127001: localhost – Apache для Windows

Содержание

127.0.0.1 — Lurkmore

— Я тебя сейчас нюкну, говори свой IP!!!11 — 127.0.0.1, хуле скрывать-то?

Ping localhost

127.0.0.1 (а если точнее, сеть 127/8, он же loopback, он же localhost) — IP-адрес, с помощью которого компьютер может обратиться по сети к самому себе, независимо от наличия у него подключения к сети, вида оной и адреса компьютера в ней.

[править] Использование

Применяется к ламерам и особенно кулхацкерам при появлении у них желания чего-нибудь поломать по сети. В таком случае приносит лулз. Нубы, как правило, иммунны. Имеются, впрочем, и добрые шутки, типа «There is no place like 127.0.0.1!».

Also, при определённых стараниях localhost (а точнее, подразумевающийся под ним IP-адрес 127.0.0.1) позволяет раз и навсегда забанить неугодные юзеру сайты и ад-попапы (в винде это быстрее делается файрволлом со встроенным блокировщиком рекламы, но некоторым ведь хочется выебнуться, правда?), тем самым сэкономив некоторое количество трафика, времени и нервных клеток (если, правда, они остались после ручной забивки файла hosts).

Бан локалхоста на Уютненьком

ОНО: народ, я новый нюк нашел, ща всех поубиваю!!! ОНО: дайте ай-пи какого-нить лоха!!! Кто-то: 127.0.0.1 ОНО: пасиба! ОНО: щас он подохнет * ОНО вышло из чата

Поскольку на локальной машине никто не запрещает запускать Апач со всеми прибамбасами (php, python, mysql, postgresql и т. д.), то зачастую пользователю, желающему на халяву получить минимум LAMP-хостинг, советуют 127.0.0.1 или, чаще, его символический вариант localhost.

xxx: народ подскажите хостинг с пхп и мускул бесплатный. мне сказали надо пхп 5 и мускул. нужно срочно! yyy: localhost подойдет? xxx: пасиба.

Так как локальная петля существует всегда, даже когда нет сети, то можно немного пофапать:

Pinger: пинговать локалхост, это тоже самое что дрочить – пинг есть а инета нет

392086

[править] Полезные примеры

В виндушечке

Баним рекламу гугля

127.0.0.1 googlesyndication.com

127.0.0.1 pagead2.googlesyndication.com

127.0.0.1 www.google-analytics.com

127.0.0.1 googleads.g.doubleclick.net

127.0.0.1 www.googletagservices.com

127.0.0.1 googletagservices.com

127.0.0.1 partner.googleadservices.com

127.0.0.1 googlesyndication.com

127.0.0.1 adservice.google.com.ua

127.0.0.1 tpc.googlesyndication.com

…и инфернального порождения Тёмы

127.0.0.1 an.yandex.ru

В расово верных линуксах: sudo route add <siteaddr> gw localhost, а в юниксах даже без «gw»: sudo route add <siteaddr> localhost

В винде, естественно, все гораздо проще:

cmd /C netsh routing ip add filter name=”Virtual Private Connection” filtertype=input srcaddr=<siteaddr> srcmask=255.255.255.255 dstaddr=0.0.0.0 dstmask=0.0.0.0 proto=any

В принципе, любители гуёв могут воспользоваться этой тулзой, но это не путь джедаев.

Более православно использовать 127.0.0.0, так как это не угнетает логи локального веб-сервера лишним мусором. Иногда работает в разы быстрее, но далеко не всегда:

127.0.0.0 ad.somesite.com

127.0.0.0 some.other.banner.net

Подобные строчки заставляют систему искать указанные сайты не в Инете, а на пустом месте. WinSock просто не пытается соединиться. В Windows 7 (возможно, и в Vista) нужно писать 0.0.0.0, иначе система будет реагировать примерно так же, как на недоступный адрес. С тем же успехом вместо 127.0.0.0 можно написать что-то вроде 666.777.888.999, результат будет одинаковый.

ntpd использует адрес 127.127.1.0 для обращения к собственным часам компьютера, адрес 127.127.20.0 — для обработки сигнала от GPS-приёмника, и т. д. Удалённый рабочий стол в большинстве версий Windows обычно не позволяет подключиться к своему IP как к 127.0.0.1, зато позволяет к 127.0.0.2 и пр. Вот такой вот диапазончик просрали-с. А адреса-то кончаются!

Домен fuf.me также ведёт на лупбэк как и ещё некоторые адреса.

Тот же loopback по версии IPv6 — 0:0:0:0:0:0:0:1 aka ::1.

[править] Что будет, если дудосить локалхост

Если дудосить локалхост, комп просто начнёт подвисать, а при использовании для этого LOIC картинка с лазером, который вот-вот устроит апокалипсис, может не отображаться, а выдавать ошибку 404 от интернет эксплорера. При использовании множественного пинга комп начнёт виснуть ещё больше.

[править] Почтовый индекс

Некоторые утверждают, что 127001 — индекс Главпочтамта России. Однако поиск отделения почтовой связи с индексом 127001 на сайте Почты России выдает сообщение «Объекты почтовой связи с данным индексом не существуют! Проверьте правильность ввода индекса либо воспользуйтесь поиском ОПС по зоне обслуживания».

Так что индекса 127001 в этой стране вообще нет. А 127000 был. Периодически из зомбоящика доносилось «Наш адрес: 127000, Москва, ул. Академика Королёва, 12…». Правда, сейчас индекс останкинского телецентра изменён на 127427.

Олдфаги однако искали индекс 127001 еще в поисковике Апорт. На то время таки индекс был в районе нынешнего метро Парк Победы в Москве. Старые организации например [1] тащемта.

Так что это, скорее всего, сисадминский прикол. Либо просто сократили некоторые почтовые отделения связи. Некоторые ранее существовавшие индексы своего города поисковиком на сайте так не находятся.

Зато письмо с таким индексом вернут отправителю. Так что все правильно.

А индекс Главпочтамта, если кому интересно, 101000.

	127.0.0.1 — часть точного мира чисел

127.0.0.1 — Lurkmore

— Я тебя сейчас нюкну, говори свой IP!!!11 — 127.0.0.1, хуле скрывать-то?

Ping localhost

[править] Использование

Бан локалхоста на Уютненьком

Так как локальная петля существует всегда, даже когда нет сети, то можно немного пофапать:

Pinger: пинговать локалхост, это тоже самое что дрочить – пинг есть а инета нет

392086

[править] Полезные примеры

В виндушечке

Баним рекламу гугля

127.0.0.1 googlesyndication.com

127.0.0.1 pagead2.googlesyndication.com

127.0.0.1 www.google-analytics.com

127.0.0.1 googleads.g.doubleclick.net

127.0.0.1 www.googletagservices.com

127.0.0.1 googletagservices.com

127.0.0.1 partner.googleadservices.com

127.0.0.1 googlesyndication.com

127.0.0.1 adservice.google.com.ua

127.0.0.1 tpc.googlesyndication.com

…и инфернального порождения Тёмы

127.0.0.1 an.yandex.ru

В расово верных линуксах: sudo route add <siteaddr> gw localhost, а в юниксах даже без «gw»: sudo route add <siteaddr> localhost

В винде, естественно, все гораздо проще:

cmd /C netsh routing ip add filter name=”Virtual Private Connection” filtertype=input srcaddr=<siteaddr> srcmask=255.255.255.255 dstaddr=0.0.0.0 dstmask=0.0.0.0 proto=any

В принципе, любители гуёв могут воспользоваться этой тулзой, но это не путь джедаев.

127.0.0.0 ad.somesite.com

127.0.0.0 some.other.banner.net

Драйвер loopback-интерфейса приучен отвечать не только на запросы к 127.0.0.1, но и на любой адрес из сети 127.0.0.0/8 — это легко проверяется по таблице маршрутизации или командой ping 127.128.129.130. Некоторые программы активно эксплуатируют такую многозначность: например, сервер точного времени ntpd использует адрес 127.127.1.0 для обращения к собственным часам компьютера, адрес 127.127.20.0 — для обработки сигнала от GPS-приёмника, и т. д. Удалённый рабочий стол в большинстве версий Windows обычно не позволяет подключиться к своему IP как к 127.0.0.1, зато позволяет к 127.0.0.2 и пр. Вот такой вот диапазончик просрали-с. А адреса-то кончаются!

Домен fuf.me также ведёт на лупбэк как и ещё некоторые адреса.

Тот же loopback по версии IPv6 — 0:0:0:0:0:0:0:1 aka ::1.

[править] Что будет, если дудосить локалхост

[править] Почтовый индекс

Зато письмо с таким индексом вернут отправителю. Так что все правильно.

А индекс Главпочтамта, если кому интересно, 101000.

	127.0.0.1 — часть точного мира чисел

127.0.0.1 — Lurkmore

— Я тебя сейчас нюкну, говори свой IP!!!11 — 127.0.0.1, хуле скрывать-то?

Ping localhost

[править] Использование

Бан локалхоста на Уютненьком

Так как локальная петля существует всегда, даже когда нет сети, то можно немного пофапать:

Pinger: пинговать локалхост, это тоже самое что дрочить – пинг есть а инета нет

392086

[править] Полезные примеры

В виндушечке

Баним рекламу гугля

127.0.0.1 googlesyndication.com

127.0.0.1 pagead2.googlesyndication.com

127.0.0.1 www.google-analytics.com

127.0.0.1 googleads.g.doubleclick.net

127.0.0.1 www.googletagservices.com

127.0.0.1 googletagservices.com

127.0.0.1 partner.googleadservices.com

127.0.0.1 googlesyndication.com

127.0.0.1 adservice.google.com.ua

127.0.0.1 tpc.googlesyndication.com

…и инфернального порождения Тёмы

127.0.0.1 an.yandex.ru

В расово верных линуксах: sudo route add <siteaddr> gw localhost, а в юниксах даже без «gw»: sudo route add <siteaddr> localhost

В винде, естественно, все гораздо проще:

cmd /C netsh routing ip add filter name=”Virtual Private Connection” filtertype=input srcaddr=<siteaddr> srcmask=255.255.255.255 dstaddr=0.0.0.0 dstmask=0.0.0.0 proto=any

В принципе, любители гуёв могут воспользоваться этой тулзой, но это не путь джедаев.

127.0.0.0 ad.somesite.com

127.0.0.0 some.other.banner.net

Домен fuf.me также ведёт на лупбэк как и ещё некоторые адреса.

Тот же loopback по версии IPv6 — 0:0:0:0:0:0:0:1 aka ::1.

[править] Что будет, если дудосить локалхост

[править] Почтовый индекс

Зато письмо с таким индексом вернут отправителю. Так что все правильно.

А индекс Главпочтамта, если кому интересно, 101000.

	127.0.0.1 — часть точного мира чисел

Комод TF-127001 – ON24 Мебель и интерьер

Комод TF-127001 – ON24 Мебель и интерьер Мы используем на своей странице файлы cookie для сбора информации, чтобы предоставить Вам лучший сервис и подходящие товары.
Если желаете продолжить как раньше, нажмите кнопку. В этом случае мы предполагаем, что вы соглашаетесь с файлами cookie нашего сайта. Читать дальше Близко \n\n\nЗа каждую регистрацию на Ваш счет поступит 10 €, а на счет зарегистрировавшегося с рекомендательным кодом друга 20 €!
\n”,”w.toode.tiedproducts.more”:”Скачать ещё сопутствующие товары”,”w.toode.option.label.placeholder”:”Выберите”,”w.toode.tekst.heading2″:”Описание {pealkiri}”,”errors.phone”:”Телефон отсутствует или дефектен.”,”w.mobile.konto.campaign.info”:””,”w.toode.related.family.less”:”Показать меньше продуктов”,”w.menu.noprod”:”Нужный товар не найден?”,”w.info.rekl.submit”:”Отправить”,”w.toode.kkk”:”Повторяющиеся вопросы”,”w.mobile.account_refferal_share_msg”:”Отправь в Messenger”,”w.menu.jm.summa”:”Сумма”,”w.toode.related.similar.less”:”Показать меньше продуктов”,”w.mobile.saal.toode.banner”:”\n\n”,”w.ostukorv.jm.firstname”:”Имя\n”,”w.saal.reasta.soodus”:”Максимальная скидка”,”w.mobile.support_info_phone”:”43 54 370″,”w.mobile.account_refferal_title”:”Ваш личный рекомендательный код”,”w.menu.minukonto”:”Мой профиль”,”w.mobile.support_info_phone_title”:”Телефон”,”w.klient.orders.date”:”Дата”,”w.klient.register.hasConsentedToEmailAds”:”По эл.почте”,”w.toode.tekst.heading”:”Описание товара”,”w.toode.tiedproducts.less”:”Уменьшить сопутствующие товары”,”js.errors.toode.no_viim_m66t_3″:”Уточни выбор и отделку!\n”,”w.toode.ojm.uurilisa”:”Условия рассрочки”,”w.mobile.kink.content”:” Скидка “,”w.toode.mobile.choose_photos”:”Смотри фото”,”w.toode.tarneaeg.kysi”:”Спроси срок доставки.”,”w.unsubscribe_a.instruction”:”Если Вы не желаете получать уведомления о поступлении денег на счёт ON24, тогда введите свой адрес электронной почты и нажмите на кнопку \”Удалить\””,”w.toode.mobile.calculator”:”Калькулятор рассрочки”,”w.info.rekl.email”:”Адрес эл. почты”,”w.klient.name”:”Имя”,”w.recoverpwd.sucess”:”Пароль выслан на Ваш адрес электронной почты.
Пожалуйста проверте входящии сообщения.”,”w.mobile.account_refferal_share_fb”:”Поделись в Facebook”,”w.klient.salvesta”:”Запомни изменения”,”errors.ostukorv.jm.kinnita”:”Для оформления заказа, пожалуйста, подтвердите, что Вы прочитали и согласны с условиями оплаты в рассрочку.”,”w.toode.mobile.choose_dimension”:”Смотри габариты”,”filter.clear”:”Очистить фильтры”,”errors.postal”:”Почтовый индекс отсутствует или дефектен.”,”w.toode.related.similar.more”:”Показать больше продуктов”,”w.noprod.sucess”:”Передача запроса прошла успешно”,”w.saal.loeedasi”:”Читай дальше…”,”w.info.rekl.name”:”Имя и фамилия”,”w.konto.protsendi_kasutamine”:”Возвращаемую сумму с совершённой покупки можно использовать через две недели после получения товара.”,”w.unsubscribe_a.sucess”:”

Удалён {email} из списка получателей уведомлений о состоянии счёта ON24.\nПодтверждение будет выслано по электронной почте.

