Асн 5000н 1 ц неисправности: Виды неисправностей стабилизаторов напряжения

Содержание

Виды неисправностей стабилизаторов напряжения

«Ресанта» – один из лидеров по производству электрического оборудования в нашей стране. Уже более 15 лет оборудование этой торговой марки известно на просторах России и стран СНГ. Во множестве домов стабилизаторы «Ресанта» обеспечивают стабильную работу сетей электроснабжения. Но, как и все остальные приборы, стабилизаторы требуют правильных условий эксплуатации или ремонта после длительного срока службы. Эта статья посвящена возможным поломкам стабилизаторов «Ресанта», ремонту поврежденных элементов и правильным условиям эксплуатации.

Для начала разберем принцип работы и устройства стабилизаторов данной марки. Основные элементы стабилизаторов «Ресанта»: электронный блок, вольтметр, автоматический трансформатор, блок подключения/отключения обмоток.

Принцип стабилизации напряжения стабилизаторов «Ресанта» – это управление всех стабилизаторов посредством электронного блока. Электронный блок считывает информацию с вольтметра и получает данные о входном напряжении. Далее происходит сравнение нормированного напряжения и действительного и только после этого электронный блок определяет, какие обмотки стабилизатора включить или отключить и, соответственно, сколько вольт прибавить или отнять.

Обмотки включаются и отключаются с помощью реле или сервопривода. В результате, на выходе из стабилизатора мы получаем нормальное напряжение. Это принцип работы, по которому работают все стабилизаторы «Ресанта», отличаются они только процессом стабилизации напряжения из-за различного подключения или отключения обмоток.

Рассмотрим каждый тип оборудования. Компания «Ресанта» выпускает стабилизаторы электромеханические и релейные.

Электромеханический тип стабилизаторов «Ресанта»

Отличительной особенностью данных моделей является наличие сервопривода. Этот элемент осуществляет переключение обмоток трансформатора. Переключение происходит плавно и без резких скачков, поэтому данные модели стабилизаторов отличаются точной регулировкой напряжения на выходе.

Сервопривод представляет собой конструкцию из двигателя и щетки. Когда происходит вращение якоря двигателя, начинается вращение щетки и контакта с обмоткой трансформатора. Щетка имеет ширину, позволяющую контактировать двум обмоткам одновременно для исключения потери фазы. Нормализатор создает напряжение ошибки, которое пропорционально величине и является разницей между входным напряжением и напряжением, заданным по параметрам. Сигнал ошибки может иметь две полярности, каждая из которых заставляет ось двигателя крутиться в определенном направлении. Соответствующее направление получает и щетка.

Исходя из этих особенностей работы, приведем возможные поломки и неисправности электромеханических стабилизаторов. В качестве практического примера возьмем одну из самых востребованных моделей стабилизатора Ресанта АСН-10000/1-ЭМ.

Основные неисправности электромеханических стабилизаторов:

1. Чем чаще изменения тока в сети, тем чаще происходит вращение якоря двигателя и щетки(сервопривода). Этот элемент при трении о витки обмотки чрезмерно нагревается и происходит загрязнение проводов и износ щетки, а также может стать причиной выхода из строя двигателя.

2. Поломка двигателя автоматически выводит из строя каскад управления двигателем, который собран на основе транзисторов Q2 ТIР41С и Q1ТIР42С.

3. После сгорания транзисторов Q2 ТIР41С и Q1ТIР42С автоматическому выходу из строя подвергаются резисторы R45 и R46.

Итак, при выходе из строя двигателя, будьте готовы к замене всех вышеперечисленных элементов. Сам двигатель можно заменить на новый, а можно подвергнуть самостоятельной реставрации, но только в том случае если вы имеете определенные навыки.

Для восстановления самого двигателя:

произведите его отключение от общей схемы.
подключите к источнику питания с постоянным напряжением в 5 Вольт. Сила тока тоже должна соответствовать определенным параметрам, от 90-160мА. При подаче такого тока щетки двигателя автоматически очищаются от частиц мусора, методом выгорания. При подаче тока поменяйте полярность несколько раз, это позволит улучшить результат.
подключите двигатель в стабилизатор придерживаясь схемы. После такой процедуры ваш стабилизатор вернется в рабочее состояние.

Релейные стабилизаторы «Ресанта»

Основные неисправности релейных стабилизаторов «Ресанта» значительно отличаются от неисправности электромеханических, соответственно и ремонт имеет отличительные черты.

Релейные модели отличаются скачкообразным выравниваем напряжения. Принцип работы: одно реле отключает/включает определенное количество витков обмотки или поочередно подключает витки и останавливает на нужном. В моделях релейного типа витки поделены на группы и каждая имеет свой вывод, который и подает ток при включении. Релейные стабилизаторы «Ресанта» состоят из четырех реле (исключение – модели СПН, имеющие пять реле) и, соответственно, количество выводов тоже четыре. Когда происходит отключение и включение каждого из реле, скачок напряжения на выходе порой составляет до 20Вольт.

Основные неисправности релейных стабилизаторов:

1. Основным рабочим узлом релейных стабилизаторов является реле, именно эта деталь нормализует ток. Соответственно, чем чаще происходят скачки напряжения, тем большему износу оно подвергается. Этот компонент при выходе из строя может сгореть или залипнуть.

2. При выходе из строя контактов реле последующей поломкой буду транзисторные ключи, которые полностью подлежат замене. Они различаются в зависимости от моделей стабилизатора. К примеру, стабилизатор Ресанта АСН-5000/1-Ц содержит транзисторы D882Р. Все транзисторы стабилизаторов «Ресанта» можно купить в большинстве магазинов, только необходимо изучить модификацию по схеме стабилизатора. Можно отреставрировать контакты реле самостоятельно – снимаем крышку реле, освобождаем подвижный контакт от пружины и снимаем его, очищаем контакт от нагара с помощью наждачной бумаги (нулевки), эту же процедуру проводим и с верхним и нижним контактом, после очистки обрабатываем все детали очищенным бензином и производим сборку, согласно схеме.

Диагностика стабилизаторов

После проведения всех ремонтных работ для любой из моделей стабилизаторов необходимо произвести проверку. Для этой цели лучше всего использовать автотрансформатор или ЛАТР.

Подключаем к этому прибору диагностируемый стабилизатор и изменяем напряжение. В качестве нагрузки используем лампу накаливания. При изменении напряжения будет видна работа стабилизатора. И только после проверки стабилизатора на корректную работу производим его подключение к сети электропитания.

Все модели стабилизаторов могут выходить из строя из-за неправильных условий эксплуатации. Чтобы этого не произошло, необходимо соблюдать правила, которые помогут вам надолго сохранить прибор в рабочем состоянии:

1. Не допускайте работу стабилизатора длительное время при пониженном напряжении, меньше 160В. Если напряжение падает до критической точки следует ограничить потребляемую мощность(нагрузку), перераспределив нагрузку и не используя мощные приборы, без которых можно обойтись. Если у вас очень часто наблюдается пониженное входное напряжение, сократите нагрузку на 50%. Например, у вас стоит стабилизатор напряжения Ресанта Доминго ДЕС- 12000/1-Ц, его мощность 12кВт, на время критических снижений напряжения снизьте потребляемую мощность до 6кВт. Есть и другой способ выйти из ситуации при постоянных пиковых снижениях напряжения — приобрести стабилизатор «Ресанта» из линейки стабилизаторов для пониженного напряжения. Эти модели стабилизаторов способны работать при критически низком напряжении в 90В!

2. Мощность стабилизатора должна быть на 10% больше, чем суммарная мощность всех потребителей, работающих одновременно. Недопустимо допускать работу прибора при полной нагрузке. Более подробные расчеты мощности для стабилизатора в нашей статье «Необходимость покупки стабилизатора»

Каждая единица оборудования в нашей компании имеет идентификационные данные, они регистрируются на всех этапах: при производстве, продаже и даже ремонте в СЦ.
Покупая у нас продукцию Ресанта, Huter и Вихрь, Вы можете быть уверены в её 100% подлинности!

Даем гарантию на все агрегаты и оборудование на этом сайте!
Покупая у нас Вы можете быть уверены в том что получите 100% оригинальный товар, гарантию и обслуживание в нашем Сервисном центре

+ Маска “Хамелеон” ** только для физ. лиц при покупке сварочного аппарата с этим стикером за наличный расчет или по карте в офисе магазина.

+ Пачка электродов ** только для физ. лиц при покупке сварочного аппарата с этим стикером за наличный расчет или по карте в офисе магазина.

+ ЕЩЁ ПОДАРОК ** только для физ. лиц при покупке сварочного аппарата с этим стикером за наличный расчет или по карте в офисе магазина.

+ КРАГИ сварщика ** только для физ. лиц при покупке сварочного аппарата с этим стикером за наличный расчет или по карте в офисе магазина.

Ремонт стабилизаторов напряжения Ресанта – несложное дело при наличии оригинальных запчастей

Эта статья расскажет о таких вопросах:

Основной принцип работы стабилизаторов «Ресанта».
Особенности работы электромеханического прибора.
Его основные неисправности.
Ремонт сервопривода.
Как работают релейные нормализаторы?
Ремонт реле.
Проведение диагностики отремонтированного стабилизатора.
Другие неисправности релейных приборов.

В очень многих домах и квартирах используются те стабилизаторы напряжения, которые были сделаны в стенах компании «Ресанта». Благодаря использованию этих приборов владельцы обеспечивают стабильную работу и защищают «здоровье» всех своих домашних электроприборов.

В конечном итоге каждый домашний электроприбор работает в течение долгого времени и очень редко требует ремонта.

Хотим отметить, что стабилизатор также является домашним прибором, который требует надлежащего ухода и соблюдения необходимых условий эксплуатации. В противном случае стабилизатор напряжения, который выпустила компания «Ресанта», может выйти из строя и будет нуждаться в ремонте.

Кроме этого он может выходить из строя после долгих лет эксплуатации. Другими словами он также обладает способностью ломаться.

Смотря на эту способность, мы решили посвятить статью слабым местам стабилизаторов марки «Ресанта» и рассмотреть, каким образом можно отремонтировать поврежденные элементы, а также восстановить полную работоспособность этого востребованного устройства.

Но, сначала расскажем об общем строении и принципе работы устройств этой марки.

Принцип работы

Как и все стабилизаторы напряжения, так и нормализаторы марки «Ресанта» состоят из:

автоматического трансформатора.
электронного блока.
вольтметра.
элемента, который осуществляет подключение/отключение определенных обмоток.

Учитывая то, что производитель осуществляет выпуск различных видов стабилизаторов, элементы для подключения обмоток являются разными. О них мы отметим несколько ниже, а именно тогда, когда будем рассматривать особенности работы и ремонта каждого вида нормализатора от латвийского производителя.

Электронный блок любого стабилизатора компании «Ресанта» осуществляет управление всей работой устройства. Он управляет работой вольтметра и получает данные об уровне входного напряжения. Дальше он сравнивает это напряжение с нормированным и определяет, сколько вольт нужно добавить или отнять.

После этого определяется то, какие обмотки стабилизатора нужно подключить или же отключить. Когда известна эта информация электронный блок подключает/отключает необходимые обмотки с помощью реле или сервопривода и наши электроприборы получают нормализованный ток.

Такой принцип стабилизации тока присущ каждому стабилизатору напряжения от компании «Ресанта». Однако процесс стабилизации в различных моделях компании имеет отличия. Они обусловлены тем, что по-разному происходит подключение/отключение обмоток трансформатора.

В стенах компании выпускается два типа стабилизаторов:

Электромеханические.
Релейные.

И, конечно, ремонт каждого из них имеет свои особенности.

Особенности работы электромеханического прибора

Сначала мы рассмотрим электромеханический нормализатор. Устройство этого стабилизатора напряжения от компании «Ресанта» предусматривает наличие такого элемента как сервопривод. Собственно благодаря ему осуществляется переключение различных обмоток автоматического трансформатора.

Переключение этих обмоток осуществляется плавно и в результате обеспечивается точная регулировка напряжения на выходе.

Каким же образом происходит это плавная регулировка? Сервопривод представляет собой двигатель и щетку (электрический контакт), которая прикреплена к якорю двигателя. Когда этот якорь крутится, то движется и щетка. Она постоянно контактирует с медными обмотками трансформатора.

По сути дела она скользит по ним. Она имеет такую ширину, которая позволяет соединять две обмотки одновременно. В результате на выходе не пропадает фаза.

Для того, чтобы щетка двигалась в определенном направлении и на определенную величину, в нормализаторе создается напряжение ошибки. Далее благодаря операционному усилителю и транзисторному выходному каскаду (он представляет собой усилитель мощности) это напряжение усиливается.

После этого оно подается на двигатель и заставляет крутиться якорь в определенном направлении.

В таком направлении движется и щетка, которая контактирует с обмотками. Напряжение ошибки является пропорциональным величине, которая является разницей между количеством вольт на входе и необходимым количеством вольт.

Сигнал ошибки может иметь одну из двух полярностей и в результате каждая полярность заставляет ось двигателя крутиться в определенном направлении. Такими являются особенности работы электромеханического нормализатора.

Отметим, что очень многие люди покупают 10-киловольт-амперный электромеханический стабилизатор. Поэтому возможные неисправности и поломки этого типа стабилизатора напряжения от компании «Ресанта» будут рассмотрены на этой модели. Ниже приводится его электросхема.

Рис. 1. Электросхема стабилизатора АСН-10000/1-ЭМ.

Стоит обратить внимание на тот факт, что общее строение всех нормализаторов этого типа является похожим. Различия заключаются в отдельных элементах моделей с разными уровнями мощности.

Основные неисправности

Из вышеописанного принципа работы электромеханического стабилизатора становится понятно, что когда происходит изменение тока в электросети, происходит одновременное вращение якоря двигателя и движение графитовой щетки.

Постоянное движение сервопривода и является главной слабостью электромеханического устройства. Почему? Потому, что в результате трения щетки о витки катушки происходит чрезмерное нагревание как щетки, так и витков под ней.

Кроме этого, трение вызывает износ щетки и загрязнение медных проводов. Последняя причина обусловливает появление искр.

Учитывая тот факт, что в наших электролиниях ток меняется очень часто, то с такой же частотой происходит движение сервопривода. Такое частое вращение становится причиной выхода из строя самого двигателя.

Примечательной особенностью является то, что поломка двигателя вызывает выход из строя других деталей. Так, появляется вероятность выхода из строя выходного каскада управления двигателем.

Специалисты компании «Ресанта» собирают этот каскад на основе пары транзисторов Q2 TIP41C и Q1 TIP42C. Когда происходит сгорание этих транзисторов, то сгорают и резисторы R45 и R46.

Они являются составляющими коллекторной цепи вышеуказанных транзисторов. R45 и R46 характеризуются сопротивлением в 10 Ом и мощностью в 2 ватта.

Когда есть такие неисправности, то надо провести проверку линейного стабилизатора. Его латвийские специалисты собирают на базе стабилитрона DM4 и транзистора Q3 TIP41C.

Если все эти составляющие электросхемы стабилизатора напряжения электромеханического типа, изготовленного компанией «Ресанта», сгорели, то их в любом случае нужно купить и заменить.

Ремонт двигателя сервопривода

Когда сгорел сам двигатель, то есть два варианта:

Покупка нового и его установка.
Попытка реставрации старого двигателя.

Второй вариант дает возможность реанимировать двигатель собственными силами, однако, на не долгое время. Для реанимации нужно произвести отключение двигателя от общей схемы. После этого его нужно подключить к мощному источнику питания.

Вашей задачей является подача на его выходы тока с постоянным напряжением в 5 вольт. Ток при этом должен иметь силу от 90 до 160 мА. При подаче такого тока на щетках двигателя сгорает каждая мелкая частица «мусора».

Полезный совет: поскольку двигатель относится к реверсивному типу, то при подаче напряжения нужно менять полярность. Эта процедура проводится два раза.

После таких действий двигатель сможет снова работать, и стабилизатор будет выполнять свою основную функцию. Далее по несложной схеме можно проводить процедуру подключения стабилизатора напряжения, выпущенного компанией «Ресанта».

Эта схема предусматривает подключение входного фазного и нейтрального кабелей к входной фазной и нейтральной клеммам соответственно. Аналогичным является подключение выходных проводов. Также обязательно подключают заземляющий провод.

Как работают релейные стабилизаторы?

Что касается релейных стабилизаторов от латвийской компании, то во время их эксплуатации возникают другие неисправности. Соответственно, их ремонт представляет собой иную процедуру.

Перед тем, как рассмотреть особенности ремонта релейного нормализатора «Ресанта», обратим внимание на особенности его работы. Релейное устройство выравнивает ток скачкообразно.

Это происходит потому, что одно реле подключает/отключает определенное количество витков второй обмотки. Если сравнить электромеханический стабилизатор, то его щетка постепенно контактирует с большим количеством витков.

Иными словами она постепенно подключает промежуточные витки и останавливается на нужном витке. В релейных приборах от «Ресанта» все витки будто поделены на группы и от каждой из них отходит вывод. Собственно на этот вывод и подается ток при включении реле.

Электрическая схема каждого релейного стабилизатора напряжения от компании «Ресанта» предусматривает наличие четырех реле, а это означает, что количество выводов второй обмотки также равняется цифре четыре.

Исключение составляют модели серии СПН. Число реле равняется цифре пять.

Полезный совет: когда включается или отключается определенное реле, напряжение на выходе меняется на 15-20 вольт, то есть происходят минискачки напряжения. Эти минипрыжки хорошо заметны на лампах освещения.

Для большинства электроприборов они не являются страшными. Однако сложная электронная и измерительная техника требуют более плавной стабилизации тока. Это следует учитывать при использовании любого релейного стабилизатора.

Подытоживая выше сказанное, отметим, что весь процесс нормализации тока сопровождается постоянной работой реле. Собственно этот механический компонент и является самым слабым местом. При эксплуатации он может как сгореть, так и залипнуть.

Как ремонтировать реле?

В том случае, когда из строя выходят контакты реле, поломаться могут и транзисторные ключи. В зависимости от модели эти ключи могут собираться на разных транзисторах. Так, в модели СПН-9000 эти ключи собраны на основе транзисторов 2SD882.

В основе транзисторных ключей модели АСН-5000/1-Ц (его схема приводится ниже) находятся транзисторы D882Р. Все эти транзисторы выпускает компания NEC.

Рис. 2. Схема стабилизатора АСН-5000/1-Ц.

В тех случаях, когда эти транзисторы и реле выходят из строя, их полностью заменяют. Такие запчасти для вышеупомянутых моделей стабилизаторов напряжения, выпускаемых компанией «Ресанта», можно найти во многих магазинах.

Также можно попробовать отреставрировать изношенные контакты реле. Данная процедура начинается со снимания крышки реле. Потом приступают к снятию подвижного контакта. Этот контакт нужно высвободить от пружины.

Далее берут наждачную бумагу «нулевку» и очищают этот контакт от всех нагоревших частиц. Такую же процедуру очистки нужно сделать и относительно верхнего и нижнего контактов.

В конце обрабатывают все контакты бензином «Галоша» и осуществляют сборку реле. Когда реле является собранным, следует проверить транзисторы 2SD882 или D882Р, или же другие (это зависит от модификации).

Их выпаивают (нужно иметь паяльник) и осуществляют проверку целостности переходов. Если переходы не является целостными, нужно взять новые транзисторы.

Проведение диагностики

После окончания ремонтных работ необходимо провести диагностику работы стабилизационного прибора. Для этого используют ЛАТР, к которому подключают стабилизатор. Далее с помощью ЛАТРа изменяют напряжение и следят за работой стабилизационного устройства. В качестве нагрузки используется лампочка.

После проверки можно произвести подключение к общей сети. Если вы не знаете, как подключить релейный стабилизатор напряжения, сделанный в стенах компании «Ресанта», то стоит запомнить, что данная процедура является такой же, как и для электромеханического нормализатора. О ней мы уже писали.

Другие неисправности релейных приборов

JAKEC набор конденсаторов

Стоит отметить, что поломка реле может быть не единственной неисправностью, которая возникает в релейном нормализаторе от латвийской компании. В некоторых случаях в стабилизаторе СПН-9000 наблюдался периодический дефект.

Внешним признаком этого дефекта являлось хаотическое отображение сегментов дисплея, которые включались. В это же время наблюдалась хаотическое включение реле.

Причина этого кроется в холодной пайке кварцевого резонатора ХТА1, который имеет рабочую частоту 8 мегагерц. Такая пайка вызывает неправильную работу микроконтроллера U2.

Для решения проблемы нужно выпаять этот резонатор, почистить его выводы с помощью нулевой наждачной бумаги, провести качественную подпайку и поставить обратно.

Специалисты также рекомендуют проверить электролитические конденсаторы, которые находятся на плате контроллера. Это необходимо сделать по той причине, что фирма использует конденсаторы от производителя JAKEC. Эти конденсаторы не характеризуются высоким качеством. Во время их проверки проводят измерение емкости и ESR.

Качество по выгодной цене – стабилизатор Ресанта СПН 9000 Ресанта СПН 5500 – мощный релейный стабилизатор. Видео Мощный и надежный стабилизатор Ресанта АСН 12000. Видео Ресанта 5000 вт, характеристики, внешний вид, применение. Видео

Стабилизатор напряжения для дачи Ресанта АСН-5000 Н/1-Ц Lux настенное исполнение

Стабилизатор напряжения однофазный Ресанта АСН-5000Н/1-Ц Люкс.

Устройство, принцип работы, индикация, установка и подключение однофазных стабилизаторов напряжения Ресанта.


Стабилизатор конструктивно выполнен в металлическом корпусе с возможностью крепления на стену.	Внутри корпуса находится мощный трансформатор и силовые реле с блоком управления.	Принцип дейсвия – релейный. При помощи мощных реле коммутируются обмотки трансформатора в заданной блоком управления последовательности.	По цифровым вольтметрам можно контролировать напряжение на входе и на выходе одновременно.

Области применения стабилизаторов Ресанта АСН-5000Н/1-Ц Люкс релейного типа.
Рекомендуется для питания	НЕ рекомендуется для питания
Насосы, холодильное оборудование, электродвигатели, электронагреватели, стиральные машины, освещение лампами накаливания, микроволновые печи, электроплиты и чайники.	Компьютеры, ЖК телевизоры и аудио-видео техника, точные электронные приборы, медицинская техника. Для питания этих приборов используйте стабилизаторы с погрешностью 1,5-2% и высокой скоростью реакции.

