аудит
Способ доставки Группа на базе Интернета
Предварительные требования Участникам семинара предлагается посетить нашу часовую веб-трансляцию «Начало работы с IDEA».Предварительной подготовки не требуется.
  • Курсы под руководством сертифицированных инструкторов IDEA
  • Материалы курса содержат исчерпывающие пошаговые инструкции для справки, включая скриншоты IDEA, советы и упражнения для поддержания ваших навыков
  • Общедоступные учебные курсы помогут вам пройти сертификацию CaseWare Analytics IDEA (CIDA)
  • Получите навыки и уверенность, используя аналитику данных для проведения более эффективных и результативных аудитов
  • Общайтесь с другими пользователями IDEA для обмена передовым опытом и развития вашей профессиональной сети
  • Информация о ресурсах и дополнительных продуктах, предназначенная для экономии времени и усилий

После прохождения данного тренинга участники смогут:

  • Создание и настройка проектов
  • Навигация по проводнику и библиотеке IDEA
  • Импорт файлов Excel с несколькими листами
  • Используйте статистику полей для проверки и согласования данных
  • Суммирование и объединение баз данных
  • Фильтровать данные и создавать извлечения
  • Создание новых полей и основных уравнений
  • Определение возраста и разрыва
  • Простое обнаружение и исключение дубликатов
  • Используйте Discover для визуализации данных
  • Документация по файлам и история с использованием обзора проекта
  • Ресурсы, доступные клиентам IDEA
Audimation Services, Inc.зарегистрирован в Национальной ассоциации бухгалтерских советов штатов (NASBA) в качестве спонсора непрерывного профессионального образования в Национальном реестре спонсоров CPE. Государственные бухгалтерские комиссии имеют окончательное право принимать индивидуальные курсы для получения кредита CPE. Жалобы в отношении зарегистрированных спонсоров можно подавать в Национальный реестр спонсоров CPE через его веб-сайт: nasbaregistry.org. По вопросам, связанным с предлагаемыми курсами, сертификатами или жалобами, обращайтесь: Дженнифер Эллисон, менеджер по обучению [электронная почта защищена] 832-327-2067

Использование и механизм действия AS101 для защиты колониеобразующих единиц костного мозга, гранулоцитов, макрофагов после очистки с помощью ASTA-Z 7557

Аннотация

Трихлор (диоксоэтилен- O, O ') теллурат (AS101) аммония, как было ранее показано, оказывает радиозащитное действие при введении мышам за 24 часа до облучения и защищает мышей от летальных и сублетальных доз циклофосфамида (CTX).В этом исследовании мы исследовали способность AS101 защищать колониеобразующие единицы костного мозга - гранулоциты-макрофаги мышей, обработанных in vitro различными дозами ASTA-Z 7557, мощного производного циклофосфамида. Мы демонстрируем, что предварительная инкубация с AS101 защищает колониеобразующие единицы-гранулоциты-макрофаги от токсических эффектов ASTA-Z. Эта защита также может быть обеспечена путем инъекции мышам AS101 перед инкубацией их костного мозга in vitro с ASTA-Z.Было показано, что предварительная инкубация с AS101 не защищает лейкозные клетки K562 или клетки HL-60 от токсических эффектов ASTA-Z. Мы показываем, что защиту AS101 от токсических эффектов ASTA-Z in vitro и CTX in vivo можно частично приписать повышенной активности альдегиддегидрогеназы (ALDH), индуцированной AS101. Это было продемонстрировано прямым измерением клеточной активности ALDH и косвенно путем измерения токсичности ASTA-Z и CTX в присутствии цианамида, ингибитора ALDH.В этом исследовании также показано, что AS101 защищает клетки селезенки от токсического действия 5-фторурацила, вероятно, посредством другого механизма. Эти свойства AS101 делают его полезным кандидатом для повышения качественного потенциала костного мозга, используемого для аутотрансплантации, после очистки с помощью ASTA-Z. Кроме того, результаты предполагают увеличение активности ALDH с помощью AS101 как одного из механизмов защиты от токсических эффектов ASTA-Z и CTX. Однако было обнаружено, что химиопротективность AS101 не ограничивается циклофосфамидом, поскольку, как показано в этом исследовании, AS101 помог с помощью других механизмов восстановить количество клеток селезенки после лечения 5-фторурацилом.