“,”w.mobile.account_refferal_earn”:”Как еще заработать деньги на счет клиента?”,”cookie-consent.info.title”:”Kуки (cookies)”,”w.toode.eritell”:”товар заказывается по спецзаказу и право возврата в течение 14 дней на него не распространяется”,”w.toode.jarelmaks.price.saal.new”:” или от {kuumaks} в месяц”,”w.info.rekl.toodeid”:”Код товара”,”w.toode.soodushind”:”Цена клиенту”,”w.klient.orders.state”:”Статус”,”w.klient.register.consent.info”:””,”errors.name_buyer”:”Имя плательщика отсутствует или дефектно.”,”w.menu.jm.intress”:”Процент”,”w.toode.related.family”:”Другие продукты с этой серии {pealkiri}”,”w.menu.noprod.url”:”/info/вы_не_нашли_подходящего_изделия”,”w.saal.reasta.tarne”:”Cрок доставки”,”w.unsubscribe.nupp”:”Удалить”,”w.klient.parool_description”:”Вы должны ввести свой текущий пароль, чтобы изменить адрес электронной почты и пароль.”,”w.info.noprod.name”:”Моё имя”,”w.mobile.filt.title”:”Фильтры”,”w.ostukorv.makseviis.vali”:”Выбор оплаты”,”w.toode.tarneaeg.ISE”:”Срок доставки \”Tовар со склада\””,”w.ostukorv.epost”:”Адрес эл.почты”,”meta.title.add”:”ON24 Мебель и интерьер”,”w.toode.jarelmaks.price.soodus.saal”:” или от {kuumaks} в месяц”,”w.mobile.filt.apply”:”Применит”,”w.toode.jarelmaks.price2″:”Рассрочка от {kuumaks} в месяц”,”w.curr.names”:”евро”,”w.saal.reasta”:”Сортировать”,”w.search.no_res”:”
\nК Вашему поиску не подошёл ни один документ.\n

Убедитесь чтобы слова были без ошибок.
Попробуйте разные вокабулы.
Попробуйте больше всеобщих вокабул.

“,”w.menu.eri”:”Специальные предложения”,”errors.city”:”Город отсутствует или очень длинное название”,”w.info.noprod.info”:”Обязательно заполните обозначенные поля.”,”w.toode.paidinfull”:”Для постоянного клиента до”,”w.ostukorv.tanav.maja”:”Улица, дом, квартира”,”w.menu.transport”:”Транспорт”,”w.saal.reasta.kallimast”:”Самые дорогие наверху”,”w.info.noprod.email”:”Адрес моей эл.почты”,”w.menu.noprod.search”:”Если Вы не нашли нужный продукт, нажмите здесь, и мы поможем.”,”w.toode.ostukorv.lisa”:”Добавь в корзину”,”w.saal.tooteviimistlused”:”Обработки товаров”,”w.toode.tarneaeg.HOME”:”Срок доставки”,”w.breadcrumb.productcode”:”Код продукта:”,”w.saal.select-grid-view”:”Сетка”,”w.mobile.support_name”:””,”w.klient.kampaania.sektsioon”:”Участие в кампании”,”w.klient.consent.credit”:”Уведомление об аккаунте”,”w.info.rekl.infotekst”:”По возможности более точное описание проблемы,
обозначение повреждённой детали.”,”w.lk.jargmine”:”Следующие ›”,”w.konto.omanik”:”Владелец счета”,”w.konto.campaign.info”:””,”w.toode.jarelmaks.price.soodus”:” или от {kuumaks} в месяц”,”w.toode.tootekood”:”Код изделия:%20″,”w.mobile.support_line_3″:”(по рабочим дням 9.00-18.00)”,”w.toode.hind_alates”:”Цена начиная от”,”w.mobile.support_line_1″:”Менеджер по обслуживанию: Кэтрин Хиет”,”w.toode.uus”:”НОВИНКА”,”w.klient.register.hasConsentedToTargetedAds”:”С персональной рекламой”,”w.info.rekl.saadetud”:”Ваша рекламация передана службе обслуживания клиентов ON24. Мы свяжемся с Вами в течение ближайшего рабочего дня.”,”w.klient.kampaania.button”:”Прими участие в кампании”,”filter.collapse”:”Показать меньше”,”w.klient.orders.transport”:”Вид транспорта”,”w.saal.toode.fast_shipping”:”Быстрая доставка!”,”w.menu.jm.kuumakse”:”Месячный платеж”,”w.info.rekl.tingimused”:”Подтверждаю, что при получении и разборке товара я исходил(а) из общих условий\nON24 пунктов 5.7 и 7.”,”w.menu.jm.periood”:”Период”,”errors.isikukood”:”Персональный код отсутствует или дефектный.”,”w.toode.option.label.selected”:””,”w.klient.rec_code.sektsioon”:”Рекомендательный код”,”w.mobile.saal.toode.fast_shipping”:”Быстрая доставка”,”w.saal.vaatalisaks”:”посмотрите дополнительно”,”w.product.texts.brand”:”Смотрите другие товары бренда {brand}”,”w.menu.jm.leping”:”Договор”,”w.klient.uusparool”:”Новый пароль”,”w.saal.toode.banner”:””,”w.klient.register.consent”:”Желаю получать информацию о новых товарах и рекламные предложения:”,”w.konto.orders”:”История заказов”,”w.info.noprod.phone.info”:”Если Вы желаете, чтобы мы Вам позвонили, то напишите свой номер телефона.”,”w.toode.option.label.deselect”:””}},”gtmId”:”GTM-P6W9RJ”,”contextEmail”:”[email protected]”,”requiresCaptcha”:true,”recaptchaSitekey”:”6Le4LP8UAAAAALhTuEqIfGH04aPbhLGbR8mQJa2M”} ; var vue_view_environment = ‘desktop’;

Сделано у нас – Нам есть чем гордиться!

Обзор дорожных проектов, ранее не опубликованных на сайте

© pchela.news

На трассе М-5 в Челябинской области открыт новый четырёхполосный участок.

По заказу ФКУ УпрДор «Южный Урал» реконструирован участок трассы возле Чебаркуля в Челябинской области. 23 декабря на нём открыли движение. Первой по расширенной трассе прошла колонна дорожной техники.

Двухполосный отрезок км 1790 — км 1799 в районе Чебаркуля уже давно не справлялся с интенсивностью движения: в сутки здесь проезжает более десяти тысяч автомобилей.

Вместо двух полос на реконструированном участке теперь четыре. Пропускная способность увеличилась в четыре раза.

читать дальше

Как сообщила пресс-служба компании «УралСпецТранс», завод разработал и освоил выпуск новой модели 2-осной сорокакубовой полуприцеп-цистерны ППЦ 40-24Д-3 УСТ 9465, предназначенной для перевозки ГСМ.

Цистерна чемоданного типа состоит из трех изолированных секций объемом объемом 21, 12 и 7 м3 и одной резервной объемом 2 м3.

Новая модель стала девятой моделью в линейке, выпускаемых заводом рамных двухосных полуприцеп-цистерн с цистернами емкостью от 31 до 42 м3 .

читать дальше

©Видео с youtube.com/ https://www.youtube.com/embed/nPIaf5PUOxk

Как сообщила пресс-служба правительства Ростовской области, в феврале 2021 г в Бразилию была отправлена очередная партия сельхозтехники производства компании «Ростсельмаш», а именно пресс-подборщики тюковые TUKAN 1600, которые предназначены для сбора валков сена естественных и сеяных трав или соломы, их прессовании в прямоугольные тюки и обвязке шпагатом с максимальной производительностью до 10 тюков в час.

Первая поставка из шести пресс-подборщиков в бразильский город Кампу Ларгу (штат Парана) состоялась в мае 2020 года.

Решение о поставке пресс-подборщиков модели TUKAN 1600 в Бразилию было принято бразильскими аграриями в апреле 2020 года (о чем сообщил сайт «Сделано у Нас»).

Первая поставка сельхозтехники производства компании «Ростсельмаш» бразильским фермерам состоялась в 2018 году.

читать дальше

Центр испытаний «НАМИ» — ведущий в стране центр доводочных и сертификационных испытаний транспортных средств, получивший международное признание. Услугами автополигона пользуются более 1700 предприятий и организаций в России, ближнем и дальнем зарубежье.

читать дальше

127001 (Ярно) · GitHub

Особенности

Участник Арктического кодекса Vault

Организации

17 публикаций в прошлом году

АпрМайИюньИюлАвгСентОктНоябДекЯнфевМарСолнцеПнВтСрЧтПтСб

Вклад деятельности

Март 2021 г.

Последовательный вызов вызывает ошибку.js путь

Фактическое поведение Мы видим, что запросы к файлам .js запрашиваются в подкаталогах и конечных точках api. При использовании браузера этого не происходит…

5 Комментарии

Открыто 1 Другие проблема в 1 хранилище

интершоп / интершоп-pwa

1 закрыто Вы не можете выполнить это действие в настоящее время.Вы вошли в систему с другой вкладкой или окном. Перезагрузите, чтобы обновить сеанс. Вы вышли из системы на другой вкладке или в другом окне. Перезагрузите, чтобы обновить сеанс.

Оценка концентрации свободного гемоглобина в мешках с кровью методом спектроскопии диффузного отражения

1. Введение

Во время хранения эритроциты подвергаются неизбежным биохимическим и морфологическим изменениям, называемым накопительными повреждениями. ¹ Эритроциты лизируют, и клеточный гемоглобин высвобождается в среду для суспендирования клеток.Концентрация свободного гемоглобина (FHB) во внеклеточной среде указывает на серьезность повреждений накопления. Регулирующие органы определяют уровень гемолиза, который рассчитывается на основе концентрации FHB, для измерения качества крови. Руководства в Европе рекомендуют максимальный уровень гемолиза 0,8% для продуктов крови, а в Северной Америке рекомендуется 1,0%. ² Однако в современной практике контроль качества в национальных банках крови осуществляется методом отбора проб; некоторые единицы крови выбираются случайным образом из популяции, и их уровни гемолиза измеряются на дату истечения срока годности.³ Поскольку метод анализа является деструктивным, он не применим ко всем единицам крови перед переливанием.

В настоящее время единственный метод оценки качества перед переливанием включает физический осмотр единиц и визуальную оценку гемолиза. ⁴ ^, ⁵ Покраснение суспендирующей среды визуально проверяется на наличие FHB, который меняет цвет бесклеточной среды с желтого на розовый. В случае чрезмерных концентраций FHB цвет становится темно-красным или почти пурпурным.Тем не менее, визуальная оценка уровня гемолиза субъективна и по большей части имеет решающее значение. ⁶

Вместо восприятия цвета было предложено неинвазивное спектрометрическое измерение цвета. ⁷ В этом исследовании параметры цвета, полученные на основе измерений диффузного отражения, контролировались во время хранения, и было обнаружено, что они коррелируют с уровнем гемолиза. ⁷ Результаты этого исследования показали, что спектроскопия диффузного отражения (DRS) может использоваться для оценки качества хранимой крови; физиологические изменения при хранении влияют на оптические свойства крови.DRS также может анализировать оптические свойства более глубоких слоев многослойных мутных образцов, таких как кровь, под тонким пластиковым слоем. ⁸ ^– ¹¹

В данной работе спектры диффузного отражения суспензий эритроцитов (ES) были исследованы во время хранения. Целью данного исследования является моделирование влияния накопления на оптические свойства ES для оценки концентрации FHB.

2. Принципы

2.1.

Теория диффузного отражения

Распространение света в мутной среде, такой как ES, обычно выражается уравнением переноса излучения.¹² Более простая экспоненциальная модель была предложена Zonios et al. для моделирования диффузного отражения от однородной полубесконечной мутной среды. ¹³ В экспоненциальной модели интегральный член уравнения переноса излучения не учитывался и предполагалось, что свет ослабляется в среде в соответствии с коэффициентами поглощения и приведенными коэффициентами рассеяния. На основе этой модели было разработано полуэмпирическое уравнение для связи измеренного коэффициента диффузного отражения (Rm) с оптическими свойствами: ¹³

Ур.(1)

Rm (λ) = c1 + μs, ES ′ (λ) c2 × μa, ES (λ) + c3.