Преимущества Недостатки

надежность (нет механических деталей)

высокое быстродействие (не пропустит через себя скачек напряжения)

два индикатора (вход и выход)

крепление на стену (экономия места)

низкая точность стабилизации (8%)

ступенчатость регулировки выходного напряжения (точные электроприборы этого не любят)

относительно громкое срабатывание реле (в спальню ставить нерекомендуется)

Технические характеристики стабилизаторов напряжения Ресанта АСН-5000Н/1-Ц Люкс.
Допустимая мощность нагрузки по фазе не должна превышать (при входном напряжении более 190 Вольт) 5000 Вт
ПРИ ВХОДНОМ НАПРЯЖЕНИИ МЕНЕЕ 190 ВОЛЬТ РАСЧИТЫВАЙТЕ МАКСИМАЛЬНУЮ НАГРУЗКУ НА СТАБИЛИЗАТОР, ИСХОДЯ ИЗ ПРИВЕДЕННОГО НИЖЕ ГРАФИКА! <5000Вт
параметр значение
Рабочий диапазон входного напряжения 140-260 В
Нижний порог срабатывания защитного отключения нагрузки 131 В
Верхний порог срабатывания защитного отключения нагрузки 265 В
Режим работы непрерывный
Условия эксплуатации по температуре +5-+40 С
Условия эксплуатации по влажности не более 80%
При транспортировке стабилизатора напряжения избегайте жесткой тряски и резких ударов .
Управление,контроль и монтаж стабилизатора напряжения Ресанта АСН-5000Н/1-Ц Люкс.
Индикация
На передней панели стабилизатора трехразрядные индикаторы. позволяющие контролировать в режиме реального времени напряжение входа и выхода. Три светодиодных индикатора показывают состояние стабилизатора:

СЕТЬ стабилизатор в штатном режиме

ЗАДЕРЖКА шестисекундная защитная от переходных процессов задержка подачи напряжения на выход стабилизатора

ЗАЩИТА – отключение напряжения на выходе для защиты нагрузки от низкого или высокого входного напряжения.

Управление На передней панели стабилизатора расположен блок автоматических выключателей и выключатель режима “БАЙПАС”.

Подключение
Подключение стабилизатора производится с помощью клеммной колодки, расположенной внизу устройства.

Техническое обслуживание Для надежной и долговечной работы релейного стабилизатора напряжения необходимо обеспечить щедящий режим работы и не перегружать особенно в периоды сильно пониженного напряжения. Со временем контакты реле износятся и их надо заменить. Производится в официальном сервис-центре РЕСАНТА.
сервисный центр стабилизаторов РЕСАНТА

Адрес: Москва, Внутренний пр-д. д 8.

Краткие рекомендации к выбору стабилизатора по мощности.
Для покупки стабилизатора напряжения оптимальной мощности необходимо замерить входное напряжение Вашей электросети. (найти его МИНИМАЛЬНОЕ значение в течении суток).Это значение можно получить с помощью тестера напряжения или токосъемных клещей. Далее по графику, приведенному ниже определяем коэфициент понижения номинальной мощности стабилизации.
Пример: входное напряжение достигает 170 В. коэфициент – 0.7
Вы не ошибетесь, выбрав стабилизатор с “запасом” по мощности на случай появления у Вас новых электроприборов и обеспечения “щедящего” режима работы стабилизатора. Который ответит Вам своей надежной и долгой службой!
Подробнее о правильном выборе стабилизатора напряжения можно прочитать в статьях
Часто задаваемые вопросы
Может ли работать стабилизатор при температуре ниже минус 5 градусов. Да может! НО ровно столько времени, за которое обмотка трансформатора нагреется, на ней образуется конденсат и произойдет межвитковое замыкание. Как правило это минут 5-10 от момента включения.
Что делать в выше указанном случае? Перевести стабилизатор в режим “БАЙПАС”, нагреть помещение, где находится аппарат и затем переключится в штатный режим.

ᐅ РЕСАНТА LUX АСН-5000Н/1-Ц отзывы — 19 честных отзыва покупателей о стабилизаторе напряжения РЕСАНТА LUX АСН-5000Н/1-Ц
Самые выгодные предложения по РЕСАНТА LUX АСН-5000Н/1-Ц

Геннадий Шарков, 14. 06.2019
Достоинства:
скорость срабатывания, мощность.
Недостатки:
пока нет
Комментарий:
Живу за городом, и какой то сосед постоянно балуется сваркой. Даже пару раз перегорал холодильник! Задумался о покупке стабилизатора и продавец посоветовал эту мощную модель. Запитал от него все приборы на кухне, справляется надежно. Теперь за технику в доме спокоен.
Борис Кароза, 21.05.2019
Достоинства:
термозащита, принудительное охлаждение, байпас
Недостатки:
нет
Комментарий:
Использую такой стабилизатор в своем офисе. Этот прибор может стабилизировать напряжение от 140 до 260 В, если входящее напряжение не будет в этих пределах он автоматически отключает электроснабжение. Стабилизатор оборудован защитой от перегрузки, перегрева и короткого замыкания. Мощности хватает для всей техники.
Евдокимов Иван, 11.05.2019
Комментарий:
Ничего не могу сказать о качестве, так как так и не воспользовался этим стабилизатором, а отказался при выдаче.
Во первых на нём были странные потёртости, что указывало на небрежную сборку, во вторых если стабилизатор потрясти, то что-то там болталось и летало внутри по корпусу.
Ну и после того как открутили планку на стабилизаторе, не знаю для чего она была, то увидели деформацию пластика, сложно это описать нужно видеть в живую.
Так что попользоваться им не удалось, по качеству сказать что-то сложно, но если это стандартная сборка, то качество там так себе.
Сергей Федоров, 14.04.2019
Достоинства:
Цена, наличие индикации входного напряжения в сети, простота установки и подключения.
Недостатки:
Крайне ненадёжное устройство. Выходят из строя рэле и плата управления.
Гость, 07.04.2019
Достоинства:
Обычный стабилизатор, неплохая конструкция
Недостатки:
индикатор выходного напряжения – обманка, все время 220 В показывает, могли бы его совсем убрать и краской написать эти 220. Проработал 4 года на даче и отказал неделю назад – постоянные перезагрузки без видимых причин.
Комментарий:
Напряжение “вверх” поднимал, а вниз – нет. При 250 В на входе – на входе имели те же 250В!
Борис Стругачев, 04.03.2019
Достоинства:
Цена, габариты.
Недостатки:
Нет
Комментарий:
Поставил на разводку к которой подключено оборудование: комп, холодильник, кондиционер, телевизор. И началась спокойная жизнь без вечных перезагрузок и сбоев. Табло упрощает данные, если в пределах диапазона +-8% то пишет просто 220.
anton, 28.02.2019
Достоинства:
внешний вид
Недостатки:
шумный. свет все равно мигает.
отработал 3 года и сдох.
Выгорают силовые каскадные реле….3 шт.
Отдельно не найти….
Гость, 17.07.2018
Достоинства:
Цена.
Был куплен 5 лет назад. Купил самый популярный в городе аппарат.
Недостатки:
Плохое, очень плохое качество сборки.
Ненадежен.
Комментарий:
После покупки, во время монтажа обнаружилось что входные клеммы рассыпались. Был отправлен на ремонт по гарантии. Через 3! (три) месяца вернули с другими клеммами которые тоже рассыпались при монтаже. В итоге сами купили похожие клеммы, и установили в него.
При работе издавал непонятные щелчки. Освещение меняло интенсивность, холодильник менял тональность жужжания – что-то происходило все время дома с электричеством.
Когда были в отпуске он самопроизвольно отключился и в итоге отключил холодильник.
Когда я его разобрал увидел что внутри был перетерт провод, хотя никто его никогда не разбирал. И управляющая плата сгорела.
Мухаметзянов Ленар, 09.06.2018
Достоинства:
Цена-качество
Недостатки:
Отсутствие пыле-влаго защиты
Комментарий:
Покупался для запитки безвоздушного окрасочного аппарата и контактной сварки. Работает уже пол года, полет нормальный!
До установки этого чуда постоянно перегорала электроника в оборудовании.
Окупил себя сразу.
Аношенков Слава, 09. 05.2018
Достоинства:
дисплей довольно неплохой, много информации
Недостатки:
дисплей – не отключаемая светодиодная подсветка, задолбала по ночам слепить. клемники фуфло, саморезы срываются. пришлось заменить колодку. заявлена до 260 вольт, по факту на 249 срабатывает защита и он отключается. через два года вышло из строя реле .
Комментарий:
покупался для защиты от повышенного напряжения, в итоге из за отключения при повышении до 249 вольт бОльшую часть времени был отключен.

ildar.tuk, 15.03.2018
Достоинства:
Соотношение цена-качество, малые габариты, лёгкий монтаж,очень тихий по сравнению с механическими стабами, полное информационное табло, современный дизайн.
Недостатки:
Лёгкое пощёлкивание релюшек. Хотя меня это не напрягает.
Комментарий:
Стоит своих денег. Могу отметить следующее:при выравнивании напряжения лампы накаливания не много “подмигивают”, а сберегайки на это не чувствительны. Бытовая техника, эл.инструмент в т.ч. сварочный (инвертор) работают на ура. При выборе прибора обязательно обратите внимание на то, какая мощность вам нужна. Покупая прибор на 5кВт, то нормальная работа будет при 4кВт нагрузки. Удачной покупки.
Виктор, 08.03.2018
Достоинства:
Не понравилось побочное излучение помех.
Недостатки:
Почему изделие излучает звук в виде звукового рева в полосе частот от 1, 5 Мгц до 7, 0 Мгц, Забивает работу радиоаппаратуры. ..
Комментарий:
Радиоаппаратуру забивает.
Тор, 16.01.2018
Достоинства:
Прост. Поставил и забыл.
Недостатки:
При скачках на 160В отключает аппаратуру. Вообщем то это не недостаток, а заявленные характеристики, но желалки всегда выше 🙂
Гость, 13.12.2017
Достоинства:
Отсутствуют
Недостатки:
Всё остальное
Комментарий:
Деньги на ветер…
Начинаем с малого: шурупы, идущие в комплекте, сделаны из откровенного г*… При попытке закрутить винты в выходных клеммах, развалилась колодка. И это не потому, что я такой сильный, это колодка сделана из примерно того же г*, что и шурупы. Пришлось менять, а это сразу – потеря гарантии.
Теперь непосредственно к работе этого “стабилизатора” – встроенный “напряжометр” показывает стабильно 220В при любом входном напряжении.. хотя по факту выходное напряжение скачет вслед за входным.. хоть и в пределах погрешности 8% .. При включении нагрузки в виде плитки 1,8кВт напряжение в сети просаживается на ~7В …
Лучше бы я сначала почитал отзывы…
Эдик Луцько, 06.06.2017
Достоинства:
на техники не передаются опасные всплески даже вне диапазона регулирования, в этом случае он просто отключает технику – это отлично, лучше отключенный телевизор, чем сгоревший; на экран дисплея выведены основные показания.
Недостатки:
нет
Комментарий:
Все бытовые приборы запитал через выпрямитель. Живу в частном секторе, перепады напряжения происходят постоянно. Дешевле было купить стабилизатор, чем менять аппаратуру. Сложил мощность всех устройств, приобрёл аппарат с соответствующими характеристиками. Также стоят фильтры от сетевых помех. Предусмотрено крепление прибора на стене.
Павел, 04.06.2017
Достоинства:
Отработал 5 лет без проблем на даче.
Недостатки:
Все понравилось.
Комментарий:
Отработал на даче 5 лет без проблем пока я не подключил сварочник. Подгорели контакты реле. После замены опять работает. Многие говорят что вых. Напряжение постоянно показывает 220в так вот если вход опускается или поднимается ниже предела и стаб не может скорректировать это вых напряжение то-же меняется.
Pyotr Shwarew, 08.05.2017
Достоинства:
В заявленном диапазоне напряжение выдает, тихий, удобный экран, настенное крепление .
Недостатки:
Нет.
Комментарий:
При постройке дома сразу повесил его в техническом помещении. В сети напряжение плохое, чаще пониженное, но стабилизатор справляется. Понятная индикация на экране. В работе его не слышно. Есть защита.
АЛЕКС, 12.01.2017
Достоинства:
цена
Недостатки:
быстро выходят из строя. напряжение в 220 вольт не держат, на экране показывает все хорошо а вот в розетках все как прыгало так и прыгает.
Комментарий:
покупал таких 3 шт на каждую фазу, один отработал пол года два других год и вышли из строя одновременно.
Михаил Просвирнов, 14.03.2016
Достоинства:
крепится на стену, надежный
Недостатки:
пока не обнаружил
Комментарий:
В доме незаменимая вещь, место занимает не много, аккуратно висит на стене. Все показатели отражаются на дисплее, если есть проблемы с электричеством отключает прибор. Он защищает от перегрева, замыкания и высокого напряжения.
Ресанта АСН-5000Н/1-Ц Инструкция по эксплуатации онлайн [7/16]
ВНИМАНИЕ! Прибор не предназначен для использования лицами (включая
детей) с ограниченными физическими, сенсорными или умственными
возможностями, обладающими недостаточным опытом и знаниями, если они
не находятся под наблюдением и не получили инструкций по использованию
устройства от лица, ответственного за их безопасность.
1. Извлечь стабилизатор из упаковочной тары и произвести внешний
осмотр с целью определения наличия повреждений корпуса или
выключателя.
2. Установить стабилизатор в помещении, отвечающем рабочим
условиям эксплуатации.
3. Убедиться в том, что выключатель (рис. 2, поз. 3 ) находится в
положении «выкл»;
4. Подключить сеть;
5. Перевести выключатель (рис. 2, поз. 3 ) в положение «вкл» на 10
секунд;
6. Дисплей (рис. 2, поз. 2 ) должен показывать 220 В при работе
стабилизатора в штатном режиме;
7. Перевести выключатель (рис. 2, поз. 3 ) в положение «выкл».
8. Подключить нагрузку;
9. Установить выключатель (рис. 2, поз. 3 ) в положение «вкл». Обратите
внимание, что напряжение на нагрузку будет подано с задержкой 3-6
сек.(время, необходимое стабилизатору для подстройки выходного
напряжения).
В ходе эксплуатации стабилизатора, на дисплее могут появляться следующие
обозначения:
L – это означает, что напряжения в сети опустилось ниже диапазона
работы стабилизатора (ниже 140 В) и сработала защита от пониженного
напряжения, стабилизатор продолжает функционировать и подавать
напряжение на выход, но на табло горит буква «L». При возврате напряжения
в рабочий диапазон на дисплее вновь появится выходное напряжение.
H
– это означает, что напряжение в сети поднялось выше рабочего
диапазона стабилизатора (выше 260 В) и сработала защита от
перенапряжения, стабилизатор выключил выходное напряжение, чтобы
избежать поломки устройства. Стабилизатор автоматически вернется в
рабочее состояние при возврате входного напряжения в рабочий диапазон.
CH
– это означает, что суммарная мощность подключаемых к
стабилизатору устройств выше номинальной мощности стабилизатора и
сработала тепловая защита от перегрева. Необходимо снизить нагрузку
7
Какой стабилизатор напряжения выбрать. Лучшие стабилизаторы напряжения для дома
Стабилизаторы бывают однофазными и трехфазными, а также цифровыми и электромеханическими (латерными).
В зависимости от типа питающей сети стабилизаторы подразделяются по значению выходного напряжения на однофазные (220 В) и трёхфазные (380 В). Выбор зависит от того, как напряжение подведено в дом. Если подведено однофазное напряжение, подойдет только однофазный стабилизатор. Если к вашему дому подведено трехфазное напряжение, есть 2 варианта: купить один трехфазный стабилизатор или три однофазных.
Цифровые или электронные стабилизаторы, в свою очередь, делятся по способу коммутации на релейные и тиристорные.
Релейные стабилизаторы – самые популярные, т.к. имеют ряд преимуществ:
— надежны
— выдерживают перегрузки
— долговечны
— быстро реагируют на перепады
— принимают входное напряжение в любом диапазоне
— не вносят радиопомех, поэтому подходят для использования с самыми разными электроприборами
— компактны – могут быть установлены в квартирах
Тиристорные модели используют для работы с оборудованием, требующим высокой точности выходного напряжения, например, медицинским. Но они менее надежны и не так удобны в эксплуатации. Еще один минус – цена самого стабилизатора и ремонта в случае поломки. Для работы телевизора, холодильника и другой бытовой техники чрезмерная точность не нужна – все эти приборы нормально работают при напряжении 220 В ± 10%.
Электромеханические стабилизаторы латерного типа отличаются высокой точностью (2-3 %) и плавной регулировкой напряжения, но гораздо медленнее срабатывают при изменениях в электросети. Такие модели не приспособлены к перегрузкам и не отличаются надёжностью, требуют регулярного техобслуживания, имеют сравнительно большие размеры. Доступная цена – вот главное преимущество электромеханических стабилизаторов.
Мощность
Чтобы сделать правильный выбор, нужно еще учитывать мощность стабилизатора. Для бесперебойной работы стандартного набора «чайник-холодильник-телевизор-плита» мощности 10-15 кВт более, чем достаточно. Для точного расчета следует сложить мощность всей домашней техники, которую вы собираетесь подключать к стабилизатору. Учитывайте пусковые токи некоторых приборов, например, кондиционера, холодильника, микроволновки. Мощность этих приборов при запуске превышает номинальную в несколько раз. Если не учесть данного факта, при включении техники с высоким пусковым током остальные приборы могут отключиться – сработает защита стабилизатора от перегрузки.
Электрическая схема ресанта асн-5000 1-ц
Электрическая схема ресанта асн-5000 1-ц
Стабилизатор напряжения однофазный ресанта асн 5000/1-ц. Однофазный стабилизатор напряжения ресанта асн 5000 н/1.
• схема стабилизатора ресанта асн-8000/1-ц.
Купить стабилизатор релейный ресанта асн-5000/1-ц в.
Стабилизатор напряжения ресанта асн-5000/1-ц купить.
Ресанта асн-5000/1-ц: стабилизатор напряжения 5 ква и 5 квт. Стабилизатор напряжения ресанта ach-5000/1-ц — 46.
Неисправность стабилизатора ресанта. Кто знает? | страница.
Ремонт и проверка стабилизатора напряжения ресанта асн.

Ресанта асн-5000/1-ц: купить в москве сравнить цены на.
Ресанта асн-5000/1-ц: купить в санкт-петербурге сравнить.
Ремонт стабилизаторов напряжения ресанта своими руками.
Ремонт стабилизаторов напряжения ресанта несложное дело.
Релейный стабилизатор напряжения | устройство и принцип.Ресанта асн-5000/1-ц: купить в якутске сравнить цены на.
Стабилизатор напряжения ресанта ach-5000/1-ц.

