Г3 111 характеристики: 111 | Генератор сигналов Г3-111 , купить Г3-111 , Г3-112 цена. Г3-112 Генератор сигналов

ПрофКиП Г3-111М генератор сигналов низкочастотный (10 Гц … 1 МГц) — Полная Информация на Официальном Сайте: Цена, Описание, Инструкции.

 Назначение генератора сигналов низкочастотного ПрофКиП Г3-111М

Генератор сигналов низкочастотный ПрофКиП Г3-111М является  малогабаритным аудио-генератором. Установка частоты осуществляется плавно в пределах одного поддиапазона. Всего в генераторе пять поддиапазонов, предназначенных для эксплуатации в жестких условиях. Синхронизация частоты генератора сигналов низкочастотного ПрофКиП Г3-111М может осуществляться внешними сигналами в независимости от их формы.

Особенности и преимущества генератора сигналов низкочастотного ПрофКиП Г3-111М

▪ Диапазон частот: 10 Гц … 1 МГц

▪ 6-ступенчатый выходной аттенюатор

▪ Функция внешней синхронизации

▪ Формы сигнала: синусоида, меандр

▪ Простота использования

Основные технические характеристики генератора сигналов низкочастотного ПрофКиП Г3-111М

Параметры	Значения
Синусоидальная волна
Диапазон частот	10 Гц … 1 МГц, 5 диапазонов
Индикатор частоты	Лимб
Точность	±(3% + 1 Гц)
Выходное напряжение	≥ 5 В (без нагрузки) ≥ 2.8 В (с нагрузкой 600 Ом)
Частотный отклик	10 Гц … 1 МГц ±1.5 дБ ( с нагрузкой 600 Ом, задание частоты 1 кГц)
Коэффициент искажения	400 Гц … 20 кГц 0.1% или менее 50 Гц … 500 кГц 0.5% или менее
Прямоугольная волна
Выходное напряжение	10 Впик-пик или более
Время нарастания и спада	≤ 0.25 мкс
Коэффициент заполнения	50% ±5% при 1 кГц
Внешняя синхронизация
Полоса синхронизации	±3% /В
Максимально допустимое входное напряжение	10 В
Входной импеданс	10 кОм ±10%
Выходные характеристики
Импеданс	600 ОМ ± 10%
Выходной аттенюатор	0 дБ, -10 дБ, -20 дБ, -30 дБ, -40 дБ, -50 дБ, 6 диапазонов (точность ±1 дБ при нагрузке 600 Ом)

Общие данные генератора сигналов низкочастотного ПрофКиП Г3-111М

▪ Питание: 110 В … 127 В ±10% /220 В … 240 В ±10%, 50 Гц ±2Гц /60 Гц ±2 Гц

▪ Габаритные размеры: 142х197х233 мм

▪ Вес: 3.5 кг

Комплект поставки генератора сигналов низкочастотного ПрофКиП Г3-111М

Наименование	Количество
Генератор сигналов низкочастотный ПрофКиП Г3-111М	1 шт.
Кабель питания	1 шт.
Руководство по эксплуатации	1 шт.

 

Генератор Г3-111

Справочник количества содержания ценных металлов в Генератор Г3-111 согласно паспортов формуляров и сборной информационной литературы. Указано точное значение драгоценных металлов в граммах (Золото, серебро, платина, палладий и другие) на единицу изделия.

Содержание драгоценных металлов в Генератор Г3-111

Золото: 0,213 грамм.
Серебро: 4,457 грамм.
Платина: 0,138 грамм.
Палладий:

0 грамм.

Источник информации: Из перечней ВНИИ Трансмаш.

Фото Г3-111:

генератор измерительный – характеристики

О приборе – Генератор
Измери́тельный генера́тор (генератор сигналов, от лат. generator — производитель, сигнал-генератор) — электронное устройство, мера для воспроизведения электромагнитного сигнала (синусоидального, импульсного, шумового или специальной формы). Генераторы применяются для проверки и настройки радиоэлектронных устройств, каналов связи, при поверке и калибровке средств измерений и в других целях.