Здесь μa, ES и μs, ES ‘соответствуют коэффициентам поглощения и приведенного рассеяния ES, соответственно, а c1, c2 и c3 – эмпирические параметры. В этом исследовании к полуэмпирической модели был добавлен параметр c1. Это в основном зависит от оптических свойств мешка с кровью. Другие параметры c2 и c3 связаны с геометрией измерения в дополнение к оптическим свойствам мешка для крови. Это полуэмпирическое выражение [Ур. (1)] показывает две фундаментальные характеристики коэффициента отражения: обратную зависимость от коэффициента поглощения и линейную зависимость от приведенного коэффициента рассеяния.¹⁴ Модель отражательной способности проверена во многих биологических исследованиях. ¹⁵ ^– ¹⁸

2.2.

Суспензии эритроцитов и их оптические свойства

В общем процессе подготовки ES кровь собирается в систему из нескольких мешков, предварительно заполненную антикоагулянтом, содержащим раствор цитрата, фосфата и декстрозы. Собранная цельная кровь центрифугируется, а затем плазма переносится в другой мешок. 100 мл консервирующего раствора, содержащего физиологический раствор, аденин, гуанин и маннит (SAGM), добавляют к оставшимся эритроцитам для замещения плазмы.

Эритроциты плотно упакованы в ЭС; гематокрит (HCT) ES составляет от 55% до 70%, в то время как самый низкий HCT у здоровых женщин составляет 36%, а самый высокий HCT у здоровых мужчин составляет 54%. Следовательно, концентрация эритроцитов (эритроцитов) и гемоглобина в ЭС выше, чем в организме. Количество эритроцитов в ES составляет от 5,5 до 7,0 × 1012 (1 / л). Благодаря недавним разработкам лейкоциты фильтруются в ES, а количество остаточных лейкоцитов (WBC) снижается до <106 / л. Кроме того, количество тромбоцитов (PLT) снижается, но их количество остается примерно 1010 / л.Нормальный диапазон объема одного эритроцита составляет от 80 до 100 мкм3, а концентрация клеточного гемоглобина находится в диапазоне от 320 до 360 г / л.

Оптические свойства ES очень похожи на свойства цельной крови, которые были тщательно изучены ¹⁹ ^– ²³ и проанализированы ²⁴ ^– ²⁶ в литературе. Коэффициент поглощения ES пропорционален средней концентрации клеточного гемоглобина (MCHC), ²⁷, и формы гемоглобина, такие как окси- и дезоксигемоглобин, характеризуют это поглощение.Коэффициент поглощения ES (μa, ES) равен

Eq. (2)

мкА, ES (λ) = MCHC × {Sat (O2) ϵHbO2 (λ) + [1 − Sat (O2)] ϵHb (λ)}, где ϵHbO2 и ϵHb – коэффициенты молярной экстинкции, а Sat (O2 ) – уровень насыщения гемоглобина кислородом.

Лейкоциты, тромбоциты и FHB не имеют большого влияния на абсорбционные свойства ES. ²² ^, ²⁸ Хотя FHB поглощает свет, поглощение света клеточным гемоглобином намного выше, поскольку MCHC по крайней мере в 20 раз плотнее, чем концентрация FHB.Это также было показано Roggan et al. ²⁸, что концентрация FHB очень мало влияет на коэффициент абсорбции цельной крови. Следовательно, MCHC в достаточной степени описывает характеристики всасывания цельной крови.

Рассеивающие свойства ES могут отличаться от рассеивающих свойств цельной крови, поскольку в ES плазма заменяется SAGM, показатель преломления которого, возможно, отличается от плазмы.

Рассеивающие свойства связаны с объемом и количеством клеток.²⁹ Концентрации (Cn), объемы (Vn) и сечения рассеяния (σs, n) различных типов ячеек определяют коэффициент рассеяния ES (мкс, ES ‘):

Eq. (3)

мкс, ES (λ) = ∑CnVnσs, n (λ).

Вклад различных клеток, RBC, WBC и PLT в коэффициент рассеяния может быть выражен как

Eq. (4)

мкс, ES (λ) = мкс, RBC (λ) + мкс, WBC (λ) + мкс, PLT (λ) + мкс, EXT (λ).

мкс, EXT представляет собой коэффициент рассеяния света частицами во внеклеточной среде.Например, рассеяние, вносимое тромбоцитами, μs, PLT, будет пропорционально отношению концентраций тромбоцитов в ES к среднему объему тромбоцитов (MPV):

, где PCT – это тромбоцит (%). Для обедненных лейкоцитами единиц ES, мкс, WBC можно не указывать. Пониженный коэффициент рассеяния эритроцитов (мкс, RBC) обычно используется для аппроксимации коэффициента рассеяния цельной крови:

Eq. (6)

мкс, ES (λ) ≅μs, RBC (λ) = γ (HCT) HCTMCVσs, RBC (λ).

Здесь MCV – средний клеточный объем эритроцитов, σs, RBC – сечение рассеяния эритроцитов, а γ (HCT) – зависимый от HCT поправочный коэффициент.(1-HCT), (1-HCT) 2 и (1-HCT) (1.4-HCT) были предложены несколькими авторами для этого эмпирического фактора. ²⁶ ^, ³⁰ ^– ³³

Приведенный коэффициент рассеяния ES пропорционален коэффициенту рассеяния, но дополнительно зависит от фактора анизотропии g:

Ур. (7)

мкс, ES ′ (λ) = мкс, ES (λ) [1 − g (λ)].

2.3.

Повреждения при хранении и их влияние на оптические свойства

Во время хранения эритроциты претерпевают серьезные морфологические и биохимические изменения, вызванные неадекватной выработкой аденозинтрифосфата (АТФ) из-за замедления реакций гликолиза в условиях охлаждения.Недостаток АТФ инактивирует натрий-калиевые насосы, и ионы калия покидают эритроциты, а ионы натрия и кальция накапливаются внутри. Ионный обмен между внутриклеточной и внеклеточной средами изменяет их показатели преломления и светорассеяние от клеток на границе между клеточной мембраной и внеклеточным пространством. Хотя реакции гликолиза замедляются при низких температурах, эритроциты продолжают метаболизм, а продукты гликолиза делают среду более кислой. Снижение pH снижает 2,3-дифосфоглицерат, который регулирует связывание кислорода с гемоглобином, и сродство гемоглобина к кислороду увеличивается.³⁴ Процесс оксигенации гемоглобина изменяет абсорбционные характеристики блока ES. Свободные радикалы, полученные в результате оксигенации, вызывают повреждение эритроцитов, повреждая фосфолипиды мембран и белки цитоскелета. Эти окислительные повреждения и потеря внутриклеточной воды и ионов приводят к образованию зубцов в эритроцитах. Впоследствии эритроциты набухают и образуют сферическую форму с множеством длинных спикул. Эти изменения формы определенно повлияют на сечение рассеяния эритроцитов.В конечном итоге эритроциты теряют эти спикулы в виде микровезикул в супернатант. ³⁵ Микровезикулы переносят цитоплазматические частицы из клеток, из которых они произошли. Размер микровезикул составляет от 100 нм до 1 мкм, и их концентрация постепенно увеличивается во время хранения. ³⁶ Накопление этих микрочастиц мембраны в супернатанте увеличило бы количество случаев рассеяния во внеклеточной среде. Уменьшение отношения поверхности к объему клеток с фрагментацией мембраны снижает деформируемость, а окислительные повреждения структурных компонентов эритроцитов делают их восприимчивыми к гемолизу.В конце концов эритроциты разрываются и высвобождают цитоплазматические частицы и гемоглобин в среду, суспендирующую клетки. Это приводит к увеличению рассеяния ЭС во внеклеточной среде.

2.4.

Моделирование концентрации FHB

Повреждения накопления изменяют как абсорбцию, так и пониженный коэффициент рассеяния ES, как описано в разд. 2.3. Однако ожидается, что концентрация FHB, которая является важным элементом оценки качества продуктов крови, будет коррелировать с увеличением рассеяния во внеклеточной среде.Комбинированный эффект накопленных повреждений на общий сниженный коэффициент рассеяния ES непредсказуем, но накопление микровезикул, клеточных частиц и FHB во внеклеточной среде может увеличивать вклад рассеяния из внеклеточной среды. Для исследования приведенного коэффициента рассеяния внеклеточной среды (мкс, EXT ‘) уравнение. (1) переписывается как

Eq. (8)

мкс, ES ′ (λ) = c2 [Rm (λ) −c1] μa, ES (λ) + c3 [Rm (λ) −c1].

После разделения мкс, ES ′, как в Ур.(4) без мкс, WBC ‘, мкс, EXT’ можно выразить как

Ур. (9)

мкс, EXT ′ (λ) = c2 [Rm (λ) −c1] μa, ES (λ) + c3 [Rm (λ) −c1] −μs, RBC ′ (λ) −μs, PLT ′ (λ).

Поскольку концентрация FHB связана с увеличением мкс, EXT ‘, уравнение. (9) можно использовать для моделирования концентрации FHB. После замены μa, ES, μs, PLT ′ и μs, RBC ′ согласно формуле. (2), уравнения. (5) и (6), соответственно, концентрация FHB может быть смоделирована с помощью регрессоров, зависящих только от диффузного отражения и гематологических параметров.Неизмеримые ковариаты, такие как сечения рассеяния и фактор анизотропии, могут быть покрыты коэффициентами регрессии. Детали и результаты моделирования приведены в разд. 3.4 и 4.5.

3. Экспериментальные методы и измерения

3.1.

Измерение оптических свойств пакетов для крови

Оптические свойства пакетов для крови (Macopharma, Франция) были измерены для исследования их вклада в данные диффузного отражения. Отражение и пропускание мешка с кровью измеряли с помощью двух интегрирующих сфер (Labsphere Inc.). В измерительной установке оптическое волокно, подключенное к источнику белого света (Ocean Optics, HL-2000), было направлено к входному отверстию первой сферы и через линзу и диафрагму (рис. 1). Падающий луч света фокусировался на мешке с кровью, который помещался между сферами. Отраженный свет и прошедший свет были интегрированы в первую и вторую сферы соответственно. Волокно было подключено к портам детектора сфер для передачи света на спектрометр (Ocean Optics, USB4000-VIS-NIR).Во время измерений воздух внутри мешка был выпущен с помощью вакуумного насоса, поскольку воздух может образовывать дополнительный слой между двумя пластиковыми листами и приводить к ошибкам в измерениях. Измеренные коэффициент отражения и пропускание были нормализованы по эталонным и темным измерениям обеих сфер. Наконец, метод ^37, обратного сложения-удвоения (IAD) был использован для вычисления коэффициентов поглощения и приведенного рассеяния из нормированных коэффициентов отражения и пропускания. Программа IAD запускалась трижды для различных оценок факторов анизотропии, g = 0.7, 0,8 и 0,9. Показатель преломления мешка с кровью был принят равным 1,5. Метод IAD требует дополнительных входных данных, таких как размеры геометрии измерения для расчета оптических свойств. Входные значения приведены в таблице 1.

Рис. 1

Схема измерения отражательной способности и пропускания пустого мешка для крови с двумя интегрирующими сферами.

Таблица 1

Входные параметры метода IAD.

Диаметр падающего пучка	3.8 мм. входного порта первой сферы	3,0 мм
Диаметр входного порта второй сферы	12,7 мм
Диаметр портов детектора	0.2 мм
Отражение от стены	99,0%

3.2.

Многослойное моделирование методом Монте-Карло

Влияние оптических свойств ES на интенсивность диффузно отраженного света моделировалось с помощью многослойного кода Монте-Карло. ³⁸ Три слоя были структурированы для блока ES; первый и последний слои – мешок с кровью (толщиной 0,03 см). ЭС находилась в среднем слое толщиной 1,54 см. Моделирование было выполнено 196 раз для 14 коэффициентов поглощения ES, логарифмически увеличивающихся от 1 до 3000 см-1, и 14 коэффициентов рассеяния ES в диапазоне от 250 до 900 см-1 с шагом 50 см-1.Показатель преломления и фактор анизотропии ЭС были приняты равными 1,37 и 0,95 соответственно. Для процесса случайного рассеяния использовалась фазовая функция Генри – Гринштейна. 106 фотонов было запущено за каждый запуск, а угол падения был установлен равным 45 градусам, чтобы ограничить оптическую глубину. Для анализа учитывался общий коэффициент диффузного отражения (DRtotal). Изменения в DRtotal, в соответствии с оптическими свойствами ES, были записаны для проверки достоверности полуэмпирической модели [Ур. (1)].

3.3.

Эксперименты

Это исследование было одобрено Комитетом по этике Институционального наблюдательного совета по исследованиям с участием людей Университета Богазичи, Стамбул, Турция, и реализовано в сотрудничестве с Красным Полумесяцем Турции, Региональным центром крови Северного Мраморного моря. В измерениях использовали 40 единиц ЭС с обедненными лейкоцитами, предоставленными банком крови. Единицы ES хранили при 4 ° C в холодильниках банка крови в течение 70 дней. Их диффузное отражение, гематологические параметры и эталонные концентрации FHB измеряли на 1, 42, 49, 56, 63 и 70 дни хранения.Эти дни были выбраны для наблюдения более высоких концентраций FHB. При статистическом анализе единицы ES были разделены на две группы: 28 единиц использовались для обучения, а оставшиеся 12 единиц – для проверки.

3.3.1.

Измерения диффузного отражения

При измерениях диффузного отражения использовался датчик отражения (Thorlabs, RP20). Зонд имеет шесть волокон вокруг одного с диаметром сердцевины 0,2 мм. Центральное волокно использовалось для передачи падающего света от оптического источника к блоку ES, а волокна вокруг центрального волокна использовались для передачи отраженного света от блока ES к спектрометру.Спектрометр (Ocean Optics, USB4000-VIS-NIR) охватывает широкий диапазон спектра от 344 до 1038 нм, а его оптическое разрешение составляет от 1,5 до 2,3 нм. Источником оптики служила вольфрамовая галогенная лампа (Ocean Optics, HL-2000). Белый стандарт диффузного отражения (Ocean Optics, WS-1) использовался для регистрации интенсивности падающего света. Сбор данных контролировался программным обеспечением Oceanview (Ocean Optics Inc.).

Перед началом каждого измерения оптический источник прогревался в течение 20 мин.Блок ES осторожно встряхивали для оценки однородности внутри мешка. Агрегированные клетки отделяли и таким образом перемешивали осажденные клетки. Для измерения диффузного отражения блок ЭС устанавливали на штатив для зонда (Thorlabs, RPH-SMA). Держатель зонда помещался над блоком ES и закреплялся на оптической стойке. Зонд помещался в держатель зонда под углом 45 градусов, чтобы избежать зеркального отражения. Установка была обшита черным картоном (Thorlabs, XE25C5D / M), чтобы исключить влияние окружающего света на измерения (рис.2).

Рис. 2

Измерение коэффициента диффузного отражения блока ES внутри темного ящика. Отражающий зонд помещался в апертуру держателя зонда под углом 45 градусов. Держатель зонда был затянут в точке, где зонд соединялся с поверхностью мешка с кровью.

Время интегрирования спектрометра для подсчета отраженных фотонов было установлено на 5 мс. Программное обеспечение усредняло по 100 сканирований перед записью данных, а ширина усреднения коробчатой диаграммы была скорректирована до 25 для сглаживания собранных данных.После записи первого измерения блок ES был удален и снова помещен под зонд, и измерения были повторены не менее трех раз. Повторные измерения были усреднены, чтобы минимизировать ошибки позиционирования и размещения.

3.3.2.

Оценка Sat (O

₂) по спектру диффузного отражения ES

Уровень насыщения гемоглобина кислородом [Sat (O2)] оценивался на основе измерений диффузного отражения. Среди различных методов количественной оценки концентрации оксигемоглобина по спектрам отражения крови, ³⁹ ^– ⁴² для расчета уровня оксигенации крови использовалось соотношение интенсивностей отраженного света при 760 и 790 нм: ⁴²

Уравнение(10)

Sat (O2) (%) = 150,60Rm (λ = 760) Rm (λ = 790) −77,41.

3.3.3.

Измерение гематологических параметров

После измерения коэффициента диффузного отражения из пакета было взято 5 мл гомогенной крови. Образец вставляли под зонд гематологического анализатора (Mindray, BC3000) для измерения гематологических переменных: MCHC, HCT, MCV, PCT и MPV.

3.3.4.

Контрольные измерения FHB

Контрольные концентрации ES в FHB были измерены в отобранной крови спектрометрическим методом Harboe.⁴³ Отобранную кровь центрифугировали при 3000 об / мин в течение 20 минут для получения супернатанта. Супернатант разбавляли до 1:10 0,01% -ным раствором Na2CO3 и переносили пипеткой в кювету. Поглощение супернатанта относительно холостого раствора при 415 нм, где гемоглобин имеет самый высокий пик поглощения, считывали настольным спектрометром (Beckman Coulter DU 730). Кроме того, также считывали оптическую плотность (A) при 380 и 450 нм для извлечения интерференции белков и липидов соответственно. Наконец, следующее выражение дает концентрацию FHB: ⁴⁴

Eq.(11)

FHB (г / л) = 0,836 × [2 × A (λ = 415) −A (λ = 380) −A (λ = 450)].

3.4.

Обобщенная линейная модель для прогнозирования концентрации FHB

GLM использовали для связи концентрации FHB с пониженным коэффициентом рассеяния внеклеточной среды. Общее выражение GLM –

, где X – матрица плана, а b, e и Y – векторы коэффициентов регрессии, остатков и конечной переменной соответственно. Матрица плана состоит из предикторов (Xp). Диффузное отражение и гематологические переменные использовались в качестве предикторов, и они были отформатированы в соответствии с формулой.(9), в котором выражены μs, EXT ′. мкс, EXT ‘заменяется концентрацией FHB в качестве переменной результата модели. На выбранной длине волны λ матричное представление GLM имеет вид

Eq. (13)

[X11,1X21,1 ⋯ Xp1,1 ⋮⋮⋮ X11, kX21, kXp1, kX12,1X22,1Xp2,1 ⋮⋮⋮⋮⋮⋮ X1n, kX2n, k ⋯ Xpn, k] (n × k ) × pλ [b1b2 ⋮ bp] p × 1λ + [e1,1 ⋮ e1, ke2,1 en, k] (n × k) × 1λ = [Y1,1 Y1, kY2,1 ⋮⋮ Yn, k] (n × k) × 1.

Индексы p, n и k представляют количество предикторов, количество единиц ES и количество повторных измерений во время хранения, соответственно.GLM применялся к 28 единицам ES в обучающем наборе для всех длин волн от 344 до 1000 нм с шагом 2 нм. Были проанализированы точность совпадений, ошибки RMS и статистическая значимость коэффициентов регрессии, и модели были протестированы на 12 единицах ES в проверочном наборе. Matlab 2017b (Mathworks Inc.) использовался для статистического анализа; результаты приведены в пп. 4.5 и 4.6.

4. Результаты

4.1.

Влияние хранения ES на гематологию

В течение 70 дней хранения ES-блоки подверглись повреждениям при хранении, и наблюдалось постепенное увеличение концентрации FHB.Стандартные отклонения между концентрациями FHB в 40 образцах также увеличивались с периодом хранения. Критический уровень концентрации FHB в мешках с кровью составляет от 3 до 6,5 г / л. Концентрация FHB всех ES-единиц была ниже критического уровня в течение первых 42 дней, но стала критической на 56-й день хранения и после этого. На 70-е сутки практически все единицы ЧС вышли за допустимые пределы качества. Гематологические параметры, непосредственно влияющие на оптические свойства, также значительно изменились при длительном хранении.Наблюдалось увеличение HCT и MCV при падении MCHC (рис. 3). Результаты повторных измерений-ANOVA показали, что хранение оказывает значительное влияние на эти гематологические переменные (p <0,001). Изменения ПКТ и MPV не были статистически значимыми. Коэффициент корреляции между концентрацией FHB и MCHC, HCT и MCV составлял 0,734, 0,6863 и 0,5524 соответственно.

Рис. 3

Влияние хранения на (a) HCT, (b) MCV и (c) MCHC, измеренное с помощью гематологического анализатора после отбора образцов крови из блоков ES.

4.2.

Спектры диффузного отражения блоков ES и влияние хранения на них

Спектр диффузного отражения произвольно выбранных блоков ES показан на рис. 4 для первого дня хранения. В спектре диффузного отражения преобладают абсорбционные характеристики гемоглобина. Обратная связь между поглощением и измеренным коэффициентом диффузного отражения, как в формуле. (1) можно увидеть на рис. 4. Впадина в определенной области спектра диффузного отражения соответствовала пиковому коэффициенту молярной экстинкции гемоглобина на этой длине волны.Однако эта обратная пропорциональность нарушалась в диапазоне от 400 до 450 нм [рис. 4 (b)], где поглощение молекул гемоглобина является самым высоким, но это не область с наименьшей интенсивностью отраженного света в спектрах диффузного отражения [Рис. 4 (а)]. Спектр диффузного отражения имел постоянный базовый уровень в области, где поглощение ES было выше. В этой области зарегистрированный свет в основном содержал отражения от мешка с кровью.

Рис. 4

(a) Коэффициент диффузного отражения ES-блока, измеренный в первый день, и (b) кривые поглощения оксигемоглобина и дезоксигемоглобина (данные взяты из Ref.45) показаны.

Измерения в первый день спектров диффузного отражения блоков ES показали большое расхождение между ними (рис. 5). Вероятно, вариации их гематологических параметров вызвали такое различие в их оптических свойствах, то есть в спектрах диффузного отражения.

Рис. 5

Спектры диффузного отражения 40 ЭС в первые сутки хранения.

Со временем хранения было замечено, что диффузное отражение единиц ES обычно увеличивается между 600 и 750 нм и снижается за пределами 800 нм.Пиковая длина волны спектра сдвинута влево. Два пика около 725 и 790 нм превратились в один пик около 670-680 нм, а впадина около 760 нм уменьшилась в некоторых модулях ES. Эти изменения были связаны с изменениями уровня оксигенации гемоглобина, рассчитанного по формуле. (10). Уровни оксигенации ES-единиц увеличивались со временем хранения (рис. 6). Направление сдвига спектров диффузного отражения из-за увеличения оксигенации [рис. 7 (b)] можно оценить по обратной величине спектров молярной экстинкции гемоглобина [Рис.7 (а)].

Рис. 6

Изменение оксигенации в процентах во время хранения.

Рис. 7

Сдвиги в спектрах диффузного отражения при увеличении оксигенации и его корреляция с обратной величиной коэффициента молярной экстинкции гемоглобина. (a) Взаимная величина молярного коэффициента экстинкции восстановленного и полностью оксигенированного гемоглобина, ⁴⁵ (b) спектры диффузного отражения различных ES-единиц, измеренные при разном времени хранения.

Не было сильной корреляции между изменениями на любой длине волны в спектрах диффузного отражения и концентрацией FHB.Наиболее сильная корреляция наблюдалась в диапазоне от 800 до 1000 нм, и это была отрицательная корреляция около 0,6.

4.3.

Оптические свойства мешка для крови

Коэффициенты поглощения и приведенного рассеяния мешка для крови были рассчитаны с помощью метода IAD. Между 550 и 900 нм коэффициент поглощения мешка с кровью составлял от 0,5 до 0,7 см-1, а уменьшенный коэффициент рассеяния составлял около 7 см-1 (рис. 8). За пределами этой области наблюдались более высокие флуктуации, поскольку мощность галогенового источника уменьшалась, а отношение сигнал / шум измерения ухудшалось.Пакеты с кровью были полупрозрачными; внутренняя поверхность обычно была модифицирована для обеспечения надлежащего контакта с эритроцитами и минимизации гемолиза. Эти текстуры приводят к высоким коэффициентам рассеяния и поглощения. ⁴⁶ Еще более высокие коэффициенты рассеяния предполагались в [4]. 47. Фактор анизотропии оказал очень небольшое влияние на вычисления приведенных коэффициентов рассеяния и поглощения.

Рис. 8

Спектры поглощения (левая ось) и приведенных коэффициентов рассеяния (правая ось) мешка с кровью.Фактические измерения были сглажены для обоих спектров. Столбики ошибок в спектрах поглощения представляют собой стандартные отклонения измерений с различными факторами анизотропии (g = 0,7, 0,8 и 0,9).

4.4.

Достоверность экспоненциальной модели

Измеренные оптические свойства мешка с кровью использовались в качестве входных данных для моделирования многослойного метода Монте-Карло (MCML) для исследования полуэмпирической модели отражательной способности [уравнение. (1)]. Коэффициент поглощения мешка с кровью был установлен на 0.6 см -1, и коэффициент рассеяния мешка с кровью был рассчитан как 35 см -1, тогда как коэффициент анизотропии был выбран равным 0,8, а пониженный коэффициент рассеяния мешка с кровью был установлен равным 7 см -1.

Моделируемые данные были в хорошем согласии с формулой. (1), когда данные были разделены на две части по уровням поглощения ES. Качество подгонки составило 0,9287 и 0,992 соответственно для низкого и высокого уровней поглощения (рис. 9). Модель казалась немного лучше, когда μa, ES были выше.Тем не менее, пригодность модели для низких значений μa, ES также была приемлемой. При низких уровнях поглощения ES (μa, ES≤5 см − 1) зависимость между приведенным коэффициентом рассеяния и диффузным отражением становится нелинейной. Однако при очень высоких уровнях поглощения ES общий коэффициент диффузного отражения сходится к c1, как в формуле. (1).

Рис. 9

Моделирование MCML: поведение диффузного отражения в зависимости от поглощения и приведенных коэффициентов рассеяния ES. Модель соответствует данным с (а) низкими уровнями абсорбции и (б) высокими уровнями абсорбции ES.

Справедливость уравнения. (1) также была протестирована на экспериментальных данных обучающей выборки. Первоначально коэффициент диффузного отражения при 570 нм использовался для нормализации, где интенсивность измеренного коэффициента отражения была минимальной, чтобы исключить эмпирический коэффициент c1, который асимптотически равен измеренному коэффициенту диффузного отражения при более высоких уровнях поглощения ES. Нормализованные спектры диффузного отражения Rnorm (λ) были получены путем вычитания отражательной способности при 570 нм из спектров:

Eq.(14)

Rnorm (λ) = Rm (λ) – Rm (λ = 570).

После нормализации оптические свойства μa, ES и μs, ES ‘в уравнении. (1) были заменены гематологическими параметрами MCHC, HCT, MCV и Sat (O2) в соответствии с уравнениями. (2) и (6) соответственно. Затем, с этими гематологическими параметрами, нормированные значения отражательной способности были предсказаны в соответствии с формулой. (1). Прогнозируемые значения хорошо согласуются с фактическими нормализованными значениями диффузного отражения (рис. 10). Наилучшее качество совпадения составило 0,8922, полученное при 658 и 660 нм.Тем не менее, качество подгонки было больше 0,8 для всех длин волн от 590 до 700 нм.

Рис. 10

Соответствие модели экспериментальным данным при длине волны 568 нм с наивысшим качеством соответствия. Данные одного выброса в (0,119 и 0,1513), хотя и включены, не видны в диапазоне графика.

4.5.

Результаты GLM для прогнозов FHB

Для оценки концентрации переменной ответа FHB выбранными предикторами GLM были

Eq.(15)

X1 = 1, X2 (λ) = Rnorm (λ) × 11 − HCT, X3 (λ) = Rnorm (λ) × MCHC × Sat (O2) × ϵHb − O2 (λ) × 11 − HCT, X4 (λ) = Rnorm (λ) × MCHC × [1 − Sat (O2)] × ϵHb (λ) × 11 − HCT, X5 = HCTMCV, X6 = HCT2MCV, X7 = PCTMPV × 11 − HCT, где X1 представляет собой вектор перехвата GLM. Нормализованное диффузное отражение, описанное в гл. 4.4 использовался для члена [Rm (λ) −c1] в уравнении. (9). Поглощение оксигемоглобина и дезоксигемоглобина было разделено на два предиктора, X3 и X4. мкс, RBC ′ в уравнении. (9) был заменен согласно формуле. (6). Эмпирический фактор, зависящий от HCT, γ (HCT), упомянутый в разд.2.2, предполагалось, что это (1-HCT) 2 или (1-HCT) (1.4-HCT). Полиномиальные члены μs, RBC ′ были разделены на два предиктора X5 и X6. X7 использовался как замена μs, PLT ′ в уравнении. (9). Все предикторы были разделены на (1 – HCT), то есть на концентрацию внеклеточной среды. Он был отменен с тем же коэффициентом γ (HCT) для предикторов X5 и X6.

GLM каждой длины волны дает статистически значимые коэффициенты регрессии, за исключением нескольких боковых длин волн спектра. Значимость коэффициентов регрессии показана в таблице 2 их диапазонами p-значений по длинам волн.Коэффициент корреляции между эталонной и прогнозируемой концентрацией FHB составлял от 0,77 до 0,83 для GLM каждой длины волны. Качество подгонки моделей было в аналогичном диапазоне (0,66

Таблица 2

Значимость коэффициентов регрессии.

b5 (λ)

Коэффициенты регрессии	диапазоны значений p ∀ λ
b1 (λ)	4E-06 до 0.013
b2 (λ)	1E-12 до 0,058
b3 (λ)	1E-11 до 0,096
b4 (λ)	1E-15 до 0,004	9E-15 до 3E-05
b6 (λ)	6E-17 до 1E-04
b7 (λ)	5E-04 до 0,010

Хотя не было физического смысла коэффициентов регрессии по отдельности, можно было сделать некоторые интерпретации с их отношениями.Отношение коэффициента регрессии b5 (λ) к b6 (λ) сообщило нам о γ (HCT), поскольку b5 (λ) и b6 (λ) оба связаны с μs, RBC ′. Ожидается, что это соотношение будет около -1 или -1,4 для согласования с предложенными в литературе эмпирическими факторами. Для большей части спектра отношение было рассчитано около -1 (среднее значение длин волн: -0,9396, стандартное отклонение 0,0420) [Рис. 11 (а)]. Во-вторых, ожидалось, что отношение коэффициентов регрессии b3 (λ) и b4 (λ) будет пропорционально отношению молярных коэффициентов экстинкции оксигемоглобина и дезоксигемоглобина, поскольку они являются независимыми от образца факторами.Отношение b3 (λ) / b4 (λ), представленное на рис. 11 (b), хорошо согласуется с предположением. Кроме того, b5 (λ) / b7 (λ) или b6 (λ) / b7 (λ) должны согласовываться с σs, RBC ′ (λ) / σs, PLT ′ (λ), что является отношением приведенных сечения рассеяния эритроцитов и PLT. Согласно соотношениям этих коэффициентов регрессии было обнаружено, что σs, PLT ′> σs, RBC ′, хотя размер PLT меньше, чем RBC. Этот результат можно объяснить более низким фактором анизотропии PLT по сравнению с RBC. Отношение приведенных сечений рассеяния равно

Eq.(16)

σs, RBC′σs, PLT ′ = σs, RBC (1 − gRBC) σs, PLT (1 − gPLT), где gRBC и gPLT – факторы анизотропии RBC и PLT. Часть обратно рассеянного света больше у тромбоцитов, так как gPLT ниже, чем gRBC, о чем сообщалось в Ref. 28.

Рис. 11

Отношения некоторых коэффициентов регрессии: (а) b5 (λ) / b6 (λ) и (б) b3 (λ) / b4 (λ).

4.6.

Точность GLM на проверочном наборе для прогнозирования FHB

Концентрации FHB единиц ES в проверочном наборе были спрогнозированы с помощью коэффициентов регрессии, вычисленных из обучающего набора.Прогнозы сравнивали с фактическими концентрациями FHB. Оптимальные результаты для проверки наблюдались при 568 нм. На этой длине волны качество совпадения составляло 0,7999 (рис. 12), а коэффициент корреляции между эталонной и прогнозируемой концентрациями FHB составлял 0,8943. Среднеквадратичная ошибка была рассчитана как 1,5347 г / л.

Рис. 12

Точность оценки концентраций FHB для 12 единиц ES валидационного набора с моделью при 568 нм: эталонная по сравнению с прогнозируемыми концентрациями FHB.

Хотя предсказать точное значение FHB с помощью предложенной модели не удалось, прогнозируемые модели и фактические концентрации FHB сильно коррелировали, что позволяет предположить, что модель может дать точную информацию о качестве крови при хранении. Уровни гемолиза ES-единиц были рассчитаны по следующему уравнению после прогнозирования концентраций FHB с помощью предложенной модели:

Eq. (17)

Уровень гемолиза (%) = FHBMCHC × (1-HCTHCT) × 100.

Единицы ES с уровнем гемолиза выше предельного уровня были оценены как единицы низкого качества.Истинное состояние сравнивалось с заданиями в соответствии с этими прогнозами. Для порога гемолиза 0,8% максимальная точность наблюдалась как 64/72 (∼89%) для модели при 568 нм, а для порога гемолиза 1,0% максимальная точность наблюдалась как 66/72 (∼ 92%) для модели на 562 нм.

5. Обсуждение

В этом исследовании DRS предлагается в качестве диагностического инструмента для оценки качества хранимых единиц ES. Представленная нами модель для прогнозирования концентрации ГГБ имеет аналитическую основу.Предикторы включают измерение диффузного отражения единиц ES и гематологические переменные, которые представляют оптические свойства ES. Все предикторы статистически значимы, и исключение любого из них снизит точность прогноза, подразумевая, что одни только гематологические переменные не могут предсказать концентрацию FHB без измерений диффузного отражения.

Модель перспективная, но по следующим причинам есть неточности в результатах. Во-первых, во внеклеточной среде было множество частиц, увеличивающих μs, EXT ‘, но при моделировании концентрация FHB использовалась как единственный источник увеличения μs, EXT ′.Во-вторых, физически не использовались оптические свойства ЭС; вместо этого использовались их гематологические аналоги. Оценка оптических свойств ES с помощью вычислительных методов, таких как обратный Монте-Карло, вероятно, даст лучшие результаты.

Оптическое измерение концентрации FHB при наличии помех от соты было сложной задачей, и лишь несколько авторов пытались использовать этот подход в прошлом. В одном исследовании степень соответствия для оценки гемолиза была оценена как R2 = 0.675, и результаты были улучшены за счет фиксации других гематологических переменных. ⁴⁸ В другом исследовании, в котором спектры пропускания использовались для прогнозирования концентрации FHB, авторы достигли R2 = 0,9524, но гематологические вариации в их образцах цельной крови не были упомянуты. ⁴⁹ Есть несколько факторов, которые влияют на оптический сигнал, полученный от образцов крови: агрегация, седиментация, коагуляция, гемолиз, HCT, Sat (O2), концентрация гемоглобина и т. Д.Фиксация этих факторов или разбавление образцов, очевидно, значительно упростят определение концентраций FHB. В этом исследовании также принимались во внимание гематологические переменные, и оценка FHB производилась на образцах со случайными гематологическими переменными.

В будущем предложенная модель может быть использована для неинвазивной оценки качества крови. Другие методы, которые неинвазивно оценивают гематологические параметры крови, должны быть интегрированы с DRS. В недавнем исследовании концентрация гемоглобина в хранимой крови измерялась неинвазивным методом с использованием спектроскопии пропускания и флуоресценции.⁴⁷ Измерения коэффициента диффузного отражения с помощью нескольких детекторов, расположенных на разном расстоянии от источника, дали точные уровни HCT. ⁵⁰ Количество и объем клеток можно измерить с помощью биоимпедансной спектроскопии, разработав специальные пакеты для крови с биосовместимыми электродами. ⁵¹

Гемолиз важен в клиническом анализе; Содержание FHB в пробах крови – самый большой источник ошибок в лабораториях. Предлагаемая модель с измерениями диффузного отражения может быть интегрирована в гематологические анализаторы вместо отнимающего много времени центрифугирования и лабораторных испытаний.

6. Заключение

Таким образом, спектры диффузного отражения ES-блоков контролировались во время хранения для оценки качества этих блоков, и были получены некоторые замечательные результаты. Несмотря на значительное поглощение света и уменьшенное рассеяние от мешка с кровью, коэффициент диффузного отражения от блоков ES был дан как функция от оптических свойств ES. Это полуэмпирическое уравнение было дополнительно подтверждено с помощью моделирования и экспериментальных данных. Для моделирования концентрации FHB предполагалось, что повреждения накопления увеличивают рассеяние во внеклеточной среде.Выделение компонентов коэффициента рассеяния ES обеспечило линейную модель концентрации FHB с предикторами, содержащими гематологические переменные и сигнал диффузного отражения. Представленная модель дала высококоррелированные оценки концентрации FHB для каждой длины волны в спектре, но точность оценки точных значений была низкой. Частота ошибок модели при диагностике истинного качества составляла около 10%.

Раскрытие информации

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Благодарности

Исследование финансировалось Советом по научным и технологическим исследованиям Турции (TUBITAK) под кодом гранта 115E477. Авторы хотели бы выразить признательность Генеральному управлению службы крови Турецкого Красного Полумесяца за набор образцов, используемых в исследовании, и разрешение на проведение исследования в лабораториях Регионального центра крови Северного Мраморного моря, Стамбул. Мы также благодарим всех сотрудников Лаборатории контроля качества Регионального центра крови Северного Мраморного моря, Картал, Стамбул, Турция, за их помощь и поддержку.Авторы также хотели бы поблагодарить доктора Эрджана Кара как члена биофотонной лаборатории Университета Богазичи за его помощь.

Ссылки

О. М. Джан, Ю. Юлген, А. Акын, «Использование цветовых пространств для определения уровня гемолиза в хранящейся крови», в Proc. 6-й Европейской конф. Междунар. Федерация медицинской и биологической инженерии, 290 –293 (2015). https://doi.org/10.1007/978-3-319-11128-5_72 Google Scholar

10.

Д. Юдовский и Л. Пилон, «Простые и точные выражения для коэффициента диффузного отражения полубесконечных и двухслойных поглощающих и рассеивающих сред», Прил. Опт., 48 (35), 6670 –6683 (2009). https://doi.org/10.1364/AO.48.006670 APOPAI 0003-6935 Google Scholar

11.

Т.-Ю. Ценг и др., «Количественная оценка оптических свойств двухслойных мутных сред путем одновременного анализа спектральной и пространственной информации стационарной спектроскопии диффузного отражения», Биомед.Опт. Экспресс, 2 (4), 901 –914 (2011). https://doi.org/10.1364/BOE.2.000901 BOEICL 2156-7085 Google Scholar

12.

С. Чандрасекар, Радиационный перенос, Oxford University Press, Лондон (1960). Google Scholar

13.

Г. Зониос и А. Димоу, «Моделирование диффузного отражения от полубесконечной мутной среды: приложение к изучению оптических свойств кожи», Опт. Экспресс, 14 (19), 8661 –8674 (2006).https://doi.org/10.1364/OE.14.008661 OPEXFF 1094-4087 Google Scholar

14.

Г. Зониос и А. Димоу, «Моделирование диффузного отражения от однородной полубесконечной мутной среды для биологических тканей: исследование Монте-Карло», Биомед. Опт. Экспресс, 2 (12), 3284 –3294 (2011). https://doi.org/10.1364/BOE.2.003284 BOEICL 2156-7085 Google Scholar

15.

Г. Зониос, И. Бассукас и А. Димоу, «Сравнительная оценка двух простых моделей диффузного отражения для биологических тканей», Прил.Опт., 47 (27), 4965 –4973 (2008). https://doi.org/10.1364/AO.47.004965 APOPAI 0003-6935 Google Scholar

16.

G. Zonios et al., «Абсорбционная спектроскопия меланина: новый метод неинвазивного исследования кожи и обнаружения меланомы», J. Biomed. Опт., 13 (1), 014017 (2008). https://doi.org/10.1117/1.2844710 JBOPFO 1083-3668 Google Scholar

17.

V. Sharma et al., «Количественная оценка спектроскопии отражения света и ее применение: определение гемодинамики спинного и головного мозга крыс, вызванной электрической стимуляцией», Нейроимидж, 56 (3), 1316 –1328 (2011).https://doi.org/10.1016/j.neuroimage.2011.01.020 NEIMEF 1053-8119 Google Scholar

18.

Р. Марчезини, А. Боно и М. Каррара, «In vivo характеристика меланина в меланоцитарных поражениях: спектроскопическое исследование на 1671 пигментированном», J. Biomed. Опт., 14 (1), 014027 (2009). https://doi.org/10.1117/1.3080140 JBOPFO 1083-3668 Google Scholar

22.

М. Мейнке, «Оптические свойства тромбоцитов и плазмы крови и их влияние на оптическое поведение цельной крови в диапазоне длин волн от видимого до ближнего инфракрасного», Дж.Биомед. Опт., 12 (1), 014024 (2007). https://doi.org/10.1117/1.2435177 JBOPFO 1083-3668 Google Scholar

23.

M. Friebel et al., «Определение оптических свойств крови человека в спектральном диапазоне от 250 до 1100 нм с использованием моделирования методом Монте-Карло с зависимыми от гематокрита эффективными фазовыми функциями рассеяния», J. Biomed. Опт., 11 (3), 034021 (2006). https://doi.org/10.1117/1.2203659 JBOPFO 1083-3668 Google Scholar

24.

В. В. Тучин, Справочник по оптической биомедицинской диагностике, 171 –216 2-е изд. SPIE Press, Беллингхэм, Вашингтон (2002). Google Scholar

39.

А.А. Стратонников, В.Б. Лощенов, «Оценка насыщения крови кислородом in vivo по спектрам диффузного отражения», J. Biomed. Опт., 6 (4), 457 –467 (2001). https://doi.org/10.1117/1.1411979 JBOPFO 1083-3668 Google Scholar

41.

E. J. Phelps et al., «Быстрое ратиометрическое определение концентрации гемоглобина с использованием диффузного отражения UV-VIS на изобестических длинах волн», Опт. Экспресс, 18 (18), 18779 –92 (2010). https://doi.org/10.1364/OE.18.018779 OPEXFF 1094-4087 Google Scholar

46.

M. Meinke et al., «Новое устройство для неинвазивного измерения свободного гемоглобина в мешках с кровью / Messgerät zur zerstörungsfreien Messung von freiem Hämoglobin в Блутконсервене», Биомед. Tech./ Биомед. Eng., 50 2 –7 (2005). https://doi.org/10.1515/BMT.2005.001 Google Scholar

49.

L. Lin et al., «Обнаружение свободного гемоглобина в продуктах крови с использованием спектров пропускания и спектров флуоресценции для обеспечения качества», Анальный. Методы, 8 (21), 4239 –4244 (2016). https://doi.org/10.1039/C6AY00776G AMNEGX 1759-9679 Google Scholar

51.

О. М. Кан, Ю. Юльген и Х. Билген, «Мониторинг параметров Коула концентратов эритроцитов во время хранения», в Int.Практикум по импедансной спектроскопии: тезисы докладов, 96 (2013). Google Scholar

Биография

Осман Мелих Джан получил степень бакалавра биомедицинской инженерии и небольшую степень в области электротехники и электроники в Университете Едитепе. Он получил степень магистра биомедицинской инженерии в Университете Богазичи. Он является докторантом и научным сотрудником Института биомедицинской инженерии Университета Богазичи в Стамбуле. Его исследовательские интересы сосредоточены на диффузной оптической спектроскопии и ее приложениях в трансфузионной медицине.Он является членом SPIE.

Йекта Юлген – профессор и заведующий кафедрой биомедицинской инженерии в Университете Бахчешехир, Стамбул. Он получил степень магистра и доктора философии в Солфордском университете, Великобритания. Его научные интересы – клиническая инженерия, измерения биоимпеданса и биомедицинское оборудование.

Двухканальный волоконный биологический датчик поверхностного плазмонного резонанса на основе гибридного опроса интенсивности и модуляции длины волны

1. Введение

В последние годы поверхностный плазмонный резонанс (ППР) широко исследуется для различных приложений измерения. ¹ ^– ³ Среди всех технологий ППР большое внимание привлекает локализованный ППР (LSPR) металлических наночастиц (НЧ). ⁴ ^– ⁸ Подобно SPR, LSPR – это коллективные электронные колебания металлических НЧ, когда частота падающего фотона соответствует частоте колебаний проводящих электронов, но его частота может быть настроена путем изменения размера, геометрии, материала , и окружающие диэлектрики НЧ.В настоящее время большинство волоконно-оптических датчиков SPR предназначены для одноканального обнаружения, ⁹ ^– ¹¹, которые не могут обнаруживать более одного аналита или устранять неблагоприятный эффект, вызванный изменениями показателя преломления (RI) объемный раствор. Датчики редко имеют несколько зон восприятия, изготовленных на коротком участке оптического волокна, которые могут реализовать многоканальное обнаружение и самокомпенсацию. ¹² Были разработаны различные подходы для получения двух каналов считывания на одном оптическом волокне.¹³ ^, ¹⁴ Например, двухканальный зонд SPR формируется путем нанесения полимерного слоя на золотую пленку для настройки длины волны резонанса SPR приблизительно на 100 нм. ¹⁵ Он использует опрос длины волны для нескольких длин волн, но не может обнаружить изменения в RI основного раствора, вызванные присутствием или отсутствием биохимических молекул. Было продемонстрировано, что двухкаскадный волоконный датчик LSPR, основанный на опросе интенсивности, одновременно обнаруживает два анализируемых вещества.¹⁶ Однако опрос интенсивности зависит от стабильности источника света, и процесс его изготовления является относительно сложным. Другие датчики SPR на основе волоконно-оптических пучков ^17, для реализации многоканального обнаружения ограничивают миниатюризацию чувствительного элемента, и процедура является сложной. Быстрое и параллельное обнаружение в одном кристалле на основе призменной спектроскопии SPR и LSPR было реализовано ранее, но они всегда зависят от сложных и дорогих компонентов, которые на практике не подходят для миниатюризации структуры.¹⁸ ^– ²⁰

В этой статье мы предложили двухканальный оптоволоконный сенсорный зонд, основанный на двух сенсорных структурах с различными методами модуляции (определение интенсивности и длины волны). Две незапакованные части волоконного зонда покрыты наночастицами золота (ЗНЧ) и многослойной конфигурацией пленки Au / оксида индия и олова (ITO) / Au соответственно. Путем нанесения тонкого диэлектрического слоя ITO с высоким показателем преломления на чувствительную к золоту поверхность можно модулировать длину волны резонанса ППР.Мы можем настроить интенсивность передачи канала на основе опроса интенсивности (канал Au NP) и резонансную длину волны канала на основе опроса длины волны (канал пленки Au / ITO / Au) путем изменения окружающего RI, что создает двухканальный гибрид датчик SPR с модуляцией по интенсивности – длине волны. Время анализа для своего рода обнаружения биомолекулярных образцов составляет менее 20 минут, и это может расширить диапазон обнаружения датчика SPR от видимого до ближнего инфракрасного. Кроме того, характеристики датчика сопоставимы с традиционными датчиками SPR.²¹ ^, ²²

2. Материалы и методы

Как показано на рис. 1 (а), был запущен свет от галогенной лампы (HL-2000-FHSA, Ocean Optics, Inc.) в один конец зонда. Спектр пропускания регистрировался спектрометром (HR4000, Ocean Optics, Inc.) и демодулировался компьютером. Мы использовали самодельную проточную кювету для управления вводом и выбросом раствора пробы. Для сравнения была выбрана скорость потока 1,0 мл / мин, контролируемая перистальтическим насосом, для введения аналитов.Рисунок 1 (b) иллюстрирует принципиальную схему двух каналов зонда. Волоконные зонды были изготовлены с использованием многомодового кварцево-оптического волокна с пластмассовой оболочкой (числовая апертура 0,37, диаметр сердцевины 400 мкм и диаметр оболочки 430 мкм). Две торцевые поверхности зонда были отполированы, чтобы уменьшить потери соединения между зондом и оптоволоконной перемычкой. Две части оптического волокна без оболочки были очищены деионизированной водой и ацетоном и высушены потоком чистого газа N2. Затем две секции были покрыты частицами золота 40 нм и слоем Au 35 нм, 35 нм / ITO 10 нм / Au 15 нм, соответственно.Они были обозначены как Канал 1 и Канал 2. В Канале 1 самосинтезированные сферические НЧ золота ²³ были иммобилизованы на сердцевине волокна с использованием послойного метода. Конкретный процесс подготовки канала 1 заключался в следующем: сердцевина оптического волокна сначала погружалась в раствор Пираньи (смесь, состоящая из семи объемов концентрированного h3SO4 и трех объемов 30% h3O2) на 45 минут, после чего следовала тщательная промывка деионизированным раствором. водой и сушат потоком чистого газа N2; Затем для самосборки ЗНЧ была выбрана трехслойная структура полиэлектролита (ПЭ).Канал последовательно погружали в поли (диаллилдиметиламмонийхлорид) (сильный катионный полиэтилен), поли (пара-стиролсульфонат натрия) (анионный полиэтилен) и поли (аллиламингидрохлорид) (ПАУ, слабокатионный полиэтилен). Время выдержки для травленого ПЭ составляло 15 мин. Наконец, ЗНЧ, стабилизированные цитратом, были иммобилизованы на внешнем слое ПАУ в течение 120 мин с образованием самоорганизующегося монослоя. В нашем тесте самоорганизующийся монослой NP был чрезвычайно стабильным в течение шести повторных условий связывания и регенерации.В канале 2 пленка Au / ITO / Au была нанесена на очищенную незапакованную сердцевину с использованием устройства для нанесения покрытий Turbo Sputter Coater (K575XD от E. M. Technologies Ltd., Эшфорд, Кент).

Рис. 1

Схема двухканальной волоконно-оптической сенсорной системы SPR на основе ЗНЧ и покрытий Au / ITO / Au для одновременной реализации модуляции интенсивности и длины волны. (а) Схема экспериментальной установки для зондирования измерений. (b) Двухканальный датчик SPR. Канал 1 состоит из ВНП, а Канал 2 построен из Au / ITO / Au.

3. Результаты и обсуждение

Экспериментально исследованы характеристики отклика RI двухканального оптоволоконного датчика. На рисунке 2 (а) представлены спектры пропускания предлагаемого биосенсора по сравнению с RI. По мере постепенного увеличения окружающего RI интенсивность пропускания провала A, соответствующего каналу 1, значительно уменьшается, и длина волны провала имеет незначительные сдвиги. Кроме того, длины волн провала B, соответствующего каналу 2, увеличиваются, в то время как окружающий RI увеличивается с 1.3266 до 1,3683. Нормализованные изменения интенсивности канала 1 и сдвиги длины волны канала 2 имеют линейный отклик на объемный RI между 1,3266 и 1,3683, что согласуется с диапазоном для наиболее распространенных биожидкостей, как показано на рис. 2 (б) и 2 (в). Соответствующие значения RI чувствительности S составляют 334,1% RIU-1 и 1963,2 нм / RIU для ЗНЧ и пленочных каналов Au / ITO / Au, соответственно. Здесь чувствительность ПП S определяется как изменение резонансной длины волны (S = Δλ / Δn) и резонансной интенсивности (S = Δλ / Δn) по отношению к объемным изменениям ПП.Разрешение R измерения RI оценивается в 5,9 × 10-5 RIU и 5,09 × 10-6 RIU, соответственно, что определяется как R = N / S, где N – стандартное отклонение шума, а S – RI. чувствительность. N можно рассчитать по временной характеристике резонансного провала для фиксированного RI объемного раствора.

Рис. 2

Отклик RI двухканального оптоволоконного датчика. (а) Экспериментальные спектры пропускания предлагаемого биосенсора для растворов хлорида натрия с различными RI.(b) Взаимосвязь RI образца и измеренной относительной интенсивности провала A в канале 1. (c) Связь RI образца и измеренной длины волны провала B в канале 2.

Для дальнейшего понимания принципа работы двухканального Датчик SPR, рис. 3 показывает распределение пространственного электрического поля для различных резонансных положений, вызванных разными резонансными модами. Черные пунктирные линии на рис. 3 (c) и 3 (e) представляют границу композита Au / ITO / Au и пленок Au соответственно.Как показано на фиг. 3 (a), 3 (c) и 3 (e), электрическое поле в основном ограничено, и максимальное распределение поля проявляется на поверхности наночастиц или металлической пленки. На рисунках 3 (b), 3 (d) и 3 (f) показаны спектры пропускания режимов LSPR и SPR соответственно. Видно, что провал резонанса LSPR, вызванный поглощением ЗНЧ, проявляется в диапазоне от 500 до 600 нм. Одновременно наблюдается явный провал в диапазоне от 600 до 1000 нм, индуцированный пленочным каналом Au / ITO / Au. Как показано на фиг.3 (c) и 3 (e), по сравнению со структурой ППР слоя чистого золота, композитная структура слоя Au / ITO / Au с той же толщиной показывает более сильное увеличение интенсивности ближнего поля (максимум напряженности поля на поверхности составная структура слоя Au / ITO / Au составляет 3,8, тогда как структура слоя Au составляет 3,3), что полезно для улучшения взаимодействия между исчезающим полем и биомолекулами и достижения высокоточного обнаружения. Кроме того, чтобы избежать перекрестных помех между каналами (резонансные длины волн разных каналов расположены в разных спектральных положениях), длины волн SPR каналов должны иметь возможность настраиваться в широком диапазоне для полного разделения двух каналов.Существует несколько подходов к реализации изменения рабочей длины волны датчика SPR: ²⁴ ^, ²⁵, и некоторые из них слишком сложны. Чтобы упростить изготовление, был выбран тонкий слой ITO для нанесения между слоями золота, чтобы сформировать конфигурацию сэндвича. Как материал с высоким RI покрытие ITO является одним из идеальных кандидатов для настройки рабочей длины волны датчика SPR. Рис. 3 (d) показывает, что длина волны резонанса ППР смещается в сторону большей длины волны, когда мы используем сэндвич-конфигурацию Au / ITO / Au.

Рис. 3

Анализ пространственного электрического поля волоконно-оптического датчика на основе двойной модуляции. (а) Распределение действительной части пространственного электрического поля (| Ex |) и (б) спектр пропускания режима LSPR для резонансного положения на длине волны 560 нм. (c) Распределение реальной части пространственного электрического поля (| Ex |) и (d) спектр пропускания режима SPR (35 нм Au / 10 нм ITO / 15 нм слой Au) для резонансного положения при 678 нм. (e) Распределение реальной части пространственного электрического поля (| Ex |) и (f) спектр пропускания режима SPR (слой Au 60 нм) для резонансного положения на 620 нм.

Для дальнейшего исследования возможности мультианалитического зондирования двойной модуляции (опрос интенсивности и длины волны) двухканального датчика, мы провели модельные эксперименты в буферном растворе для кинетического мониторинга событий молекулярного распознавания. Анти-кроличий иммуноглобулин G (анти-IgG) был функционализирован на канале GNP как зонд молекулярного распознавания для специфического связывания с IgG, а рибонуклеаза B (РНКаза B) была зафиксирована на пленочном канале Au / ITO / Au как часть распознавания для специфическое связывание с Con A.Процессы иммобилизации IgG и Con A изображены на рис. 4. Мы погрузили два канала в 11-меркаптоундекановую кислоту (1 ммоль / л) при комнатной температуре на 12 часов для самоорганизации монослоя алкантиола на поверхности; затем зонд погружали в водный раствор, содержащий гидрохлорид 1-этил-3- (3-диметиламинопропил) карбодиимида (0,55 моль / л) и N-гидроксисукцинимид (0,5 моль / л), на 30 минут при 4 ° C для активации карбоксил алкантиольного слоя. После активации зонд промывали деионизированной водой и сушили в атмосфере азота.Канал 1 был погружен в раствор против кроличьего IgG [0,1 мг / мл в 0,01 М фосфатно-солевом буфере (буфер PBS, pH = 7,4)], а канал 2 был погружен в раствор РНКазы B (0,1 мг / мл в 0,01 М Буфер PBS, pH = 7,4) в течение 30 мин для образования стабильного мономолекулярного слоя соответственно. После промывки буфером PBS использовали 0,1 мг / мл бычьего сывороточного альбумина для дезактивации непрореагировавших групп на двухканальных поверхностях. Наконец, был получен функциональный зонд, который можно было использовать для измерения специфического биомолекулярного связывания.

Рис. 4

Процессы специфического связывания (a) IgG и (b) Con A.

Производительность биологического мониторинга этого двухканального волоконного биосенсора оценивалась на основе специфического связывания IgG с анти-IgG и Con A к РНКазе B. Образцы IgG и Con A с различными концентрациями готовили в буфере PBS (pH = 7,4). Перед введением образцов в проточную кювету вводили буфер PBS, чтобы установить базовое значение. Отклик двух каналов в реальном времени контролировался LabVIEW, а экспериментальные данные обрабатывались каждые 2 секунды.Временной ответ специфического биомолекулярного связывания двух каналов показан на фиг. 5. Для сравнения мы также привели изменения сигнала неспецифического связывания в других каналах во время обнаружения IgG и Con A на фиг. 5 (а) и 5 (б). Стоит отметить, что реакция неспецифического связывания в реальном времени была почти одинаковой для обнаружения молекул с разными концентрациями. Поэтому на рис. 5 (а) и 5 (б). Молекулярное связывание вызовет увеличение локализованного RI на поверхности NP.Таким образом, интенсивность падающего света с длиной волны 560 нм уменьшалась с увеличением времени, а затем достигла устойчивого состояния через 1200 с. На рисунке 5 (а) показано, что интенсивность канала 1 снизилась из-за инъекции IgG, что согласуется с тем фактом, что IgG специфически связывается с анти-IgG на поверхности чувствительной области. Используя раствор мочевины (8,0 М) для регенерации поверхностей биосенсора, оценивали образцы IgG с различными концентрациями в диапазоне от 0,05 до 0,4 мг / мл (0,05, 0,1, 0,2 и 0,4 мг / мл).Ответ усиливался с увеличением концентрации IgG. Однако резонансная длина волны канала 2 остается неизменной, что означает, что во время обнаружения IgG в канале 2 не происходило молекулярного взаимодействия. Более того, ответ канала 2 также демонстрирует, что не было значительного изменения объема RI при увеличении концентрации IgG. На рисунке 5 (c) показана взаимосвязь между интенсивностью канала 1 и различными концентрациями образцов IgG. Нормализованная интенсивность линейно уменьшалась с концентрацией образцов.Планки погрешностей на рис. 5 показывают дисперсию трех повторных экспериментов.

Рис. 5

(а) Ответ двух каналов при обнаружении IgG. (b) Реакция двух каналов при обнаружении Con A. (c) Калибровочная кривая канала 1. (d) Калибровочная кривая канала 2.

Затем, в реальном времени отклики разработанного биосенсора на Con A с различными концентрациями (0,05, 0,08, 0,1, 0,3 и 0,5 мг / мл) были экспериментально исследованы. Как показано на рис. 5 (b), резонансная длина волны канала 2 имеет красный сдвиг из-за связи между Con A и РНКазой B.Точно так же неизменная интенсивность канала 1 также может указывать на отсутствие значительного изменения объемного RI во время процесса обнаружения Con A. Взаимосвязь между различными концентрациями образцов Con A и характеристикой длины волны канала 2 показана на рис. 5 (d). Резонансная длина волны линейно перемещалась в сторону более длинных волн по мере увеличения концентрации Con A. Также был проведен эксперимент по введению забуференной смеси, содержащей как 0,05 мг / мл IgG, так и 0,05 мг / мл Con A. Результаты показали такие же ответы по интенсивности и длине волны, как на фиг.5 (а) и 5 (б), за исключением того, что изменение сигнала произошло почти одновременно. Используя контрольный канал, мы можем гарантировать, что изменение измеренного сигнала было вызвано специфическим событием связывания между аналитом и соответствующими распознающими молекулами на сенсорной поверхности. Пределы обнаружения составляли 0,05 и 0,01 мг / мл для двух каналов соответственно.

4. Заключение

Таким образом, мы предложили и продемонстрировали двухканальный волоконно-оптический биосенсор, использующий гибридный опрос интенсивности и модуляции длины волны.Модуляция интенсивности и длины волны генерировалась из ППР ЗНЧ и сэндвич-конфигурации пленки Au / ITO / Au, соответственно. Мы изготовили двухканальные прототипы с комбинацией ЗНЧ и сэндвич-конфигурации пленки Au / ITO / Au. Технология зондирования завершается измерением изменения интенсивности и сдвига длины волны резонансных провалов в спектре передачи. В диапазоне RI от 1,3266 до 1,3683 соответствующие чувствительности составляют 334,1% RIU − 1 и 1963,2 нм / RIU для ЗНЧ и пленочных каналов Au / ITO / Au, соответственно.Мы исследовали возможность мультианалитического восприятия этой структуры, когда сенсорные зонды функционализированы разными биологическими молекулами, а двойные каналы могут обнаруживать разные биохимические цели одновременно. Биохимический ответ показывает, что этот датчик можно использовать для двухканального измерения и повысить эффективность обнаружения. Дальнейшие работы будут сосредоточены на повышении чувствительности и разрешения за счет оптимизации конструкции сенсора и материалов.

Раскрытие информации

Авторы не заявляют о конфликтах интересов, финансовых или иных.

Благодарности

Авторы выражают благодарность Национальному фонду естественных наук Китая (61137005 и 11474043) за финансовую поддержку.

Ссылки

18.

S. Mohseni et al., «Разработка сенсора SPR без меток для обнаружения матриксной металлопротеиназы-9 путем иммобилизации антител на карбоксиметилдекстрановом чипе», Биосенс. Биоэлектрон., 81510 –516 (2016). http://dx.doi.org/10.1016/j.bios.2016.03.038 BBIOE4 0956-5663 Google Scholar

19.

K. Tiwari et al., «Датчик на основе поверхностного плазмона с на порядок более высокой чувствительностью к изменениям диэлектрической среды, вызванным электрическим полем, на границе раздела металл / нематический жидкий кристалл», Сенсорные приводы, A, 216 128 –135 (2014). http://dx.doi.org/10.1016/j.sna.2014.05.020 Google Scholar

24.

L. L. Obando et al., «Настройка динамического диапазона и чувствительности многомодовых волоконно-оптических датчиков поверхностного плазмонного резонанса белого света», Анальный.Chem., 71 (22), 5116 –5122 (1999). http://dx.doi.org/10.1021/ac9f ANCHAM 0003-2700 Google Scholar

Биография

Ликсия Ли получила степень бакалавра наук в Школе физики и электронной инженерии Университета легкой промышленности Чжэнчжоу, Чжэнчжоу, Китай, в 2012 году. В настоящее время она работает над докторской степенью в области оптической инженерии в Даляньском технологическом университете. Область ее исследований сосредоточена на волоконно-оптических датчиках, поверхностном плазмонном резонансе, а также разработке и производстве субволновой оптики.

Синьпу Чжан получил докторскую степень в области оптической инженерии на факультете физики Даляньского технологического университета, Далянь, Китай, в 2016 году. Он присоединился к Школе информационных наук и технологий Юго-Западного университета Цзяотун в качестве лектора. Его область исследований сосредоточена на волоконно-оптических сенсорах, поверхностном плазмонном резонансе и волоконных решетках.

Юйчжан Лян получил докторскую степень в области оптической инженерии на факультете физики Даляньского технологического университета, Далянь, Китай, в 2016 году.В настоящее время он является доктором Нанкинского университета. Его текущие исследовательские интересы включают поверхностный плазмонный резонанс и разработку и изготовление субволновой оптики.

Цзянье Гуан получил степень бакалавра в области оптической информации и технологий в Даляньском технологическом университете, Далянь, Китай, в 2015 году. В настоящее время он является аспирантом в области оптической инженерии в Колледже физики и оптоэлектронной техники Даляньского технологического университета . Его текущие исследовательские интересы включают поверхностный плазмонный резонанс и биохимическое зондирование.

Вэй Пэн получила докторскую степень в области оптической инженерии в Даляньском технологическом университете, Далянь, Китай, в 1999 году. Проработав 4 года в Центре фотонных технологий на факультете электротехники Политехнического института Вирджинии и государственного университета им. Приглашенный ученый и постдоктор, она заняла должность профессора на факультете Технологического университета Даляня, Китай, в 2009 году. В настоящее время ее исследовательские интересы включают волоконно-оптические датчики, поверхностный плазмонный резонанс, а также проектирование и изготовление субволновой оптики.

127001 Bell & Gossett TB-3/4 Балансир Thermoflo

Информация о гарантии

Гарантия: Указанные цены включают стандартные заводские гарантии. Гарантия требует установки, запуска и эксплуатации в соответствии с инструкциями производителя IOM. Помощь на сайте вакансии: от других Запуск: Другими Ввод в эксплуатацию: другими лицами: за эти услуги, если проект требует запуска, за них отвечает подрядчик или агент по вводу в эксплуатацию.Помощь в обучении владельца, как указано в технических характеристиках оборудования, ответственном за ввод в эксплуатацию. Разъяснения и исключения «АЛЬТЕРНАТЫ» предлагаются на рассмотрение и всегда подлежат утверждению инженером и владельцами. Исключает любые сейсмические расчеты или опоры, покрытия, отличные от заводских. Условия: указаны цены «за каждый» (если не указано иное) и пункт отправления на условиях FOB, грузовые суда не разрешены к перевозке через общий наземный перевозчик, и только внутри континентальной части США – за любые особые требования к доставке несет ответственность покупатель.Мы предлагаем все цены без налогов, срок действия 30 дней с указанной даты, и все продажи являются окончательными. После того, как товары были отправлены и покинули склад, National Pump Supply не несет ответственности за любой ущерб, причиненный в процессе доставки. Вы должны напрямую связаться с грузоотправителем и подать претензию в транспортную компанию. Время выполнения: Все предлагаемые цены основаны на стандартных заводских сроках выполнения (или), указанных в предложении. Ускоренная доставка возможна за дополнительную плату.Свяжитесь с вашим инженером по продажам, чтобы узнать расчетное время прибытия любого конкретного оборудования по любому заказу или предложению.

Просмотреть всеЗакрыть

Добавить: pJUMP19-J23119s_P

Эти плазмиды созданы вашими коллегами. Пожалуйста, примите во внимание Главный исследователь, процитируйте статью, в которой были описаны плазмиды: и включите Addgene в Материалы и методы ваших будущих публикаций.

Для вашего Материалы и методы раздел:
pJUMP19-J23119s_P был подарком от Крис Френч (Плазмида Addgene # 127001; http: // n2t.сеть / addgene: 127001; RRID: Addgene_127001)
Для вашего Ссылки раздел:
Объединенные универсальные модульные плазмиды (JUMP): гибкая векторная платформа для синтетической биологии .Валенсуэла-Ортега М., Френч К. Synth Biol (Oxf). 2 февраля 2021 г .; 6 (1): ysab003. DOI: 10,1093 / синбио / ysab003. eCollection 2021. 10.1093 / synbio / ysab003 PubMed 33623824

Brady® 127001 | Электроснабжение Revere

Знак опасности поражения электрическим током Brady®, ламинированный прямоугольный, текстовые обозначения, ОПАСНОСТЬ ___ НАПРЯЖЕНИЕ ТОЛЬКО ДЛЯ УПОЛНОМОЧЕННОГО ПЕРСОНАЛА обозначения, B-302 Полиэстер, самоклеящееся крепление, 10 дюймов в высоту, 14 дюймов в ширину, черный / красный на белом

Высота	:	10 дюйм
Легенда Стиль	:	Текст
Легенда / Цвет фона	:	Черный / красный на белом
Легенда	:	ОПАСНО ___ НАПРЯЖЕНИЕ ТОЛЬКО ДЛЯ УПОЛНОМОЧЕННОГО ПЕРСОНАЛА
Материал	:	B-302 Полиэстер
Тип монтажа	:	Самоклеящийся
Тип	:	Ламинированный прямоугольный
Ширина	:	14 дюйм

B-302 – это высокоэффективный знак безопасности, чувствительный к давлению, для использования внутри и вне помещений, он представляет собой полиэфир с печатным рисунком и ламинатом из полиэстера.
Устойчивость к истиранию и химическому воздействию F
Используется для знаков безопасности, пожарной сигнализации, огнетушителей и аварийных выходов
Полиэфирный ламинат выдерживает до 1000 циклов
Средний ожидаемый срок службы продукта вне помещения от 5 до 8 лет будет зависеть от определения пользователем неисправности и климатических условий
Английский язык
Защищенная графика выдерживает многократные разливы и промывки

Влияние рекламы общего жидкого молока и сыра на регулируемые рынки молочных продуктов: анализ системной динамики

Скачать полный текст от издателя

Ссылки на IDEAS

Притчетт, Джеймс Г.И Лю, Дональд Дж. И Кайзер, Гарри М., 1998. “ Оптимальный выбор расходов на рекламу непатентованного молока в СМИ “, Журнал экономики сельского хозяйства и природных ресурсов, Западная ассоциация экономики сельского хозяйства, вып. 23 (1), страницы 1-15, июль.
Филип Р. Ванде Камп и Гарри М. Кайзер, 2000. « Оптимальные временные политики в рекламе жидкого молока », Американский журнал экономики сельского хозяйства, Ассоциации сельскохозяйственной и прикладной экономики, вып. 82 (2), страницы 274-286.

Полные ссылки (включая те, которые не соответствуют элементам в IDEAS)
Самые популярные товары
Это элементы, которые чаще всего цитируют те же работы, что и эта, и цитируются в тех же работах, что и эта.
Юцин Чжэн и Гарри М. Кайзер, 2009 г. « Оценка эффективности рекламы непатентованных лекарств по сравнению с нерекламной маркетинговой деятельностью на молочных рынках штата Нью-Йорк », Агробизнес, John Wiley & Sons, Ltd., т.25 (3), страницы 351-368.
Уэда, Такеши и Фрешетт, Даррен Л., 2002. “ Изменились ли предпочтения в отношении молочного жира? Структурный анализ потребления молока в Нью-Йорке “, Обзор экономики сельского хозяйства и ресурсов, Северо-восточная ассоциация экономики сельского хозяйства и ресурсов, т. 31 (1), страницы 1-13, апрель.
Dewenter, Ralf & Heimeshoff, Ulrich, 2016. « Прогнозирование объемов рекламы: подход структурных временных рядов », Документы для обсуждения DICE 228, Дюссельдорфский университет, Дюссельдорфский институт экономики конкуренции (DICE).
Парселл, Джо Л. и Кастенс, Терри Л. и Дуйветтер, Кевин С. и Шредер, Тед К., 2000. « Эффективность экономических экономистов-аграриев в отчетности и передаче исследовательских процедур и результатов ,» Обзор экономики сельского хозяйства и ресурсов, Cambridge University Press, vol. 29 (2), страницы 173-182, октябрь.
Парселл, Джозеф Л. и Кастенс, Терри Л. и Дуйветтер, Кевин С. и Шредер, Тед К., 2000. « Эффективность отчетности и передачи исследовательских процедур и результатов экономистов-аграрников ,» Обзор экономики сельского хозяйства и ресурсов, Северо-восточная ассоциация экономики сельского хозяйства и ресурсов, т.29 (2), страницы 1-10, октябрь.
Тариф, Рольф и Гросскопф, Шона и Селдон, Барри Дж. И Тремблей, Виктор Дж., 2004. « Эффективность рекламы и выбор медиамикса: ящик пива », Международный журнал промышленной организации, Elsevier, vol. 22 (4), страницы 503-522, апрель.
Закария Бабуцидзе, 2011 г. « Возвращается к продвижению продукта, когда потребители учатся потреблять », Журнал эволюционной экономики, Springer, vol.21 (5), страницы 783-801, декабрь.
Николсон, Чарльз Ф. и Кайзер, Гарри М., 2008. « Динамическое влияние рекламы непатентованных молочных продуктов на рынок », Журнал бизнес-исследований, Elsevier, vol. 61 (11), страницы 1125-1135, ноябрь.
Pimbucha Rusmevichientong & Harry M. Kaiser, 2009. « Измерение эффективности программ содействия экспорту риса из США », Агробизнес, John Wiley & Sons, Ltd., т. 25 (2), страницы 215-230.
Ральф Девентер и Ульрих Хеймесхофф, 2017.« Прогнозирование объемов рекламы с использованием структурных моделей временных рядов: пример из практики », Бюллетень экономики, AccessEcon, vol. 37 (3), страницы 1644-1652.
Гарри М. Кайзер, Дональд Дж. Лю и Тед Консигнадо, 2003 г. “ Экономический анализ продвижения экспорта изюма из Калифорнии ,” Агробизнес, John Wiley & Sons, Ltd., т. 19 (2), страницы 189-201.
Дарем, Кэтрин А. и Джонсон, Аарон Дж. И Макфетридж, Марк В., 2007. « Влияние маркетинга и менеджмента на продажи продукции », Журнал исследований распределения пищевых продуктов, Общество исследований распределения пищевых продуктов, вып.38 (2), страницы 1-17, июль.
Шмит, Тодд М. и Кайзер, Гарри М., 2007. « Оптимальное сезонное распределение расходов на рекламу родовых молочных продуктов ,» Журнал сельскохозяйственной и прикладной экономики, Южная ассоциация экономики сельского хозяйства, вып. 39 (1), страницы 1-23, апрель.
Бабуцидзе, Закария, 2009. « Learning How to Consume and Returns to Product Promotion ,» Рабочие документы MERIT 2009-018, Университет Организации Объединенных Наций – Маастрихтский институт экономических и социальных исследований в области инноваций и технологий (MERIT).
Бич, Роберт Х. и Мюррей, Брайан К. и Пигготт, Николас Э. и Вольгенант, Майкл К., 2002. « Взаимодействие программ продвижения, исследований и поддержки цен для хлопка США », 2002 Ежегодное собрание, 28-31 июля, Лонг-Бич, Калифорния. 19803, Американская ассоциация экономики сельского хозяйства (новое название, 2008 год: Ассоциация сельскохозяйственной и прикладной экономики).
Донг, Дяньшенг и Шмит, Тодд М. и Кайзер, Гарри М., 2007. « Оптимальное распределение средств массовой информации расходов на рекламу общего жидкого молока: пример штата Нью-Йорк », Обзор экономики сельского хозяйства и ресурсов, Cambridge University Press, vol.36 (2), страницы 253-266, октябрь.
Сильви Чумтчуа и Рональд В. Коттерилл, 2010 г. « Оптимальная торговая марка и общие рекламные политики в динамической дифференцированной продуктовой олигополии », Отчеты об исследованиях Центра политики в области маркетинга пищевых продуктов 126, Университет Коннектикута, Департамент экономики сельского хозяйства и природных ресурсов, Центр Чарльза Дж. Цвика по политике в области пищевых продуктов и ресурсов.
Холлоуэй Гарт Дж. И Айдогус Осман, 2004 г. «Перенос промоакции как проблема отсутствия данных », Журнал сельскохозяйственной и пищевой промышленной организации, De Gruyter, vol.2 (1), страницы 1-18, февраль.
Исправления
Все материалы на этом сайте предоставлены соответствующими издателями и авторами. Вы можете помочь исправить ошибки и упущения. При запросе исправления укажите дескриптор этого элемента: RePEc: ags: cudawp: 127001 . См. Общую информацию о том, как исправить материал в RePEc.
По техническим вопросам, касающимся этого элемента, или для исправления его авторов, заголовка, аннотации, библиографической информации или информации для загрузки, обращайтесь: (AgEcon Search).Общие контактные данные провайдера: http://edirc.repec.org/data/dacorus.html .
Если вы создали этот элемент и еще не зарегистрированы в RePEc, мы рекомендуем вам сделать это здесь. Это позволяет связать ваш профиль с этим элементом. Это также позволяет вам принимать потенциальные ссылки на этот элемент, в отношении которых мы не уверены.
Если CitEc распознал ссылку, но не связал с ней элемент в RePEc, вы можете помочь с этой формой .
Если вам известно об отсутствующих элементах, цитирующих этот элемент, вы можете помочь нам создать эти ссылки, добавив соответствующие ссылки таким же образом, как указано выше, для каждого элемента ссылки.Если вы являетесь зарегистрированным автором этого элемента, вы также можете проверить вкладку «Цитаты» в своем профиле RePEc Author Service, поскольку там могут быть некоторые цитаты, ожидающие подтверждения.
Обратите внимание, что исправления могут занять пару недель, чтобы отфильтровать различные сервисы RePEc.
.

127001: localhost – Apache для Windows

127.0.0.1 — Lurkmore

[править] Использование

[править] Полезные примеры

[править] Что будет, если дудосить локалхост

[править] Почтовый индекс

127.0.0.1 — Lurkmore

[править] Использование

[править] Полезные примеры

[править] Что будет, если дудосить локалхост

[править] Почтовый индекс

127.0.0.1 — Lurkmore

[править] Использование

[править] Полезные примеры

[править] Что будет, если дудосить локалхост

[править] Почтовый индекс

Комод TF-127001 – ON24 Мебель и интерьер

Сделано у нас – Нам есть чем гордиться!

127001 (Ярно) · GitHub

Особенности

Организации

Популярные репозитории

17 публикаций в прошлом году

Вклад деятельности

Март 2021 г.

Последовательный вызов вызывает ошибку.js путь

Оценка концентрации свободного гемоглобина в мешках с кровью методом спектроскопии диффузного отражения

1.

Введение

2.

Принципы

2.1.

Теория диффузного отражения

Ур.(1)

2.2.

Суспензии эритроцитов и их оптические свойства

Eq. (2)

Eq. (3)

Eq. (4)

Eq. (6)

Ур. (7)

2.3.

Повреждения при хранении и их влияние на оптические свойства

2.4.

Моделирование концентрации FHB

Eq. (8)

Ур. (9)

3.

Экспериментальные методы и измерения

3.1.

Измерение оптических свойств пакетов для крови

Рис. 1

Таблица 1

3.2.

Многослойное моделирование методом Монте-Карло

3.3.

Эксперименты

3.3.1.

Измерения диффузного отражения

Рис. 2

3.3.2.

Оценка Sat (O

Уравнение(10)

3.3.3.

Измерение гематологических параметров

3.3.4.

Контрольные измерения FHB

Eq.(11)

3.4.

Обобщенная линейная модель для прогнозирования концентрации FHB

Eq. (13)

4.

Результаты

4.1.

Влияние хранения ES на гематологию

Рис. 3

4.2.

Спектры диффузного отражения блоков ES и влияние хранения на них

Рис. 4

Рис. 5