Ресанта асн-5000/1-ц: купить в нальчике сравнить цены на.
Ремонт стабилизатора “ресанта” асн-5000/1-ц. Ошибка-“err”.
Стабилизатор напряжения ресанта асн-10000/1-ц. Стабилизатор напряжения ресанта асн-5000/1-ц — купить в. Учебник биология 6 класс сонин ответы Игры для мальчиков гонки торрент скачать Эпоха мертвых москва круз андрей скачать Ноги из глины терри пратчетт скачать txt Учебник по химии новошинский 11 класс
Фаговый дисплей тканевого ингибитора металлопротеиназы-2 (TIMP-2): ИДЕНТИФИКАЦИЯ СЕЛЕКТИВНЫХ ИНГИБИТОРОВ КОЛЛАГЕНАЗЫ-1 (МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗА 1 (MMP-1))
Тканевый ингибитор металлопротеиназы-2 (TIMP-2) представляет собой широкий спектр ингибитор матричных металлопротеиназ (ММП), которые участвуют в катаболизме внеклеточного матрикса. Здесь фаговый дисплей был использован для идентификации вариантов человеческого ТИМП-2, которые являются селективными ингибиторами человеческой ММП-1, коллагеназы, нерегулируемое действие которой связано с раком, артритом и фиброзом.Используя жесткую рандомизацию остатков 2, 4, 5 и 6 (L1) и мягкую рандомизацию остатков 34-40 (L2) и 67-70 (L3), была создана библиотека, содержащая 2 × 10 ¹⁰ вариантов TIMP- 2. Пять клонов были выделены после пяти раундов селекции с ММП-1, используя ММП-3 в качестве конкурента. Обогащенные фаги избирательно связывали MMP-1 относительно MMP-3 и содержали мутации только в L1. Наиболее селективный вариант (TM8) был использован для создания второй библиотеки, в которой остатки Cys ¹ –Gln ⁹ были мягко рандомизированы.Четыре дополнительных клона, выбранных из этой библиотеки, показали сродство к MMP-1, аналогичное TIMP-2 дикого типа, но с пониженным сродством к MMP-3. Варианты N-концевого домена ТИМП-2 (N-ТИМП-2) с последовательностями наиболее селективных клонов были экспрессированы и охарактеризованы в отношении ингибирующей активности против восьми ММП. Все они были эффективными ингибиторами MMP-1 с наномолярными значениями K _и , но TM8, содержащий замены Ser ² на Asp и Ser ⁴ на Ala, был наиболее селективным с наномолярным K _i значение для MMP-1, но не обнаруживается ингибирующей активности в отношении MMP-3 и MMP-14 до 10 мкм.Это исследование предполагает, что фаговый дисплей и селекция с другими ММП могут быть эффективным методом обнаружения тканевого ингибитора вариантов металлопротеиназы, которые различают определенные ММП как мишени.
Ингибиторы ферментов
Матричная металлопротеиназа (ММП)
Структура белка
Взаимодействия белок / белок
Тканевый ингибитор металлопротеиназы (TIMP)
Коллагеназа
Фаговый дисплей
Статьи по мутагенезу белков
© 2011 ASBMB.В настоящее время опубликовано Elsevier Inc; Первоначально опубликовано Американским обществом биохимии и молекулярной биологии.
Рекомендуемые статьи
Ссылки на статьи
Биоинженерия | Бесплатный полнотекстовый | Биоинженерия биофармацевтического препарата rFVIIa и характеристика структуры для оценки биоподобия
1. Введение
Одним из основных классов терапевтических биофармацевтических препаратов являются факторы крови. Они составляют шесть процентов от одобренных биотерапевтических препаратов до 2014 года [1].Многие из них используются для лечения гемофилии, наследственного (хромосома X) нарушения свертывания крови, вызванного дефицитом факторов свертывания крови VIII (гемофилия A) и IX (гемофилия B) соответственно [2]. Активированный фактор VII (FVIIa) инициирует внешний путь коагуляции и, таким образом, активирует фактор IX и фактор X для связывания с тканевым фактором на поверхности клеток, которые подверглись воздействию циркулирующей крови из-за повреждения. Применение фармакологических доз FVIIa приводит к связыванию достаточного количества FVIIa с активированными тромбоцитами и последующей активации фактора X, дальнейшему прохождению комплекса теназы и, наконец, к индукции тромбинового выброса [3].Эптаког альфа представляет собой витамин К-зависимый рекомбинантный FVIIa (rFVIIa), полученный с помощью генной инженерии из клеток почек детенышей хомячка (BHK). Разрыв связи Arg152 – Ile153 единственной пептидной цепи из 406 остатков (около 50 кДа) в FVII приводит к его активации. Полученный FVIIa состоит из легкой цепи (LC) из 152 аминокислот (около 20 кДа) и тяжелой цепи (HC) из 254 аминокислот (около 30 кДа), связанных друг с другом одной дисульфидной связью (Cys135 – Cys262 ). Во время биоинженерии rFVIIa претерпевает множество посттрансляционных модификаций (ПТМ).Первые десять глутаминовых кислот N-концевой части являются γ-карбоксилированными, Asn145 и Asn322 являются N-гликозилированными, а Ser52 и Ser60 являются O-гликозилированными. N-гликозилирование играет важную роль в сворачивании белка FVII, в то время как O-гликозилирование имеет большее значение для биологической активности FVII. Было высказано предположение, что структурные элементы, обнаруженные в O-гликанах, важны для ассоциации FVIIa с тканевым фактором [4,5]. Описано, что γ-карбоксилирование чувствительно к ограничениям в аппарате клеточной посттрансляционной модификации белков в пути секреции рекомбинантных витамин К-зависимых факторов свертывания крови [6].Эптаког альфа под торговым названием NovoSeven ^® (Ново Нордиск, Багсвард, Дания) был лицензирован регулирующими органами в 1996 (ЕС), 1999 (США) и 2000 (Япония) для лечения врожденной и приобретенной гемофилии [7]. AryoSeven ™ представляет собой биоподобную версию NovoSeven ^®, которая, как недавно было доказано, сопоставима с точки зрения клинической эффективности [8]. Он был разработан биоинженерией для соответствия критериям биоподобия, и уже доступны клинические данные, демонстрирующие аналогичную эффективность у людей [8].В общем, биоаналоги представляют собой подкласс биотерапевтических средств с высоким структурным и клиническим сходством по сравнению с уже имеющимся на рынке биопрепаратом изобретателя [9]. Согласно критериям пути применения биоподобных препаратов Европейского агентства по лекарственным средствам (EMA) или аналогичным критериям других стран, необходимо продемонстрировать сходство двух биологических препаратов. Критические атрибуты качества (CQA), которые могут повлиять на фармакологический ответ, должны быть исследованы, и должны быть установлены спецификации [10]. Поскольку вариативность процессов биологического производства может изменить качество продукта, изменения CQA от партии к партии в течение длительного периода производства необходимо тщательно контролировать.Следовательно, предварительно установленные спецификации CQA отправителя должны быть реализованы в приемлемом диапазоне путем разработки биопроцесса для оригинала, а также для производства биоподобных веществ [11]. Для оценки требований спецификаций Q6B и Q5E Международной конференции по гармонизации (ICH) необходимо применить несколько современных аналитических методов. Они требуют подробного описания и сопоставимости нескольких CQA, касающихся физических, химических и биологических характеристик, по крайней мере, для трех партий [12,13,14].Поскольку гликозилирование очень чувствительно к производственным изменениям, EMA и Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) запрашивают обширную гликозилированную аналитику, включая гликановый паттерн и сайт-специфический анализ гликозилирования для утверждения фармацевтических препаратов на основе гликопротеинов. Изменение профилей гликозилирования и модификации биоподобного препарата может помешать его одобрению в качестве последующего биопрепарата из-за известного влияния на активность и фармакокинетику [15,16,17]. Поэтому была проведена биоинженерия последующего биофармацевтического препарата rFVIIa для получения продукта, который отвечает критериям для утверждения в качестве биоподобия.Непосредственное исследование биоподобия применялось для NovoSeven ^® (оригинатор) и AryoSeven ™ (последующий продукт). Физико-химические свойства были проанализированы на основе масс-спектрометрии, включая неповрежденную массу, PTM и структуру более высокого порядка (HOS), а также другие биофизические методы. Это было дополнено анализом активности коагуляции для изучения потенциального влияния вариаций CQA на биоактивность. Эптаког альфа с торговым названием NovoSeven ^® (Novo Nordisk, Багсверд, Дания) был лицензирован регулирующими органами в 1996 (ЕС), 1999 (США) и 2000 (Япония) для лечения врожденной и приобретенной гемофилии [7].AryoSeven ™ представляет собой биоподобную версию NovoSeven ^®, которая, как недавно было доказано, сопоставима с точки зрения клинической эффективности [8]. Он был разработан биоинженерией для соответствия критериям биоподобия, и уже доступны клинические данные, демонстрирующие аналогичную эффективность у людей [8]. В общем, биоаналоги представляют собой подкласс биотерапевтических средств с высоким структурным и клиническим сходством по сравнению с уже имеющимся на рынке биопрепаратом изобретателя [9]. Согласно критериям пути применения биоподобных препаратов Европейского агентства по лекарственным средствам (EMA) или аналогичным критериям других стран, необходимо продемонстрировать сходство двух биологических препаратов.Критические атрибуты качества (CQA), которые могут повлиять на фармакологический ответ, должны быть исследованы, и должны быть установлены спецификации [10]. Поскольку вариативность процессов биологического производства может изменить качество продукта, изменения CQA от партии к партии в течение длительного периода производства необходимо тщательно контролировать. Следовательно, предварительно установленные спецификации CQA отправителя должны быть реализованы в приемлемом диапазоне путем разработки биопроцесса для оригинала, а также для производства биоподобных веществ [11].Для оценки требований спецификаций Q6B и Q5E Международной конференции по гармонизации (ICH) необходимо применить несколько современных аналитических методов. Они требуют подробного описания и сопоставимости нескольких CQA, касающихся физических, химических и биологических характеристик, по крайней мере, для трех партий [12,13,14]. Поскольку гликозилирование очень чувствительно к производственным изменениям, EMA и Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) запрашивают обширную гликозилированную аналитику, включая гликановый паттерн и сайт-специфический анализ гликозилирования для утверждения фармацевтических препаратов на основе гликопротеинов.Изменение профилей гликозилирования и модификации биоподобного препарата может помешать его одобрению в качестве последующего биопрепарата из-за известного влияния на активность и фармакокинетику [15,16,17]. Поэтому была проведена биоинженерия последующего биофармацевтического препарата rFVIIa для получения продукта, который отвечает критериям для утверждения в качестве биоподобия. Непосредственное исследование биоподобия применялось для NovoSeven ^® (оригинатор) и AryoSeven ™ (последующий продукт). Физико-химические свойства были проанализированы на основе масс-спектрометрии, включая неповрежденную массу, PTM и структуру более высокого порядка (HOS), а также другие биофизические методы.Это было дополнено анализом активности коагуляции для изучения потенциального влияния вариаций CQA на биоактивность. Эптаког альфа с торговым названием NovoSeven ^® (Novo Nordisk, Багсверд, Дания) был лицензирован регулирующими органами в 1996 (ЕС), 1999 (США) и 2000 (Япония) для лечения врожденной и приобретенной гемофилии [7]. AryoSeven ™ представляет собой биоподобную версию NovoSeven ^®, которая, как недавно было доказано, сопоставима с точки зрения клинической эффективности [8]. Он был разработан биоинженерией для соответствия критериям биоподобия, и уже доступны клинические данные, демонстрирующие аналогичную эффективность у людей [8].В общем, биоаналоги представляют собой подкласс биотерапевтических средств с высоким структурным и клиническим сходством по сравнению с уже имеющимся на рынке биопрепаратом изобретателя [9]. Согласно критериям пути применения биоподобных препаратов Европейского агентства по лекарственным средствам (EMA) или аналогичным критериям других стран, необходимо продемонстрировать сходство двух биологических препаратов. Критические атрибуты качества (CQA), которые могут повлиять на фармакологический ответ, должны быть исследованы, и должны быть установлены спецификации [10]. Поскольку вариативность процессов биологического производства может изменить качество продукта, изменения CQA от партии к партии в течение длительного периода производства необходимо тщательно контролировать.Следовательно, предварительно установленные спецификации CQA отправителя должны быть реализованы в приемлемом диапазоне путем разработки биопроцесса для оригинала, а также для производства биоподобных веществ [11]. Для оценки требований спецификаций Q6B и Q5E Международной конференции по гармонизации (ICH) необходимо применить несколько современных аналитических методов. Они требуют подробного описания и сопоставимости нескольких CQA, касающихся физических, химических и биологических характеристик, по крайней мере, для трех партий [12,13,14].Поскольку гликозилирование очень чувствительно к производственным изменениям, EMA и Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) запрашивают обширную гликозилированную аналитику, включая гликановый паттерн и сайт-специфический анализ гликозилирования для утверждения фармацевтических препаратов на основе гликопротеинов. Изменение профилей гликозилирования и модификации биоподобного препарата может помешать его одобрению в качестве последующего биопрепарата из-за известного влияния на активность и фармакокинетику [15,16,17]. Поэтому была проведена биоинженерия последующего биофармацевтического препарата rFVIIa для получения продукта, который отвечает критериям для утверждения в качестве биоподобия.Непосредственное исследование биоподобия применялось для NovoSeven ^® (оригинатор) и AryoSeven ™ (последующий продукт). Физико-химические свойства были проанализированы на основе масс-спектрометрии, включая неповрежденную массу, PTM и структуру более высокого порядка (HOS), а также другие биофизические методы. Это было дополнено анализом активности коагуляции для изучения потенциального влияния вариаций CQA на биоактивность.
2. Материалы и методы
2.1. Химические вещества и расходные материалы
Все закупленные химические вещества были высшей степени чистоты.Гидроцитрат диаммония, дитиотреитол (DTT), йодацетамид (IAA), D ₂ O, декстрановая лестница, супер-дигидроксибензойная кислота (sDHB), гидроксид натрия, метилиодид, бикарбонат аммония, ацетонитрил (ACN) класса MS, муравьиная кислота FA) и трифторуксусную кислоту (TFA) были приобретены у Sigma-Aldrich (Steinheim, Германия). Диметилсульфоксид, йодид натрия, 2-пропанол и хлороформ были приобретены у Carl Roth (Карлсруэ, Германия). Сверхчистая вода была получена из водоочистителя Milli-Q (Millipore Corporation, Медфорд, Массачусетс, США).Трипсин и PNGase F для секвенирования были приобретены в Roche Applied Science (Мангейм, Германия). Комплект ZIC-HILIC был приобретен у Merck (Дармштадт, Германия), центробежные фильтры Amicon Ultra-0,5 мл у Merck (Дармштадт, Германия), твердофазная экстракция Empore ^® (SPE), используемая для наконечников ступеней C18 от Sigma-Aldrich, и карбограф извлекают чистые колонки от Alltech (Дирфилд, Иллинойс, США). Получена стандартная ампула Национального института биологических стандартов и контроля (NIBSC, Великобритания), которую использовали в качестве эталона.Плазма с дефицитом фактора VII (Hemosil, NY, USA), калибровочная плазма (Hemosil) и тромбопластин (Hemosil) были приобретены в лиофилизированной форме и восстановлены в соответствии с инструкциями производителя. Фактор-разбавитель и эталонная эмульсия также были получены от Hemosil.
Оригинал «NovoSeven ^® 1,2 мг / мл» (номер партии: CU60561, ES6S824 и ES6T726) был получен от Novo Nordisk (Багсвард, Дания). Биоаналог «AryoSeven ™ 1,2 мг / мл» (№ партии: 9401043-а, 9401044-а и 9401045-а) был получен от AryoGen Pharmed (Тегеран, Иран).Оба биологических препарата были доставлены в виде лиофилизированного порошка для восстановления во флаконе.
2.2. Приборы
Анализ гликопептидов с использованием жидкостной хроматографии и точной масс-спектрометрии (UHPLC-QTOF-MS) выполняли на системе Waters ACQUITY UPLC, соединенной с масс-спектрометром SYNAPT HDMS G2-S (Waters; Манчестер, Великобритания) с разрешением 18000 и оснащенным оборудованием. с BEH C18 (2,1 × 100 мм, размер частиц 1,7 мкм, Waters, Manchester, UK) с использованием H ₂ O: FA (99,9: 0,1, об: об) в качестве подвижной фазы A и ACN: FA (99.9: 0,1, об: v) в качестве подвижной фазы B. Скорость потока была установлена на уровне 200 мкл / мин, а линейный градиент от 5% B до 35% B за 35 минут, от 35% B до 50% B за 10 минут, а затем изократическим потоком при 80% B в течение 5 мин. Калибровку массы QTOF проводили с использованием однозарядных ионов, продуцируемых 2 мкг / мкл раствора йодида натрия в 2-пропаноле: воде (50:50, об: об). Образцы были ионизированы в режиме ионизации положительным электрораспылением (ESI +). Капиллярное напряжение было 2500 В, конусное напряжение 50 В, диапазон измерения m / z 250–2000.В экспериментах с масс-спектрометрией с повышенным энергопотреблением (MS ^E) диапазон регистрации составлял m / z 50–2000, энергия столкновения ловушек 4 В и передаваемая энергия столкновения от 15 до 45 В. с использованием аналогичных условий, как описано для UHPLC-QTOF-MS, с дополнительным использованием опции IMS (UHPLC-IMS). Настройки IMS были следующими: капиллярное напряжение 2800 В, скорость волны 2000 м / с, высота волны 1,0 В, скорость волны переноса 1968 м / с и высота волны переноса 1.8 V. Интерпретация данных выполнялась с использованием программ MassLynx 4.1 и Driftscope 2.1 (Waters; Манчестер, Великобритания).
Матричная лазерная десорбционная ионизация по времени пролета масс-спектрометрия (MALDI-TOF-MS) N- и O-гликанов была выполнена на масс-спектрометре Ultraflextreme (Bruker Daltonics; Бремен, Германия), оснащенном лазером smartbeam-IITM и установка TOF / TOF MS (технология LIFTTM). Аликвоты (0,5 мкл) образца смешивали непосредственно на измельченной стальной пластине-мишени MALDI (Bruker Daltonics) в соотношении 1: 1 (об. / Об.) С матрицей sDHB 10 мг / мл, растворенной в ACN: H ₂ O ( 10:90, v: v) и дают высохнуть при температуре окружающей среды.Спектры записывали от m / z от 700 до 5000 (N-гликаны) или от m / z от 200 до 3000 (O-гликаны) в режиме положительных ионов рефлектрона. Регистрация происходила при 2000 Гц для 4000 выстрелов (200 выстрелов на шаг) с использованием алгоритма случайного блуждания, и ионы были ускорены с помощью 25 кВ. Внешнюю калибровку для гликанов проводили с использованием декстрановой лестницы (Sigma). Анализ данных выполняли в FlexControl 3.4 (Bruker Daltonics), а спектры оценивали с помощью программного обеспечения GlycoPeakfinder (EuroCarbDB, Европейский институт биоинформатики, Гейдельберг, Германия).Назначенные гликановые структуры были построены с помощью программного обеспечения GlycoWorkbench (версия 1.1, EuroCarbDB).
Интактную массу биотерапевтических средств оценивали с помощью MALDI-TOF-MS. Стандарт белка II (Bruker Daltonics) использовали в качестве внешнего калибровочного стандарта. Аликвоты (2 мкл) раствора образца смешивали с 2 мкл 2% раствора TFA. Добавляли матричный раствор (2 мкл) и смесь переносили пипеткой вверх и вниз до начала кристаллизации. Аликвоту (1 мкл) суспензии кристаллов наносили и тщательно перемешивали на мишени.Ионы анализировались в линейном режиме после ускорения при 20 кВ, а энергия лазера была установлена на 50%.
Жидкостная хроматография Nanoflow, электрораспылительная ионизация, тандемная масс-спектрометрия (nLC-ESI-MS / MS). Анализы выполняли на приборе Dionex Ultimate 3000 nanoLC (Thermo Fisher Scientific; Бремен, Германия), соединенном с масс-спектрометром LTQ Orbitrap Velos (Thermo Fisher Scientific). с использованием ионизации nESI +. Хроматографическое разделение было достигнуто на микроколонке из кварцевого стекла диаметром 250 мм и внутренним диаметром 100 мкм собственного производства.Колонки заполняли смолой ReproSil-Pur C18-AQ 3 мкм (Maisch GmbH; Ammerbuch-Entringen, Германия). Линейный градиент от 5% B до 60% B за 90 мин при скорости потока 350 нл / мин для подвижной фазы A (H ₂ O: FA, 99,9: 0,1, v: v) и подвижной фазы B (ACN: FA, 99,9: 0,1, об: об). Были записаны спектры МС полного сканирования (от m / z 300–1700), а также спектры ионов-продуктов после фрагментации двадцати наиболее интенсивных ионов в результате диссоциации, индуцированной столкновениями (CID). Идентификацию последовательности белка и анализ PTM выполняли с помощью MaxQuant, версия 1.3.0.5 (Институт биохимии Макса Планка; Мартинсрид, Германия).
2.3. Обработка образцов
2.3.1. Определение массы интактных образцов
Образцы
rFVIIa заменяли буфером в ультрацентробежных фильтрах Amicon MWCO 30 кДа и разбавляли до 1 мкг / мкл в H ₂ O: FA (9,9: 0,1, об.: Об.). Затем матрицу 2,5-дигидроксиактетофенона (2,5-DHAP) (7,6 мг) растворяли в 375 мкл этанола, смешанного с 125 мкл раствора, содержащего 18 мг / мл гидрогенцитрата диаммония (DAC), растворенного в воде, и использовали для анализа нативного rFVIIa.
2.3.2. Анализ N- и O-гликанов.
Аликвоты (50 мкг) биологических препаратов растворяли в 100 мкл 50 мМ буфера бикарбоната аммония (ABC). Восстановление проводили DTT (20 мМ в 50 мМ буфере ABC) в течение 45 минут при 60 ° C и алкилирование 20 мМ IAA в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте. Затем образцы обрабатывали 2 ед. Фермента PNGase F в 50 мкл буфера ABC в течение 4 часов при 37 ° C для высвобождения общего количества N-гликанов. Напротив, O-связанные углеводы расщепляли с использованием β-элиминирования, выполняемого следующим образом: аликвоты по 50 мкг белка смешивали с 10 мкл 200 мМ DTT, и полученную смесь инкубировали в течение 60 мин при 60 ° C.Раствору давали остыть при комнатной температуре, после чего добавляли 10 мкл 200 мМ раствора IAA в воде и инкубировали при комнатной температуре в течение 45 минут в темноте. Затем к смеси добавляли 50 мкл водного раствора аммиака (25% об.) И инкубировали при 50 ° C в течение ночи. Образцы сушили под вакуумом. Очистка была достигнута с использованием картриджа Carbograph SPE, уравновешенного 3 × 400 мкл ACN: H ₂ O: TFA (80: 19,9: 0,1, об: об: об), а затем H ₂ O: TFA (99,9: 0.1, v: v). Образцы подкисляли 1% TFA до конечного значения pH ₂ O: TFA (99.9: 0.1, v: v) для обессоливания N-гликанов. Затем гликаны элюировали 3 × 400 мкл ACN: H ₂ O: TFA (25: 74,9: 0,1, об: об: об). Элюаты сушили под вакуумом. Высушенные N-гликаны перметилировали в диметилсульфоксиде с использованием гидроксида натрия и метилиодида, как описано в литературе [18]. Затем смеси инкубировали при комнатной температуре в течение 1 ч. Образцы интенсивно перемешивали, затем водную фазу отбрасывали. Органическую фазу пять раз промывали водой и затем упаривали досуха.Перметилированные N-гликаны растворяли в 10 мкл ACN: H ₂ O (75:25, об: об) и аликвоты анализировали с помощью MALDI-TOF-MS.
2.3.3. Картирование пептидов
Аликвоты (50 мкг) биологических препаратов растворяли в 100 мкл 50 мМ буфера ABC. Восстановление проводили DTT (20 мМ в 50 мМ буфере ABC) в течение 45 минут при 37 ° C и алкилирование 20 мМ IAA в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте. Затем образцы обрабатывали 2 ед. Фермента PNGase F в 50 мкл буфера ABC в течение 4 часов при 37 ° C.Образцы дегликозилированного rFVIIa переваривали трипсином (1 мкг трипсина, соотношение фермента к белку 1:50 в 50 мМ буфере ABC) и обессоливали с использованием наконечников ступени C18. Наконечники C18 уравновешивали 100 мкл MeOH, 190 мкл ACN: H ₂ O: FA (5: 94,9: 0,1, об: об: об), а затем 120 мкл ACN: H ₂ O: TFA (5 : 92: 3, v: v: v). Наносили образцы, и наконечники C18 промывали 200 мкл ACN: H ₂ O: FA (5: 94,9: 0,1, об: об: об). Затем пептиды элюировали 200 мкл ACN: H ₂ O: FA (80:19.9: 0.1, v: v: v). Элюаты сушили под вакуумом. Очищенные образцы пептидов растворяли в 15 мкл ACN: H ₂ O: FA (5: 94,9: 0,1, об: об: об) и подвергали секвенированию белков и анализу PTM с использованием nLC-ESI-MS / MS. Данные сравнивали с онлайн-базой данных DrugBank, содержащей последовательности HC и LC rFVIIa.
2.3.4. Анализ гликопептидов
Аликвоты образцов, содержащие 50 мкг rFVIIa, растворяли в 100 мкл буфера ABC. Восстановление проводили DTT (20 мМ в 50 мМ буфере ABC) в течение 45 минут при 60 ° C и алкилирование 20 мМ IAA в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте.Добавляли трипсин (1 мкг, соотношение фермента к белку 1:50) и проводили инкубацию в течение ночи при 37 ° C. Перед анализом отделение гликопептидов от гидрофобных пептидов выполняли с использованием набора ZIC-HILIC ProteoExtract (Merck, Дармштадт, Германия), как описано производителем. Полученный супернатант, содержащий гликопептиды, анализировали с помощью UHPLC-QTOF-MS.
2.3.5. Анализ структуры высшего порядка
Образцы
rFVIIa заменяли буфером на ABC-буфер с 30 кДа фильтром Amicon (Merck, Германия).Образцы rFVIIa, восстановленные в 50 мкл буфера ABC, были доставлены в UHPLC-IMS и проанализированы, как описано выше.
Вторичные структуры новатора и биоаналога сравнивали методом кругового дихроизма (КД) с использованием CD-спектрометра JASCO J-810 (Jasco, Истон, Мэриленд, США), оборудованного кюветами CD Suprasil с длиной оптического пути 0,1 см (Hellma Analytics, Мюльхайм, Германия). . Анализы проводили при 293 К. Использовали ширину полосы 2 нм и скорость сканирования 100 нм / мин. Для каждого образца было выполнено три сканирования три раза (n = 3), и полученные спектры были усреднены.Инфракрасную спектроскопию с преобразованием Фурье (FTIR) проводили с использованием FTIR-спектрометра PerkinElmer Spectrum 100. Время измерения было установлено 50 с с разрешением 4 см ⁻¹.
Одномерные протонные ЯМР-спектры записывали на системе ЯМР Avance III 700 МГц (Bruker Daltonics) с программным обеспечением Topspin 2.1. Буфер для приготовления биофармацевтических препаратов заменяли на воду с использованием фильтра Amicon 30 кДа. Для подавления сигнала остаточной воды использовалась тяжелая вода.Измерения образцов с концентрацией 0,25 мМ проводили со спектральной шириной 20 ppm и сканированием 8k при 293 К.
2.3.6. Анализ коагуляции
Активность FVIIa анализировали с помощью автоматического анализатора коагуляции, ACL 7000 (Instrumentation Laboratory, Bedford, MA, USA). Методика ACL 7000 основана на изменении светорассеяния, связанном с образованием фибринового сгустка. После калибровки прибора было восстановлено все содержимое ампулы стандарта NIBSC, содержащей 2-й международный стандарт для концентрата FVII, и были приготовлены серийные разведения стандарта и образца в соответствии с инструкциями производителей.Время свертывания для каждого разведения анализировали с помощью программного обеспечения PLA 2.0 Bioassay (Stegmann Systems, Родгау, Германия). Средние результаты трех купленных лотов оригинатора NovoSeven ^® (номер партии: CU60561, ES6S824, ES6T726) использовали в качестве контрольного значения.
4. Обсуждение
Было обнаружено, что интактные массы сопоставимы для NovoSeven ^® и AryoSeven ™. Сдвиги массы, наблюдаемые для биоаналога, скорее всего, связаны с различиями в PTM, такими как дезамидирование [19], окисление или гликозилирование, которые более точно оцениваются после переваривания белка.В процессе окисления атом серы метионина окисляется до сульфоксида (увеличение массы на 16 Да), а затем в форму сульфона (увеличение массы на 32 Да) [20]. Процесс дезамидирования происходит в основном по остаткам Asn либо в кислых условиях, либо в нейтральных и основных условиях, что приводит к образованию Asp и / или isoAsp с увеличением массы на 1 Да [21,22]. Аналогичная низкая степень окисления и дезамидирования была обнаружена в обоих биотерапевтических средствах, что указывает на то, что эти модификации имеют очень низкое влияние на биоактивность.γ-Карбоксилирование было проанализировано, поскольку сообщалось о мониторинге ограничений клеточного аппарата посттрансляционной модификации белка в пути секреции рекомбинантных витамин К-зависимых факторов свертывания крови [6,23]. Богатый γ-карбоксиглутаминовой кислотой (GLA) домен в rFVII содержит несколько остатков глутамата (на E6, E7, E14, E16, E19, E20, E25, E26, E29 и E35), которые посттрансляционно модифицированы витамином K -зависимое карбоксилирование с образованием γ-карбоксиглутамата (Gla) [24,25,26].Было обнаружено, что γ-карбоксилированные пептиды сопоставимы в NovoSeven ^® и AryoSeven ™, поскольку полностью γ-карбоксилированный пептид, содержащий 10-кратный Gla, был обнаружен в обоих биопрепаратах. Следовательно, этот PTM соответствует предыдущим исследованиям [23]. Изменения гликозилирования часто вызваны изменениями в биопроцессе, используемом для производства биологических препаратов [27,28]. В частности, идентификация сайта O-гликозилирования является сложной задачей, потому что Eptacog alfa несет O-фукозилирование в позиции Ser60 и O-глюкозу или O-глюкозо- (ксилозу) _1,2 мотивы в Ser52 [29].Поскольку гликозидная связь O-фукозы с Ser очень лабильна, это вызывает сложные масс-спектры CID [30]. Однако в рамках этого исследования масс-спектры O- и N-гликопептидов последующего биологического (AryoSeven ™) и эталонного продукта (NovoSeven ^®) были сопоставимы и позволили подтвердить каждый сайт O- и N-гликозилирования (Ser52, Ser60 , Asn145 и Asn322). Таким образом, тщательно спроектировав процесс биоинженерии, можно было получить биоподобие и в этом CQA. Было обнаружено, что GalNAc-несущие структуры N-гликана намного более многочисленны в AryoSeven ™, что часто коррелирует с общим более низким сиалированием [23].Последний также наблюдался в проанализированных образцах. Последующий биологический препарат имеет в основном несиалилированные структуры, оканчивающиеся на Gal и GalNAc (галакто- и агалакто-тип), соответственно. Обе структуры связываются с рецептором асиалогликопротеина с высоким сродством. Это может ускорить выведение rFVIIa из кровообращения и привести к сокращению периода полувыведения лекарства [31]. CD и FTIR были использованы для оценки различных геометрических форм, таких как α-спирали, полипролиновые спирали, β-листы и случайная спираль, которые влияют на дальний ультрафиолетовый спектр CD и ИК-полосы [13].Спектральный анализ КД в дальнем УФ (200–260 нм) показывает информацию об α-спирали, β-листе и случайном клубке, которые могут восстанавливать конформационное состояние молекулы. Спектры в ближнем УФ (260–350 нм) отражают третичную структуру белков [32]. Данные CD (рис. 6) выявили минимум поглощения в диапазоне длин волн 190–230 нм, что представляет собой преобладающую α-спиральную структуру в обоих биотерапевтических препаратах [33]. Сходное место и форма амидных полос (между 1750 и 750 см ^-1) в FTIR-спектрах подтвердили результаты CD [13,32].Незначительные различия в спектрах КД возникают из-за вариации количества кальция в буфере для приготовления биопрепаратов [33] и не отражают структурные различия двух белков. ЯМР-спектроскопия может производить спектральный отпечаток биологических веществ в растворе, обеспечивая структурные и гидродинамические данные для оценки сопоставимости биофармацевтических препаратов [32,34]. Было также обнаружено, что данные ЯМР сопоставимы для NovoSeven ^® и AryoSeven ™. Использование IMS в качестве мощного метода визуализации в денатурирующих условиях подтвердило исследование биоподобия [35,36].Разделение разновидностей ионов разного размера, заряда и формы проводилось в дрейфовой ячейке, заполненной буферным газом-носителем (N ₂) в присутствии электрического поля, где скорость разновидностей ионов играет критический параметр [ 37]. Данные IMS очень сопоставимы. Эффективность обоих биологических препаратов rFVIIa определяли путем добавления тромбопластинового реагента, который содержит тканевой фактор и кальций, к плазме с дефицитом фактора VII и измерения времени свертывания. Протромбиновое время (ПВ) варьируется в зависимости от реагента и коагулометра, но обычно составляет от 10 до 14 с [38].Биоактивность биоаналога практически идентична оригинальному препарату НовоСэвен ^®.
Физические основы биохимии
Об этой книге
Введение
Физические основы биохимии: Руководство по решениям ко второму изданию предлагает решения наборов проблем из второго издания Физические основы биохимии . Физические основы биохимии – это введение в философию и практику междисциплинарной области, в которой биологические системы исследуются с использованием количественной точки зрения ученого-физика. Как и в случае с первым изданием, идея о том, что фундаментальное понимание основных физических принципов, лежащих в основе химических биологических систем, является жизненно важным, остается в центре внимания этого второго издания. Это новое издание «Физические основы биохимии » содержит существенный новый материал, добавленный в отношении моделей на простом молекулярном уровне (включая газы Ван-дер-Ваальса и вириальные обработки), который связан с охватом моделей термодинамики полимеров.Второе издание разделено на пять разделов: центральная концепция, согласно которой наука – это способ взгляда на мир; физические основы биофизической химии с упором, прежде всего, на энергию, работу и силы, имеющие биологическое значение; изучение того, как строятся модели, применимые к молекулярной биофизике; приведенная в движение трехмерная поверхность потенциальной энергии; и краткое обсуждение биофизических методов, используемых для оценки структуры и функции биологических систем.Кроме того, часть приложений по-прежнему служит для подробного представления некоторой обзорной информации и определенных тем. Физические основы биохимии будет интересен количественно ориентированным биологам, а также начинающим химикам, физикам и инженерам, интересующимся биологическими системами.
Авторы и аффилированные лица
Питер Р. Бергетон
Кевин Хэллок
1., Кафедры анатомии и нейробиологии Медицинской школы Бостонского университета, Бостон, США,
2. Кафедра анатомии и нейробиологии, Медицинская школа Бостонского университета, Бостон, США,
,
.
Об авторах
Кевин Хэллок, доктор философии, является исследователем и преподавателем кафедры анатомии и нейробиологии Медицинской школы Бостонского университета в Бостоне, штат Массачусетс, где он преподает биостатистику, аспирантуру по науке о катастрофах, а также преподает в качестве соучредителя. курсы биофизической химии и моделирования с докторомБергетон. Его исследовательские интересы включают влияние антимикробного пептида на фосфолипидные бислои, твердотельный ЯМР и определение характеристик кристаллических твердых частиц с помощью магнитно-резонансной томографии, образование атеросклеротических бляшек, магнитно-резонансную микроскопию членистоногих, влияние хронического воздействия ртути на старение и роль клеточной мембраны. биофизика играет в фундаментальных процессах нейрофизики. Питер Бергетон, доктор медицины, является руководителем Центра нейробиологического междисциплинарного моделирования и симуляции (NIMS Center), Лаборатории интеллектуального моделирования и нейрофизики и членом факультета обоих факультетов анатомии / нейробиологии и биохимии Медицинской школы Бостонского университета.Его исследования вращаются вокруг основного вопроса: «Какова физическая и системная основа творчества и разумного поведения и как такое поведение можно практически сконструировать или реконструировать?» Доктор Бергетон также является активным членом Американской академии неврологии, от которой он получил премию Основателя, Электрохимического, Биофизического, Американского химического обществ, Общества нейробиологии и Американского общества биохимии и клеточной биологии.
Библиографическая информация
НАСТРОЙКА КОНФУНДЕРА
ПРИ НЕСКОЛЬКИХ ТЕСТИРОВАНИЯХ ГИПОТЕЗ на JSTOR
Abstract
Мы рассматриваем крупномасштабные исследования, в которых одновременно выполняются тысячи критериев значимости.В некоторых из этих исследований процедура множественного тестирования может быть сильно искажена латентными смешивающими факторами, такими как групповые эффекты и неизмеряемые ковариаты, которые коррелируют как с первичными интересующими переменными (например, с лечебной переменной, фенотипом), так и с результатом. За последнее десятилетие было предложено множество статистических методов для корректировки искажающих факторов при проверке гипотез. Мы унифицируем эти методы в одной структуре, обобщаем их, чтобы включить несколько основных переменных и несколько мешающих переменных, и анализируем их статистические свойства.В частности, мы предоставляем теоретические гарантии для RUV-4 [Gagnon-Bartsch, Jacob and Speed (2013)] и LEAPP [Ann. Прил. Стат. 6 (2012) 1664–1688], которые соответствуют двум различным условиям идентификации в структуре: первое требует набора «отрицательных контролей», которые, как известно, априори соответствуют нулевому распределению; второй требует, чтобы истинные ненулевые значения были редкими. Затем к этим двум сценариям применяются две разные оценки, основанные на RUV-4 и LEAPP. Мы показываем, что если смешивающие факторы сильны, результирующие оценки могут быть асимптотически такими же мощными, как оценка оракула, которая наблюдает за скрытыми смешивающими факторами.Для проверки гипотез мы показываем, что асимптотические z-тесты, основанные на оценках, могут контролировать ошибку типа I. Численные эксперименты показывают, что частота ложных открытий также контролируется процедурой Бенджамини – Хохберга, когда размер выборки достаточно велик.
Информация журнала
The Annals of Statistics публикует научные статьи самого высокого уровня. качество, отражающее многие аспекты современной статистики. Основной упор придается важность и оригинальность, а не формализм.Дисциплина статистики имеет глубокие корни как в математике, так и в основные научные направления. Математика дает язык, на котором сформулированы модели и свойства статистических методов. Это важно за строгость, последовательность, ясность и понимание. Следовательно, наша политика будет продолжать играть особую роль в представлении исследований на переднем крае математической статистики, особенно теоретических достижений, которые, вероятно, оказывать значительное влияние на статистическую методологию или понимание.Основные области важны для сохранения жизнеспособности статистики, поскольку они обеспечивают мотивацию и направление для большинства будущих разработок в статистике. Таким образом, мы намерены также публиковать статьи, касающиеся роли статистики в междисциплинарных исследованиях во всех областях естественной, технические и социальные науки. Третья сила, меняющая статистику вычислительная революция, и Анналы также приветствуют разработки в этой области.
Информация об издателе
Целью Института математической статистики (IMS) является содействие развитие и распространение теории и приложений статистики и вероятность.Институт сформирован на встрече заинтересованных лиц. 12 сентября 1935 года в Анн-Арборе, штат Мичиган, вследствие чувства что теория статистики будет продвинута с образованием организации тех, кто особенно интересуется математическими аспектами предмета. Летопись статистики и Анналы вероятности (которые заменяют “Анналы математической статистики”), Статистические Наука и Анналы прикладной вероятности – это научные журналы института.Они и Бюллетень IMS включают официальные журналы института. Институт имеет индивидуальное и организационное членство. Сборы оплачиваются ежегодно и включают подписку на информационный бюллетень организации, Бюллетень IMS. Участники также получают приоритетные цены на все другие публикации IMS.
N. Ettischer-Schmid ¹, K. Strecker ¹, M. Stein ², P.Reinke ², R. Preyer ¹
¹ GenID GmbH, AID GmbH, Штрассберг, Баден-Вюртемберг, Германия
² Charité-Universitätsmedizin, Центр регенеративной терапии (BCRT), Берлин, Германия
Einführung
Индивидуальная иммунотерапия для пациентов после трансплантации все больше перемещается в центр внимания врачей и центров трансплантологии, поскольку индивидуальные подходы к терапии позволяют минимизировать долгосрочные побочные эффекты и повысить качество жизни пациентов.
Эти индивидуальные подходы к терапии требуют высоких требований к диагностике и мониторингу терапии, а также к обнаружению новых биомаркеров.
Methoden
Enzyme-Linked ImmunoSpot assay (EliSpot) стал мощным инструментом при трансплантации твердых органов и стволовых клеток. В общеевропейском многоцентровом исследовании проекта Bio-DrIM ( BIO marker -Dr iven personalized Im munosuppression ^c), использование метода EliSpot было всесторонне оценено для выбора реципиентов трансплантата почки для персонализированного терапия.
Справочный институт разработал СОП и обучил обслуживающий персонал соответствовать строгим требованиям. Системы чтения EliSpot и комплекты EliSpot прошли всестороннюю техническую проверку, чтобы гарантировать, что все центры достигают одинаковых результатов.
Ergebnisse
Всего было подсчитано 21 планшет из 4 различных партий, обработанных 5 операторами, с 1983 лунками. Линейная регрессия всех пар значений 1983 года приводит к линии линейной регрессии с уравнением y = 1.026 * x + 0,06888 и коэффициент корреляции Пирсона R ² = 9988, демонстрируя высокую согласованность каждой системы считывания.
Чтобы еще больше продемонстрировать необычайно высокую стандартизацию процедуры, оценка между и внутри анализа была проведена 5 разными операторами, 3 разными партиями в 3 разных дня, соответственно, 2 оператора выполнили 11 анализов, включая 3 репликативные лунки для каждого антигена с использованием изолированных клеток из 3-х лейкоцитов и одного образца свежей крови. В зависимости от количества пятен в наборе проанализированных результатов CV% варьировался ниже 20%, что намного ниже клеточных анализов, указанных FDA, с 25%.
Schlussfolgerung
В заключение отметим, что мощная комбинация метода EliSpot с системой EliSpot Reader является высокоэффективным инструментом для диагностики и мониторинга иммуносупрессии. Основываясь на высоком потенциале стандартизации, эта современная технология будет играть важную роль в диагностической валидации персонализированной терапии следующего поколения.
Выражение признательности
Эта совместная работа получила финансирование от Седьмой рамочной программы Европейского Союза FP7 / 2007-2013, соглашение о гранте № 305147 BIO-DrIM
Referenzen
Viklicky O, Krystufkova E, Brabcova I, Sekerkova A, Wohlfahrt P, Hribova P, Wohlfahrtova M, Sawitzki B,
Слатинская Дж., Стриз И., Фольк Х.D и Reinke P
Биомаркеры толерантности, связанные с В-клетками, активируются у реципиентов трансплантата почки без отторжения.
Трансплантация 2013, 95 (1), 148-54. DOI: 10.1097 / TP.0b013e3182789a24 .
Viklicky O, Hribova P, Brabcova I
Молекулярные маркеры отторжения и толерантности: уроки клинических исследований.
Циферблатная трансплантация нефрола 2013, 28 (11), 2701-08. DOI: 10,1093 / ndt / gft102 .
Schachtner T, Stein M, Sefrin A, Babel N, Reinke P
Воспалительная активация и восстановление BKV-специфического иммунитета коррелируют с самоограничивающейся репликацией BKV после трансплантации почки.
Transpl Int 2014, 27 (3), 290-301. DOI: 10.1111 / tri.12251 .
Baid-Agrawal S, Schindler R, Reinke P, Staedtler A, Rimpler S, Malik B, Frei U, Berg T
Распространенность скрытой инфекции гепатита С у пациентов с хроническим гемодиализом и трансплантацией почки.
J Hepatol 2014, 60 (5), 928-33. DOI: 10.1016 / j.jhep.2014.01.012.
Juvet SC, Whatcott AG, Bushell AR, Wood KJ
Использование регуляторных Т-клеток для клинического использования при трансплантации: конец начала.
Am J Transplant 2014, 14 (4), 750-63. DOI: 10.1111 / ajt.12647.
Wohlfahrtova M, Viklicky O
Недавние испытания иммуносупрессии и их последствия для текущей терапии.
Curr Opin Organ Transplant 2014, 19 (4), 387-94. DOI: 10.1097 / MOT.0000000000000093.
Lúcia M, Crespo E, Cruzado JM, Grinyó JM, Bestard O
Человеческие CMV-специфические Т-клеточные ответы при трансплантации почки; к изменению существующей парадигмы стратификации риска.
Transpl Int. 2014, 27 (7), 643-56. DOI: 10.1111 / tri.12318.
Stolp J, Turka LA, Wood KJ
В-клетки с иммунорегулирующей функцией при трансплантации.
Nat Rev Nephrol 2014, 10 (7), 389-97. DOI: 10.1038 / nrneph.2014.80.
Гирманова Е, Груба П, Виклицкий О
Циркулирующие биомаркеры толерантности.
Transplant Rev (Орландо) 2015, 29 (2), 68-72. DOI: 10.1016 / j.trre.2015.01.003.
Volk HD, Стивенс MM, Mooney DJ, Grainger DW, Duda GN
Ключевые элементы для поддержки среды переводческих исследований.
Sci Transl Med 2015, 7 (282), 282 см2. DOI: 10.1126 / scitranslmed.aaa2049.
Schmueck-Henneresse M, Sharaf R, Vogt K, Weist BJ, Landwehr-Kenzel S, Führer H, Jurisch, A, Babel N, Rooney CM, Reinke P, Volk HD
Полученные из периферической крови вирусспецифические стволовые Т-клетки памяти созревают до функциональных субпопуляций эффекторной памяти с самообновляющейся способностью.
J. Immunol 2015, 194 (11), 5559-67. DOI: 10.4049 / jimmunol.1402090.
Weist BJ, Wehler P, El Ahmad L, Schmueck-Henneresse M, Millward JM, Nienen M, Neumann AU, Reinke P, Babel N
Пересмотренная стратегия мониторинга BKV-специфического клеточного иммунитета у пациентов с трансплантацией почки.
Kidney Int 2015, 88 (6), 1293-1303. DOI: 10.1038 / ki.2015.215.
Braza, F, Dugast E, Panov I, Paul C, Vogt K, Pallier A, Chesneau M, Baron D, Guerif P, Lei H, Laplaud DA, Volk HD,
Degauque N, Soulillou JP, Sawitzki B, Brouard S
Центральная роль CD45RA-Fox3hi Т-лимфоцитов, регулирующих память, в клинической переносимости трансплантации почки.
J Am Soc Nephrol 2015, 26 (8), 1795-805. DOI: 10.1681 / ASN.2014050480.
Schachtner T, Babel N, Reinke P
Различные профили факторов риска различают репликацию BKV с ранним и поздним началом.
Transpl Int 2015, 28 (9), 1081-91. DOI: 10.1111 / tri.12601.
Asadullah K, Busch A, Gottwald M, Reinke P, Landeck L
Сотрудничество промышленности и науки для биомаркеров.
Nat Rev Drug Discov. 2015, 14 (12), 805-6. DOI: 10,1038 / NRD4727.
Wohlfahrtova M, Tycova I, Honsova E, Lodererova A, Viklicky O
Молекулярные закономерности субклинического и клинического отторжения аллотрансплантата почки: количество имеет значение.
Kidney Blood Press Res 2015, 40 (3), 244-257.DOI: 10,1159 / 000368500.
Wohlfahrtova M, Viklicky O
Новые стратегии оценки качества трансплантатов почек от пожилых доноров.
Transplant Rev (Орландо) 2015, 29 (4), 212-8. DOI: 10.1016 / j.trre.2015.04.002.
Hruba P, Brabcova I, Gueler F, Krejcik Z, Stranecky V, Svobodova E, Maluskova J, Gwinner W, Honsova E,
Лодерерова А, Обербауэр Р, Заховаль Р, Виклицкий О
Молекулярная диагностика выявляет риски дисфункции трансплантата, несмотря на пограничные гистологические изменения.
Почки, внутр. 2015, 88 (4), 785-95. DOI: 10.1038 / ki.2015.211.
Krepsova E, Tycova I, Sekerkova A, Wohlfahrt P, Hruba P, Striz I, Sawitzki B, Viklicky O
Влияние индукционной терапии на экспрессию молекулярных маркеров, связанных с отторжением и толерантностью.
BMC Nephrol. 2015, 16, 146. DOI: 10.1186 / s12882-015-0141-2.
Schlickeiser S, Streitz M, Sawitzki B
Стандартизированная многоцветная проточная цитометрия и открытие компьютерных биомаркеров.
Методы Мол Биол 2016, 1371, 225-38. DOI: 10.1007 / 978-1-4939-3139-2_15.
Weber SA, Pietzsch M, Bestard O, Reinke P, Grinyo JM
Исследование медико-экономических профилей иммуносупрессии, управляемой биомаркерами (BioDrIM), после трансплантации твердых органов.
Value Health 2015, 18 (7), A534. DOI: 10.1016 / j.jval.2015.09.1669.
16_10.07.2015.pdf | Международная автомобильная федерация
Перейти к основному содержанию # 3500LivesDataSmart CitiesПанель высокого уровня # 3500LivesDataSmart CitiesПанель высокого уровня
Медиа
Сети FIA
Facebook
Твиттер
Instagram
YouTube
Назад
FIA
Назад
О FIA
Назад
Организация
Администрация
Партнеры
Назад
Партнеры по маркетингу
Институциональное партнерство
Маркетинговые услуги
Приглашение к участию в торгах
Уведомление о конфиденциальности данных
Свяжитесь с нами
Отчет о деятельности FIA
Назад
Отчет о деятельности FIA за 2019 год
РАПОРТ Д’АКТИВИТЕ FIA 2019
INFORME DE ACTIVIDADES DE LA FIA 2019
ОТЧЕТ О ДЕЯТЕЛЬНОСТИ FIA ЗА 2018 ГОД
ДОКЛАД Д’АКТИВИТЕ FIA 2018
INFORME DE ACTIVIDADES DE LA FIA 2018
ОТЧЕТ О ДЕЯТЕЛЬНОСТИ FIA ЗА 2017 ГОД
РАПОРТ Д’АКТИВИТЕ FIA 2017
ИНФОРМАЦИЯ ОБ АКТИВИДАХ FIA 2017
ОТЧЕТ О ДЕЯТЕЛЬНОСТИ FIA ЗА 2016 ГОД
РАПОРТ Д’АКТИВИТЕ FIA 2016
ИНФОРМАЦИЯ ОБ АКТИВИДАХ FIA 2016
Горячая линия FIA по вопросам этики и соблюдения требований
Устав
Назад
Устав и внутренние правила
Управление
Назад
Президент
Президентство
Офицеры
Генеральная Ассамблея
Всемирные советы
Назад
Всемирный совет по автомобильной мобильности и туризму
Всемирный совет автоспорта
Сенат
Комитет по этике
Комиссии
Назад
Международная историческая комиссия
Спортивные комиссии
Комиссионные по мобильности
Объединенная комиссия по спорту и мобильности
Спортивные комитеты
Спина
Комитет по выносливости
Комитет GT
Комитет ТК
FIA для общества
Назад
#RaceAgainstCovid Auction
Все кампании
Действия FIA по безопасности дорожного движения
Инвалидность и доступность
FIA Race True
Выходные волонтеров FIA
Прошедшие кампании
Действия FIA по охране окружающей среды
Назад
Программа экологической аккредитации
Корты
Назад
Суды FIA
Международный трибунал
Назад
Решения Международного трибунала
Международный апелляционный суд
Назад
Решения Международного апелляционного суда
Фонд FIA
Sport
Назад
Возвращение FIA к правилам автоспорта
Соревнования
Назад
Чемпионат мира
Назад
Чемпионат мира Формулы-1 FIA
Чемпионат мира по ралли FIA
Чемпионат мира по гонкам на выносливость FIA
Чемпионат мира по ралли-кроссу FIA
Чемпионат мира FIA Formula E
Автодром
Назад
Чемпионат мира FIA Formula One
Чемпионат мира по гонкам на выносливость FIA
WTCR – Мировой кубок FIA по кузовным гонкам
Чемпионат мира FIA Formula E
Чемпионат FIA Формула 2
Чемпионат FIA Formula 3
Чемпионат мира FIA F3
Региональная формула
Чемпионат Формулы 4 сертифицирован FIA
Чемпионат Европы по гонкам на грузовиках FIA
Чемпионат Европы по дрэг-рейсингу FIA
Чемпионат FIA по электричеству и новой энергии
Межконтинентальный кубок FIA по дрифтингу
Ралли
Назад
Чемпионат мира по ралли FIA
Чемпионат Африки по ралли FIA
Чемпионат FIA по ралли в Азиатско-Тихоокеанском регионе
Чемпионат FIA Codasur Rally Championship
Чемпионат Европы по ралли FIA
Чемпионат FIA по ралли на Ближнем Востоке
Чемпионат FIA NACAM по ралли
Трофей европейского ралли FIA
Чашка R-GT
Cross-Country
Back
Кубок мира FIA по лыжным гонкам
Кубок мира FIA по беговым бахам
Кубок Европы FIA по кросс-кантри-бахам
Off-Road
Back
Чемпионат мира по ралли-кроссу FIA
Чемпионат Европы по ралли-кроссу FIA
Чемпионат Европы по автокроссу FIA
Hill Climb
Back
Чемпионат Европы FIA по Hill Climb
FIA Hill Climb Masters
Международный кубок FIA по подъему по холмам
Коэффициент полезного действия
Historic
Back
FIA Masters Historic Formula One Championship
Чемпионат FIA Masters по историческим спортивным автомобилям
Трофей FIA Lurani для автомобилей Formula Junior
FIA Historic Formula 3 European Cup
Чемпионат Европы по историческому ралли FIA
Трофей FIA за исторические регулярные ралли
Чемпионат FIA по историческому подъему в гору
Историческая база данных FIA
Регламент
Картинг
Назад
Новости картинга
Календарь гонок
Регламент
Архив
Рекорд скорости на земле
Digital Motor Sport
Назад
GT World Tour
Рабочая группа по цифровому автоспорту
FIA Motorsport Games
Назад
Списки участников
Новости
Регламент
Архив
Международный спортивный календарь
Правила
Назад
Международный спортивный кодекс и приложения
Чемпионат мира
Спина
Чемпионат мира Формула-1 FIA
Чемпионат мира по гонкам на выносливость FIA
Чемпионат мира по ралли FIA
Чемпионат мира по ралли-кроссу FIA
ЧЕМПИОНАТ МИРА FIA FORMULA E
Автодром
Назад
Чемпионат мира FIA Formula One
Чемпионат мира по гонкам на выносливость FIA
WTCR – Мировой кубок FIA по кузовным гонкам
ЧЕМПИОНАТ МИРА FIA FORMULA E
Чемпионат FIA Формула 2
Чемпионат FIA Formula 3
Чемпионат мира FIA F3
Формула 4
Картинг
Чемпионат Европы по гонкам на грузовиках FIA
Кубок Европы по кузовным гонкам FIA
Чемпионат Европы по дрэг-рейсингу FIA
Чемпионат FIA по электричеству и новой энергии
Межконтинентальный кубок FIA по дрифтингу
FIA Motorsport Games
Ралли
Назад
Чемпионат мира по ралли FIA
Региональные митинги
Cross-Country
Back
Кубок мира FIA по лыжным гонкам
Кубок мира FIA по беговым бахам
Off-Road
Back
Чемпионат мира по ралли-кроссу FIA
Чемпионат Европы по автокроссу FIA
Чемпионат Европы по ралли-кроссу FIA
Hill-Climb
Back
Чемпионат Европы FIA по Hill Climb
FIA Hill Climb Masters
Международный кубок FIA по подъему по холмам
FIA Motorsport Games
Исторический
Антидопинг
Категория драйверов FIA
Манипулирование соревнованиями
Омологации
Назад
Омологации для автомобилей
Технические списки
Утверждение испытательных домов
Стандарты FIA
Отраслевая рабочая группа FIA
Безопасность
Назад
Новости безопасности
Защитное оборудование
Цепь безопасности
Rally Safety
Безопасность при подъеме на холм
Медицинский
Антидопинг
Антиалкогольные
Всемирная база данных происшествий
Мобильность
Назад
Политика и защита интересов
Назад
Безопасность дорожного движения
Устойчивая мобильность
Назад
Доступность
Экологические характеристики автомобиля
Городская мобильность
Возможности подключения
Назад
Автономные автомобили
Клубы передвижения
Путешествия и туризм
Участники
Назад
Список участников
Принадлежность
События FIA
Назад
Ежегодная Генеральная Ассамблея FIA
Назад
Информационные бюллетени
Вручение призов FIA
КОНФЕРЕНЦИЯ FIA 2019
Спортивная конференция FIA
Конференция FIA по мобильности
FIA eConference 2020
Назад
Информационный бюллетень – FIA eConference 2020
Программа
– Электронная конференция FIA 2020
Услуги FIA
Назад
Программа развития спортивных клубов FIA
Грантовые программы
Назад
Гранты на мобильность
Программа спортивных грантов
Университет ФИА
Проездные документы
Назад
Брошюры
Международная сеть CPD
Международные сети CPD
Международный спортивный календарь
Назад
Приложение календаря
Заявка на международную серию
Лицензия для должностных лиц
Программа вознаграждений ASN
Инновационный фонд FIA
Программы передового опыта
Назад
Официальные лица
Медицинский
Драйверы
Инновационный фонд
Окружающая среда
Женщины
Назад
Женщины в автоспорте
Назад
О НАС
ВЫСОКОЕ
ПРЕДСТАВИТЕЛИ
ПРОЕКТЫ
Назад
The Girls On Track – Rising Stars
Девушки на трассе – соревнования по картингу
При поддержке женщин в автоспорте
Карьера в автоспорте
Женщины в автоспорте во всем мире
МАГАЗИН
Скачать lmp1_15-16_10.07.2015.pdf (3,96 МБ)
475 157
вентилятора
как FIA
596 063
подписчика
подписаться на FIA
1 000 881
подписчика
подписаться на FIA
81 700
подписчика
подписаться
© 2021 FIA
Кредиты
Положения и условия
Уведомление о конфиденциальности данных
Свяжитесь с нами
Карьера
Фонд FIA
Информация о событии и времени
Патент 2287469 Резюме – Канадская база данных патентов
CA 02287469 1999-10-14
ИНТЕРАКТИВНАЯ СИСТЕМА ДЛЯ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ
И УДАЛЕНИЯ ВЕЩЕСТВ
ОПИСАНИЕ
Настоящее изобретение относится к интерактивным системам
для представления и удаления
веществ из жидкостей.Кроме того, изобретение относится к устройствам
, изготовленным
с этими интерактивными системами, таким как, например, системы капиллярных трубок,
волоконный материал
для фильтрации физиологических жидкостей, фильтрующие маты, артропластики или
сосудистые протезы
и т. Д.
Для ряда целей часто необходимо исключить
конкретных веществ из
жидкости или представить вещества в жидкости.
Например, физиологически активные вещества часто сочетаются с полиалкиленгликолями
, например.грамм. полиэтиленгликоль, чтобы увеличить молекулярную массу

и, таким образом, улучшить фармакокинетику в организме (см., например, Thrombosis
и
Haemostasis, 77 (1), 168-73 (1997), Peptide Research, Vol. 8, No. 2 (1995)).
Такие
вещества сегодня широко используются в терапии. На данный момент для таких веществ не существует
эффективных функциональных антидотов или систем, которые нейтрализуют их действие,
, то есть системы
для устранения этих веществ.
Во время серьезных заболеваний клеточные сигнальные вещества от функционального расстройства

часто попадают в кровоток, что позволяет этим клеточным сигнальным факторам
–
быстро распространяться в любую часть тела.Это может вызывать как полезные ответы
организма
CA 02287469 1999-10-14
2
на такие сигналы, но также часто патологические. Путем
нейтрализации или
блокирования этих патогенных факторов можно остановить заболевание или предотвратить
прогресс болезни
, чтобы собственные механизмы восстановления организма получили
возможность вмешательства
.
Типичными примерами таких сигнальных веществ являются клеточные мессенджеры
эндотелиальных и циркулирующих клеток крови, таких как e.грамм. CD1, CD2, CD6, CD8, CD16,
фактор некроза опухоли (TNF) и т. Д. Индуцированные белки, которые являются патогенетически значимыми
, такие как, например, липопротеин-связывающий белок LBP также
отвечает за
развитие чрезвычайно серьезных осложнений у пациентов с септическим шоком
.
Было бы важно иметь возможность мягко удалять такие вещества с помощью экстракорпоральной терапевтической системы
, не обременяя организм дополнительными
веществами. Кроме того, было бы полезно лечить определенные заболевания
с помощью систем
для презентации моноклональных антител или фрагментов этих моноклональных антител
.В настоящее время такая терапия возможна только в течение ограниченного периода
времени
, поскольку иммунокомпетентные клетки организма быстро продуцируют человеческие антитела
против этих чужеродных белков. Локальная презентация таких моноклональных антител

в кровотоке может применяться для нейтрализации антигенов
в крови
в течение длительного времени, не вызывая какой-либо иммунореактивности.
Более того, часто бывает желательно исключить определенные ингредиенты в продуктах питания
, например
e.грамм. холестерин, некоторые жирные кислоты, алкоголь, примеси микробного или
бактериального происхождения
и т. д. мягко и легко, например, для производства определенных продуктов
для особых диетических требований
.
Следовательно, цель, лежащая в основе настоящего изобретения, состоит в том, чтобы предоставить простую
недорогую и универсально применимую систему для удаления или представления

веществ в жидкости. Система должна легко адаптироваться к различным практическим требованиям

.Кроме того, система не должна отрицательно влиять на обрабатываемую жидкую среду
или
и должна легко удаляться оттуда. Если система

используется в диагностических и терапевтических целях, она должна применяться осторожно,
, и не обременять организм.
Эта цель достигается согласно настоящему изобретению с помощью интерактивной системы

, содержащей по меньшей мере одну активную поверхность пластического материала из мономеров
, содержащую по меньшей мере один структурный элемент (А), полученный из карбоновой кислоты
и по меньшей мере
, по меньшей мере, один вещество, связанное с линкером по крайней мере с одним структурным элементом
(B)
CA 02287469 1999-10-14
3
, способное устанавливать водородную связь, причем взаимодействие происходит между
структурным элементом
(A) и ( Б).Предпочтительно структурный элемент, производный
от карбоновой кислоты
, расположен в боковой цепи мономера. Более предпочтительно,
пластиковый материал
содержит структурный элемент
R
C = 0
x
R
, где группы R могут быть одинаковыми или разными и представляют собой любую алкильную или
арильную группу,
или атом водорода. X является необязательной группой и представляет 0, N или Ch3.
Неожиданно было обнаружено, что во время исследований связывающей способности
поверхностных структур
поверхности пластического материала из мономеров, содержащих, по меньшей мере,
структурный элемент (A)
, полученный из карбоновой кислоты, вступают в очень стабильное
взаимодействие
с линкерами. по крайней мере с одним структурным элементом, способным устанавливать связь
водород
.Такое взаимодействие очень стабильно и не может быть отменено, например,
pH
значениями от 2 до 13 или буферами с высокой ионной силой или температурами от
до
+60 C. Это взаимодействие может быть использовано для связывания широкого диапазона веществ. путем связывания
веществ с этим линкером, после чего вещества вступают в соответствующее взаимодействие
с пластиковым материалом. Активные поверхности могут быть
,
изготовлены из таких пластмассовых материалов, то есть поверхностей, на которых происходит соответствующее взаимодействие
и
, последующая реакция связанного вещества с сореагентом.
Эта поверхность
может иметь любую форму и размер. Предпочтительно это мембрана, пористая
или твердая микрочастица
, магнитная микрочастица, формованный материал или покрытие
, изготовленное
из натурального или синтетического вещества. Возможны также комбинации. В примере
микрочастицы могут быть вплетены в волокнистый материал или связаны с ним.
Это приводит к структуре сети / каркаса, которая предотвращает провисание или сжатие

микрочастиц, например.грамм. в хроматографических колонках. Эта активная поверхность может быть
включена в различных формах в системы, такие как системы капиллярных трубок, фильтры
для физиологических жидкостей
, аппараты для гемодиализа, физиологические замещающие жидкости
, системы доставки ферментов
, артропластики или сосудистые протезы или искусственные органы
.
Например, пористые микрочастицы могут применяться в качестве активной поверхности на обычных трубках и фильтрующих системах
CA 02287469 1999-10-14
4
.Можно создать любую желаемую универсально применимую систему
. Посредством простого грунтования на соответствующие поверхности
часто можно легко нанести вещества, которые
сложно соединить с
ковалентной связью. Это особенно выгодно, если необходимо стерилизовать устройства или связанное с ними оборудование

. Часто бывает трудно стерилизовать ковалентно связанные вещества

, не повредив их. В настоящем изобретении пластиковая поверхность и, в позиции
,
, в то же время, вещество, связанное с линкером, могут быть стерилизованы, и затем оба стерильных компонента

снова могут быть легко приведены во взаимодействие в стерильных условиях
.
Вместе с веществом, связанным с линкером, по меньшей мере, с одним структурным элементом

, способным устанавливать водородную связь, образуется интерактивная система. Интерактивная система
может присутствовать отдельно, то есть в разных фазах, или как
как реактивный блок
. Кроме того, активную поверхность также можно формовать с образованием полых волокон
, пряжи, прессованных листов, фильтрующих матов, нетканых материалов и т.п. Если
активная поверхность
присутствует в форме микрочастиц, они могут иметь любую желаемую форму
,
e.грамм. сферические, ромбовидные, гантелевидные, ромбовидные и т.д. Однако они
предпочтительно являются сферическими с диаметром от 0,5 до 500 мкм, предпочтительно от 1 до 300,
мкм, более предпочтительно
, от 1 до 250 мкм. Предпочтительно микрочастицы являются пористыми и
, таким образом,
имеет большую поверхность.
Согласно настоящему изобретению пластмассовый материал содержит, по меньшей мере,
конструктивный элемент
(A)
R
C = 0 (A).
x
R
Этот структурный элемент является, например, частью полимера общей формулы
(I)
CA 02287469 1999-10-14
R
C = 0 (I) ‘
x
R
n
, где R представляет собой алкильную или арильную группу или атом водорода, а n составляет от 10 до
10000.Группа X является необязательной и представляет собой 0, N или CHZ.
Алкильная группа может быть любой линейной или разветвленной, необязательно замещенной,
алкильной
группой. Прямая или разветвленная, необязательно замещенная C1-8-алкильная группа,
, такая как
, например, метильная, этильная, н-пропильная, изопропиловая, н-бутильная, изобутильная, втор-бутильная или
трет-бутильная группа.
является предпочтительным. Примеры необязательных заместителей включают один или несколько атомов галогена
,
, например атомы фтора, хлора, брома или йода, или гидроксигруппы, алкильные
группы
, такие как C1-6алкильные группы или алкоксигруппы, такие как e.грамм. Cl_6 алкоксигруппы,
например, C1.3
алкокси, такой как метокси или этокси группы, или тиоловые группы, такие как, например,
Cj. ‘.
алкилтиольных групп, например С1-3алкилтиольные группы, такие как метилтио или
этилтио группы.
Арильная группа может быть моноциклической или бициклической, необязательно замещенной арильной группой

, которая необязательно может содержать один или несколько гетероатомов. Их примерами являются
фенильные, 1- или 2-нафтильные, инденильные или изоинденильные группы. Необязательно, арильные группы
также могут быть замещены.Примерами арильных групп, содержащих гетероатом, являются гетероарильная группа
C1,9
, например необязательно замещенную C3_9 гетероарильную группу
, содержащую, например,
один, два, три или более гетероатомов, выбранных из атомов кислорода, серы или
атомов азота. Моноциклические гетероарильные группы включают, например, пиролил,
фурил,
тиенил, имидазолил, N-метилимидазолил, N-этилимидазолил, оксазолил,
дисоксазолил,
тиазолил, изотиазолил, пиразолил, 1,2,33-изотиазолил, пиразолил, 1,2,33-изотиазолил,
-бензофурил, 9024-изофурил, 9024-изофурил-24, группы бензотиенила, изобензотиенила, индолила, изоиндолила, бензимидазолила,
бензотиазолила,
хиназолинила, нафтилпиридинила, хинолинила, изохинолинила и тетразолила
.
Тактичность полученного таким образом полимера может быть любой, например
изотактической,
гетеротактической или синдиотактической.
Линкер содержит по меньшей мере один структурный элемент (B), способный
устанавливать водородную связь
. Этим структурным элементом может быть любой полярный атом водорода, так как он
– это
CA 02287469 1999-10-14
6
, например, присутствует. в связях OH, SH, NH или PH. Линкер может иметь любую желаемую длину цепи
. Предпочтительно линкер представляет собой (поли) алкиленгликоль, более предпочтительно
полиэтиленгликоль
.Кроме того, предпочтительны (поли) алкиленимин, (поли) алкиленамин, сульфид (поли) алкилен

или полиоксазилин. Линкер также может содержать несколько
из
структурных элементов (B).
Связывание веществ с линкером происходит в соответствии с известными процессами
. Для этой цели могут использоваться реакционноспособные производные, такие как, например, сукцинимидил
сукцинат, сукцинимидилпропионат, нитрофенилкарбонат, трезилат, эпоксиды
, альдегиды
, изоцианаты, малеимиды и т.п.В этом соединении
ссылка
сделана на каталог компании Shearwater Polymers, Inc.,
2307
Spring Branch Rd., Huntsville, AL 35801 (США).
Пластиковый материал предпочтительно представляет собой полиметакрилат, предпочтительно пластик
полиалкил (мет) акрилата (ПАМА) или сополимер полиалкил (мет) акрилата.
Особенно предпочтительным является пластиковый полиметил (мет) акрилат (ПММА),
полиэтил (мет) акрилат (РЕМА), полипропил (мет) акрилат,
полибутил (мет) акрилат
(PBMA), полипентил (мет) акрилат, поливинил (мет) акрилат, поливинилацетат ,
полициклогексил (мет) акрилат
или полифенил (мет) акрилат.
Также предпочтительными являются смеси в любом соотношении вышеупомянутых полиалкил (мет) акрилатов
и одного или нескольких дополнительных полимерных компонентов, например полистирола, полиакрилонитрила, поликарбоната или полисульфона
. Примеры
из
предпочтительных смесей включают полиметилметакрилат + полистирол, полиметил-
-метакрилат + полиакрилонитрил + метакрилат, полиметилметакрилат + поли-
-акрилонитрил + металлилсульфонат, полиметил-3-акрилонитрил +
-полиметилполиметилполиметил-винил +
-полиметилполиметил-
-полиметилполиметил-
-полиметилполиметил-
-полиметилполиметил-
-полиметилметил-
-полиметилметил-
-полиметилметил-
-полиметилполиметил-
-полиметилметил-90-243-поли-метакрилат, поли-Предпочтительно содержание полиметилметакрилата в смешанных полимерах
составляет
, по меньшей мере, 20%, более предпочтительно, полиметилметакрилат составляет 40% или 60% от
пластичного материала
. Кроме того, смешанные полимеры могут быть получены из известных
типичных полимерных компонентов
.
Эти смешанные полимеры могут быть получены способами, известными в области техники
. В полимер могут быть включены другие компоненты, например
неорганические соединения, такие как e.грамм. магнитные или парамагнитные соединения железа или железо
, или поверхностно-активные вещества, такие как, например, NO-расщепляющие соединения, такие как
, например, дигидрат нитронитропруссата натрия. Кроме того, легирование
атомов металла
CA 02287469 1999-10-14
7
, например, возможен никель, цинк, гадолиний и др. Таким образом, система
может быть адаптирована к конкретным аналитическим, терапевтическим или диагностическим требованиям.
Если интерактивная система используется в терапевтических или диагностических целях, необходимо
убедиться, что пластиковый материал является физиологически приемлемым, т.е.е. что
он не
отрицательно взаимодействует с физиологическими жидкостями. Если интерактивная система
используется в
в области пищевых продуктов, косметики или потребительских товаров, также должна быть обеспечена совместимость с

. Кроме того, интерактивная система также может быть встроена в
подходящих носителей
, например микросомы, липосомы, наночастицы и т. д., чтобы легко вводить их
еще
в организм.
Любые желаемые вещества могут быть связаны с линкером.Связанные вещества
могут быть
одинаковыми или разными. Также возможно связать несколько разных веществ
с
разными линкерами. Предпочтительно, чтобы с линкером были связаны фармакологически или физиологически активные
вещества
. Его примеры включают белки, нуклеиновые кислоты,
клеточные сигнальные вещества
, партнеры пары биологического или физиологического сродства
, такие как, например,
ДНК / ДНК-связывающий белок, ДНК / комплементарная ДНК,
РНК / комплементарная РНК, антиген / антитело, стрептавидин. / биотин, стреп-
ТАГ / искусственный пептид
, лектин / углевод или маркеры биологического вещества / биологическое вещество
.Более предпочтительно белок представляет собой фермент, например липаза, эстераза
, трансфераза
, антиген, антитело, опухолевый маркер, поверхностный антиген, лиганд
, рецептор
, поверхностно-активный клеточный фрагмент бактерий или вирусов или иммунное вещество-мессенджер
, например, например цитокины, интерейкины, факторы роста,
факторы, стимулирующие колонию,
, факторы некроза опухоли, белки, индуцирующие апоптоз, или
их специфические антитела или
терапевтические агенты.Маркер представляет собой, например, флуоресцентное
или хемилюменесцентное вещество
, EST (метку экспрессионной последовательности) или фермент
. Фармакологически активное вещество представляет собой, например, антикоагулянт
, метаболически активный фермент
или синтетическое лекарство, такое как, например, антибиотик
, противоопухолевый агент
или ингибитор фермента. Кроме того, могут быть связаны
вещества
, которые реагируют с неорганическими ионами, такими как, например, никель, цинк, гадолиний, лантан
или золото.Их примерами являются соответствующие комплексообразователи.
Вещества, связанные с линкером, кроме того, имеют дополнительное преимущество, заключающееся в том, что
они
могут быть удалены из организма.
Такая интерактивная система предлагает множество возможностей применения. Он
особенно подходит для представления веществ, связанных с линкером, в жидкости
,
, где целевое вещество связано, расщепляется или иным образом модифицировано, или для удаления
веществ, связанных с линкером, из жидкости.Предпочтительной областью
заявки
CA 02287469 1999-10-14
8
является мониторинг диагностики или терапии метаболических
заболеваний,
дефектов свертывания крови, вирусных, бактериальных, микотических или паразитарных инфекций или
злокачественных
заболеваний. Готовые к использованию комплекты, а также устройства в подходящих корпусах и с

необходимое оборудование для работы устройства могут быть изготовлены из таких интерактивных систем
для конкретных приложений.
Хотя молекулярный принцип взаимодействия между структурным элементом

(A) и линкером еще не исследован, предлагается следующий гипотетический механизм связывания

, основанный на взаимодействии между полиалкиленгликолем
и
полиалкил (мет ) акрилат, который, однако, не должен каким-либо образом ограничивать настоящее изобретение
в
.Карбонильный кислород на боковых цепях поли (мет) акрилата имеет сильный отрицательный заряд

из-за распределения заряда в структуре углеводородной цепи
.
Следовательно, этот кислород может устанавливать водородные связи или электронные взаимодействия
с
полиалкиленгликолевой цепью. Во взаимодействиях может также участвовать кислород
и полиалкиленгликоль
, который имеет небольшой положительный электронный заряд из-за конфигурации -C-
O-C
. Взаимодействие между этими двумя различными заряженными видами кислорода

в поли (мет) акрилате и полиалкиленгликоле очень вероятно, так что цепь
PEG
связана с поверхностью PMMA на определенной длине из нескольких звеньев цепи
C-C-O-C-C-O
.
В этой связи сделана ссылка на прилагаемый ИК-спектр на рис. 1.
На этом рисунке
показан ИК-спектр полиметилметакрилата, полиэтиленгликоля
(5000)
и взаимодействующих частиц ПММА-ПЭГ.
На рисунке показано, что взвешенное сложение спектров
PMMA и PEG не позволяет
идентифицировать отдельные спектры. Что особенно примечательно для
, так это
снижение интенсивности симметричных растягивающих колебаний Ch3 и Ch4
ниже
2900 см -1 по сравнению со свободным ПММА.Это указывает на то, что адсорбция PEG
и PMMA привела к определенной новой конформации. Наиболее вероятные взаимодействия
,
PMMA и взаимодействие PEG следующие:
CA 02287469 1999-10-14
9
1. сложноэфирная группа (PMMA) .. HOH..ether (PEG)
2. сложноэфирная группа (PMMA) .. HC (метиленовая группа, PEG)
3. карбоксильная группа (PMMA) COH..эфирная группа (PEG) (несколько групп)
4. концевая группа (PEG) COH..эфирная группа (PMMA).
Все присвоения соответствуют валентным колебаниям ОН, которые происходят в
комплексах
ПЭГ-ПММА.
Обнаруженный принцип неожиданного связывания вещества, соединенного с линкером

, по меньшей мере, с одним структурным элементом, способным устанавливать водородную связь поверхностей
–
со структурным элементом (A), позволяет использовать
в различных практических применениях. С
, с одной стороны, такие поверхности могут быть использованы в качестве функционального антидота для определенных
активных
веществ. С другой стороны, такие поверхности можно легко покрыть связанными активными веществами
и, таким образом, использовать, например, для очистки
крови in vivo или обработки плазмой
.Однако существенно, что этот принцип взаимодействия
может быть приготовлен отдельно
(стерилизация, стерильная фильтрация и т.п.) и только
может быть затем объединен с
. Эти поверхностные структуры могут быть частью экстракорпоральной терапевтической системы
. Кроме того, с помощью такой поверхности связанные активные вещества могут быть аккуратно удалены из организма
после их реакции в организме,
предпочтительно
в крови. Таким образом, например,
может быть антагонизирован опасно высокими уровнями в крови PEG-гирудина
, но также могут быть удалены
пегилированные антитела или активные пегилированные белковые вещества
, которые были активны в крови в течение ограниченного периода времени (
вещество в течение ограниченного времени).
Более того,
, например, капиллярные диализаторы PMMA, могут быть локально антикоагулированы с помощью
полиэтиленгликоль-связанного гирудина или других прямых антитромбинов (например,
argatroban)
(так что пациенты не нуждаются в системном антикоагулянте), но они также могут быть включены
для специфически взаимодействуют с токсичными, патогенными или провоцирующими заболевание фракциями
крови или метаболитами
путем покрытия капиллярных диализаторов антигенами PEG или антителами
PEG
или активными веществами PEG.
Кроме того, пластиковый материал, способный взаимодействовать, также может быть частью поверхностей
микротитровальных планшетов, кювет или контактных линз
. Кроме того, также возможно
использовать линкер
как таковой без связанного вещества для насыщения соответствующих свободных
связей
на пластическом материале, способном взаимодействовать.
Для большого количества лекарственных средств было бы предпочтительно, если бы они
действовали
только на кровообращение. Для этой цели молекулярная масса веществ
должна быть увеличена так, чтобы они не могли проникнуть в жидкость
CA 02287469 2008-03-26
пространства за пределами кровеносных сосудов.Однако вещества с увеличенной молекулярной массой
нельзя использовать в прикладной медицине, потому что тогда
больше не сможет вывести эти вещества из организма через почечный выход
.
«Почечный порог» лежит в диапазоне молекулярной массы ниже размера веществ
, что предотвращает распространение за пределами кровообращения. Таким образом,
исключительный эффект
веществ в кровообращении является важной проблемой
, которая
до сих пор не решена.Только возможность вылова связанных с ПЭГ веществ
(предшествующий уровень техники) в пределах определенного диапазона молекулярной массы с помощью
, например, Поверхностная структура полиметилметакрилата
позволяет использовать такие препараты
в прикладной медицине.
Активная поверхность предпочтительно содержит некоторую увеличенную структуру поверхности, например

пор, которые могут быть образованы в процессе прядения.
Для примера
к нагретому полимеру добавляются «порции посторонних веществ», т.е.грамм.
глицерин, который не смешивается с нагретыми жидкими полимерами. Капли или дефекты
в
в результате прядения полых волокон вымываются из структуры мембраны
с помощью подходящих растворителей, будь то вода или органические растворители,
. Таким образом, образуются
выгодные пористые мембраны. В случае микрочастиц или макрочастиц
, которые подходят для другого типа применения, эта пористость
, большая «внутренняя» поверхность
частиц, формируется аналогичным образом.Здесь также
, размерные структуры
образованы за счет включения посторонних структур, например,

глицерин; затем включенные вещества удаляются известными методами капельной полимеризации распылением
или
. Полимерная структура обычно
разрушается,
и изменяется во время этого процесса. Эта пористость, «внутренняя структура»
мембран или частиц
, имеет существенное значение для связывания связанных веществ
.
В соответствии с одним аспектом настоящего изобретения предоставляется интерактивная система

, содержащая:
(a) поверхность пластического материала, полученного из мономеров, содержащего по меньшей мере
один структурный элемент (A), полученный из карбоновой кислоты, где пластик
представляет собой пластик, полученный из поли (мет) акрилата, сложного поливинилэфира
или сополимера или их смеси с другими полимеризуемыми веществами
и
CA 02287469 2008-03-26
10a
( b) линкер, содержащий физиологически и / или фармакологически активное вещество

(c), связанное с ним, где линкер выбран из (поли) алкиленгликолей
,
(поли) алкилениминов, (поли) алкиленаминов, (поли) алкиленсульфидов и
полиоксазолинов, и содержит по крайней мере один структурный элемент (B), способный
устанавливать водородные связи,
, в котором существует устойчивое взаимодействие посредством водородных связей между en структурный элемент
(A) поверхности и структурный элемент (B) линкера
,
, который не может быть обращен значениями pH в диапазоне от 2 до 13 или температурами
от
до 60 ° C.
В соответствии с другим аспектом настоящего изобретения обеспечивается использование
интерактивной системы
, описанной здесь как система для представления веществ
, связанных
с линкером в жидкости, где целевое вещество связано, отщепляется или
иным образом.
, модифицированный связанным веществом.
Согласно еще одному аспекту настоящего изобретения предлагается
устройство
, содержащее интерактивную систему, описанную в данном документе, в подходящем корпусе.
В соответствии с еще одним аспектом настоящего изобретения предоставляется способ
ex-vivo
для обработки жидкости, отличающийся тем, что обрабатываемая жидкость
приводится в контакт
с интерактивной системой, описанной здесь, и что впоследствии
, обработанная таким образом жидкость
снова отделяется.
В соответствии с дополнительным аспектом настоящего изобретения предоставляется интерактивная система
, описанная здесь, для использования в качестве средства для лечения
по меньшей мере
одного из метаболических заболеваний, дефектов свертывания крови, вирусных инфекций,
бактериальных инфекций,
, грибковые инфекции, паразитарные инфекции и злокачественные заболевания.
Согласно еще одному аспекту настоящего изобретения предоставляется
интерактивная система
, описанная в данном документе, для приготовления средства для лечения
по меньшей мере
одного из метаболических заболеваний, дефектов свертывания крови, вирусных инфекций,
бактериальных инфекций,
, грибковые инфекции, паразитарные инфекции и злокачественные заболевания.
CA 02287469 2008-03-26
10b
Прилагаемые чертежи более подробно объясняют изобретение.
На рис. 1 показаны ИК-спектры полиметилметакрилата, полиэтиленгликоля
(5000)
и взаимодействующих частиц ПММА-ПЭГ.
На фиг. 2 показано связывание полиэтиленгликоль10оо-гирудина с
микрочастицами из
различных полиалкилметакрилатов.
На фиг. 3 показано связывание тромбина с диализатором из ПММА, загруженным
синтетическим
ПЭГ, око-ингибитором тромбина во время повторной циркуляции растворов тромбина.
CA 02287469 1999-10-14
11
На фиг. 4 показано связывание синтетического ингибитора тромбина PEG1okD с диализатором PMMA
во время 30-минутной циркуляции.
Настоящее изобретение теперь объясняется более подробно на основе активных веществ, связанных полиалкиленом
гликоль-
с поли (мет) акрилатными поверхностями.
1. Трубные системы
Имеющиеся в продаже диализаторы из полиметилметакрилата, например от
компании Toray, предпочтительно системы с высокой плотностью потока, например серии BK или диализаторы
с низким потоком
, например серии B2 открыты на двух концевых участках, а пучки капиллярных трубок

(n = 60) изолированы.Нарезав три пучка волокон на
длиной
12,7 см, их помещают в полиэтиленовую трубку диаметром 1,4
см. Силикон
(A-Sil 2002) вдавливается между пучками капиллярного диализатора
, выступающими
примерно на 0,5 см из двух открытых торцевых частей, так что литой материал
толщиной 8-10 мм образует полностью плотное уплотнение открытых концов. После полимеризации
и отверждения отливочного материала выступающие капиллярные трубки
срезаются на
заподлицо с помощью острого скальпеля, и два конца системы трубок каждый
соединяются
с полиэтиленовым катетерным материалом, который позволяет промывать капилляр
с помощью
средств насос.Системы полностью заполнены солевым раствором, таким как
, что нет пузырьков воздуха
. Таким образом, эти системы капиллярных трубок можно хранить
при
4 ° C и использовать в течение нескольких недель.
2) Фильтры для крови
В полиэтиленовой трубке диаметром 0,7 см и более прочными стенками пробивают
ломтика материала фильтра газов крови
из инфузионных систем, и ломтики
прикрепляют
к нижнему отверстию 3-сантиметровой трубки. части с помощью термопластичного клеящего материала
.Картридж заполняется пористыми частицами ПММА предпочтительного размера
от 80 до 120 мкм, а затем герметизируется сверху
фильтрующим материалом для крови
. Затем плотно прикрепляются эластичные силиконовые резиновые трубки
,
соединяются с материалом посредством термопластической адгезии и соединяются с опорными трубками
. Используя ту же установку, можно сконструировать микрофильтры для крови
, состоящие из полиэтиленовых трубок диаметром 0,2 мм и длиной 2 см. Пространство с
по
, заполненное микрочастицами, затем уменьшается примерно до одной сотой.
Что касается размера и поверхности
, то эти системы трубок также подходят для внутрисосудистых применений
.
CA 02287469 1999-10-14
12
Изготовленные микрокапиллярные или микроколоночные модули

перед применением могут быть стерилизованы с помощью ЭТО или γ-лучей. Паровая стерилизация
также возможна для
этого материала. Активные вещества, связанные с полиалкиленгликолем, наносятся только
на поверхность
поли (мет) акрилатной структуры незадолго до использования системы
.
Это делается следующим образом: модули носителя поли (мет) акрилата ополаскивают
стерильным физиологическим солевым раствором
в течение примерно 10 минут перед использованием в
, чтобы
удалить из систем токсичные продукты, образующиеся во время производства или стерилизации

процессов (стандартная технология во всех системах наружной терапии, таких как гемодиализаторы или оксигенаторы
в медицине). После этого процесса очистки необходимо нанести
вещества, например, Вещества, связанные с ПЭГ, наносятся на поверхность
модулей в режиме рециркуляции путем заливки систем в течение 5–
10
минут раствором вещества ПЭГ.Благодаря высокой связывающей способности,

можно наносить несколько различных веществ, связанных с ПЭГ, на структуру поли (мет) акрилата
, либо одно за другим, либо их смесь.
В экспериментах
можно было однозначно подтвердить, что не существует конкуренции
среди
веществ из-за специфических химических структур относительно поверхности
поли (мет) акрилата
. После завершения процесса заливки фильтры
снова промывают
раствором соли в течение 1-2 минут для удаления остатков веществ PEG
из системы, которые не были полностью связаны.Затем внешнюю терапевтическую систему
подключают с помощью традиционной одно- или двухигольной
–
вено- или артериовенозно. Применение вено-венозного пассивного средства
имеет то преимущество, что кровообращение в системе
можно контролировать с помощью миниатюрных насосов для крови, которые вводятся в экстракорпоральное кровообращение
. Эффективность специфического субстрата «отлов»
составляет
, определяемая путем исследования исчезновения целевых патогенов.
Соответствующие методы обнаружения существуют почти для всех используемых активных веществ
.
Наборы внешних терапевтических систем предлагают выбор различных размеров
фильтров крови
, чтобы их можно было настроить на необходимое количество заправленного вещества
. Для этой цели существует таблица преобразования, известная из клинических испытаний таких систем до
. В соответствии с своего рода «концепцией модульной сборки
»,
врач может выбирать из резервуара с различными пегилированными активными
веществами
и различными фильтрами крови и составлять индивидуальные терапевтические пакеты
, подходящие
для его пациента с учетом терапевтических агентов и размер системы.
Такие наборы
необязательно содержат подходящие реагенты, буферные растворы, реакционные сосуды
и подобные
. Набор также может находиться в подходящей упаковке.
CA 02287469 1999-10-14
13
Аналогично, такие прикладные наборы могут быть собраны как системы биохимической очистки
. Размер модуля адаптирован к соответствующему препаративному приложению

. Для решения биохимических препаративных задач и для тестирования in vitro,
может использоваться не только
колоночная система, но и периодическая система.Соответствующие микро- или макрочастицы
тщательно перемешивают в объеме партии и после заливки

полиалкилированными веществами и центрифугирования супернатанта загруженные
частицы
снова дважды промывают солевым раствором, а затем соответствующим раствором препарата

промывают. добавлен. Вылавливая «подходящие» реагенты, можно разделить антигены
и
, антитела или химически взаимодействующие вещества. Это позволяет, например,

– препаративная аффинная очистка с эффективностью почти 100%.
Примерный список возможных приложений вышеупомянутых систем –
, приведенный ниже
.
A) Удаление веществ из крови:
1. Для использования специфических реакций антиген-антитело настоящие моноклональные или поликлональные антитела
связываются с полиэтиленгликолем, и эти антитела PEG
затем наносятся на поверхность PMMA. В частности, распознавание
эпитопов
вещества, подлежащего удалению, насколько это возможно, чрезвычайно важно
для быстрого и прочного связывания
с подготовленной поверхностью.Согласно способу
, описанному выше, антитела к ПЭГ примируются к фильтру крови выбранного размера

, и путем добавления пегилированного антитромбина, например Гирудин ПЭГ, местная антикоагуляция
систем нацелена. Преобладающим преимуществом местного антикоагулянтного эффекта

с помощью пегилированных антитромбинов является то, что пациенту
, подлежащему лечению
, не требуется системная антикоагуляция во время лечения
с помощью
внешних терапевтических систем.
2. Для лечения ингибиторной гемофилии, серьезного аутоиммунного заболевания,
человеческий фактор VIII (антигемофильный глобулин) связывают с полиэтиленгликолем
с использованием известных способов
, а затем наносят на полиалкилакрилатный субстрат подходящего размера
. Модули ингибитора гемофилии, полученные таким образом, используются с
регулярными интервалами
в качестве внешней терапевтической системы для пораженных пациентов. Интервалы
этого лечения
зависят от измеримого «потребления» фактора VIII у пациента
.Уровень фактора VIII
не должен опускаться ниже 25-30% от нормального значения. Между
и
интервалами лечения пациенты не подвергаются опасности кровотечения или геморрагического диатеза
, так что эту форму терапии можно назвать причинной.
CA 02287469 1999-10-14
14
3. Возможности противомикробного лечения: Методы молекулярной медицины
позволяют получать моноклональные или поликлональные антитела против почти
всех вирусов
, имеющих белковые оболочки, против бактерий, но также против
грибов.
Эти антитела, направленные против микроб-специфичных белков, могут быть праймированы на
субстраты вещества
, изготовленные из полиалкилакрилата, после того, как они были соединены
с полиэтиленгликолем подходящего размера (предпочтительно 5-10 кДа). Путем лечения
пациентов такими внешними терапевтическими системами можно исключить
патогенных или вызывающих заболевание и поддерживающих микробы из кровотока.
В частности, этот метод отлично подходит для лечения, например,
малярии.Циклическое использование
специфических субстратов, несущих активные вещества, позволяет с
по
прервать болезнь и добиться быстрого выздоровления пациента.
4. Приготовление систем местного антикоагулянтного гемодиализа и гемофильтрации
: при использовании аппаратов для гемодиализа с полиметилметакрилатом или модулей гемофильтрации
(продукция компании Toray, Япония) модули
обрабатывают
раствором полиэтиленгликольгирудина после промывки раствора гирудина полиэтиленгликоля. систем и
до их использования
.За счет рециркуляции ПЭГ-гирудина достигается антикоагулянтный эффект на поверхности мембраны
. В зависимости от продолжительности лечения в системе имеется
, которые необходимо обработать различными количествами ПЭГ-гирудина (5-50 мг).
5. Приготовление местных антикоагулянтных систем трубок для крови: с использованием
обычных систем трубок для крови (PS, PE, PP и т.п.), при производстве

из которых не менее 20%, более предпочтительно 50% полиалкилметакрилатов,
, предпочтительно полибутилметакрилат
, возможно праймирование с помощью ПЭГ-гирудина или синтетических ингибиторов тромбина
, связанных с ПЭГ.Таким образом, локальная антикоагуляция
, распространяющаяся на
все системы трубок для крови, как артериального, так и венозного типа, также
возможна.
B) Применение ферментов, которые влияют на определенные компоненты крови или
белков:
Это относится, например, к следующим веществам: 1. ферменты, которые
участвуют
прямо или косвенно в механизмах контроля организма, например которые активируют
или ингибируют специфические факторы свертывания крови
. Путем PEG-сцепления e.грамм. protac, змеиный яд
, фермент
, который активирует протеин C высокоспецифическим образом, совершенно новая долгосрочная профилактика тромбоза без геморрагического диатеза или других побочных эффектов
в
, смысл терапевтических веществ, используемых до сих пор, очевиден. Фермент
,
protac, активирует протеин C в протеин CA, который препятствует свертыванию крови
посредством
ингибирования активированных факторов V и VIII. Оба фактора активируются
тромбином
CA 02287469 1999-10-14
и имеют положительный эффект обратной связи на активацию самого тромбина, так что
приводит к циклу потенцирования
, который может быть немедленно прерван путем ингибирования
этих
двух факторов ускорения. (клинические эквиваленты –
дефицита протеина C, сопровождающийся
серьезными тромбоэмболическими заболеваниями).Но также уровень сахара в крови, регулирующий
ферментов, таких как глюкозо-дегидрогеназа и другие ферменты, может регулировать
патологические или патофизиологические изменения в смысле метаболического заболевания
в
кровотоке (гиперхолестеринемия, гиперлипидемия, сахарный диабет типа
II или
определенные болезни накопления). ). Возможная форма применения
– воздействие на эндокринологические нарушения обмена веществ.
C) Применение веществ, важных для жизнедеятельности
1) Искусственная кровь
Также существует возможность получения искусственных эритроцитов.Гемоглобин PEG
, например
, экстрагированный из бычьей крови, в настоящее время проходит клинические испытания как
«искусственный компонент крови
» («оксиглобин»). Гемоглобины ПЭГ должны быть нанесены на подходящие частицы парамагнитного полиметилметакрилата
или полиалкилметакрилата, которые были отсортированы по размеру, а затем использованы соответствующим образом. В идеале частицы
должны иметь такой же удельный вес, как кровь. Таким образом, используются сополимеры полистирола полиалкилметакрилата
в соотношении компонентов 50/50, более предпочтительно в соотношении компонентов
30/70.Для этого, например, 1 г монодисперсных пористых частиц полиметилметакрилата
(или полистирола ПММА) (d = 6 мкм) загрунтовали

250 мг ПЭГ-связанного гемоглобина (например, экспериментальный препарат от
компании Enzon). Показатель веса относится к доле гемоглобина.
Частицы полиметилметакрилата
(полистирол ПММА) были специально приготовлены
путем введения Fe203 в тонкодисперсной форме в полимеризационную массу

во время полимеризации.Эти частицы, содержащие Fe2O3, являются парамагнитными, и
можно удалить из обращения
вышеупомянутым способом.
Такие магнитоактивные частицы подходят для прямого циркуляционного использования
в крови
различными способами. Помимо вышеописанного гемоглобина ПЭГ, могут быть связаны донаторы NO
(специфическое ингибирование активации тромбоцитов), но также партнеры
специфического взаимодействия
для клеток, предпочтительно опухолевые клетки. При лечении
опухолей
«фиксация» частиц, несущих противоопухолевый активный ингредиент
, может быть осуществлена
посредством магнитных полей в области опухоли.
CA 02287469 1999-10-14
16
Частицы гемоглобина обладают высокой функцией связывания кислорода и могут принимать на себя
функцию транспорта кислорода
во всем кровообращении, аналогичную функции
эритроцитов
. Таким образом, эти микрочастицы гемоглобина подходят в качестве универсальной системы-переносчика кислорода
в медицине катастроф.
Особенно важно, чтобы
транспорт кислорода как наиболее важная нарушенная жизненно важная функция после массивной кровопотери был восстановлен очень быстро
.По окончании
лечения, продолжающегося несколько дней, когда рассматриваемый организм повторно синтезировал
соответствующие тельца, частицы могут быть количественно удалены

из кровотока с помощью магнитных удерживающих систем. Эти магнитные удерживающие системы

представляют собой, например, микрокапиллярные ETS, которые окружены постоянным магнитным кольцом
. Магнитные частицы удаляются из циркуляции с помощью крепления
к полым волокнам ETS.
2) Факторы, стимулирующие рост клеток
Описанный основной принцип присоединения активных ингредиентов к конкретным полимерным материалам

также подходит для покрытия других пластиковых поверхностей, сепараторов клеток

или материалов для культивирования клеток, в которых усиливается импульс роста. достиг
за счет наклеивания
тонких слоев очень мелких микрочастиц из ПММА, что позволяет применять
факторов роста клеток (например, пегилированный BMP-2 или BMP-4).
Его можно также использовать для покрытия сосудистых протезов факторами роста
таким образом
, что эндотелиальные клетки очень быстро и интенсивно оседают на стороне крови
сосудистых протезов
, инициируя натурализацию («эндотелизацию»)
сосудистый протез
нет. Путем специального легирования тканевой стороны протезов
для цели
врастания клеток соединительной ткани и клеток гладкой мускулатуры, для примера

путем применения основного фактора роста фибробластов (bFGF), даже натурализации
всего протеза
материал возможен.Покрытие артропластического материала пегилированным
rBMP-2 или rBMP-4, двумя рекомбинантно полученными факторами роста остеобластов или смесью
пористых микрочастиц из PAMA с rBMP-2 или rBMP-4 в костных цементах
значительно снижает фазу врастания . Таким образом, достигаются значительно улучшенные результаты фиксации
.
D) Методы разделения микрочастиц вирусов и бактерий и продуктов их метаболизма
в донорской крови и плазме.
Обработка плазмы специфическими антителами PMMA-PEG против белков оболочки
или вирусной ДНК позволяет очищать образцы плазмы человека очень щадящим способом.Количественное удаление возможно, особенно в вирусах, имеющих специфические белки (белок вируса гепатита B
E1 и
E2, белки вируса СПИДа). Это может быть
выполнено
как в периодическом, так и в колонном процессах.
E) Использование частиц PMMA-PEG для удаления нежелательных веществ из пищевых продуктов,
например, для деалкоголизации алкогольных напитков, таких как пиво, вино и т. Д.,
представление
специальных липаз или ферментов, которые расщепляют избыточные пищевые жиры на не-
абсорбирующие производные или связывающие подходящие соединения с их поверхностью, удаление
холестерина, избирательное удаление определенных белковых компонентов при определенных
метаболических нарушениях (например, глютен при глютеновой болезни), удаление некоторых
углеводов при диабете и т. д.)
На этой основе пищевые продукты и диетические продукты могут быть приготовлены для конкретных требований диеты

путем добавления микрочастиц с подходящим покрытием в соответствии с изобретением
в продукт
или путем соответствующей предварительной обработки продукта. Также можно
взять подходящие микрочастицы
до, во время и после употребления соответствующего корма
. Для этой цели микрочастицы
могут быть приготовлены в виде таблеток или капсул, устойчивых к желудочному и кишечному соку
,
.
F) Установка микрофильтров крови в кровоток с помощью так называемого метода «фильтрования» вен, который в настоящее время используется в инвазивной радиологии
при
глубоких тромбозах вен нижних конечностей и тазовых вен. Так называемый кава-фильтр в виде
проволочной клетки
вытягивается и устанавливается в полую вену, чтобы предотвратить отталкивание значительных
тромботических масс
в поток легких. Этот метод
кава-фильтра
может также использоваться в качестве фиксирующего или несущего материала для микрофильтров крови.Используются
те же материалы покрытия
, которые описаны выше. Однако такая система должна иметь
форму плоского фильтра для крови с максимально возможной
межфазной площадью
.
G) Пероральное применение определенных носителей активных ингредиентов:
Есть две различные возможности:
1) Замещение нарушенных пищеварительных функций:
Подобно системам доставки пищеварительных ферментов, все еще находящихся в стадии разработки
стадии,
определенных частиц в соответствии с изобретением, содержащее постоянное покрытие пищеварительным ферментом
, может быть использовано.Эти частицы могут выполнять основные функции пищеварения во время прохождения через желудочно-кишечный канал. Постоянная инстилляция
кишечных трубок, способствующих пищеварению, возможна, если в подходящей фибриллярной
или аналогичной структуре
ферменты тонкого кишечника используются на определенной полиалкилакрилатной матрице
. Постоянный постоянный желудочный зонд в форме структурированной пластиковой клетки
снабжен, например, нитевидными структурами ПММА
и
, в которых ферменты постоянно связаны посредством соединения ПММА-ПЭГ на расстоянии
30-50 см.Они проходят в тонкий кишечник вместе с пищевым пюре

и на одном конце все еще имеют прочный контакт с фиксатором желудка. Соответствующие
ферменты могут имитировать пищеварительную функцию в желудочно-кишечном канале в течение
довольно длительного периода времени. Они начинают действовать, когда соответствующие пищевые компоненты проходят через фибриллярные структуры
.
2) Корпускулярные или определенные носители ферментов, метаболизирующие особые порции или
конкретных пищевых компонентов с целью превращения в химическое производное
, которое больше не резорбирует.Для этого подходят растительные ферменты, которые способны
модифицировать холестерин
и другие пищевые соединения, богатые жирами и энергией.
Связывание
холестерина и резорбирующих жиры желчных кислот с подходящими связывающими партнерами на поверхности
этих желудочно-кишечных частиц
также является возможным методом. Для конкретного применения
,
также частицы согласно изобретению, имеющие высокую концентрацию
алкоголя,
дегидрогеназы, подходят для разложения нежелательных количеств алкоголя уже
в
желудочно-кишечном канале.
Конкретным применением является, например, использование пегилированных моноклональных антител

против фактора некроза опухоли (TNF). Моноклональное антитело против фактора некроза опухоли

(MAK-195) представляет собой тестируемый препарат от компании Knoll и в настоящее время проходит оценку
в клинических исследованиях с пациентами с шоком на предмет его
клинической
эффективности. Это моноклональное антитело может быть связано с ПЭГ и без каких-либо проблем нанесено на подходящую структуру ПММА
.Таким образом, моноклональное антитело
связано с твердой фазой и высоко специфично связывает эпитоп фактора некроза опухоли

. Таким образом, высокие уровни TNF, которые патофизиологически вредны для
, могут быть уменьшены дальнейшее течение
шоковой реакции. Точно так же моноклональные или поликлональные
антитела против липополисахарид-связывающего белка (LBP) могут быть связаны с
. Этот белок служит транспортом бактериальных продуктов метаболизма
,
иипополисахаридов (эндотоксины, липид А) в крови и их презентации
клеткам
.Если уровень липосахаридсвязывающего белка снижается, то
может быть полностью заблокировано
при абсорбции
эндотоксинов из желудочно-кишечного канала, а также из источников воспаления
.
CA 02287469 1999-10-14
19
Кроме того, можно, например, также пегилировать специфические фракции человеческого y-
глобулина
и нанести их на мембрану PMMA, чтобы непосредственно ингибировать
бактерии или вирусы и вывести их из организма с помощью временной экстракорпоральной терапевтической системы
.
Кроме того, также можно использовать ингибиторы активированных факторов свертывания крови, например
, рекомбинантный TFPI
, естественный ингибитор комплекса фактор Vil-тканевый фактор,
, наиболее важный механизм запуска свертывания крови
. В
подходящей пегилированной форме
они могут быть связаны с мембраной, чтобы полностью
ингибировать свертывание крови
в первых активирующих механизмах, не влияя на нормальный
коагуляционный потенциал организма
.В принципе, любой патологический
механизм
организма, использующий кровоток для передачи сигнала, может быть модифицирован
на
такой экстракорпоральной терапевтической системой.
Связываемость таких капиллярных диализаторов с поверхностным легированием на удивление высока; На 1 м2 поверхности можно приклеивать до 1
г пегилированных конструкций. Попытки промывки
, несомненно, продемонстрировали, что физико-химически объяснимая связь
между пегилированным активным ингредиентом и PAMA-мембраной очень стабильна
, а отсоединение от мембраны как при промывании солью, так и при промывании
плазмой
или цельной кровью невозможно. .
Из молекулярной иммунологии известен ряд специфических опухолевых антигенов на поверхности клеток
опухолевых клеток
, для которых подходящие антитела для исследования in vitro
– это
, доступные для диагностических целей. Однако их чужеродные белковые структуры

не позволяют применять их у пациентов. Согласно изобретению эти антитела
, связанные
с линкерами ПЭГ на поверхности мембраны ПММА, могут образовывать специфическое взаимодействие

с опухолевыми клетками крови и специфически удалять их из кровотока

подобно гемофильтрации.Таким образом, это первый случай, когда
предоставлена система
, в которой на основе настоящего поверхностного материала, который является биосовместимым и утвержденным
, определено взаимодействие в крови между клетками или частями клеток
организма
и твердой фазой. возможно связывание специфических антагонистов.
Интерактивные системы в соответствии с изобретением могут применяться во многих
других терапевтических приложениях
, в частности, для очистки плазмы in vivo. Например,
ультрафильтрационные мембраны
типа PMMA, на которые были нанесены специальные ферменты
, связанные с ПЭГ, могут быть использованы для детоксикации пациентов с почечным заболеванием
.Кроме того, применяя PEG-связанную уреазу к мембранам PMMA
, можно снизить повышенные уровни мочевины в крови или, применяя
PEG-
CA 02287469 1999-10-14
ферментов метаболизма креатинина, дальнейшее снижение , азот
, как правило,
удаляется с мочой.
Использование интерактивных систем согласно изобретению, предпочтительно мембран
PMMA
, в капиллярных диализаторах является предпочтительным. Единственным производителем капиллярных диализаторов PMMA
является компания Toray, Япония.Перед применением у
человек,
пациентов, модули капиллярного диализатора тщательно промываются как со стороны диализата
,
, так и со стороны крови, со стороны крови физиологическим раствором хлорида натрия
, со стороны диализата диализирующей жидкостью (солевой раствор). ) для того, чтобы
вымыть
токсичных продуктов и веществ, которые попали в контакт с системой
в процессе производства, из капиллярного диализатора. В конце
этого непрерывного процесса полоскания
, в котором промывочная жидкость сбрасывается с обеих сторон
, сторона диализата
закрывается пробкой при подготовке внешней терапевтической системы

на стороне крови, рециркуляция присоединяется с помощью пегилированное вещество
к
наносят растворенным в резервуаре для раствора объемом около 200 мл.Посредством
простого процесса рециклизации
, в котором на выходе из диализатора раствор
перекачивается
обратно в резервуар для раствора через перистальтический насос, мембрана
покрывается пегилированным веществом в течение 5-10 минут. Независимо от их порогового значения

(размерная фигура размера пор в мембране) мембраны принимают до
200 мг вещества, на которое наносится покрытие (= 1 г пегилированного активного вещества
)
на 1 м2 поверхности капилляров.Важно, что соответствующие сайты связывания
на мембране
PMMA полностью заняты пегилированным активным веществом. Если
наносят только небольшие количества этих активных веществ, необходимо провести дополнительную стадию ополаскивания
раствором соли ПЭГ в конце процесса ополаскивания
в
для насыщения всех участков связывания ПЭГ мембраны. Таким образом,
гарантирует, что дополнительное покрытие
белками плазмы крови больше не происходит на
сайтах связывания
, и, таким образом, не происходит взаимодействия между белками плазмы и представленными
активными веществами
(праймирование).
Далее изобретение будет описано более подробно на основе
из
следующих примеров.
Пример I
Использование гирудина, связанного с полиэтиленгликолем, в диализе
В своей рекомбинантной, идентичной природе форме гирудин является высокоспецифичным и
эффективным антитромботическим принципом
, который будет привлекать все большее внимание в отношении
CA 02287469 1999 -10-14
21
Достаточная терапия тромбоэмболических заболеваний и связанных с ними состояний
в
следующие несколько лет.
Эффективность этого нового терапевтически ценного вещества была
доказана
первыми клиническими применениями и обширными исследованиями III фазы.
Рекомбинантный гирудин, конечно, может приводить к интоксикациям либо по типу
, либо по терапевтической схеме
, либо путем передозировки, либо путем объективного устранения
трудностей
, которые возникают из-за внезапной или преходящей почечной недостаточности.
Для удаления гирудина из организма в настоящее время в
клинической медицине
существует два способа, т.е.е. применение антидота (см. немецкий патент
, спецификации P 42
03 965.7 и 196 25 642.9 и EP 0 625 908), а также быстрое удаление
гирудина
с помощью диализных мембран с высокой проницаемостью.
В клинической практике, в частности, высокомолекулярное производное гирудина

оказалось подходящим для практического применения. Это гирудин, у которого
молекулярная масса
увеличена двумя 5000-н-цепями полиэтиленгликоля.После применения
достигается увеличение количества вещества в организме до 4-5 раз, а
– значительно увеличенное время удержания гирудина в плазме.
Противодействие этому гирудину PEG в случае передозировки или токсичных уровней в крови
оказывается затруднительным. Хотя универсальный принцип антидота против гирудинов
и против синтетических ингибиторов тромбина
, как описано выше, также можно использовать для гирудина PEG
,
, но общей диализируемости гирудина PEG не существует.ПЭГ гирудин не проходит через системы гемофильтрации
, даже
, с чрезвычайно высоким порогом отсечки. Соответственно, доступный функциональный состав антидота
быстро
пока невозможен.
При сравнении гирудина и ПЭГ молекулярная масса увеличивалась в гирудине
, соответствующем in vitro, но также и циркуляции in vivo через капиллярные диализаторы
из ПММА
и гемофильтры из ПММА наблюдали совершенно иное поведение. В то время как
нативный гирудин
или рекомбинантный гирудин очень быстро проходит со стороны крови на сторону диализата
,
и затем исчезает из кровотока, гирудин PEG ведет себя совершенно по-другому,
.Было продемонстрировано, что в модели
с капиллярным диализатором с рециркуляцией,
после короткого периода времени больше нет гирудина PEG в свободной форме как
в крови
, так и на стороне диализата, хотя относительно высокие количества гирудина PEG
на
со стороны крови применялись либо в антикоагулированной бычьей крови, либо также в солевом растворе
белка
. Таким образом, было продемонстрировано, что в этой модели рециркуляции PEG
гирудин
CA 02287469 1999-10-14
22
из цельной крови, плазмы или рециркуляционного раствора альбумина прочно связывается
с высокими скоростями
на поверхности мембраны PMMA.Попытка добиться оттока или отмывания
ПЭГ гирудина от мембраны после удаления исследуемого циркуляционного раствора
с помощью солевых растворов не удалась; облигация
оказалась достаточно стабильной и крепкой
.
Из этих анализов ясно, что возможен принцип функционального антидота для гирудина PEG

. Таким образом, такие диализаторы можно использовать по-разному:
Например, диализатор из ПММА можно подключить к обычному диализатору и использовать
в качестве функционального принципа противоядия для гирудина ПЭГ в соответствующих клинических применениях
, или диализаторы из ПММА могут работать от простые насосные системы для гемофильтрации
, используемые в интенсивной медицине для непрерывной гемоперфузии
(см. пример
), со стороной диализата закрытой, так что относительно беспроблемный
гемодиализ
с низкой объемной нагрузкой может быть проведен у соответствующего пациента.
Время
, необходимое для гемодиализа, даже в случае высоких концентраций гирудина PEG
в крови, в этих случаях будет менее 2 часов, предпочтительно 30-45
минут.
Для экстракорпоральной терапии крови посредством эффективного диализа
продуктов метаболизма
, обычно удаляемых с мочой, разрабатываются мембранные материалы, имеющие максимально возможную биосовместимость
и
и имеющие постоянную фильтрующую способность в течение
длительного периода времени
. .Полиметилметакрилат (ПММА)
обеспечивает превосходный клиренс средних молекул и характеристики ультрафильтрации
, которыми
можно точно управлять с помощью трансмембранного давления.
Пример 2
Получение PEG-модифицированных козьих антител гирудина
1) Получение SC-PEG
Метод по T. Miron и M. Wilchek
(литература: Bioconjugate Chem. 1993, 4, 568-569)
Материалы
ацетон без воды
диэтиловый эфир вода = свободный
1,4-диоксан без воды
CA 02287469 1999-10-14
23
молекулярное сито 4A, гранулы 8-12 меш
фосфатный буфер 0.05 моль / л; pH 7,0
полиэтиленгликоль 6000 МВт 5000-7000; 1 ммоль
N, N’-дисукцинимидилкарбонат 5 ммоль
4- (диметиламино) пиридин 5 ммоль
Методика:
1 ммоль ПЭГ растворяют в 25 мл безводного диоксана (через молекулярное сито) в
горячей водяной бане
. После охлаждения до комнатной температуры добавляют дисукцинимидилкарбонат N, N’-
,
, растворенный в 10 мл ацетона. Затем при перемешивании медленно добавляют 10 мл ацетона,
вместе с
и 5 ммоль 4- (диметиламино) пиридина.При температуре
комнатной
смесь активируют в течение 6 часов (магнитная мешалка). Активированный
ПЭГ
непосредственно осаждается из этого раствора диэтиловым эфиром. Объемный белый осадок

оттягивают с помощью фритты G3. Полное удаление эфира
осуществляется в вакуумированном эксикаторе
. Хранение: в сухом виде при 4 ° C.
Эффективность: 85% (на основе PEG)
2) Связывание SC-PEG с белком
a) Получение PEG-модифицированного гирудина:
Материалы: боратный буфер, pH 9.5
фосфатный буфер, pH 7,0; 0,05 моль / л
гирудин; рекомбинантный
SC-PEG
Процедура:
150 мг ПЭГ и 27 мг гирудина растворяли вместе в 25-ми боратном буфере
и
, инкубировали при перемешивании в течение 3 часов при 4 ° С. Несвязанные ПЭГ и гирудин удаляли

с помощью ультрафильтрации (AMICON ; мембрана YM 10) с 6-10-кратным объемом
фосфатного буфера. Остаток лиофилизуют и хранят в эксикаторе при
± 4 ° С.
Индивидуальные этапы приготовления проверяют с помощью SDS-PAGE, тестов коагуляции
(ECT), определения PEG и экспериментов на животных.
б) Получение ПЭГ-модифицированного гирудина ZAK (козье антитело):
CA 02287469 1999-10-14
24
Материалы: фосфатный буфер pH 7,0; 0,05 моль / л
SC-PEG
Гирудиновые козьи антитела (Hi-ZAK)
Процедура:
500 мг PEG растворяют в 20 мл Hi-ZAK (присутствует в фосфатном буфере) и
инкубируют в течение 48 часов при 4 ° C при перемешивании. . Свободный ПЭГ и Hi-ZAK удаляют
ультрафильтрацией
(AMICON; мембрана YM 10) с 6-10-кратным объемом фосфатного буфера
.Препарат хранили в виде раствора при 4 ° С.
Эти козьи антитела к гирудину, модифицированные ПЭГ, можно наносить на мембрану
из ПММА, и, таким образом, при использовании в экстракорпоральной терапевтической системе можно снизить высокие уровни гирудина
в крови
.
Пример 3
«Удаление» PEG гирудина из крови
В следующем экспериментальном примере должна быть продемонстрирована эффективность удаления PEG
гирудина
из крови. Для этой цели 250 или 300 мл цельной
коровьей крови
подвергают антикоагуляции 36 пг / мл ПЭГ гирудина и вводят в системы рециркуляции диализа PMMA
, подготовленные соответствующим образом и доступные для приложения
.
Для этой модели рециркуляции используется следующая экспериментальная установка:
Устройство для гемодиализа типа Fresenius A2008C используется для предварительной промывки
крови
и сторон диализата диализаторов. Диализаторы из ПММА подготовлены для диализа

в соответствии со спецификациями производителя. В конце предварительной промывки
диализной мембраны из ПММА
вход и выход на стороне диализата
полностью закрыты
зажимами для шланга, так что диализный раствор не может быть изменен во время эксперимента
–
.Шланговый насос блока диализа подсоединен к накопительному контейнеру

и к артериовенозной стороне. Экстрагированная и обработанная антикоагулянтом ПЭГ гирудином кровь
крупного рогатого скота
заливается в силиконизированный стеклянный контейнер для хранения, и немедленно начинается рециркуляция
на стороне крови
. В течение коротких интервалов времени берутся образцы
из резервуара для крови
, и концентрация гирудина в системе рециркуляции составляет
, измеренная на основе времени свертывания экарина (см. Заявку на патент Германии
P
42 03 965.7). Как видно из рисунка 3, быстрое падение концентрации гирудина
CA 02287469 1999-10-14
в крови происходит в начале циркуляции мембраны
PMMA
, то есть в течение первых 40 минут.
На фиг. 3 показана поверхностная связь синтетического ингибитора тромбина с малым размером молекулы

, полученного с полиэтиленгликолем (10 кДа) в соответствии со спецификацией
W.
Stiiber et al. (Peptide Research 8 (2) 1995, страницы 78-85) как пегилированный
, ингибирующий
агент.Принцип эффективного ингибитора тромбина – это вещество Mtr-Asn-D-
Adf-Pip
, которое оказалось высокоспецифичным и эффективным агентом
, ингибирующим тромбин в предыдущих анализах
(Dickneite G. et al. Thrombosis Research 77, стр. 537-568).
На фиг. 4 показано связывание тромбина с диализатором ПММА, заряженным ингибитором ПЭГ- (10
кДа) -тромбина. Из этого рисунка очевидно, что тромбин связывается с
, связанным с
ингибитором тромбина во время рециркуляции, и, таким образом, быстро исчезает
из рециркуляционного раствора
.
Из описанных здесь
концентраций гирудина ПЭГ в крови и диализате, очевидно, что на обеих сторонах системы рециркуляции больше не присутствует
измеримого гирудина
ПЭГ.
Для сравнения показано поведение рекомбинантного гирудина при использовании диализаторов PMMA
. Используемая кровь представляла собой бычью кровь, которая была антикоагулирована
30-50 лаг / ми r-гирудином. Из фигуры
очевидно, что снижение концентрации гирудина на
также происходит на стороне крови, которая, однако,
быстро становится устойчивой.Обследование после двухчасового гемодиализа
показало высокие концентрации r-гирудина на стороне диализата
, аналогичные
на стороне крови, то есть имеется типичная общая концентрация r-гирудина
, равновесная
с обеих сторон. Адсорбционное связывание (потеря r-гирудина) настолько мала, что ею
можно пренебречь. Из представленных здесь анализов очевидно, что PEG гирудин
, обладающий высокой специфичностью
, связывается с капиллярными диализаторами PMMA. Прямое сравнение
с несвязанным r-гирудином
, несомненно, позволяет сделать вывод, что часть ПЭГ
гирудина
отвечает за связывание на поверхности PMMA.
CA 02287469 1999-10-14
26
Пример 4
Получение и использование связанного с полиэтиленгликолем (20000) моноклонального антитела

против фактора некроза опухоли (MAK 195)
100 мг MAK 195 растворяют в 50 мл 0,1-моль боратного буфера (pH 8) и
добавляют к 200 мг метоксиполиэтиленгликоля (20000) -4-нитрофенилкарбоната
и затем
инкубируют в течение 3 ч при 25 ° C. Реакцию связывания останавливают с помощью 500-
-кратный
молярный избыток ТРИС, диализуют против 20 ммоль ТРИС-HCl и наносят на колонку с сефарозой HP-Q-
(Pharmacia) с линейным градиентом NaCl (0-400 ммоль NaCl)
в
20 ммоль ТРИС -HCI (pH 8).Конъюгат PEG-MAK 195 элюируется примерно при 200-250
ммоль NaCi. Связывающую способность моноклонального антитела тестируют на основе
из
рекомбинантного человеческого α-TNF с помощью α-TNF-ELISA. Потеря эффективности моноклонального антитела
не наблюдается. Пегилированное моноклональное антитело
против TNF наносят на экспериментальный модуль капиллярного диализатора из ПММА
, имеющий поверхность
площадью 50 см2. Способность к связыванию для поверхности 50 см2 составляла 4 мг, исходя из содержания белка
в PEG-MAK 195.В плазме человека, в которую был добавлен TNF
(100 нг / мл), фактор некроза опухоли не мог быть идентифицирован в рециркуляционном растворе

всего лишь через 10 минут.
Была проведена еще одна серия экспериментов, в которых 50 мл крови человека
добавляли к PEG-MAK 195 в концентрации 1 мг на мл. Это количество
крови PEG-MAK добавляли в экспериментальный капиллярный диализатор из PMMA, имеющий поверхность

50 см2, путем рециркуляции и рециркулировали с помощью шлангового насоса.После 30
мин
перфузии в исследуемой крови
больше нельзя было идентифицировать MAK-антитело.
Идентификацию проводили посредством анализа ингибирования TNF на основе измерения
TNF-ELISA. Эти два эксперимента несомненно доказывают, что
пегилированное моноклональное антитело
, в данном случае TNF-антитело MAK 195,
(Knoll), может быть специфически нанесено на мембрану капиллярного диализатора PMMA
, где
способно количественно связывать человеческий TNFa.
Во втором эксперименте было продемонстрировано, что пегилированное моноклональное антитело

, присутствующее в крови, специфически удаляется из кровотока мембраной PMMA
. Этот эксперимент демонстрирует «ловлю» пегилированного активного ингредиента
, используемого в крови в течение ограниченного периода времени.
CA 02287469 1999-10-14
27
Пример 5
Использование PEG-связанного фермента
В качестве модельного фермента уреаза (EC 3.5.1.5., Доступная от Sigma, номер для заказа.U 1500)
– это
б / у. Приготовление препарата уреазы, связанной с ПЭГ: 100 мг уреазы (тип
III, удельная активность от 20000 до 30000 Ед / г) растворяют в 80 мл 0,1-моль боратного буфера

(pH 8) и добавляют к 250 мг метоксиполиэтилена. гликоля (25000) -4-
нитрофенилкарбоната и инкубируют в течение 24 ч при 5 ° C. Реакцию останавливают
с помощью
, в несколько раз более высокого молярного избытка ТРИС, диализованного против ТРИС-HCl (pH 8) колонка с HP-Q-сефарозой, имеющая линейный градиент NaCl (pH 8).Конъюгат с уреазой
ПЭГ элюируется при концентрации NaCl от 180 до 200 ммоль. Выход конъюгата ПЭГ-уреаза
составляет 30-40%. Активность фермента измеряют с помощью анализа мочевины
.
Расщепляющую активность отслеживают посредством измерения pH-титрования, и
сравнивает
с неконъюгированной уреазой. Пегилирование уреазы имеет незначительную активность
–
усиливает влияние на уреолитическую активность фермента. Уреазу
, соединенную с полиэтиленгликолем
25 кДа, наносят в концентрации 2 мг (исходя из содержания белка
в конъюгате) в миниатюрный экспериментальный капиллярный диализатор

, имеющий поверхность 50 см2.Уже после первого обращения более 90–
% уреазы
иммобилизовано на поверхности. К пятому циклу рециркуляции уреаза
PEG
прочно закрепляется на поверхности мембраны. Промывание
полосканием
в течение 30 минут раствором соли альбумина не привело к потере активности или
появлению активности свободной уреазы в промывочной жидкости. Раствор
плазмы крови (50–
мл, содержащий 30 мг мочевины) наносят на капиллярный диализатор
, допированный уреазой, PMMA.В элюате экспериментальной мембраны ПЭГ-уреаза-ПММА оставшиеся
количества мочевины идентифицируются через 5, 10, 20 и 30 минут с помощью
способа
ферментного анализа. Можно показать, что концентрация мочевины
в плазме крови
быстро снижается в течение первых 10 мин. Через 30 минут несвязанная мочевина уже не может быть идентифицирована
. Аммиачный тест в крови положительный в течение последних
25
минут эксперимента. Из анализа можно без сомнения сделать вывод
, что пегилированный фермент
, связанный с мембраной PMMA, проявляет локальную активность фермента
и способен генерировать соответствующие специфические взаимодействия со своим
субстратом
в циркулирующей крови.
CA 02287469 1999-10-14
28
Пример 6
Получение и использование микрочастиц полиалкилметакрилата
В дальнейших экспериментах можно было проверить, что микрочастицы полиалкилметакрилата
(PAMA) также способны связывать эти полиэтиленгликоль- 9024 вещества на их поверхности. Микрочастицы РАМА получают
известными методами и покрывают соответствующими активными веществами.
Были исследованы частицы разного размера.Микрочастицы полиалкилметакрилата
с диаметром
от 0,5 до 250 мкм связывают большие количества активных веществ PEG.
Эти частицы можно использовать по-разному:
1) Частицы, имеющие диаметр до 20 мкм:
После специального допирования активного вещества ПЭГ эти частицы могут быть нанесены
внутрисосудистым путем
и затем оставаться в кровотоке на более длительный период
раза.
Есть возможность снова вывести эти частицы из тела
, если они
содержат соединения, которые могут быть магнитно-возбудимыми (например,грамм. Fe203). Посредством специальной внешней обработки крови
с помощью магнитных удерживающих систем эти частицы
могут быть удалены из кровотока в конце терапии. Здесь
пролекарства (вещества, которые превращаются в свою эффективную форму только
ферментами
, присутствующими в крови) могут, например, доставляться к определенным органам или очагу
болезни
в организме, где они затем присутствуют для терапии в высоких концентрациях
.
1.1 Транспортные средства для транспортировки кислорода
Путем праймирования этих частиц ПАМА гемоглобином, связанным с полиэтиленгликолем, образуются
«искусственных» эритроцитов, которые обладают высокой удельной способностью
транспортировать кислород
и достаточно длительным временем удерживания в организме.
1.2 Противовирусные частицы
Специфические поликлональные или моноклональные антитела против белков оболочки (высокоспецифичные
точки распознавания) вирусов праймируются на частицы PAMA. Частицы

способны количественно «улавливать» вирусы и удалять их из организма
.
CA 02287469 1999-10-14
29
1.3 Частицы, несущие моноклональные антитела (МАБ)
Частицы МАБ против фактора некроза опухоли (TNF-a) могут быть использованы как против
сепсиса, так и при серьезных инфекционных заболеваниях.Частицы МАВ «находят» TNF-
, продуцируемый инфицированными клетками, который при некоторых инфекционных заболеваниях также высвобождается в
высоких концентрациях после контакта с эндотоксином.
1.4 Твердые тела и ткани, покрытые частицами
1.4.1 Материал для артропластики или сосудистых протезов
Монодисперсные частицы предпочтительного размера 1 мкм, 5 мкм или 10 мкм прочно
прикреплены к материалу протеза с помощью подходящего клейкая пленка («клей ПАМА
»).После отверждения адгезивной связки материалы, покрытые частицами PAMA
, обрабатывают факторами роста, связанными с полиалкилгликолем, для костей,
соединительной ткани или мышечных клеток (например, rBMP-2 или rBMP-4, bFGF и т. в тело. Это позволяет впервые добиться прочного соединения
между материалом протеза и мышцей (реконструктивная травматология
!).
1.4.2 Сосудистые протезы
Слой частиц ПАМА (диаметром 0,5 мкм) наносят на сосудистые протезы
Goretex или Dacron
, и перед их использованием они обрабатываются пегилированным эндотелиальным фактором роста

.Дополнительное применение основного фибробластного фактора роста, который
был связан с
PEG, позволяет улучшить витализацию за счет индукции роста в
соединительной ткани и микрокапиллярах.
1.4.3 Искусственные органы
Слои биосовместимых тканей, изготовленные из пластмассовых материалов, на которые были прикреплены
монодисперсные частицы
ПАМА или сополимеры, содержащие ПАМА в качестве основного материала
, загрунтованные органо-специфическим пегилированным фактором роста клеток.Это позволяет осуществлять
быстрое и контролируемое нанесение покрытия на материалы, заменяющие органы.
Области применения: заменитель печени, заменитель костного мозга, легочная ткань
заменитель
и т. Д.
CA 02287469 1999-10-14
1.4.4 Контакты клеточного чипа
Биосенсоры, например кремниевые чипы и другие материалы
электронных схем могут быть покрыты
локально монодисперсными частицами ПАМА (предпочтительный диаметр от 0,5 до
5
мкм). Праймирование пегилированными факторами роста клеток обеспечивает рост определенных концов
клеток
.С помощью этой технологии может быть достигнут обмен информацией между тканью,
предпочтительно нервной тканью, и интеллектуальными цепями.
2) Частицы диаметром от 30 до 80 мкм:
Эти частицы могут быть загрунтованы большим количеством активных веществ, ферментов
, антител
, (прямых и непрямых) антитромботических средств, таких как гирудин, синтетические ,
малые –
молекулы ингибиторов тромбина, змеиные яды, активирующие протеин С, но также
с
тромболитиками, такими как фибринолаза, tPA, комплекс активатора стрептокиназы и т. Д.
Эти частицы
вводятся непосредственно в венозно-венозный (пассивный) или артериовенозный
(активный) шунт в миниатюрных «трубчатых колоннах».
Размер частиц таков, что корпускулярные компоненты
крови могут проходить беспрепятственно. Внутренняя поверхность этих модулей настолько велика, что возможно даже
внутрисосудистых «временных» систем.
«Множественное» праймирование поверхностей PAMA позволяет вызвать специфические ферментативные реакции
в крови.Таким образом, лейкоциты, моноциты и полиморфно-ядерные лейкоциты
также могут быть специфически изменены на поверхности
ETS
(например, расщепление детерминант, специфичных для воспаления).
3) Частицы диаметром от 80 до 150 мкм:
Эти размеры частиц особенно подходят для желудочно-кишечного канала или
для перорального введения.

Преимущества	Недостатки
надежность (нет механических деталей) высокое быстродействие (не пропустит через себя скачек напряжения) два индикатора (вход и выход) крепление на стену (экономия места)	низкая точность стабилизации (8%) ступенчатость регулировки выходного напряжения (точные электроприборы этого не любят) относительно громкое срабатывание реле (в спальню ставить нерекомендуется)

	Допустимая мощность нагрузки по фазе не должна превышать (при входном напряжении более 190 Вольт)	5000 Вт
	ПРИ ВХОДНОМ НАПРЯЖЕНИИ МЕНЕЕ 190 ВОЛЬТ РАСЧИТЫВАЙТЕ МАКСИМАЛЬНУЮ НАГРУЗКУ НА СТАБИЛИЗАТОР, ИСХОДЯ ИЗ ПРИВЕДЕННОГО НИЖЕ ГРАФИКА!	<5000Вт

параметр	значение
Рабочий диапазон входного напряжения	140-260 В
Нижний порог срабатывания защитного отключения нагрузки	131 В
Верхний порог срабатывания защитного отключения нагрузки	265 В
Режим работы	непрерывный
Условия эксплуатации по температуре	+5-+40 С
Условия эксплуатации по влажности	не более 80%

Индикация	На передней панели стабилизатора трехразрядные индикаторы. позволяющие контролировать в режиме реального времени напряжение входа и выхода. Три светодиодных индикатора показывают состояние стабилизатора: СЕТЬ стабилизатор в штатном режиме ЗАДЕРЖКА шестисекундная защитная от переходных процессов задержка подачи напряжения на выход стабилизатора ЗАЩИТА – отключение напряжения на выходе для защиты нагрузки от низкого или высокого входного напряжения.
Управление	На передней панели стабилизатора расположен блок автоматических выключателей и выключатель режима “БАЙПАС”.
Подключение	Подключение стабилизатора производится с помощью клеммной колодки, расположенной внизу устройства.
Техническое обслуживание	Для надежной и долговечной работы релейного стабилизатора напряжения необходимо обеспечить щедящий режим работы и не перегружать особенно в периоды сильно пониженного напряжения. Со временем контакты реле износятся и их надо заменить. Производится в официальном сервис-центре РЕСАНТА.	сервисный центр стабилизаторов РЕСАНТА Адрес: Москва, Внутренний пр-д. д 8.

Может ли работать стабилизатор при температуре ниже минус 5 градусов.	Да может! НО ровно столько времени, за которое обмотка трансформатора нагреется, на ней образуется конденсат и произойдет межвитковое замыкание. Как правило это минут 5-10 от момента включения.
Что делать в выше указанном случае?	Перевести стабилизатор в режим “БАЙПАС”, нагреть помещение, где находится аппарат и затем переключится в штатный режим.

Асн 5000н 1 ц неисправности: Виды неисправностей стабилизаторов напряжения

Виды неисправностей стабилизаторов напряжения

Ремонт стабилизаторов напряжения Ресанта – несложное дело при наличии оригинальных запчастей

Принцип работы

Особенности работы электромеханического прибора

Основные неисправности

Ремонт двигателя сервопривода

Как работают релейные стабилизаторы?

Как ремонтировать реле?

Проведение диагностики

Другие неисправности релейных приборов

Стабилизатор напряжения для дачи Ресанта АСН-5000 Н/1-Ц Lux настенное исполнение

Стабилизатор напряжения однофазный Ресанта АСН-5000Н/1-Ц Люкс.

Устройство, принцип работы, индикация, установка и подключение однофазных стабилизаторов напряжения Ресанта.

Управление,контроль и монтаж стабилизатора напряжения Ресанта АСН-5000Н/1-Ц Люкс.

Краткие рекомендации к выбору стабилизатора по мощности.

ᐅ РЕСАНТА LUX АСН-5000Н/1-Ц отзывы — 19 честных отзыва покупателей о стабилизаторе напряжения РЕСАНТА LUX АСН-5000Н/1-Ц

Самые выгодные предложения по РЕСАНТА LUX АСН-5000Н/1-Ц

Ресанта АСН-5000Н/1-Ц Инструкция по эксплуатации онлайн [7/16]

Какой стабилизатор напряжения выбрать. Лучшие стабилизаторы напряжения для дома

Электрическая схема ресанта асн-5000 1-ц

Электрическая схема ресанта асн-5000 1-ц

Купить стабилизатор релейный ресанта асн-5000/1-ц в.

Стабилизатор напряжения ресанта асн-5000/1-ц купить.

Неисправность стабилизатора ресанта. Кто знает? | страница.

Ремонт и проверка стабилизатора напряжения ресанта асн.

Ресанта асн-5000/1-ц: купить в москве сравнить цены на.

Ресанта асн-5000/1-ц: купить в санкт-петербурге сравнить.

Ремонт стабилизаторов напряжения ресанта несложное дело.

Ресанта асн-5000/1-ц: купить в нальчике сравнить цены на.

Фаговый дисплей тканевого ингибитора металлопротеиназы-2 (TIMP-2): ИДЕНТИФИКАЦИЯ СЕЛЕКТИВНЫХ ИНГИБИТОРОВ КОЛЛАГЕНАЗЫ-1 (МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗА 1 (MMP-1))

Рекомендуемые статьи

Ссылки на статьи

Биоинженерия | Бесплатный полнотекстовый | Биоинженерия биофармацевтического препарата rFVIIa и характеристика структуры для оценки биоподобия

1. Введение

2. Материалы и методы

2.1. Химические вещества и расходные материалы

2.2. Приборы

2.3. Обработка образцов

2.3.1. Определение массы интактных образцов

2.3.2. Анализ N- и O-гликанов.

2.3.3. Картирование пептидов

2.3.4. Анализ гликопептидов

2.3.5. Анализ структуры высшего порядка

2.3.6. Анализ коагуляции

4. Обсуждение

Физические основы биохимии

Об этой книге

Введение

Авторы и аффилированные лица

Об авторах

Библиографическая информация

ПРИ НЕСКОЛЬКИХ ТЕСТИРОВАНИЯХ ГИПОТЕЗ на JSTOR

16_10.07.2015.pdf | Международная автомобильная федерация

Патент 2287469 Резюме – Канадская база данных патентов

Больше новостей

Добавить комментарий Отменить ответ