Классификация

По ГОСТ 15094 генераторы подразделяются на 6 видов: низкочастотные, высокочастотные, импульсные, сигналов специальной формы, шумовых сигналов и качающейся частоты. Однако, следует учитывать, что классификационные границы условны, некоторые генераторы занимают промежуточное положение между низко- и высокочастотными, некоторые бывают комбинированными по виду сигнала. Для оптических генераторов существует аналогичная классификация. Кроме генераторов стандартизованных видов бывают генераторы отраслевого назначения (в составе контрольно-измерительной аппаратуры).

Г2 — генераторы шума, имитируют белый или розовый шум.
ПРИМЕРЫ: Г2-37, Г2-47, Г2-59
Г3 — генераторы низкой частоты, обычно от 20 Гц до 200 кГц, реже до 2 или 10 МГц, модуляция сигнала в генераторах производства до 80-х гг, как правило, не предусмотрена.
ПРИМЕРЫ: Г3-102, Г3-109, Г3-118, Г3-119, Г3-122
Г4 — генераторы высокой частоты, предназначены для работы в радиочастотном диапазоне с различными видами модуляции.
ПРИМЕРЫ: Г4-83, Г4-129, Г4-153, Г4-154, РГ4-14, РГ4-17-01А, Г4-219, Г4-220
Г5 — генераторы импульсов, воспроизводят последовательности прямоугольных импульсов, некоторые генераторы способны генерировать кодовые импульсные последовательности.
ПРИМЕРЫ: Г5-54, Г5-60, Г5-80, Г5-89, Г5-100, Г5-103, Г5-109

Г6 — генераторы сигналов специальной формы, воспроизводят последовательности импульсов разной формы: треугольной, пилообразной, трапецеидальной и др.
ПРИМЕРЫ: Г6-17, Г6-22, Г6-39
Г7 — синтезаторы частот, используют различные методы синтеза частоты из опорного сигнала, могут иметь в своем составе модуляторы.
ПРИМЕРЫ: Г7-14, Г7-15, Г7М-20, Г7М-40
Г8 — генераторы качающейся частоты
ПРИМЕРЫ:
ОГ — генераторы оптического диапазона
ПРИМЕРЫ: ОГ-2-1, ОГ4-163, ОГ5-87
Генераторы отраслевого назначения — воспроизводят специальные сигналы, например, сложной формы или со сложными комбинированными методами модуляции, манипуляции; наравне с калибраторами предназначены для проверки и настройки определенных видов радиоаппаратуры.
ПРИМЕРЫ: И-331 (в авионике), ГКС-69 (в авионике), ГТИС-01 (телевизионный)

Генератор – видео.

Характеристики Г3-111:

Купить или продать а также цены на Генератор Г3-111:

Оставьте отзыв о Г3-111:

