Ку1205: Коробка установочная 68х60мм металлические лапки ГИПРОК КУ1205-И (КУ1205-И)

Коробка установочная 68х60мм металлические лапки ГИПРОК КУ1205-И (КУ1205-И)

Код товара 4073376

Артикул КУ1205-И

Производитель HEGEL

Страна Россия

Наименование  

Упаковки 240 шт

Сертификат RU C-RU.АЯ60.B00031-20

Тип изделия Коробка для скрытого монтажа

Способ монтажа Скрытый

Материал изделия Полипропилен

Высота, мм 60

Ширина, мм 60

Глубина, мм 60

Диаметр, мм 60

Степень защиты IP20

Крышка Нет

Диаметр внешний, мм 68

Цвет Зеленый

Все характеристики

Характеристики

Код товара 4073376

Артикул КУ1205-И

Производитель HEGEL

Страна Россия

Наименование  

Упаковки 240 шт

Сертификат RU C-RU. АЯ60.B00031-20

Тип изделия Коробка для скрытого монтажа

Способ монтажа Скрытый

Материал изделия Полипропилен

Высота, мм 60

Ширина, мм 60

Глубина, мм 60

Диаметр, мм 60

Степень защиты IP20

Крышка Нет

Диаметр внешний, мм 68

Цвет Зеленый

Все характеристики

Всегда поможем:
Центр поддержки
и продаж

Скидки до 10% +
баллы до 10%

Доставка по городу
от 150 р.

Получение в 150
пунктах выдачи

Коробка установочная 68х60 металлические лапки, с саморезами (для полых стен)

Технические характеристики Коробки установочной СП 68х60 для гипсокарт.

с метал. лапками HEGEL КУ1205

Форма – Круглая.
Для количества встроенных устройств – 1.
Цвет – Зеленый.
Диаметр – 64 миллиметров.
Фиксация устройства – Распорные лапки.
Количество входов, вводов – 5.
Материал – Пластик.
Исполнение – Одинарная.
Степень защиты IP – IP30.
Глубина – 59 миллиметров.
Монтажная глубина – 60 миллиметров.
Ввод сзади – Да

• Материал Пластик
• Модель/исполнение Одинарный (-ая)
• Цвет Зеленый
• Способ монтажа Пустотел. (полая) стена
• Ширина 0.061 м.
• Код товара HEGEL#ку1205
• Степень защиты (IP) IP30
• Высота 0. 054 м.
• Глубина 0.07 м.
• Защитное покрытие поверхности Необработанная
• Глубина устройства 60 мм
• Диаметр 68 мм
• Конструктивное исполнение Коробка установочная
• Форма Круглая (-ое)
• Внутр. глубина 59 мм
• Вес 0.0238 кг.
• Крепление крышки Винтовое
• Тип крепления подключаемого устройства Винт или распорка
• Тип ввода в корпус Преднамечен. выбиваем. (штампов.-высечное) отверстие
• Для трубы диаметром 20 мм
• Количество вводов 6
• Количество устанавливаемых устройств (мест) 1
• Монтажная глубина 60 мм
• Исполнение Одинарная
• Тип изделия Коробка для скрытого монтажа
• Материал изделия Полипропилен
• Степень защиты IP20
• Фиксация устройства Распорные лапки
• Количество входов, вводов 5

Сертификаты товара

Коробка установочная СП 68х60 для гипсокартона с металлическими лапками HEGEL КУ1205, цена

Описание установочной коробки СП 68х60 для гипсокартона с металлическими лапками HEGEL КУ1205

Применяется при монтаже электроустановочных изделий в гипсокартоне и полой стене.

Производитель оставляет за собой право изменять страну производства, характеристики товара, его внешний вид и комплектность без предварительного уведомления продавца. Уточняйте информацию у менеджеров!

1. Способы доставки

	до 100 кг	до 300 кг	до 500 кг**	Постаматы и ПВЗ  PickPoint
Москва	390 руб	500 руб	900 руб	200 руб
МО, область	390 руб*	500 руб*	900 руб*	200 руб
Регионы, РФ				450 руб
Самовывоз	Выдача товара до 20:00, Раменский район, Михайловская слобода, Старорязанская улица, д. 4. (при оплате – резерв товара) Пункт выдачи по адресу: Москва, Рязанский проспект, д.79 (пн-вс с 09:00 до 20:00)

* каждый 1 км за МКАД дополнительно 30 руб

** полная информация по доставке крупногабаритных грузов смотрите в разделе Доставка и оплата

2. Способы оплаты

      Банковской картой онлайн на сайте             ЮMoney (Я.Деньги)

     Наличными курьеру                                                    QIWI кошелек

     Сбербанк-онлайн                                                           WebMoney

     Безналичный расчет

Вы можете вернуть товар, если был обнаружен производственный брак, дефекты и прочие повреждения. Срок возврата осуществляется в течение 14 дней с даты покупки товара. 

Возврат товара осуществляется в полном соответствии с законодательством РФ, включая Закон о Правах Потребителя.

Подробная информация о возратах и обмене

Коробка установочная 68х60мм металлические лапки гипсокартон [КУ1205] Hegel

Вы можете заказать товар используя функционал сайта или прислать заявку на почту info@e-k. su.

К заказу обязательно приложите реквизиты компании.

После обработки заказа менеджером Вам будет выставлен счет на оплату.

Оплатите счет по указанным реквизитам.

Обращаем Ваше внимание, что мы принимаем оплату только от юридических лиц в безналичной форме!

Отгрузка или доставка товара осуществляется на следующий день после поступления оплаты.

Вы можете выбрать удобный способ получения товара:

• Самовывоз со склада, г. Москва, Егорьевский проезд, д. 8.
• Бесплатная доставка в пределах МКАД, при размещении заказа на сумму от 30000₽.
• Платная доставка, при размещении заказа на сумму менее 30000₽.
– Стоимость доставки в пределах МКАД – 1500₽.
– Стоимость доставки по Московской области рассчитывается индивидуально.
• Доставка товара в регионы России через транспортные компании.
– Оплату услуг транспортной компании осуществляет покупатель.

Установочные коробки КУ позволяют осуществлять монтаж электрических розеток, выключателей, диммеров и других электроустановочных изделий в полые стены и перегородки.

Все установочные коробки данной серии соединяются между собой в блоки, для установки рядом вертикально или горизонтально. Соединение осуществляется при помощи кабельных переходников ПК5201 или ПК5202 и может содержать несколько механизмов в блоке (межцентровое расстояние 71 мм). Степень защиты – IP20. Напряжение – 400 В. Материал – полипропилен с антипиреном, имеющий огнестойкость 850 °С.

Технические характеристики
Способ монтажа	Пустотел. (полая) стена
Оснащение/комплектация	Нет (без)
Степень защиты (IP)	IP30
Диаметр	68 мм
Глубина	60 мм
Материал	Пластик
Конструктивное исполнение	Коробка установочная
Форма	Круглая (-ое)
Не содержит (без) галогенов	Да
Модель/исполнение	Одинарный (-ая)
Внутр. глубина	59 мм
Количество устанавливаемых устройств (мест)	1
Тип крепления подключаемого устройства	Винт или распорка
С винтами/шурупами	Да
Тип ввода в корпус	Преднамечен. выбиваем. (штампов.-высечное) отверстие
Для трубы диаметром	20 мм
Фиксация трубы	Нет
Ввод с тыльной стороны	Да
Количество вводов	6
Защитное покрытие поверхности	Необработанная
Цвет	Зеленый
Крышка	Нет (без)
Крепление крышки	Винтовое
Пломбируемый (-ая)	Нет
С экранированием	Нет
Ветронепроницаемый (-ая)	Нет
Крюк для крепления (подвешивания) светильника	Нет
Патрубок/штуцер	Нет (без)
С язычками/ушками для фиксации гвоздями	Нет
Глубина устройства	60 мм
Глубина	60 мм

Коробка установочная СП 68х60 для гипсокарт.

с метал. лапками HEGEL КУ1205

Коробка уст. СП 68х60 для гипсокарт. с метал. лапками HEGEL КУ1205 – монтажный элемент, аксессуар.
Габариты: 68 х 60 мм.
Корпус изготовлен из полипропилена. Круглой формы. Имеет 6 вводов. IP30.
Рекомендуется к применению в помещениях.
Применяется при монтаже электроустановочных изделий в гипсокартоне и полой стене.

Бренд:	HEGEL
Длина:	0.07
Ширина:	0.061
Высота:	0.054
Код единицы измерения размера (ДхШхВ):	MTR
Исполнение:	Одинарная
Цвет:	Зеленый
Диаметр:	64 мм
Материал:	Пластик
Степень защиты IP:	IP30
Глубина:	59 мм
Форма:	Круг
Количество входов, вводов:	5
Ввод сзади:	Да
Монтажная глубина:	60 мм
Фиксация устройства:	Распорные лапки
Для количества встроенных устройств:	1

Аристарх (Москва)

1 г. назад

Это лучший магазин в городе Мытищи

Широкий ассортимент. Есть из чего выбрать. Грамотная консультация. Хорошее отношение к клиентам. Доставка вовремя. Спасибо! Успехов Вам и процветания!

Ответ магазина

Здравствуйте, Аристарх! Спасибо вам за отзыв!

КУ1205 коробка установочная Д-68х60 глубокая в гипрок

Название:

Артикул:

Текст:

Выберите категорию:
Все Новинки Бактериальная защита » Бактерицидные лампы » Бактерицидные облучатели » Бактерицидные рециркуляторы Освещение » Светодиодные светильники »» Светодиодные светильники наружного освещения »»» Светильники для автомагистралей »»» Светильники уличные, промышленные COB »»» Светильники уличные, промышленные Модуль »»» Светильники уличные, промышленные Шеврон »»» Светодиодные уличные, консольные светильники »»» Светильники LED уличные на солнечной батарее »» Светодиодные светильники промышленные »» Светодиодные светильники внутреннего освещения »»» Светодиодные светильники внутреннего освещения встраиваемые ДВО »»» Светильники светодиодные накладные LED IP44, IP54, IP65 (аналог НПП, НБП) »»» Светодиодные светильники внутреннего освещения накладные ДПО »»» Светодиодные светильники офисные »»»» Светодиодные светильники для потолка Армстронг »»»» Светодиодные светильники для потолка Грильято »»»» Светодиодные светильники офисные универсальные »»»» Трековые светодиодные светильники »»» Светодиодные панели »»» Светильники светодиодные LED аналог TL2001, TL3011 »»» Светодиодная подсветка »» Светодиодные светильники для ритейла »» Светодиодные прожекторы »» Светильники светодиодные с датчиками »» Светодиодные светильники аварийного освещения »» Драйверы для светодиодных светильников » Светодиодная лента и аксессуары »» Светодиодная лента »»» LED лента 12 Вольт »»» LED лента 24 Вольта »»» LED лента 220 Вольт »» Блоки питания для светодиодной ленты (драйверы) »»» Блоки питания для светодиодной ленты 12в »»» Блоки питания для светодиодной ленты 24в »» Блоки управления лентой LED »» Аксессуары к ленте LED »» Профиль для светодиодной ленты » Лампы специальные » Светильники специальные »» Свет для растений, ФИТО (Fito) светильники и лампы »» Светильники аварийные, указатели, наклейки » Традиционное освещение »» Люстры »»» Бра »» Переносные светильники »» Светильники уличные под ДРЛ (ртутную лампу) »» Светильники уличные под натриевую лампу (ДНАТ) »» Светильники подвесные под лампы накаливания, КЛЛ, ДРВ »» Светильники под галогенные лампы »»» Прожекторы под галогенную лампу »»» Светильники встраиваемые с патроном G4, G5. 3, G6.35 »» Светильники под лампы накаливания и КЛЛ »»» Светильники накладные под ЛОН или КЛЛ IP20, IP30, IP40 »»» Светильники накладные под ЛОН, КЛЛ, LED пылевлагозащитные IP54, 65 »»» Светильники встраиваемые Downlight (ЛОН, КЛЛ) »»» Светильники встраиваемые для ламп с цоколями GX53 GX70 »»» Светильники встраиваемые для ЛОН (Е14 Е27) »» Светильники люминесцентные »»» Светильники накладные люминесцентные под лампу Т4 и Т5 »»» Светильники накладные люминесцентные под лампу T8 IP20, 30, 40 »»» Светильники накладные люминесцентные пылевлагозащитные IP54, 65 »»» Светильники встраиваемые для люминесцентных ламп (T8) »»» Дроссели для люминесцентных ламп, ЭмПРА, ЭПРА »» Светильники настольные »» Светильники подвесные под газоразрядные лампы (ДРЛ, ДНАТ, МГЛ) »» Аксессуары к светильникам »»» Шнуры, выключатели. »»» Датчики движения »»» Стартеры »»» Патроны для ламп » Лампы , источники света »» Светодиодные лампы »»» LED лампы 12В с цоколем G4, GU4 »»» LED лампы 220в с цоколем G4 и G9, капсульные »»» LED лампы с цоколем GU5,3, GU4, 220в (JCDR, MR16, MR11) »»» LED лампы GU10 »»» LED лампы Т8 G13 »»» LED лампы Е14 »»» LED лампы Е27 »»» LED лампы Е27, Е40 мощные »»» LED лампы GX53, GX70 »»» LED лампы 12В G53 AR111, GU5. 3 »»» LED лампы цветные шарики »»» Декоративные лампы »»» LED лампы для замены зеркальной R39, R50, R63 »» Лампы накаливания »»» Лампы накаливания общего назначения »»» Лампы накаливания декоративные »»» Лампы накаливания местного освещения »»» Лампы накаливания зеркальные »»» Блок защиты для ламп накаливания и галогенных ламп »» Лампы галогенные »»» Лампы галогенные миниатюрные 12в (капсульные) цоколь G4, G6. 35 »»» Лампы галогенные миниатюрные 220в (капсульные) »»» Лампы галогенные рефлекторные 12в »»» Лампы галогенные рефлекторные 220в »»» Лампы галогенные линейные цоколь R7S »»» Трансформаторы для галогенных ламп »» Лампы люминесцентные линейные T4, T5, T8, кольцевые »»» Линейные люминесцентные лампы Т4 (Д-12мм) G5 »»» Линейные люминесцентные лампы Т5 (16мм) G5 »»» Линейные люминесцентные лампы Т8 »» Лампы энергосберегающие, компактные люминесцентные »»» Лампы энергосберегающие с цоколем Е40 »»» Лампы энергосберегающие с цоколем Е14 »»» Лампы энергосберегающие с цоколем Е27 »»» Лампы – U с цоколем G23, G24D для ЭМПРА »»» Лампы – U с цоколем 2G7, G24Q для ЭПРА »»» Лампы GU5. 3 энергосберегающие »» Лампы газоразрядные »»» Ртутные лампы смешанного света (прямого включения) ДРВ »»» Ртутные лампы »»» Натриевые лампы »»» Металлогалогенные лампы »»»» Металлогалогенные лампы с цоколем G12 »»»» Металлогалогенные лампы с цоколем RX7S »»»» Металлогалогенные лампы с цоколем Е40 »»» Дроссели для газоразрядных ламп ДРЛ, ДНАТ, МГЛ » Фонари, фонарики Электроустановочные изделия (выключатели, розетки) » Электроустановочные изделия для скрытой проводки »» Практика Пластиковая серия CGSS »» Эстетика Стеклянная серия CGSS »» Сенсорные выключатели CGSS »» Серия W59 (Wessen59) »» Рондо скрытая проводка »» GLOSSA Schneider Electric »» Sedna Schneider Electric »» UNICA NEW Schneider Electric »» Выключатели разные » Электроустановочные изделия для открытой проводки »» QUTEO Legrand »» BLANCA Schneider Electric »» ЭТЮД »» ЭТЮД дерево »» Влагозащитные розетки и выключатели » Удлинители »» Удлинители бытовые »» Удлинители силовые на катушках »» Фильтры сетевые » Вилки, переходники, штепсели » Звонки, кнопки » Телефонные, телевизионные аксессуары Кабель и провод » ПУВ Провод установочный (ПВ1) » ПУГВ Провод установочный (ПВ3) » Провод гибкий ШВВП, ПУГВВ » Провод соединительный ПВС » Кабель силовой NYM » Кабель ВВГнг-Ls » Кабель ВВГнг-FRls » Провод СИП для ЛЭП » Арматура СИП » Кабель коаксиальный, кабель ТВ, кабель TV » Кабель компьютерный » Кабель телефонный » Кабель связи, сигнальный » Кабель бронированный » Кабель силовой гибкий КГ » РКГМ провод термостойкий Электромонтажные изделия, кабельные аксессуары » Инструмент для электромонтажа » Наконечники, гильзы кабельные »» Наконечники медные ТМ, ТМЛ »» Наконечники штифтовые медные НШП »» Наконечники под пайку ПМ »» Наконечники алюминиевые ТА »» Наконечники медно-алюминиевые ТАМ »» Гильзы кабельные »» Наконечники с изолятором НШВИ »» Болтовые наконечники и соединители НБ СБ » Сжимы » Клеммы WAGO, скрутки » Коробки монтажные, установочные, разветвительные »» Аксессуары к монтажным коробкам »» Коробки уравнивания потенциалов »» Коробки установочные, разветвительные для сплошных стен (бетон, кирпич) »» Коробки установочные, разветвительные для полых стен (гипрок) »» Коробки разветвительные открытой установки »» Коробки клеммные для открытой установки универсальные »» Коробки для монолитного строительства »» Коробки зажимов » Труба ПНД жёсткая техническая » Разъемы кабельные, разъемы силовые, вилки, штепсели »» Разъемы силовые ИЭК »» Разъемы силовые ABB »» Разъемы каучук »» Разъемы силовые » Хомуты, ленты » Труба ПВХ гофрированная » Кабель-каналы и аксессуары »» Кабель-каналы ЭЛЕКОР ( IEK ) »» Кабель-каналы ДКС » Лотки металлические » Металлорукав Щитовое оборудование » Щиты и боксы распределительные »» Щиты и боксы внутренней установки пластиковые »» Щиты и боксы внутренней установки металлические » Щиты учетно-распределительные (под счетчик) »» Щиты под счетчик встраиваемые »» Щиты под счетчик навесные металлические »» Щиты под счетчик навесные пластиковые » Щиты с монтажной панелью, сборные (ЩМП) »» Щиты с монтажной панелью металлические ЩМП IP30, 31 (IEK, ABB и др) »» Щиты с монтажной панелью металлические ЩМП IP54, IP65 (IEK, ABB, DKC) »» Аксессуары к щитам с монтажной панелью » Щитки освещения, распределительные, понижающие ОЩВ, РУСП, ЯТП » Ящики силовые с рубильником ЯРП, ЯБПВУ » Коробки приборные, герметичные » Аксессуары к щитам (din-рейки, шины и др. ) » Вводы кабельные, сальники » Клеммы, клеммники, клеммы на DIN рейку, аксессуары »» Клеммы винтовые на Din-рейку »» Блок ответвительный Счетчики » Счетчики 1-фазные »» Счетчики 1-фазные 1-тарифные »» Счетчики 1-фазные многотарифные » Счетчики 3-фазные »» Счетчики 3-фазные 1-тарифные »» Счетчики 3-фазные многотарифные » Аксессуары для счетчиков Низковольтное оборудование » Модульные автоматические выключатели »» АВВ автоматические выключатели, УЗО, диффавтоматы »»» Автоматические выключатели модульные ABB серия Sh300L »»» Автоматические выключатели модульные ABB серия S200 »»» Автоматические выключатели модульные ABB серия BMS »»» Автоматические выключатели модульные ABB серия S800 »»» Аксессуары к автоматическим выключателям модульным (ABB) »»» Выключатели автоматические дифференциальные (АВДТ) ABB »»» Выключатели дифференциального тока (УЗО) ABB »» IEK »»» Автоматические выключатели ВА 47-29 »»» Автоматический выключатель ИЭК ВА 47-100 »»» Дифференциальные автоматы АД12, АД14 »»» УЗО »» Legrand »»» Автоматические выключатели RX3 Legrand »»» Устройства защитного отключения Legrand » Стационарные выключатели »» АВВ »»» Автоматические выключатели стационарные ABB Tmax »»» Аксессуары к автоматическим выключателям стационарным (ABB Tmax) »» ИЭК » Двигатели и управление »» Двигатели и аксессуары »» Автоматы защиты двигателя и аксессуары »» Преобразователи частоты и аксессуары »» Устройства защиты асинхронных электродвигателей »» Устройства плавного пуска » Пульты, кнопки, светосигнальная арматура, кнопочные посты »» Кнопки управления »» Кнопки – компактная серия »» Переключатели »» Светосигнальные индикаторы »» Сигнальные индикаторы – компактная серия »» Аксессуары к кнопкам и индикаторам »» Посты и пульты кнопочные »»» Корпуса для постов и аксессуары »»» Посты кнопочные »»» Пульты тельферные »»» Выключатель кнопочный »» MIRS, RS Переключатель. » Пускатели, контакторы. »» Контакторы стационарные и аксессуары (ABB) »» Контакторы модульные и аксессуары »» Пускатели электромагнитные IEK. »» Пускатели ПМЛ »» Пускатели ПМЕ, ПМА »» Пускатели ПМ-12 (ПМ12) » Ограничители перенапряжения, УЗИП » Реле »» Реле промежуточные »» Реле времени, таймеры »» Реле контроля напряжения »» Реле освещения, фотореле »» Реле тока »» Реле контроля фаз »» Реле защиты двигателя »» Реле температурное » Ограничители мощности » Рубильники, выключатели, переключатели »» Переключатели кулачковые »» Рубильники, выключатели нагрузки ABB »» Рубильники модульные на DIN-рейку (выключатели нагрузки) »» Рубильник ВР-32 »» Предохранители к рубильникам » Трансформаторы »» Трансформаторы тока » Стабилизаторы напряжения »» Однофазные стабилизаторы напряжения, 220в »» Трехфазные стабилизаторы напряжения 380В Тепловое оборудование » Кабельные системы обогрева »» Теплые полы (маты) »» Теплые полы (кабель) »» Аксессуары для кабельных теплых полов »» Термостаты »» Защита бытовых трубопроводов от замерзания »» Антиобледенение наружных территорий »» Антиобледенение кровли и водостоков » Конвектор электрический » Радиаторы электрические масляные » Инфракрасные обогреватели » Тепловые пушки,тепловентиляторы. Мультиметры, измерительные приборы Средства Защиты Распродажа

Мощность:
Все1 Вт1,5 Вт1.8 Вт2 Вт2,5 Вт2.5 Вт3 Вт3.5 Вт4 Вт4,8 вт/м4.5 Вт4.8 Вт4.8 Вт/м5 Вт5,5 Вт6 Вт6,3Вт/м7 Вт7,2 Вт/м7,4 Вт/м7,5 Вт7,7 Вт/м8 Вт8,6Вт/м9 Вт9 Вт/м9,6Вт/м10 А10 Вт11 Вт11,5 Вт/м12 Вт12 Вт/м12Вт12Вт/м13 Вт13 Вт/м14 Вт14,4 Вт/м14.4 Вт/м15 Вт16 Вт17,3 Вт/м18 Вт19,2 Вт/м19,4 Вт/м20 Вт20 Вт/м21 Вт22 Вт22 Вт/м24 Вт24 Вт/м25 Вт26 Вт/м27 Вт28 Вт28 Вт/м28,8 Вт/м30 Вт31 Вт32 Вт33 Вт35 Вт36 Вт37 Вт38 Вт39 Вт40 Вт42 Вт43 Вт45 Вт46 Вт47 Вт48 Вт49 Вт50 Вт52 Вт53 Вт54 Вт56 Вт58 Вт60 Вт62 Вт64 Вт65 Вт70 Вт72 вт75Вт79 Вт80 Вт90 Вт93 Вт96 вт100 Вт105 Вт106 Вт110 Вт116 Вт120 Вт122 Вт124 Вт126 Вт130Вт144150 Вт150Вт158 Вт159 Вт160 Вт168 Вт180 Вт183 Вт192200 Вт200Вт210Вт237 Вт240 Вт250 Вт300 Вт316 Вт350Вт400 Вт500 Вт600 Вт800 Вт1000Вт1500Вт2000 Вт

Напряжение:
Все3,2 В612 В12-42 В24 В24-264 В28-42 В85-265 В90-305100-240100-264150-250 В160-260 В165-285 В170-265 В175-264175-264 В176-264 В180-240 Вт180-260Вт180-265 ВТ185-240 В185-265 В200-240 Вт200-240В220 В220-230В220-240220-240В230 В230W380 В600 V660 в

Новинка:

Вседанет

Спецпредложение:

Вседанет

Спецпредложение:
Вседанет

Результатов на странице: 5203550658095

Найти

Цистеин-зависимое убиквитинирование Pex18p связано с перемещением груза через пероксисомальную мембрану

Дефекты цикла пероксисомальных рецепторов влияют на относительное количество Pex18p

Импорт белков PTSx7-ассоциированных белков в пероксисомальный матрикс облегчается импортируемым рецептором Pex вспомогательные белки, также называемые корецепторами (31). В S. cerevisiae эту функцию выполняют Pex18p и Pex21p, два белка, функции которых частично перекрываются (32).После индукции олеиновой кислоты Pex18p оказался наиболее важным для импорта тиолазы, несущей PTS2 (Fox3p) (32, 33). Было продемонстрировано, что Pex18p убиквитинируется и конститутивно деградирует, скорее всего, за счет системы убиквитин-протеасома (34).

Чтобы понять эти процессы более подробно, мы сравнили относительную распространенность вспомогательного Pex18p и рецептора PTS2 Pex7p у дикого типа и выбрали делеционных штаммов PEX . Готовили лизаты цельных клеток штаммов, индуцированных олеиновой кислотой, которые подвергали SDS-PAGE и иммуноблот-анализу.В образцах, полученных из клеток pex7 Δ или pex5 Δ, численность Pex18p была аналогична таковой, полученной из клеток дикого типа ( A ). Однако значительное увеличение содержания Pex18p было видно при анализе мутантов с пораженным импортом матричного белка, тогда как уровни Pex7p увеличивались лишь незначительно. Фактически, делеция компонентов рецепторного стыковочного комплекса (Pex13p), комплекса RING finger (Pex12p) или аппарата экспорта рецептора (Pex4p и Pex1p / Pex6p) увеличивала стационарную концентрацию Pex18p до 8 раз по сравнению с штамм дикого типа ( A ).Такое увеличение также наблюдалось при анализе pex3 Δ клеток. Чтобы исключить возможность того, что наш результат был вызван неравномерной загрузкой образца, мы исследовали цитозольный маркер фруктозо-1,6-бисфосфатфосфатазы (Fbp1p) (35) и пероксисомный переносчик АТФ Ant1p, которые оказались равными по величине. все образцы ( A ). Таким образом, наши результаты демонстрируют, что количество Pex18p увеличивается в штаммах, подверженных рецепторному связыванию или рециклингу, что дополняет предыдущие результаты (34).Поскольку Pex3p необходим для нацеливания на белки пероксисомальной мембраны, а его делеция приводит к потере пероксисомальных мембран (36), наши результаты, кроме того, показывают, что функциональные пероксисомы необходимы для поддержания концентрации Pex18p дикого типа.

Pex18p подвергается быстрому обороту в клетках дикого типа. A , лизаты целых клеток штаммов, индуцированных олеиновой кислотой, как указано, анализировали на количество Pex18p и Pex7p с помощью иммунологического обнаружения.Цитозольный Fbp1p и пероксисомальный переносчик АТФ Ant1p служат в качестве контроля для равной нагрузки ( слева, ). Интенсивности сигналов Pex7p и Pex18p в двух независимых экспериментах оценивали с помощью денситометрии. Планки погрешностей , S.E. ( правый ). B , указанные штаммы выращивали на среде олеиновой кислоты в течение 14 ч, а затем обрабатывали 15 мкг / мл циклогексимида. В определенные моменты времени готовили лизаты целых клеток и анализировали иммуноблоттингом на Pex7p и Pex18p.*, перекрестно-реактивная полоса, меченная антителами против Pex18p.

Pex18p подвергается быстрому обороту в клетках дикого типа

Концентрация клеточного белка регулируется балансом синтеза и распада белка. Чтобы различить, является ли наблюдаемое увеличение постоянной концентрации Pex18p следствием более высокой экспрессии или более низкой скорости разложения Pex18p, мы провели эксперименты по погоне за циклогексимидом. Циклогексимид является ингибитором биосинтеза белка в эукариотических организмах, поскольку он блокирует трансляционное удлинение (37).Таким образом, анализ белков после применения этого ингибитора позволяет определить скорость их обновления. Циклогексимид добавляли к среде клеток, индуцированных олеиновой кислотой, и анализировали стабильность Pex18p и Pex7p. В клетках дикого типа Pex18p был ниже уровня обнаружения уже после 3 часов погони за циклогексимидом, что указывает на его быстрое обновление за счет протеасомной деградации (B ( осталось ) и дополнительная таблица S1). Чтобы подтвердить эти данные, мы контролировали уровень Pex18p в штамме, пораженном CIM5 , геном, кодирующим регуляторную субъединицу 26 S протеасомы (38).В этом штамме уровень Pex18p не демонстрировал заметного снижения даже через 6 часов после применения циклогексимида, что демонстрирует, что оборот Pex18p вызван протеасомной деградацией. Скорость оборота Pex18p в штамме fox3 Δ, а также в штамме pex7 Δ была сравнима со штаммом дикого типа, что указывает на то, что ни рецептор PTS2, ни его карго-белковая тиолаза не требуются для доставки Pex18p в протеасому. Напротив, Pex18p оставался стабильным в штаммах с общим дефектом импорта матричного белка ( B ( справа ) и дополнительная таблица S1, pex13 Δ, pex1 Δ / 6Δ и pex3 Δ).Таким образом, отсутствие рецепторного цикла не увеличивает экспрессию Pex18p, но позволяет избежать его протеасомной деградации. Опять же, Pex7p вел себя совершенно иначе, чем его корецептор. Во всех испытанных штаммах рецептор PTS2 оставался стабильным в течение измеренного периода времени 6 часов.

Аналогичные характеристики убиквитинирования рецептора PTS1 Pex5p и Pex18p

Pex5p, а также Pex18p, как было продемонстрировано, изменяются посредством убиквитинирования (11, 13, 34). Хотя был достигнут большой прогресс в анализе убиквитинирования Pex5p, включая выяснение соответствующего ферментативного каскада и идентификацию целевых остатков для соединения убиквитина (Ub), наши знания об убиквитинировании Pex18p остались скудными. Чтобы лучше понять функциональную роль Pex18p, мы исследовали убиквитинирование этого корецептора более подробно. Из-за перекрестно-реактивных белков при использовании Pex18p-специфических антител наша стратегия заключалась в обогащении мембраносвязанным Pex18p путем выделения комплекса Pex14p импортируемого пероксисомального белка, который содержит оба рецептора PTS (26, 39), а также Pex18p (33). ). С этой целью мы применили штаммы дикого типа или отобранные мутантные штаммы, которые экспрессировали Pex14p, геномно меченный протеином А и сайтом расщепления вируса травления табака (TEV) между меткой протеина А и его партнерским протеином слияния.Очищенные комплексы подвергали SDS-PAGE и иммуноблот-анализу для отслеживания присутствия белка-приманки Pex14p, белка стыковки Pex13p и рецептора импорта PTS1 Pex5p и корецептора PTS2 Pex18p. При выделении из клеток дикого типа Pex13p, Pex5p и Pex18p присутствовали в комплексе Pex14p ( A , дорожка 2 ), что согласуется с предыдущими данными (6, 33). То же самое относится и к комплексу, выделенному из штаммов pex8 Δ, pex4 Δ или pex6 Δ.Однако, хотя и Pex5p, и Pex18p были обнаружены как нативные и, следовательно, немодифицированные белки, когда происходили из клеток дикого типа или клеток pex8 Δ, иммунореактивные сигналы с более низкой подвижностью появлялись, когда рецепторные молекулы были выделены либо из штамма, дефектного по ферменту E2 Pex4p. или белок AAA Pex6p. Что касается Pex5p, то эти сигналы с более высокой молекулярной массой, как известно, представляют полиубиквитинированные виды Pex5p (11, 13). Паттерн модификации Pex5p различается между штаммами, которые затронуты либо Pex4p, либо его мембранным якорным белком Pex22p, либо одним из белков AAA Pex1p и Pex6p, либо их мембранным якорем Pex15p ( A ) (11, 13).Интересно, что Pex18p также демонстрирует Pex5p-подобные паттерны модификации в штаммах pex4 Δ и pex6 Δ ( A ), что указывает на убиквитинированный Pex18p. Чтобы выяснить, действительно ли полосы Pex18p с более высокой молекулярной массой, которые появляются в мутантных штаммах, представляют собой убиквитинированные виды корецептора PTS2, мы проанализировали штаммы дрожжей, экспрессирующие либо Ub дикого типа, либо гибридный ген myc Ub (40 ). Вариант myc Ub составляет около 1.На 5 кДа больше, чем Ub дикого типа, но неотличим от Ub дикого типа по способности ферментативно конъюгировать и отщепляться от акцепторных молекул (40). In vivo замена Ub на более крупный myc Ub должна уменьшать электрофоретическую подвижность полос с более высокой молекулярной массой, меченных Pex18p-специфическими антителами, когда они представляют собой конъюгаты Ub. Поэтому мы выделили комплекс Pex14p из штамма дикого типа, а также из штамма pex4 Δ, экспрессирующего либо Ub, либо myc Ub.Полученные фракции элюата разделяли с помощью SDS-PAGE и обрабатывали для иммуноблоттинга. Опять же, полосы с высокой молекулярной массой не были обнаружены в образце дикого типа, но присутствовали, когда Pex18p был выделен из pex4 Δ клеток ( B ). Сравнение образцов pex4 Δ при экспрессии либо Ub, либо myc Ub показало, что предполагаемые убиквитинированные виды Pex18p были заменены новыми полосами с пониженной электрофоретической подвижностью ( B ). Эти данные показывают, что сверхэкспрессия myc Ub сопровождалась увеличением размера всех видов Pex18p с более высокой молекулярной массой.Таким образом, наши данные продемонстрировали, что эти полосы представляют собой убиквитинированные виды корецептора PTS2 Pex18p. Стоит отметить, что в отличие от Pex18p, Pex7p не проявлял явных модификаций в pex4 Δ клетках, как показано в B .

Убиквитинирование Pex18p. Pex14p-TEV-ProtA-комплексы были выделены с помощью аффинной хроматографии из мембранных фракций указанных штаммов. Фракции элюата A , анализировали иммуноблоттингом на присутствие Pex14p, Pex13p и Pex18p, а также рецептора PTS1 Pex5p.Виды Pex18p с более высокой молекулярной массой были обнаружены в штаммах, дефицитных по PEX4 или PEX6 , что напоминало внешний вид убиквитинированного Pex5p ( Ub-Pex5p ) в этих штаммах. B Комплексы , Pex14p-TEV-ProtA выделяли из клеток дикого типа и клеток pex4 Δ, экспрессирующих либо кодируемый плазмидой Ub дикого типа, либо myc Ub. В pex4 Δ-клетках были видны модификации Pex18p с более высокой молекулярной массой, которые смещались в белковые виды с еще более низкой электрофоретической подвижностью при экспрессии myc Ub, демонстрируя, что эти модификации представляют собой убиквитинированный Pex18p.

Консервативный остаток цистеина Pex18p необходим для его функции

Было продемонстрировано, что Pex18p может функционально заменять N-концевую половину Pex5p при транспортировке белков PTS1 в пероксисомы (41). Несмотря на низкое общее сходство между первичными последовательностями Pex18p и рецептора PTS1, одна общая черта очевидна. И Pex18p, и Pex5p содержат цистеин и по крайней мере один остаток лизина в аналогичных положениях ( A ). Эти остатки консервативны среди видов и, таким образом, присутствуют в Pex5p от разных организмов, а также в Pex21p и корецепторе PTS2 Pex20p от P. pastoris и Y. lipolytica . Стоит отметить, что Pex18p содержит второй остаток лизина, соседний с первым, который также присутствует в Pex5p из пекарских дрожжей и млекопитающих. Было продемонстрировано, что один или оба этих остатка лизина служат мишенью для полиубиквитинирования S. cerevsiae и H. polymorpha Pex5p, а также P. pastoris Pex20p (42–44). Консервированный цистеин оказался важным для рециклинга P.pastoris Pex20p и Pex5p крысы, и было показано, что он необходим для моноубиквитинирования Pex5p (42, 45–47).

Функциональная значимость консервативного остатка цистеина Pex18p. A , первичное выравнивание последовательностей N-концевых областей Pex5p и Pex20p разных видов и S. cerevisiae, Pex18p и Pex21p. Консервативный цистеин и первый остаток лизина присутствуют во всех (ко) рецепторных молекулах, а также второй остаток лизина, специфичный для S.cerevisiae Pex5p и Pex18p обозначены стрелкой и показаны красным цветом . B , маркерный белок PTS2 PTS2-dsRed был трансформирован в клетки дикого типа, pex18 Δ 21 Δ и pex18 Δ 21 Δ клетки, экспрессирующие указанные варианты Pex18p. Трансформированные штаммы выращивали на пластинах с олеиновой кислотой в течение 2 дней и исследовали с помощью флуоресцентной микроскопии. Структурная целостность клеток подтверждается светлопольной микроскопией. В отличие от pex18 Δ 21 Δ, клеток, которые нарушены в импорте PTS2-зависимого матричного белка и неправильно локализуют маркерный белок в цитозоле, у клеток дикого типа наблюдается точечное флуоресцентное окрашивание. pex18 Δ 21 Δ клетки, экспрессирующие либо Pex18p дикого типа, либо замены остатков лизина PTS2-рецептора, показали аналогичное окрашивание для синтетического маркерного белка PTS2. Штамм, экспрессирующий Pex18pC6S, демонстрирует цитозольное окрашивание маркерного белка, что указывает на дефект импорта белков PTS2 и, таким образом, потерю функции этого мутанта Pex18p. Шкала , 5 мкм. C , анализ роста клеток дикого типа и pex18 Δ / 21 Δ клеток.Указанные штаммы были нанесены в виде серии 10-кратных разведений на среде, содержащей олеиновую кислоту в качестве единственного источника углерода. Чашки инкубировали в течение 3-5 дней при 30 ° C и оценивали появление колоний и образование ореола. По сравнению с клетками дикого типа, клетки pex18 Δ / 21 Δ, а также pex18 Δ / 21 Δ клетки, экспрессирующие Pex18pC6S, не показали роста на олеате в качестве единственного источника углерода, что подтверждает наблюдаемый дефект импорта белка.

Чтобы выяснить роль консервативных остатков для функции Pex18p более подробно, мы создали варианты Pex18p с заменами первого (Lys-13) или второго (Lys-20) лизина на аргинин, консервативного цистеина (Cys -6) в серин или комбинацию этих вариаций.Pex18p дикого типа и мутант экспрессировали из плазмиды в pex18 Δ pex21 Δ клетках. Нетрансформированные и трансформированные индуцированные олеиновой кислотой живые клетки контролировали с помощью флуоресцентной микроскопии на предмет импорта PTS2-зависимого матричного белка. Синтетический маркерный белок PTS2-dsRed выявил паттерн точечного окрашивания в штамме дикого типа, который типичен для пероксисомного мечения ( B ). Напротив, маркер был цитозольным в pex18 Δ pex21 Δ клетках ( B ), что соответствует дефициту импорта PTS2 этих клеток (32).Этот дефект импорта был восстановлен экспрессией Pex18p дикого типа. Аналогичным образом, экспрессия вариантов Pex18p с заменой одного или обоих остатков лизина привела к точечному паттерну PTS2-dsRed. Это открытие указывает на то, что консервативные остатки лизина на N-конце Pex18p не требуются для функционального PTS2-зависимого импорта белка в пероксисомы. Однако, когда Pex18p (C6S) экспрессировался в pex18 Δ pex21 Δ клетках, наблюдалось цитозольное распределение синтетического белка PTS2, сравнимое с окрашиванием, выявленным для нетрансформированных мутантных клеток. Поскольку экспрессия Pex18p (C6S) была такой же, как и для Pex18p дикого типа ( B и дополнительная таблица S2), результаты демонстрируют потерю функции этого варианта Pex18p. Чтобы подтвердить этот вывод, мы провели тест на рост олеиновой кислоты как единственного источника углерода. Пероксисомы необходимы для роста пекарских дрожжей на этом источнике углерода, а дефект роста указывает на пероксисомную дисфункцию. В отличие от клеток дикого типа, клетки с дефицитом PEX18 / PEX21 не могли расти на олеиновой кислоте ( C ), что типично для S.cerevisiae , дефектные в биогенезе пероксисом (19). Мутантный штамм, экспрессирующий варианты Pex18p или Pex18p дикого типа с заменой консервативных остатков лизина, рос нормально. Напротив, не наблюдали роста для pex18 Δ pex21 Δ клеток, экспрессирующих Pex18p (C6S) ( C ). Из этого мы заключаем, что консервативный цистеин в положении 6 важен для функции Pex18p в импорте белка PTS2-зависимого матрикса.

Лизины 13 и 20 Pex18p необходимы для полиубиквитинирования корецепторов и протеасомной деградации. A , Pex14p комплексы были выделены из pex18 Δ / 21 Δ / 4 Δ и pex18 Δ / 21 Δ / 4 Δ клеток, экспрессирующих указанные варианты Pex18p. Фракции элюата проверяли на присутствие Pex14p, Pex18p и Pex5p с помощью иммуноблоттинга. Во всех образцах Pex5p демонстрировал паттерн убиквитинирования, типичный для pex4 Δ клеток. Хотя разные варианты Pex18p демонстрировали нормальный паттерн модификации, убиквитинированные виды Pex18p не были обнаружены, когда лизин 13 и 20 были заменены на аргинин (Pex18pK13R / K20R).Это открытие идентифицирует оба остатка лизина как мишени для прикрепления убиквитина. B , дикого типа, а также pex18 Δ 21 Δ клеток, экспрессирующих указанные варианты Pex18p, выращивали на олеиновой кислоте в течение 14 часов и обрабатывали 15 мкг / мл циклогексимида. В указанные моменты времени отбирали образцы и анализировали на Pex18p с помощью иммуноблоттинга. *, перекрестно реактивная полоса. Хотя Pex18p дикого типа был ниже уровня обнаружения через 1 час, Pex18pK13R / K20R был почти стабильным в течение всего периода времени.Эти данные указывают на то, что консервативные остатки лизина необходимы для протеасомной деградации Pex18p, и подтверждают мнение о том, что они обеспечивают целевые остатки для полиубиквитинирования.

Lys-13 / Lys-20-зависимое полиубиквитинирование и деградация Pex18p

Затем мы выяснили, влияет ли замена консервативных аминокислотных остатков на статус убиквитинирования Pex18p. Применяли штамм pex18 Δ pex21 Δ с геномно экспрессируемым Pex14p-TEV-ProtA для комплексного выделения и дополнительной делеции PEX4 . pex4 Δ клеток применяли, потому что они не влияют на образование пероксисомального импортомера (6), но накапливают полиубиквитинированные Pex5p и Pex18p, которые здесь могут быть проанализированы. С этой целью белковые комплексы, выделенные из этих мутантных клеток, экспрессирующих различные мутанты Pex18p, исследовали на белок-приманку Pex14p, а также на Pex18p и Pex5p. Во всех комплексах Pex5p присутствовал в одинаковых количествах и с паттерном убиквитинирования, типичным для PEX4 -дефицитных клеток ( A ) (11, 13).Связанный Pex18p с заменой одного или обоих остатков лизина или остатка цистеина (Pex18pK13R, -K20R, -K13R / K20R и -C6S) демонстрировал тот же профиль и интенсивность белка, что и Pex18p дикого типа. Однако Pex18pK13R / K20R, который содержал замену обоих остатков лизина на аргинин, все еще ассоциировался с Pex14p, но больше не был убиквитинирован. Это наблюдение убедительно доказывает, что лизины в положениях 13 и 20 представляют собой целевые остатки для полиубиквитинирования корецептора.Более того, данные продемонстрировали, что консервативный цистеин, который оказался важным для функции белка, не требуется для связывания Pex18p с док-комплексом пероксисомальной мембраны (( B и C ) и A ).

Затем мы исследовали, влияет ли мутация целевых остатков для убиквитинирования Pex18p на скорость оборота белка. Клетки выращивали на среде олеиновой кислоты, добавляли циклогексимид и в разные моменты времени готовили и анализировали лизаты целых клеток.Pex18p дикого типа полностью разлагался в течение 2 часов после добавления циклогексимида ( B и дополнительная таблица S2). Замена K20R не влияла на период полужизни Pex18p, поскольку для мутированных белков наблюдали такой же оборот, как и для кодируемого плазмидой Pex18p дикого типа. Замена K13R немного повысила стабильность. Однако самая высокая степень стабилизации наблюдалась для Pex18p, несущего замену как остатков K13R, так и K20R. Это согласуется с ролью этих остатков лизина в полиубиквитинировании и направлением Pex18p на протеасомную деградацию.Интересно, что биологически неактивный Pex18pC6S показал лишь небольшое увеличение стабильности, которое аналогично стабилизации, наблюдаемой для замены K13R. Однако, в отличие от замены K13R, замена цистеина приводит к полной потере функции Pex18p, указывая на особую роль консервативного цистеина.

Цистеин-зависимое убиквитинирование Pex18p

Поскольку Pex18p имеет некоторые общие черты с N-концевым доменом рецептора PTS1 Pex5p, который не изменяется в условиях дикого типа, но моноубиквитинируется при использовании ингибитора изопептидазы NEM (48), мы исследовали Pex18p в этих условиях.Клетки, индуцированные олеиновой кислотой, экспрессирующие Pex14p-TEV-ProtA, обрабатывали NEM, и комплексы Pex14p выделяли и зондировали иммуноблоттингом с Pex18p-специфическими антителами. Появление дополнительных высокомолекулярных соединений Pex18p наблюдали, когда к препарату добавляли NEM ( A ). Чтобы проверить, представляет ли вид с более высокой молекулярной массой убиквитинированный Pex18p, белок был выделен из штаммов, сверхэкспрессирующих Ub, кодируемый плазмидой, или myc, Ub.При экспрессии myc Ub электрофоретическая подвижность модификации Pex18p снижалась, что продемонстрировало ее природу как конъюгата Ub ( B ).

Pex18p убиквитинируется по консервативному остатку цистеина. Pex14p-TEV-ProtA выделяли из клеток дикого типа, индуцированных олеиновой кислотой в отсутствие или в присутствии NEM ( A ), при экспрессии либо кодируемого плазмидой Ub, либо myc Ub в присутствии 20 мМ NEM ( B ), или из pex18 Δ 21 Δ, экспрессирующих либо Pex18p дикого типа, либо мутантный Pex18p, как указано, а также pex18 Δ 21 Δ 4 Δ, экспрессирующих Pex18p дикого типа ( C ).Равные части полученных фракций элюата анализировали иммуноблоттингом на присутствие Pex18p и его модифицированных видов. *, перекрестно реактивная полоса.

В Pex5p NEM-защищенное моноубиквитинирование происходит по консервативному остатку цистеина на крайнем N-конце рецептора PTS1. Поскольку этот остаток также консервативен в Pex18p ( A ), мы проанализировали, представляет ли он также целевой остаток для убиквитинирования Pex18p. Pex18p дикого типа или мутировавшие варианты Pex18p экспрессировались в pex18 Δ 21 Δ клетках; Комплекс Pex14p был выделен в присутствии NEM и исследован на Pex18p. Как показано ранее, моноубиквитинированный Pex18p был виден в этих условиях (C , дорожка 1, ). Картина модификации не изменилась при замене двух консервативных остатков лизина на аргинин, демонстрируя, что эти остатки не обязательны для моноубиквитинирования Pex18p ( C , дорожка 2 ). После замены консервативного остатка цистеина в положении 6 Pex18p на серин картина убиквитинирования Pex18p изменилась ( C , дорожка 3 ).Моноубиквитинированная форма исчезла, и вместо этого появился узор, напоминающий полиубиквитинированный Pex18p в pex4 Δ ( C , дорожка 4 ). Этот образец также наблюдался в pex4 Δ даже в отсутствие NEM (не показано). Когда в дополнение к цистеину 6 были заменены два консервативных остатка лизина ( C , дорожка 5 ), убиквитинирование Pex18p больше не было видно. Эти находки указывают на то, что Pex18p подвергается цистеин-зависимому NEM-защищенному убиквитинированию. Более того, замена цистеина приводит к полиубиквитинированию Pex18p по консервативным остаткам лизина.

Импорт Pex7p требует экспорта его корецептора Pex18p

Pex18p имеет двойную локализацию с основной цитозольной фракцией и меньшей частью, локализованной на внешней поверхности пероксисомальной мембраны (32). Чтобы выявить изменения в топологии Pex18p во время каскада импорта белка, мы выполнили анализы защиты протеазы с диким типом, а также с отобранными мутантами pex , затронутыми на разных стадиях рецепторного цикла.Органические фракции, полученные из клеток дикого типа, pex8 Δ, pex4 Δ или pex1 Δ /6 Δ клеток, получали и инкубировали с протеиназой K в присутствии или в отсутствие тритона X-100. В соответствии с предыдущими результатами, Pex18p клеток дикого типа был доступен для экзогенно добавленной протеазы даже в отсутствие детергента Triton X-100, который нарушает целостность мембраны ( A ) (32). Однако в этих условиях часть Pex18p-связывающего партнера Pex7p была защищена от деградации, что указывает на его пероксисомную локализацию. Интересно, что у мутантных штаммов наблюдается разная топология рецептора и корецептора. Хотя Pex7p был полностью доступен для протеиназы K даже в отсутствие детергента, значительная часть Pex18p была защищена протеазой ( A ). Этот результат указывает на то, что Pex7p не был перемещен через пероксисомальную мембрану и что Pex18p остановлен в защищенной протеазой форме. Поскольку этот результат был получен для всех протестированных штаммов мутантов, он, по-видимому, является общим фенотипом для дефекта компонентов механизма импорта белков пероксисомального матрикса.

Pex18p останавливается в защищенной протеазой форме, когда рецепторный цикл блокируется на поздних стадиях. Осадок органелл дикого типа и отобранных мутантных штаммов pex ( A ) или pex18 Δ / 21 Δ клеток, экспрессирующих различные варианты Pex18p ( B ), были выделены и подвергнуты тесту на протеазную защиту с протеиназа К в отсутствие или в присутствии Тритона Х-100. В указанные моменты времени протеаза ингибировалась добавлением PMSF.Равные части образцов подвергали SDS-PAGE и иммуноблот-анализу на присутствие Pex7p и Pex18p.

Было показано, что убиквитинирование импортного рецептора Pex5p необходимо для его экспорта обратно в цитозоль (43). В дрожжах S. cerevisiae блокировка экспорта рецептора либо делецией компонентов механизма экспорта, либо мутацией аминокислот Pex5p, которая предотвращает убиквитинирование рецептора, приводит к накоплению Pex5p на пероксисомной мембране (11, 13, 43).Здесь мы наблюдали аналогичное поведение для Pex18p, поскольку большее количество корецепторов ассоциировалось с Pex14p в штаммах с делецией pex ( A ). Это открытие поставило вопрос о том, может ли этот эффект быть похожим на аминокислотную замену целевых остатков Ub в Pex18p. Чтобы ответить на этот вопрос, мы проанализировали топологию вариантов Pex18p и особенно последствия для локализации Pex7p. Биологически активные замены Pex18pK13R / K20R, которые больше не подвергаются полиубиквитинированию, вели себя почти как Pex18p дикого типа с небольшой долей Pex18p, но большая часть Pex7p была защищена протеазой пероксисомальной мембраной ( B ). Напротив, замена цистеина 6 в Pex18p серином задерживала значительную часть Pex18p в защищенной протеазой форме, тогда как Pex7p был чувствителен к протеазе даже в отсутствие детергента. То же самое наблюдалось при замене консервативных остатков лизина и цистеина ( B ). Соответственно, блокирование Cys-6-зависимого моноубиквитинирования приводит к остановке Pex18p в защищенной мембраной форме, при этом Pex7p все еще обращен к цитозолю.

Таким образом, цистеин-зависимое убиквитинирование, которое запускает экспорт рецепторов, как показано для Pex5p, является предпосылкой для транслокации груза.Это подтверждает идею о том, что экспорт запускает импорт, как постулируется в модели импорта, управляемого экспортом (49).

Миссия сопровождения МИАП, 7 мая 2021 г. – Сан-Антонио Патриот гвардейцы наездники

АЛКОН:

Техасский MIAP сердечно приглашает к участию и присутствие Техасских наездников Патриотической гвардии (TXPGR), Техасских наездников Американского легиона (TX ALR), Техасской мотоциклетной ассоциации ветеранов боевых действий (TX CVMA), мотоциклетных ассоциаций военных и офицеров правоохранительных органов (LEO). шествие и церемонии погребения трех (5-8) невостребованных ветеранов без семьи на национальном кладбище Даллас-Форт-Уэрт в пятницу, 7 мая 2021 года, в 15:00.

Людей и / или групп, желающих прокатиться на мотоцикле в честь наших потерявших место / неправильно обращенных ветеранов, просят присоединиться к нам на любой из остановок заправки / отдыха и не стесняйтесь падать в тыл группы столько, сколько захотите. поездка.

Руководство МИАП, автомобили или грузовики для преследования / эвакуации, полицейские машины и приглашенная пресса – единственные другие разрешенные автомобили в шествии

Это однодневное событие будет происходить в три (3) фазы:

Процессия 2 – SA – DFWNC, пятница, 7 мая 2021 г.

** ДЛЯ ЭТОЙ ПРОЦЕССИИ НЕТ LEO ESCORT, ПОКА МЫ НЕ ДОБРАЕМСЯ ДО ГАЗОВОЙ ОСТАНОВКИ WEATHERFORD **

Staging – 0715 – Boerne, HEB Plus
420 W.Bandera Rd
Boerne, Tx 78006
https://goo.gl/maps/SPAnE9YQUWxjZKY87

Брифинг – 0730
Отрыв от места – 0800, Сан-Саба, Техас, 110 миль, 1:50
Топливная остановка 1, Exxon, 20 минут
307 N High St
Сан-Саба, Tx 36877
325-372-6028
https://goo. gl/maps/p9vcEgEjtkYbERf98

KU: 1010 часов – Санто, Техас, 118 миль, 1:55
Топливная остановка 2, остановка грузовиков Maverick
14100 США 281
Санто, Техас 76472
940-769-2206
https: // g.page / mavericktravelcenter-santo? share

KU – 1205 часов – Weatherford, Техас, 24 мили,: 25
Топливная остановка 3 – Loves Truck Stop
2605 E Bankhead HWY
Weatherford, Tx 76087
817-594-2755
https://goo.gl/ карты / vLJZupNUCKGqsdVF6

** На остановке заправки 3 обе процессии объединятся, установят большие флаги, реорганизуются и начнут заключительное 54-мильное шествие в центр приветствия DFWNC, где дальнейшие инструкции будут даны Национальным кладбищем. **

KSU – NLT 1345 часов

Капитаны / Хвостовой стрелок / Сопровождение
Боб «Pizza Man» Джонсон, SAPGR DSC / RC / Escort
Дэвид Стинсон, SAPGR / Escort
Энди «Дядя Гвидо» Шварц, SAPGR RC / Escort

, фаза III, закачка в DFWNC:

По прибытии процессии в DFWNC нас направят на переулок. Четыре велосипеда с большим флагом будут выбраны и назначены для сопровождения Cremains в назначенное убежище / павильон в назначенное время сотрудниками DFWNC.

Остальные сопровождающие / всадники / службы поддержки / LEO отправятся в назначенное убежище / павильон в ожидании прибытия Cremains. В это время NTX PGR возьмет на себя групповые передвижения по кладбищу.

Информация об отеле, Ред-Оук, Гранд-Прери, 7 мая 2021 г.
Забронируйте собственный номер (номера), «MIAP» или пропавший без вести в Америке. Проект
с 10 двухместными номерами для нас по цене 99 долларов.00 НЕТ НАЛОГА! (Позвоните мне, если заполнен)
(нажмите на ссылку ниже)
508 N I-35E

Red Oak, Texas 75154
469-820-9800
https://www.wyndhamhotels.com/laquinta/red-oak-texas/la-quinta-inn-and-suites-red-oak-tx-ih-35e / rooms-rates? & checkInDate = 05.07.2021 & checkOutDate = 05.08.2021 & groupCode = CGMIAP **

У меня будет письмо об освобождении от уплаты налогов для отелей. **

ПОЖАЛУЙСТА, НАПРАВЛЯЙТЕ ВСЕ ВОПРОСЫ И ПРОБЛЕМЫ КООРДИНАТОРУ CJ ROWELL, TEXAS MIAP @ 940-300-5674, ИЛИ ДЖИНУ КЛАРКУ.

С уважением,

Г-н Джин Кларк,
, пропал без вести в Америке. Проект
Техасский координатор сопровождения / дорожный капитан
Мобильный телефон: 210-452-2745

Ильму Актуария | Курикулум

Курикулум

Информации о мата кулиах семестр маупун кеминатан.

Мата Кулия Семестр

Семестр 1

Нет	Код	Мата Кулия (МК)	СК	Практикум
		Всего	17
1	КУ1209	Калкулус I	3	Тидак Ада
2	КУ1211	Fisika Dasar I	3	Ада
3	КУ1218	Алгоритм дан Пемрограф	3	Ада
4	КУ1217	Pengantar Metode Statistik	3	Тидак Ада
5	AK1401	Логика дан Химпунан	3	Тидак Ада
6	КУ1101	Панкасила	2	Тидак Ада

Семестр 2

Нет	Код	Мата Кулия (МК)	СК	Практикум
		Всего	19
1	КУ1202	Калкулус 2	3	Тидак Ада
2	КУ1204	Физика Дасар 2	3	Ада
3	КУ1205	Кимиа Дасар	3	Тидак Ада
4	КУ1209	Бахаса Ингрис	2	Тидак Ада
5	AK1402	Aljabar Linier Elementer	3	Тидак Ада
6	AK1403	Экономи Микро	3	Тидак Ада
7	AK1404	Pengantar Ekplorasi Data	2	Тидак Ада

Семестр 3

Нет	Код	Мата Кулия (МК)	СК	Практикум
		Всего	18
1	AK1405	Калкулус Ланют	3	Тидак Ада
2	AK1406	Номер метода	3	Тидак Ада
3	AK1407	Statistika Matematika 1	3	Тидак Ада
4	AK1408	Математика Кеуанган 1	3	Тидак Ада
5	AK1409	Экономи Макро	3	Тидак Ада
6	AK1410	Pengantar Persamaan Diferensial	3	Тидак Ада

Семестр 4

Нет	Код	Мата Кулия (МК)	СК	Практикум
		Всего	19
1	KU110X	Агама	2	Тидак Ада
2	AK1411	Pengantar Analisis Real	3	Тидак Ада
3	AK1412	Statistika Matematika 2	3	Тидак Ада
4	AK1413	Контингенси Джива 1	3	Тидак Ада
5	КУ1102	Бахаса Индонезия	2	Тидак Ада
6	AK1414	Математика Кеуанган 2	3	Тидак Ада
7	AK1415	Теори Рисико Актуария 1	3	Тидак Ада

Семестр 5

Нет	Код	Мата Кулия (МК)	СК	Практикум
		Всего	19
1	KU1320	Pemanfaatan Sumber Daya	2	Тидак Ада
2	КУ1108	Кеварганегараан	2	Тидак Ада
3	AK1416	Kontingensi Jiwa 2	3	Тидак Ада
4	AK1417	Модель Linier	3	Тидак Ада
5	AK1418	Акунтанси 1	3	Тидак Ада
6	AK1419	Модель Survival	3	Тидак Ада
7	AK1420	Теори Рисико Актуария 2	3	Тидак Ада

Семестр 6

Нет	Код	Мата Кулия (МК)	СК	Практикум
		Всего	20
1	КУ1321	Кулия Керджа Ньята	2	Тидак Ада
2	AK1421	Метод Перамалан	3	Тидак Ада
3	AK1422	Акунтанси 2	3	Тидак Ада
4	AK1423	Проза Стокастик	3	Тидак Ада
5	AK1424	Модель Linier Lanjut	3	Тидак Ада
6	AK1425	Teori Investiasi	3	Тидак Ада
7	AK1426	Ilmu Data	3	Тидак Ада

Семестр 7

Нет	Код	Мата Кулия (МК)	СК	Практикум
		Всего	20
1	AK1601	Kerja Praktik	2	Тидак Ада
2	AK1427	Асуранси Лингкунган	3	Тидак Ада
3	AK15XX	Мата Кулия Пилихан	15	Тидак Ада

Семестр 8

Нет	Код	Мата Кулия (МК)	СК	Практикум
		Всего	12
1	AK1701	Тугас Ахир	6	Тидак Ада
2	AK15XX	Мата Кулия Пилихан	6	Тидак Ада

Мата Кулия Кеминатан

Компьютерная сеть

Нет	Код	Мата Кулия (МК)	СК	Практикум
		Всего	27
1	IF1217	Sistem Terdistribusi	3	Тидак Ада
2	IF1218	Keamanan Informasi dan Jaringan	3	Тидак Ада
3	IF1301	Джаринган Ниркабель	3	Тидак Ада
4	IF1302	Komputasi Awan	3	Тидак Ада
5	IF1303	Технологи Антар Джаринган	3	Тидак Ада
6	IF1304	Джаринган Мультимедиа	3	Тидак Ада
7	IF1305	Komputasi Grid dan Parallel	3	Тидак Ада
8	IF1306	Komputasi Pervasif dan Jaringan Sensor	3	Тидак Ада
9	IF1307	Perancangan Keamanan Sistem дан Джаринган	3	Тидак Ада

Компьютерные науки

Нет	Код	Мата Кулия (МК)	СК	Практикум
		Всего	27
1	IF1219	Pengolahan Citra Digital	3	Тидак Ада
2	IF1220	Kecerdasan Komputasional	3	Тидак Ада
3	IF1308	Visi Komputer	3	Тидак Ада
4	IF1309	Penambangan Data	3	Тидак Ада
5	IF1310	Komputasi Biomedik	3	Тидак Ада
6	IF1311	Permodelan дан Simulasi	3	Тидак Ада
7	IF1312	Sistem Temu Kembali Informasi	3	Тидак Ада
8	IF1313	Большие данные	3	Тидак Ада
9	IF1314	Мультивариатный анализ данных	3	Тидак Ада

Программная инженерия

Нет	Код	Мата Кулия (МК)	СК	Практикум
		Всего	27
1	IF1221	Konstruksi Perangkat Lunak	3	Тидак Ада
2	IF1222	Manajemen Proyek Perangkat Lunak	3	Тидак Ада
3	IF1315	Arsitektur Perangkat Lunak	3	Тидак Ада
4	IF1316	Penjaminan Mutu Perangkat Lunak	3	Тидак Ада
5	IF1317	Системное предприятие	3	Тидак Ада
6	IF1318	Realitas Virtual и Augmentasi	3	Тидак Ада
7	IF1319	Basis Data Terdistribusi	3	Тидак Ада
8	IF1320	Pemrograman Perangkat Bergerak	3	Тидак Ада
9	IF1321	Pengembangan Permainan	3	Тидак Ада

.