Сноски

  • 1 Работа выполнена при поддержке профессора Роберта Ассерафа.

  • 2 Кому следует адресовать запросы на перепечатку.

  • Получено 18 февраля 1991 г.
  • Принято 8 августа 1991 г.
  • © 1991 Американская ассоциация исследований рака.

Рейс AS101 авиакомпании Alaska Airlines - Flightradar24

835 -

927C93 N296AK) SE ) 20:35 Сиэтл (SEA) ANC) 02 Июнь 2021

2:59

Приземлился 20:36

-

16 июня 2021 г.

-

По расписанию

16 июня 2021 г. 73H - 17:00 - 20:35 По расписанию По расписанию

--

9 по расписанию

0009

0009

0009 по расписанию
15 июня 2021 года Сиэтл (SEA) Анкоридж (ANC) 73J - 17:00 - 20:35 По расписанию

-

1 4 июня 2021 г.

-

По расписанию

14 июня 2021 г. Сиэтл (SEA) Анкоридж (ANC) 73J - 17:00 по расписанию по расписанию

-

13 июня 2021 г.

-

по расписанию

927C 73J - 17:00 - 20:35 по расписанию по расписанию

--

009 по расписанию

0009

0009

0009

0009
12 июня 2021 года Сиэтл (S EA) Анкоридж (ANC) 73H - 17:00 - 20:35 По расписанию Играть

1

1

1

1

1

-

По расписанию

11 июня 2021 г. Сиэтл (SEA) Анкоридж (ANC) 73J - 17:00 Играть

10 июня 2021 г.

-

Расчетное время вылета 10:00

10 июня 2021 г. Сиэтл (SEA) - 17:00 - 20:35 Расчетное время вылета 10:00 Играть

09 июн 2021

-

Расчетное время вылета 10:00

927 июн 2021 Анкоридж (ANC) B738 (N526AS) - 17:00 - 20:35 Расчетное время вылета 10:00 Люфт 9269 Июнь 2021 г.

-

Расчетное время вылета 10:21

08 июня 2021 г. Сиэтл (SEA) Анкоридж (ANC) B739 (N457AS) - 20:35 Расчетное время вылета 10:21 Играть

07 июня 2021 г.

3:02

Приземлился 21:05

07 июня 2021 г. 02 17:00 18:03 20:35 Приземлился 21:05 KML CSV Воспроизвести

06 июн 2021

9 2:59 2021

9 2:59 9ded0009 : 34

06 июня 2021 года Сиэтл (SEA) Анкоридж (ANC) B739 (N448AS) 2:59 17:00 17:35 Приземлился 20:34 KML CSV Воспроизвести

05 июн 2021

3:05

Приземлился 20:37 9 0009

05 июн 2021 Сиэтл (SEA) Анкоридж (ANC) B739 (N402AS) 3:05 17:00 17:32 20:35 20:37 KML CSV Воспроизвести

04 июн 2021

3:09

Приземлился 20:39

04 июн 2021 B739 (N471AS) 3:09 17:00 17:30 20:35 Приземлился 20:39 KML CSV Играть
03 Июн 2021

3:03

Приземлился 20:40

03 июн 2021 Сиэтл (SEA) Анкоридж (A NC) B739 (N323AS) 3:03 17:00 17:37 20:35 Приземлился 20:40 KML CSV Играть
02 июн 2021 Сиэтл (SEA) Анкоридж (ANC) B738 (N512AS) 2:6 17:00 17:38 20:35 Приземлился 20:36 KML CSV Воспроизвести

01 июн 2021

3:13

9015

20:50

01 июня 2021 года Сиэтл (SEA) Анкоридж (ANC) B739 (N297AK) 3:13 17:00 17:37 20:35 Приземлился 20:50 KML CSV Воспроизвести
.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *