P u2 r: Hitachi R-S702 PU2 GS – ,

Технические характеристики

Видео

Отзывы и обзоры

Смотрите видео (выше) и обзоры (ниже), они часто лучше текстовых отзывов. Прочитать больше отзывов или оставить свой вы можете в комментариях к этой странице. Спасибо за ваш отзыв или оценку!

Сергей

Холодильник хороший. Работает без проблем, морозит как надо, места нам тоже на все хватает. Почти год как купили и ни разу не пожалели о своем выборе.

Цены и продавцы

Экспрессия и регуляция рецептора нейропептида Y Y2 в сенсорных и вегетативных ганглиях

Подтип Y2 рецепторов нейропептида тирозина (Y2R) и некоторые нейропептиды были изучены с помощью гибридизации in situ в сенсорных и вегетативных нейронах крыс и крыс. обезьяна. От 10% до 20% нейронов ганглия (DRG) ганглия (DRG) содержат мРНК Y2R у крысы и обезьяны. В DRG крыс мРНК Y2R экспрессируется в нейронах среднего и большого размера, положительных по отношению к пептиду, связанному с геном кальцитонина (CGRP), что является комплементарным по отношению к Y1R, который расположен в небольших нейронах CGRP.В DRG обезьян мРНК Y2R экспрессируется в основном в небольших нейронах. Периферическая аксотомия активирует Y2R в малых и больших нейронах DRG у обоих видов. Y2R и NPY мРНК совместно локализованы во многих крупных нейронах аксотомированных DRG крыс. МРНК Y2R экспрессируется в 50% НЧ узлового ганглия с умеренным увеличением после аксотомии. МРНК Y2R обнаруживается в нескольких НЧ в верхних шейных ганглиях нормальных крыс с заметным увеличением после перерезки сонных нервов. Нет Y2R-позитивных по мРНК, но много (≈30%) слабо Y1R-позитивных по мРНК NPs были обнаружены в сфенопалатиновом ганглии.Наконец, уровни мРНК Y2R увеличиваются в спинномозговых мотонейронах крыс после аксотомии. Таким образом, при нормальных обстоятельствах NPY может действовать на Y1 и Y2R, экспрессируемые, соответственно, в малых и больших CGRP-положительных нейронах DRG крысы. Y2R может быть важным рецептором висцеро-сенсорных нейронов. Y2R могут быть особенно важны после аксотомии, выступая в качестве пресинаптических и / или ауторецепторов на DRG крыс, верхних шейных ганглиях и нейронах узловых ганглиев, а также в качестве пресинаптических рецепторов в нейронах DRG обезьян.

Нейропептид тирозин (NPY), выделенный из бычьего мозга Tatemoto et al. (1), имеет широкое распространение в нервной системе и, по-видимому, участвует во многих периферических и центральных функциях (2, 3). На основании фармакологических исследований и исследований связывания с использованием пептидных фрагментов были представлены доказательства существования множества подтипов рецепторов NPY (4, 5). Ранее были выявлены два основных подтипа, рецепторы Y1 и Y2 (Y1Rs, Y2Rs), которые, как считалось, представляют в основном постсинаптические и предсинаптические рецепторы соответственно (6, 7). Y1R (8–10) и Y2R (11–13) были клонированы, и может существовать еще пять подтипов рецепторов NPY (5).

Имеются данные о том, что NPY может играть роль на уровне позвоночника. Таким образом, NPY-положительные локальные нейроны присутствуют в дорсальном роге (14), но в нейронах ганглия задних корешков (DRG) NPY в нормальных условиях не обнаруживается или присутствует на очень низких уровнях (15). Резкое повышение регуляции этого пептида происходит в нейронах DRG после повреждения периферических нервов, прежде всего в крупных нейронах (16). Авторадиографические исследования связывания лиганда продемонстрировали сильное связывание NPY в дорсальном роге спинного мозга (17, 18), которое снижается после дорсальной ризотомии (17), что позволяет предположить наличие сайтов связывания на нейронах DRG.Фактически, высокая аффинность ¹²⁵ I-меченных сайтов связывания NPY была продемонстрирована на волокнах культивируемых нейронов DRG (19). Также висцеральные первичные афферентные нейроны в узловых ганглиях кролика (NG) экспрессируют связывание лигандов Y1 и Y2 (20). Связывание Y2R на сенсорных нейронах увеличивается после периферической аксотомии (Axo) (18). Используя гибридизацию in situ , мРНК Y1R была обнаружена в популяции в основном небольших нейронов DRG, также содержащих пептид, связанный с геном кальцитонина (CGRP) и вещество P (SP) (21), но этот рецептор, по-видимому, не переносится центробежно, таким образом представляя чисто соматический рецептор (22).Более того, после периферической Axo уровни мРНК Y1R уменьшались в малых, но увеличивались в больших нейронах DRG (21). В вегетативной нервной системе NPY сосуществует с норадреналином в симпатических нейронах (23) и с ацетилхолином в парасимпатических нейронах (24).

В настоящем исследовании мы использовали гибридизацию in situ и для анализа экспрессии и регуляции мРНК Y2R как в DRG крысы и обезьяны, так и в верхних шейных ганглиях (SCG), NG и сфенопалатиновых ганглиях (SPG) крыс при нормальных условиях. условиях и после Axo (DRG у крыс и обезьян и SCG и NG у крыс).

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Препарат ткани.

Пятнадцать взрослых самцов крыс Sprague – Dawley (масса тела 200–250 г) и 3 самцов обезьян ( Macaca mulatta ) (3–4 кг) были глубоко анестезированы, и левый седалищный нерв был рассечен над большим вертелом. Крысам давали выжить в течение 2 (3 крысы), 7 (3 крысы), 14 (6 крыс) или 21 (3 крысы) дней, а обезьянам – 14 дней. Восемнадцать крыс подверглись глубокой анестезии, и левый внутренний и внешний сонные нервы были пересечены на расстоянии 2 мм от SCG.Крыс умерщвляли через 2, 7 или 14 дней (по шесть в каждой группе). Еще у девяти крыс был рассечен левый блуждающий нерв на 20 мм ниже NG. Крыс умерщвляли через 2, 7 или 14 дней (по три в каждой группе). Эксперименты на крысах были одобрены Stockholms norra djurförsöksetiska nämnd (местным этическим комитетом), а на обезьянах – Китайским национальным комитетом по использованию экспериментальных животных в медицинских целях, филиал Шэньси.

Оперированных животных, а также контрольных животных подвергали глубокой анестезии, и поясничный (L) спинной мозг (L4 – L5), L4 и L5 DRG, SCG, NG и SPG вырезали, замораживали и разрезали на 5 или 14 мкм. в криостате и обработаны для гибридизации in situ (21).Девять крыс с перерезанными сонными нервами (как указано выше) и три контрольных животных анестезировали и фиксировали перфузию формалином. SCG были постфиксированы, разрезаны на 14 мкм в криостате и обработаны для иммуногистохимии (15).

Подготовка зондов и процедура гибридизации.

Смесь из трех коммерчески приобретенных олигонуклеотидных зондов (Скандинавский ген синтеза, Köping, Швеция): ( я ) TGCTTGGAGATCTTGCTCTCCAGGTGGTAGACAATGCAAC, ( II ) TGTGCCTTCGCTGATGGTAATGGTCACTTGCAGCTCCAGGAC и ( III ) GAGTTTGTACTCCTTCAGGTCCAGGACATGGCTGTCGA комплементарной нуклеотидной последовательности внутриклеточных петель 2 и 3, и внеклеточная петля 3 крысы Y2R соответственно (25).Зонд для мРНК NPY Y1R комплементарен нуклеотидам 546–585 крысиного NPY Y1R (10), а мРНК NPY Y5R – нуклеотидам 1542–1580 крысиного Y5R (26). Последовательности нейропептидных зондов были комплементарны нуклеотидам 1671–1714 крысиного NPY (27), нуклеотидам 664–698 крысиного CGRP (28) и нуклеотидам 145–192 крысиного SP (29). Олигонуклеотидные зонды метили на 3′-конце [α- ³⁵ S] dATP (New England Nuclear) и очищали, как описано (21). DTT добавляли до конечной концентрации 10 мМ (удельная активность 1–4 × 10 ⁶ имп / мин / нг на олигонуклеотид).Процедура гибридизации in situ следовала опубликованным протоколам (21). После гибридизации срезы промывали, обезвоживали, сушили, погружали в эмульсию ядерных треков NTB2 (Kodak), экспонировали при 4 ° C в течение 2–4 недель, проявляли, фиксировали, промывали и анализировали в микроскопе Nikon Microphot-FX, оборудованном конденсатор темного поля или окрашенный крезиловым фиолетовым и установленный для просмотра в ярком поле. Контрольные гибридизации с избытком холодного зонда (в 100 раз) отменяли все сигналы.

Иммуногистохимия.

Срезы инкубировали с антисывороткой против NPY [1: 800; J. Walsh, Центр исследований и образования язв (CURE), Лос-Анджелес], обработал для метода ABC (Vector Laboratories) и исследовал описанное (15). Для контроля антисыворотку против NPY предварительно абсорбировали синтетическим NPY (Peninsula Laboratories) в концентрации 10 ^-6 М, который полностью блокировал окрашивание.

Количественная оценка.

Процент меченых профилей нейронов (NP) подсчитывали на окрашенных крезиловым фиолетовым срезах в микроскопе Nikon (21).Каждый четвертый раздел серии (всего 5–8 разделов каждой L5 DRG), или каждый третий раздел серии (всего 5-7 разделов из каждой SCG или NG), или каждый четвертый раздел серии (всего Были отобраны 10 срезов каждого спинного мозга от трех подвергнутых аксотомии животных и трех травмированных животных в каждый момент времени. Всего было проанализировано 912-1297 NP от каждой DRG крыс, 1281-1742 NP от каждой DRG обезьян, 958-1414 NP от каждой SCG или NG крысы и 74-123 профиля мотонейронов крысы из обоих вентральных рогов спинного мозга. .Количество меченых НЧ делили на общее количество НЧ.

Размер NP в DRG, интенсивность мечения мРНК Y2R в DRG и интенсивность мечения мРНК NPY в SCG измеряли, как описано (21), с использованием программного обеспечения для изображений Национального института здравоохранения (любезно предоставлено W. Rasband, Национальный институт психического здоровья). Измеряли размер 200 NP, содержащих мРНК Y2R, и 400 NP с мРНК Y2R или без нее из контрольных и ипсилатеральных DRG крыс и обезьян через 14 дней после одностороннего Axo.Измеряли уровни относительной плотности мечения мРНК Y2R в DRG трех контрольных и трех подвергнутых аксотомии (14 дней) животных и мРНК NPY в SCG трех контрольных и трех аксотомированных (7 дней) крыс. Измеряли пятьдесят NP от каждой DRG или SCG каждого животного. Каждое изображение было оцифровано с 256 уровнями серого для каждого элемента изображения. Данные оценивались с помощью непарного двустороннего теста t .

РЕЗУЛЬТАТЫ

DRG Крысы и Обезьяны.

В DRG L4 и L5 нормальных крыс 15-20% всех NP были Y2R-положительными по мРНК (мРНК ⁺ ) (рис. 1 a и e и 2 a ), с диапазоном 400-2700 мкм ² (большинство 900-1800 мкм ² ) (рис. 2 b ), что в основном представляет собой крупные нейроны. После Axo наблюдалось сильное увеличение процента мРНК Y2R ⁺ NP в ипсилатеральных DRG (фиг. 1 b и f , и 2 a ).Через 7, 14 и 21 день после Axo ≈35% всех НЧ были положительными с небольшим снижением на противоположной стороне (рис. 2 a ). Размер Y2R мРНК ⁺ NPs после Axo находится в диапазоне от 300 до 1500 мкм ² , что представляет собой сдвиг в сторону более мелких нейронов (рис. 2 c ). Также интенсивность сигнала мРНК увеличивалась после Axo (средний уровень серого мечения ± SEM: 15,0 ± 1,5 у контрольных крыс по сравнению с 24,2 ± 1,7 через 14 дней после Axo; n = 3, P <0.05).

Темные ( a – d ) и яркие ( e – m ) микрофотографии контрольного поля ( a , c , e , g и i – k ) и ипсилатеральные ( b , d , f , h , l и m ) L5 DRG крысы ( a , b , e , f и i – m ) и обезьяна ( c , d , g и h ), гибридизированные с зондами для Y2R ( a – i и l ), мРНК CGRP ( j ), Y1R ( k ) и NPY ( m ) через 14 дней после одностороннего перерезания седалищного нерва.( a – h ) Сильное мечение мРНК Y2R наблюдается во многих крупных нейронах DRG (стрелки в a и e ) и некоторых нейронах DRG среднего размера (стрелки на a и e ) в обычных DRG крыс. После Axo количество нейронов мРНК Y2R ⁺ увеличивается в ипсилатеральных DRG крысы (b ). Более мелкие (изогнутые стрелки), средние (стрелки) и большие (стрелки) нейроны экспрессируют мРНК Y2R ( b и f ).В нормальных DRG обезьян только несколько маленьких нейронов экспрессируют мРНК Y2R (стрелки в c и g ). Количество Y2R мРНК ⁺ малых (стрелки на d и h ) и больших (стрелки на h ) нейронов заметно увеличивается в ипсилатеральных DRG обезьяны через 14 дней после Axo. ( i – k ) Три смежных участка толщиной 5 мкм нормального DRG крысы показывают, что Y2R экспрессируется в мРНК CGRP ⁺ среднего и большого (стрелки) нейронов; однако маленькие нейроны, экспрессирующие Y1R и CGRP, не имеют Y2R (стрелки).( l и m ) Два смежных участка DRG ипсилатеральной крысы через 14 дней после Axo демонстрируют совместную локализацию мРНК Y2R и NPY во многих нейронах DRG большого и среднего размера (стрелки). Имеются некоторые мРНК NPY ⁺ больших нейронов, лишенные мРНК Y1R (стрелки на l и m ). (Полосы = 200 мкм в и – , d и 50 мкм в и – м .)

Процент мРНК Y2R ⁺ NP в контрольных, ипсилатеральных и контралатеральных DRG крыс через 2, 7, 14 и 21 день ( и ) после и у обезьян через 14 дней после перерезания седалищного нерва ( d ).Диапазон размеров мРНК Y2R ⁺ NP у крыс ( b ) и обезьян ( e ) контрольных DRG и у крыс ( c ) и обезьян ( f ) DRG через 14 дней после Axo. Данные представлены как среднее ± стандартная ошибка среднего. ∗, P <0,05; ∗∗, P <0,01 по сравнению с контролем.

В DRG нормальных обезьян ≈10% всех НЧ составляли мРНК Y2R ⁺ (рис.1 c и g и 2 d ), с резким увеличением после Axo (до 60%) (рис. .1 d и h и 2 d ). В нормальных DRG большинство НЧ мРНК Y2R ⁺ имели небольшой размер (500–1400 мкм ² , пик на 700 мкм ² ), в значительной степени перекрывающийся с распределением всех НЧ (рис. 2 и ). . После Axo произошел сдвиг в сторону более крупных Y2R мРНК ⁺ NP (рис. 2 f ). Только одиночные Y1R мРНК ⁺ NPs можно было наблюдать в нормальных и подвергнутых аксотомии DRG (данные не показаны).

В соседних срезах нормальных DRG толщиной 5 мкм мРНК Y2R наблюдалась в мРНК CGRP ⁺ средних и крупных НЧ (рис.1 i и j ) (34,2% НЧ содержали мРНК Y2R плюс CGRP, 0% только мРНК Y2R и 65,8% только мРНК CGRP; n = 82). Меньшее количество NP экспрессировало мРНК Y2R плюс SP, чем мРНК Y2R плюс CGRP (12,6% содержали мРНК Y2R плюс SP; 21,4% только мРНК Y2R; 66% только мРНК SP; n = 103). Колокализация мРНК Y2R и Y1R не наблюдалась ( n = 60) (рис. 1 i , j и k ). В ипсилатеральных DRG через 14 дней после Axo многие крупные NPs экспрессировали мРНК NPY и 41.8% подсчитанных мРНК NPY ⁺ содержали мРНК Y2R (рис.1 i и m ) (35,0% содержали мРНК Y2R плюс NPY; 16,3% только мРНК Y2R; 48,7% только мРНК NPY; n = 80). Иногда мРНК Y2R и Y1R можно было наблюдать в одних и тех же НЧ (2,4% содержали мРНК Y2R плюс Y1R; 55,4% только мРНК Y2R; 42,2% только мРНК Y1R; n = 83).

Вегетативные ганглии крыс.

Y2R экспрессировалась в 0,5% НЧ в нормальных SCG (рис.3 a и d , и 4 a ). Через два дня после перерезки внутренних и наружных сонных нервов количество НЧ Y2R мРНК ⁺ заметно увеличилось ипсилатерально (рис.3 b и 4 a ) и достигло 40% всех НЧ через 7 дней после Axo (рис. . 3 c и e и 4 a ). Никаких заметных изменений в контралатеральных SCG обнаружено не было (рис. 4 и ). МРНК Y1R не была обнаружена в SCG нормальных крыс и / или после перерезки сонного нерва (данные не показаны).

Темный – ( a – c , f , g , l и m ) и светлый – ( d , e , h – k , n и o ) полевые микрофотографии контроля ( a , d , f , h , j , l , n и o ) и ипсилатеральные ( b , c , e , g , i , k и m ) SCG ( a – k ), NGs ( l – n ), и SPG ( o ) крыс, гибридизированных с зондами для Y2R ( a – e и l – n ), Y1R ( o ) и NPY ( f – i ). ) мРНК или иммуномеченых для NPY ( j и k ) 2 ( b ) или 7 ( c , e , g , i , k и м ) дней после односторонней перерезки обоих сонных нервов.Немногие нейроны содержат мРНК Y2R в нормальном SCG (стрелки в a и d ) с небольшим увеличением через 2 дня (стрелки в b ) и заметным увеличением через 7 дней после Axo (стрелки в c и e. ). Большинство нейронов в нормальных SCG содержат мРНК NPY (стрелки в f и h ) и NPY-подобную иммунореактивность (стрелки в j ). Интенсивность мечения мРНК NPY снижается в нейронах (стрелки в g и i ) в ипсилатеральном SCG через 7 дней после Axo.Количество нейронов NPY ⁺ в ипсилатеральном SCG заметно снижено (стрелки в k ). Многие нейроны в нормальном NG экспрессируют мРНК Y2R (стрелки на l и n ). Больше нейронов NG представляют собой мРНК Y2R ⁺ через 7 дней после Axo (стрелки на м ). МРНК Y1R экспрессируется в нейронах SPG (стрелки в o ). (Полосы = 200 мкм в a – c , f , g , l и m ; 50 мкм в d , e и h – l ; и 20 мкм в n и o .)

Процент мРНК Y2R ⁺ и мРНК NPY ⁺ NP ( a ) и серые уровни маркировки мРНК NPY ( b ) в SCG контрольных крыс и в ипсилатеральных и контралатеральных SCG 2, 7 и 14 после одностороннего перерезания сонного нерва. Процент мРНК Y2R ⁺ НЧ в NG ( c ) и в вентральных рогах спинного мозга ( d ) ипсилатеральной и контралатеральной стороны. Данные представлены как среднее + SEM. ∗, P <0.05; ∗∗, P <0,01 по сравнению с контролем.

В нормальных SCG 74% подсчитанных НЧ содержали мРНК NPY (Фиг.3 f и h , и 4 a ), со значительным увеличением (до 85%) через 7 дней после Axo (Фиг.3 g и i и 4 a ). Однако интенсивность мечения заметно снизилась (рис. 3 g и i и 4 b ). Это сопровождалось снижением NPY-подобной иммунореактивности, что привело к явному снижению количества положительных NP в ипсилатеральных SCG (рис.3 j и k ).

В нормальных NG около 50% всех НЧ экспрессировали мРНК Y2 (рис.3 -1 и n ), и небольшое увеличение наблюдалось через 7 (рис.3 m ) и 14 дней после Axo (рис.4 ). c ). В SPG 32,3% НЧ были мРНК Y1 ⁺ (фиг. 3 o ), но мРНК Y2 обнаружить не удалось (данные не показаны).

Спинальные мотонейроны крыс.

Y2R была обнаружена в 15% подсчитанных профилей мотонейронов в нормальном спинном мозге (рис.4 д ). После седалищного разреза заметное увеличение количества профилей мотонейронов Y2R mRNA ⁺ наблюдалось ипсилатерально во всех исследованных временных интервалах (Фиг.4 , и 5).

Микрофотография вентрального рога спинного мозга крысы через 14 дней после Axo показывает мРНК Y2R ⁺ мотонейронов (стрелки). Стрелки указывают на мРНК-отрицательные мотонейроны Y2R. (Бар = 50 мкм.)

мРНК Y5.

Y5 не была обнаружена в L5 DRG, SCG, SP, NG или спинном мозге крысы при нормальных обстоятельствах или после Axo (DRG, SCG и NG; данные не показаны).Однако этот зонд показал сигнал в нескольких областях мозга, включая гиппокамп.

ОБСУЖДЕНИЕ

Настоящие результаты демонстрируют, что субпопуляция в основном крупных нейронов в DRG крыс, составляющая около 15-20% всех NP, экспрессирует определяемые уровни мРНК Y2R при нормальных обстоятельствах в соответствии с предварительным отчетом Gustafsson et al . (30). Соответствующий показатель для НГ составляет около 50%. В SCG, преимущественно норадренергическом симпатическом ганглии, уровни Y2R при нормальных обстоятельствах очень низкие.Сигнал мРНК Y2R не обнаруживается в нормальном парасимпатическом SPG. У обезьяны 10% NP DRG представляют собой мРНК Y2R ⁺ , но подавляющее большинство является небольшим. В некоторых ганглиях Axo вызывает заметную повышающую регуляцию уровней мРНК Y2R с удвоением в НЧ DRG крыс, 6-кратным увеличением НЧ DRG обезьян и в SCG крыс около 40% НЧ теперь экспрессируют рецептор (вверх). от 0%). Также увеличивается мРНК Y2 в мотонейронах крыс (с 15 до 35% НЧ). Однако рост числа НГ был незначительным.Более того, во всех случаях уровни мРНК в отдельных нейронах повышены, что свидетельствует об увеличении синтеза и уровней рецепторного белка. Следует подчеркнуть, что наша методология может быть недостаточно чувствительной для обнаружения низких уровней мРНК Y2R, и поэтому мы недооцениваем возникновение Y2R. Настоящие результаты вместе с ранее опубликованными данными представлены в Таблице 1.

Рецепторы NPY в сенсорных и вегетативных ганглиях

Сенсорные ганглии.

В предыдущем исследовании на крысах периферический Axo вызывал заметное увеличение связывания ¹²⁵ I-меченного пептида тирозин тирозина (PYY) над дорсальными корнями, а также над поверхностным и глубоким слоями дорсального рога (18). Конкурентные эксперименты показали, что это связывание в основном представляет собой Y2R. Эти находки и тот факт, что маленькие и большие нейроны проецируются, соответственно, в поверхностные и более глубокие пластинки дорсального рога, согласуются с настоящими результатами, показывая, что мРНК Y2 после Axo активируется как в малых, так и в больших нейронах.

Настоящие и предыдущие результаты показывают, что нейроны CGRP можно подразделить на две комплементарные субпопуляции: малые нейроны CGRP, экспрессирующие Y1R (21), и большие нейроны CGRP, экспрессирующие мРНК Y2 (настоящие данные). После Axo мы часто обнаруживали мРНК Y2R в крупных нейронах, также содержащих мРНК NPY. Также Y1R активируется в крупных нейронах после повреждения нерва (21). Однако четкое различие между этими двумя рецепторами состоит в том, что Y1R остаются в теле клетки в качестве соматических рецепторов (22), тогда как Y2R транспортируются централизованно к спинному рогу в больших количествах, особенно после Axo (18), что согласуется с их постулируемые роли в качестве пост- и пресинаптических рецепторов соответственно (6).Таким образом, после Axo Y2Rs могут действовать как ауторецепторы на первичных афферентах в дорсальном роге, помимо активации NPY, высвобождаемого из локальных нейронов дорсального рога (14). Сообщалось, что NPY ингибирует приток Ca ²⁺ в культивируемые нейроны DRG крысы через Y2R (31, 32) и ингибирует высвобождение SP с концов как in vitro , так и in vivo (19, 33). Спинальное введение NPY вызывает антиноцицептивные эффекты (34) и двухфазные эффекты на ноцицептивный сгибательный рефлекс (35).Ингибирующие эффекты NPY, возможно, могут быть усилены после Axo, потому что на сенсорных нейронах должно быть доступно больше рецепторов.

В настоящем исследовании наблюдались некоторые видовые различия между крысами и обезьянами. Y1R вряд ли нормально синтезируется в DRG обезьян или после Axo. Однако Y2R экспрессируется в небольших нейронах DRG, которые часто содержат CGRP и SP у нормальных обезьян (36). После Axo повышающая регуляция Y2R происходит как в малых, так и в крупных нейронах, и это более выражено у обезьян, чем у крыс.Это согласуется с результатами исследования связывания рецепторов, показывающими, что Y2R являются основными сайтами связывания NPY в поверхностном дорсальном роге спинного мозга нормальных обезьян и после Axo (18). NPY не был обнаружен в DRG нормальных обезьян, и только 2% нейронов экспрессируют NPY после Axo (36). Таким образом, у обезьян локальные нейроны в поверхностном дорсальном роге могут быть основным источником NPY, действующего на первичные афферентные терминалы, содержащие Y2Rs.

Автономные ганглии.

Настоящее исследование показывает, что Y2R обычно экспрессируется только на очень низких уровнях в SCG, предполагая, что этот пресинаптический ауторецептор (6) имеет лишь небольшое функциональное значение, и что NPY, высвобождаемый из симпатических нервных окончаний, может в основном действовать на постсинаптические рецепторы. Интересно, что в SPG не наблюдалось сигнала мРНК Y2R, которые вместо этого демонстрировали низкую экспрессию мРНК Y1R во многих нейронах.

Заметное увеличение мРНК Y2R наблюдалось в симпатических ганглиях после Axo рядом с телами клеток, параллельно со сниженными уровнями NPY.Кроме того, хотя большее количество нейронов продуцировало пептид NPY, уровни в отдельных нейронах снижались, о чем также сообщали другие (37). Функциональное значение увеличения «предсоединительных» рецепторов или симпатических нейронов после Axo неясно. Было показано, что NPY способствует периферической гипералгезии, воздействуя на предсоединительные Y2R на постганглионарных симпатических окончаниях (38), которые могут присутствовать в высоких уровнях на симпатических волокнах, регенерирующих после Axo.

В заключение, настоящие данные подтверждают мнение, что Y2R-опосредованные эффекты могут усиливаться после повреждения нерва.Это может предложить новые подходы к лечению, например, боли с помощью агентов, действующих на Y2R.

Благодарности

Мы благодарим докторов наук. J. Walsh и H. Wong (Центр исследований и образования язвы / Калифорнийский университет, Лос-Анджелес; при поддержке Национального института здравоохранения, грант DK 17294) за щедрое пожертвование антисыворотки к NPY. Эта работа поддержана Шведским советом по медицинским исследованиям (04X-2887), Марианн и Маркусом Валленбергами Штифтелсе, Густавом Висом и Дроттнингом Викториасом Штифтелсе, Astra Pain Control AB и Китайским фондом естественных наук (гранты 39525010 и 39500045).

Сноски

• ↵ Кому запросы на переиздание следует направлять по адресу: Отдел неврологии / гистологии, Каролинский институт, 171 77, Стокгольм, Швеция. электронная почта: Tomas.Hokfelt neuro.ki.se.

• Томас Хёкфельт

• Сокращения: Axo, аксотомия; CGRP, пептид, родственный гену кальцитонина; DRG, ганглий дорзального корня; L, поясничный; мРНК ⁺ , мРНК-положительная; NP, профиль нейрона; NPY, нейропептид тирозин; Рецепторы YIR и Y2R, NPY1 и -2; СП, вещество Р; НГ, узловатые ганглии; SCGs, верхние шейные ганглии; SPGs, клиновидно-небные ганглии.

• Принято 18 ноября 1996 г.

• Авторские права © 1997, Национальная академия наук США

Коэффициенты корреляции

Прикладная статистика – Урок 5

Обзор урока

Корреляция

Примеры: одна переменная может быть количеством охотники в регионе, а другой переменной может быть популяция оленей.Возможно, с увеличением числа охотников популяция оленей уменьшается. Это пример отрицательной корреляции : как одна переменная увеличивается, другой уменьшается. Положительная корреляция – это то место, где две переменные реагируют одинаково, увеличиваясь или уменьшаясь вместе. Температура в градусах Цельсия и Фаренгейта имеет положительную корреляцию.

Pearson Product Moment

Как при осмотре определить тип корреляции?
Если график переменных представляет собой линию с положительным наклоном, то существует положительная корреляция ( x увеличивается по мере увеличения y ). Если наклон линии отрицательный, значит, имеется отрицательная корреляция. (поскольку x увеличивается, y уменьшается).

Важным аспектом корреляции является то, насколько сильное . Сила корреляции измеряется корреляцией коэффициент r .Другое название для r – корреляция момента произведения Пирсона . коэффициент в честь Карла Пирсона, который разработал его около 1900 года. Обычно используются как минимум три разные формулы чтобы вычислить это число и эти разные формулы несколько представляют разные подходы к проблеме. Однако такое же значение для r получается с помощью любой из различных процедур. Сначала мы приводим формулу необработанной оценки . n имеет обычное значение того, сколько упорядоченных пар находятся в нашей выборке. Также важно распознать разница между суммой квадратов и квадраты сумм!

Далее мы представляем формулу оценки отклонения . Эта формула ближе к истории развития поскольку он дает среднее перекрестное произведение стандартные оценки двух переменных, но в в вычислительном отношении более простой формат.

Нам нужно сделать несколько замечаний относительно обозначений, поскольку x и y переменных в приведенной выше формуле были преобразованы из исходных переменных вычитая их средства.

Наконец, мы представляем ковариационную формулу , что является еще одним подходом.Ковариации обычно дается между двумя переменными, и это одна из причин, почему. (Следует отметить, что размер ковариации зависит от об единицах измерения, используемых для каждой переменной. Однако коэффициента корреляции нет.)

r часто обозначается как r _xy чтобы выделить две рассматриваемые переменные.Для выборок коэффициент корреляции представлен как r . а коэффициент корреляции для популяций обозначен греческой буквой ро (которая может выглядеть как p ). Имейте в виду, что коэффициент корреляции Спирмена ро также использует греческую букву ро, но обычно применяется выборкам и данным ранжируются (порядковые данные).

Чем ближе r к +1, тем сильнее положительная корреляция. Чем ближе r к -1, тем сильнее отрицательная корреляция.Если | r | = 1 точно, две переменные идеально коррелированы ! Температура в градусах Цельсия и Фаренгейта прекрасно коррелирует.

Формальная проверка гипотез может быть применена к r чтобы определить, насколько значим результат. Это тема Хинкля главы 17 и этот урок 12. Распределение Student t с n -2 степени свободы.

Нулевое значение для r не означает, что корреляции нет, может быть нелинейная корреляция. Также могут быть задействованы смешивающие переменные . Предположим, вы обнаруживают, что у майнеров скорость выше среднего рак легких. У вас может возникнуть соблазн немедленно заключить что их занятие является причиной, в то время как, возможно, регион имеет большое количество утечек радиоактивного газа радона из субземных регионов и все люди в этой области затронуты.А может, они заядлые курильщики ….

r ² часто используется и называется коэффициент детерминации . Это доля вариации значений и . это объясняется регрессией наименьших квадратов y на x . Об этом мы поговорим подробнее в уроке 6. после введения наименьших квадратов.

Коэффициенты корреляции, величина которых находится в пределах от 0.9 и 1.0 указывают переменные, которые можно считать очень сильно коррелированными. Коэффициенты корреляции от 0,7 до 0,9 указывают переменные, которые можно считать сильно коррелированными. Коэффициенты корреляции от 0,5 до 0,7 указать переменные, которые можно считать умеренно коррелированными. Коэффициенты корреляции от 0,3 до 0,5 указывают переменные, которые имеют низкую корреляцию . Коэффициенты корреляции, величина которых меньше 0,3 имеют небольшую (линейную) корреляцию. Мы легко видим, что 0,9 < | r | <1,0 соответствует 0,81 < r ² <1,00; 0,7 < | r | <0,9 соответствует 0,49 < r ² <0,81; 0,5 < | r | <0,7 соответствует 0,25 < r ² <0.49; 0,3 < | r | <0,5 соответствует 0,09 < r ² <0,25; и 0,0 < | r | <0,3 соответствует 0,0 < r ² <0,09.

Копейщик Ро для ранжированных / порядковых данных

Формула для расчета ро Спирмена коэффициент корреляции следующий.

n – количество парных рангов и d – разница парных рангов.Если нет равных баллов, коэффициент корреляции Спирмена ро будет еще ближе к коэффициенту корреляции момента произведения Пирсона. Также обратите внимание, что эту формулу можно легко понять, если Вы понимаете, что сумма квадратов от 1 до n может быть выражено как n ( n + 1) (2 n + 1) / 6. Отсюда можно реализовать наименьшую сумму d ² равно нулю, а наибольшая сумма d ² равна удвоенная сумма квадратов нечетных целых чисел до n /2, а затем масштабирует такую ​​сумму от -1 до +1.

Пример: Предположим, у нас есть результаты тестов. из 110, 107, 100, 96, 89, 78, 67, 66 и 49. Они соответствуют рангам с 1 по 9. Если бы были дубликаты, то пришлось бы найти средний рейтинг для дубликатов и замените это значение на наши ряды. Соответствующие итоговые оценки первой страницы были: 29, 32, 27, 29, 25, 25, 21, 26, 22. Таким образом, эти ранги следующие: 2,5, 1, 4, 2,5, 6,5, 6,5, 9, 5, 8. (Обратите внимание, что если мы изменили порядок, присвоение рангов от низкого к высокому вместо высокого к низкому, в результате Коэффициент корреляции Спирмена Ро изменил бы знак на противоположный.)

На основе информации, представленной выше, мы составили таблицу ниже. Мы добавили дополнительные столбцы d и d ² для простоты расчета Spearman rho. Используя формулу Спирмена ро, получаем 1-6 (24) / (9 (80)) = 0,80.

Факторы, влияющие на размер

По мере того, как однородность группы увеличивается, дисперсия уменьшается, а величина коэффициент корреляции стремится к нулю.{\ large \ frac {3} {2} \ normalsize}}}} = 2,} \; \; \; \ kern-0.3pt
{R = \ frac {1} {K} = \ frac {1} {2}.}
\]

Пример 3.

Решение.

Эта функция достигает максимума в точках \ (x = {\ large \ frac {{2 \ pi n}} {m} \ normalsize}, \; n \ in Z. \) По периодичности кривизна вообще Максимум точек одинаков, поэтому достаточно рассмотреть только точку \ (x = 0.{\ large \ frac {1} {2} \ normalsize}}.}
\]

Ограничиваясь первой дугой циклоиды, т.е. интервалом \ (0 \ le t \ le 2 \ pi, \), получаем следующее выражение для радиуса кривизны циклоиды:

\ [R = 4a \ sin \ frac {t} {2}. \]

Отсюда следует, что радиус кривизны имеет максимум в \ (t = \ pi. \) Его значение в этой точке \ ({R _ {\ max}} = 4a. \)

Пример 8.

Как видно, в точке \ (x = 0 \) кривизна равна нулю: \ (K \ left (0 \ right) = {K_0} = 0. \)

В этом случае точка \ (x = 0 \) является точкой перегиба функции \ (y = \ arctan x. \) Поскольку вторая производная равна нулю в любой точке перегиба, кривизна здесь также должна быть равна к нулю, что совпадает с полученным решением.

Рассчитайте значение кривизны \ ({K _ {\ infty}} \) в пределе как \ (x \ to \ infty: \)

\ [
{{K_ \ infty} = \ lim \ limits_ {x \ to \ infty} K \ left (x \ right)}
= {\ lim \ limits_ {x \ to \ infty} \ frac {{2x \ left ({1 + {x ^ 2}} \ right)}} {{{{\ left [{{{{\ left ({1 + {x ^ 2}} \ right)} ^ 2} + 1} \ справа]} ^ {\ large \ frac {3} {2} \ normalsize}}}}}
= {\ lim \ limits_ {x \ to \ infty} \ frac {{2 {x ^ 3} + 2x}} {{{{\ left ({{x ^ 4} + 2 {x ^ 2} + 2} \ right)} ^ {\ large \ frac {3} {2} \ normalsize}}}}}
= {\ lim \ limits_ {x \ to \ infty} \ frac {{\ frac {{2 {x ^ 3} + 2x}} {{{x ^ 6}}}}}} {{\ frac {{{{\ left ( {{x ^ 4} + 2 {x ^ 2} + 2} \ right)} ^ {\ large \ frac {3} {2} \ normalsize}}}} {{{x ^ 6}}}}}}
= {\ lim \ limits_ {x \ to \ infty} \ frac {{\ frac {2} {{{x ^ 3}}} + \ frac {2} {{{x ^ 5}}}}} { {{{\ left ({\ frac {{{x ^ 4} + 2 {x ^ 2} + 2}} {{{x ^ 4}}}} \ right)} ^ {\ large \ frac {3} {2} \ normalsize}}}}}
= {\ lim \ limits_ {x \ to \ infty} \ frac {{\ frac {2} {{{x ^ 3}}}} + \ frac {2} {{ {x ^ 5}}}}} {{{{\ left ({1 + \ frac {2} {{{x ^ 2}}}} + \ frac {2} {{{x ^ 4}}}}} \ справа)} ^ {\ large \ frac {3} {2} \ normalsize}}}}}
= {\ frac {0} {1} = 0. {\ frac {3 } {2}}}}}.{\ frac {3} {2}}}}}.} \]

Обратите внимание, что если степень \ (n \) является дробной, основания в параметрических уравнениях (функции синуса и косинуса) должны быть определены положительно. Это накладывает ограничения на параметр \ (t, \), который изменяется в диапазоне \ (0 \ lt t \ lt \ large {\ frac {\ pi} {2}} \ normalsize. \)

Эту задачу предложил Джон Эрбес. Мы очень благодарны за это!

ответов на викторину 1-4

Ответы на викторину 1-4

Вопрос 1. Вектор b представляет собой линейную комбинацию столбцов матрицы A есть и только тогда, когда уравнение Ax = b имеет хотя бы одно решение.

Ответ: Верно. Это два способа сказать одно и то же.

Вопрос 2. Уравнение Ax = b непротиворечиво, если расширенная матрица [A b] имеет позицию поворота в каждой строке.

Ответ: Неверно. Система несовместима, если [A b] имеет стержень в последний («б») столбец.м находится в промежутке столбцов, что является другим способом сказать, что любой b является линейное сочетание столбцов. Тогда уравнение непротиворечиво (см. Вопрос 1).

Вопрос 4 . Если уравнение Ax = b несовместимо, то b не входит в набор, охваченный столбцами A.

Ответ: Верно.

Вопрос 5. Множество решений линейной системы, расширенная матрица которой is [a b c d] то же самое, что и множество решений Ax = d, где A = [a b c].4. Что из следующего верно?

Ответ: Пусть x = x1 + x2. Тогда Ax = A (x1 + x2) = Ax1 + Ax2 = y1 + y2 на дистрибутивность умножения матриц (см. задачу 35). Таким образом, x является решение Ax = y, без дополнительной информации. Однако x не обязательно общее решение, поскольку Ax = y может иметь бесконечное число решений.

Назад к математике 308A, неделя 2, стр.

mvrnorm | R Документация

Детали

Для обеспечения репликации сделано очень небольшое изменение.Код в MASS :: mvrnorm рисует случайную выборку и заполняет матрицу по столбцу, а затем эта матрица раскладывается. Перемена реализованный здесь заполняет эту матрицу по строкам, и проблема в том, что устранено.

Замечены некоторые особенности при изменении ковариационной матрицы от диагональной матрицы к более общей симметричной матрице (ненулевые элементы недиагональные). Когда ковариация строго диагональ, то только один столбец смоделированной многомерной обычные данные будут реплицированы, а другие – нет.Это очень неприятные последствия для моделирования, которое рисует образцы различных размеров, а затем основывать расчеты на отдельных смоделированных столбцы (т.е. одни столбцы идентичны, другие полностью некоррелированный).

Примеры

  # NOT RUN {
библиотека (МАССА)
библиотека (рокчелк)

set.seed (12345)
X0 <- МАССА :: mvrnorm (n = 10, mu = c (0,0,0), Sigma = diag (3))
## создать меньший набор данных, начиная с той же позиции
set.seed (12345)
X1 <- МАССА :: mvrnorm (n = 5, mu = c (0,0,0), Sigma = diag (3))
## Создайте больший набор данных
набор.семя (12345)
X2 <- МАССА :: mvrnorm (n = 15, mu = c (0,0,0), Sigma = diag (3))
## Первые 5 строк в X0, X1 и X2 не совпадают
X0
X1
X2
set.seed (12345)
Y0 <- mvrnorm (n = 10, mu = c (0,0,0), Sigma = diag (3))
set.seed (12345)
Y1 <- mvrnorm (n = 5, mu = c (0,0,0), Sigma = diag (3))
set.seed (12345)
Y2 <- mvrnorm (n = 15, mu = c (0,0,0), Sigma = diag (3))
# обратите внимание, что результаты в первых 5 строках совпадают:
Y0
Y1
Y2
идентичные (Y0 [1: 5,], Y1 [1: 5,])
идентичные (Y1 [1: 5,], Y2 [1: 5,])

myR <- lazyCor (X = 0,3, d = 5)
mySD <- c (0.5, 0,5, 0,5, 1,5, 1,5)
myCov <- lazyCov (Rho = myR, Sd = mySD)

set.seed (12345)
X0 <- МАССА :: mvrnorm (n = 10, mu = rep (0, 5), Sigma = myCov)
## создать меньший набор данных, начиная с той же позиции
set.seed (12345)
X1 <- МАССА :: mvrnorm (n = 5, mu = rep (0, 5), Sigma = myCov)
X0
X1
## 'set.seed (12345)
Y0 <- rockchalk :: mvrnorm (n = 10, mu = rep (0, 5), Sigma = myCov)
## создать меньший набор данных, начиная с той же позиции
set.seed (12345)
Y1 <- rockchalk :: mvrnorm (n = 5, mu = rep (0, 5), Sigma = myCov)
Y0
Y1

#}
  

Примеры сообщества

Похоже, примеров пока нет.

The SpaceR3

Если три взаимно перпендикулярных копии реальной линии пересекаются в своих началах, любая точка в результирующем пространстве определяется упорядоченной тройной действительных чисел ( x ₁ , x ₂ , х ₃ ). Набор всех упорядоченных троек действительных чисел называется 3-пробел , обозначается R ³ («R три»).См. Рисунок.

Рисунок 1

Операции сложения и скалярного умножения, указанные в R ² , переносятся на R ³ :

Векторы в R ³ называются 3-векторами (потому что есть 3 компонента), и геометрические описания сложения и скалярного умножения, данные для 2-векторов, также переносятся на 3-векторы.

Пример 1 : Если x = (3, 0, 4) и y = (2, 1, −1), то

Стандартные базисные векторы в R ³ .Поскольку для любого вектора x = ( x ₁ , x ₂ , x ₃ ) в R ³ ,

стандартные базисные векторы в R ³ - это

Любой вектор x в R ³ , следовательно, может быть записан как

См. Рисунок.

Рисунок 2

Пример 2 : Какой вектор нужно добавить к a = (1, 3, 1), чтобы получить b = (3, 1, 5)?

Пусть c - искомый вектор; тогда a + c = b .Следовательно,

Обратите внимание, что c - это вектор ab ; см. рисунок.

Рисунок 3

Перекрестное произведение . До сих пор вы видели, как можно складывать (или вычитать) два вектора и как вектор умножается на скаляр. Можно ли как-то «умножить» два вектора? Один из способов определить произведение двух векторов - который выполняется только с векторами в R ³ - состоит в том, чтобы сформировать их перекрестное произведение .Пусть x = ( x ₁ , x ₂ , x ₃ ) и y = ( y ₁ , y 03 2 , ₃ ) быть двумя векторами в R ³ . Перекрестное произведение (или векторное произведение ) x и y определяется следующим образом:

Перекрестное произведение двух векторов является вектором, и, возможно, наиболее важной характеристикой этого векторного произведения является то, что оно перпендикулярно обоим факторам .(Это будет продемонстрировано при введении скалярного произведения.) То есть вектор x x y будет перпендикулярен как x , так и y ; см. рисунок. [Здесь есть двусмысленность: плоскость на рисунке, содержащая векторы x и y , имеет два перпендикулярных направления: «вверх» и «вниз». Какой из них выбирает кросс-произведение? Ответ дает правило правой руки : поместите запястье правой руки в общую начальную точку x и y , указав пальцами вдоль x ; когда вы сгибаете пальцы в направлении x , ваш большой палец будет указывать в направлении x x y .Это показывает, что перекрестное произведение антикоммутативно: y x x = - ( x x y ).]

Рисунок 4

Длина вектора x = ( x ₁ , x ₂ , x ₃ ) в R ³ , что обозначается ∥ x ∥ , задается уравнением

результат, который следует из теоремы Пифагора (см. Обсуждение перед рисунком ниже).В то время как направление векторного произведения x и y определяется ортогональностью и правилом правой руки, величина (то есть длина) x x y равна площади параллелограмма, натянутого на векторы x и y .

Так как площадь параллелограмма на рисунке

выполняется следующее уравнение:

, где θ - угол между x и y .

Рисунок 5

Пример 3 : Пусть x = (2, 3, 0) и y = (−1, 1, 4) будут векторами положения в R ³ . Вычислите площадь треугольника, вершины которого являются началом и конечными точками x и y , и определите угол между векторами x и y .

Так как площадь треугольника составляет половину площади параллелограмма, охватываемого x и y ,

Теперь, поскольку ‖ x x y ‖ = ‖ x ‖ · ‖ y ‖ sin θ, угол между x и y равен

Следовательно, θ = sin ⁻¹ √233 / 234.

 set.seed (0)
treeVolume <- c (rnorm (75, среднее = 36500, sd = 2000))
т.test (treeVolume, mu = 39000) # Ho: mu = 39000
 
Один образец t-теста

данные: treeVolume
t = -12,2883, df = 74, значение p <2,2e-16
альтернативная гипотеза: истинное среднее не равно 39000
95-процентный доверительный интервал:
 36033,60 36861,38
примерные оценки:
среднее значение x
 36447,49
  

  t = -12,2883, p-значение <2,2e-16  

 set.seed (2820)

preTreat <- c (rnorm (1000, среднее = 145, sd = 9))
postTreat <- c (rnorm (1000, среднее = 138, sd = 8))

t.test (preTreat, postTreat, paired = ИСТИНА)
 
Парный t-тест

данные: preTreat и postTreat
t = 19,7514, df = 999, значение p <2,2e-16
Альтернативная гипотеза: истинная разница в средних не равна 0
95-процентный доверительный интервал:
 6.703959 8,183011
примерные оценки:
среднее значение различий
               7,443485
  

  t = 19,7514, p-значение <2,2e-16  

 set.seed (0)  ClevelandSpending <- rnorm (50, среднее = 250, стандартное отклонение = 75)
Нью-Йоркские расходы <- rnorm (50, среднее = 300, стандартное отклонение = 80)  t.test (ClevelandSpending, NYSpending, var.равно = ИСТИНА)   Двухвыборочный t-критерий  данные: ClevelandSpending и NYSpending
t = -3,6361, df = 98, значение p = 0,0004433
Альтернативная гипотеза: истинная разница в средних не равна 0
95-процентный доверительный интервал:
 -77,1608 -22,6745
примерные оценки:
среднее значение x среднее значение y
 251.