Г3-135   * Генератор сигналов низкочастотный

Наименование характеристики	Значение
Диапазон частот (в диапазоне  (0,001 – 0,01) Гц  параметры не нормируются)	0,001 Гц – 10 МГц
Дискретность перестройки частоты ·          до 500 кГц ·          свыше 500 кГц  до 10 МГц	0,001 Гц 0,02 Гц
Коэффициент гармоник КГ, %, не более
·          на нагрузке 50 Ом o    в диапазоне частот 0,001 Гц – 200 Гц o    в диапазоне частот 0,2 кГц – 20 кГц o    в диапазоне частот 20 кГц – 60 кГц o    в диапазоне частот 60 кГц – 200 кГц o    в диапазоне частот 200 кГц – 500 кГц o    в диапазоне частот 500 кГц – 2000 кГц o    в диапазоне частот 2 МГц – 5 МГц o    в диапазоне частот 5 МГц – 10 МГц	0,03 0,003 0,01 0,03 0,1 0,5 2 4
·          на нагрузке 600 Ом o    в диапазоне частот 0,001 Гц – 200 Гц o    в диапазоне частот 0,2 кГц – 10 кГц o    в диапазоне частот 10 кГц – 20 кГц o    в диапазоне частот 20 кГц – 60 кГц o    в диапазоне частот 60 кГц – 200 кГц o    в диапазоне частот 200 кГц – 500 кГц o    в диапазоне частот 0,5 МГц – 10 МГц	0,03 0,003 0,005 0,02 0,05 0,1 Не нормируется
Нестабильность частоты F, за 12 мес.*	1·10 -5F Гц
Абсолютная погрешность установки частоты	±1·10-5F Гц
Выходное сопротивление	5 Ом; 50 Ом; 600 Ом
Диапазон установки выходного напряжения:
·       При выходном сопротивлении генератора 5 Ом o    на нагрузке 50 Ом §   в диапазоне частот 0,001 Гц – 5 МГц §   в диапазоне частот свыше 5 – 10 МГц	10 мВ – 5 В 10 мВ – 2,5 В
o    на нагрузке 600 Ом §   в диапазоне частот 0,001 Гц – 5 МГц §   в диапазоне частот свыше 5 – 10 МГц	10 мВ – 10 В 10 мВ – 5 В
·       При выходном сопротивлении генератора 50 Ом o    на нагрузке 50 Ом §   в диапазоне частот 0,001 Гц – 5 МГц §   в диапазоне частот свыше 5 – 10 МГц	200 мкВ – 5 В 200 мкВ – 2,5 В
o    на нагрузке 600 Ом §   в диапазоне частот 0,001 Гц – 5 МГц §   в диапазоне частот свыше 5 – 10 МГц	200 мкВ – 9 В 200 мкВ – 4,5 В
·       При выходном сопротивлении генератора 600 Ом o    на нагрузке 600 Ом §   в диапазоне частот 0,001 Гц – 5 МГц §   в диапазоне частот свыше 5 – 10 МГц	200 мкВ – 5 В 200 мкВ – 2,5 В
Дискретность установки напряжения	1 мкВ – 1 мВ
Погрешность установки уровня	(3 – 9) %
Уровень  модуляционных и комбинационных помех, не более	– 70 дБ
Интерфейс с ЭВМ	USB-2.0; RS 232
Напряжение питания	(220±22) В 50 Гц
Масса	4 кг
Габаритные размеры	250х311х116 мм
Заменяет Г3-102, Г3-111, Г3-112, Г3-118, Г3-120 (питание 220 В), Г3-131

Покупаем на выгодных условиях: платы, радиодетали, микросхемы, АТС, приборы, лом электроники, катализаторы

Мы гарантируем Вам честные цены! Серьезный подход и добропорядочность – наше главное кредо.

Компания ООО «РадиоСкупка» (скупка радиодеталей) закупает и продает радиодетали , а также любое радиотехническое оборудование и приборы. У нас Вы сможете найти не только наиболее востребованные радиодетали, но и редкие производства СССР и стран СЭВ. Мы являемся партнером  «ФГУП НИИ Радиотехники» и накопили огромный опыт  за наши годы работы. Также многих радиолюбителей заинтересует наш уникальный справочник по содержанию драгметаллов в радиодеталях. В левом нижнем углу нашего сайта Вы сможете узнать актуальные цены на драгметаллы такие, как золото, серебро, платина, палладий (цены указаны в $ за унцию) а также текущие курсы основных валют. Работаем со всеми  городами России и география нашей работы простирается от Пскова и до Владивостока. Наш квалифицированный персонал произведет грамотную и выгодную для Вас оценку вашего оборудования, даст профессиональную консультацию любым удобным Вам способом – по почте или телефону.  Наш клиент всегда доволен!

Покупаем платы, радиодетали, приборы, АТС, катализаторы. Заинтересованы в выкупе складов с неликвидными остатками радиодеталей а также цехов под ликвидацию с оборудованием КИПиА.

Приобретаем:

• платы от приборов, компьютеров
• платы от телевизионной и бытовой техники
• микросхемы любые
• транзисторы
• конденсаторы
• разъёмы
• реле
• переключатели
• катализаторы автомобильные и промышленные
• приборы (самописцы, осциллографы, генераторы, измерители и др.)

Купим Ваши радиодетали и приборы в любом состоянии, а не только новые. Цены на сайте указаны на новые детали. Расчет стоимости б/у деталей осуществляется индивидуально в зависимости от года выпуска, состоянии, а также текущих цен Лондонской биржи металлов. Работаем почтой России, а также транспортными компаниями. Наша курьерская служба встретит и заберет Ваш груз с попутного автобуса или поезда.

Честные цены, наличный и безналичный расчет, порядочность и клиентоориентированность наше главное преимущество!

Остались вопросы – звоните 8-961-629-5257, наши менеджеры с удовольствием ответят на все Ваши вопросы. Для вопросов по посылкам: 8-900-491-6775. Почта [email protected]

С уважением, директор Александр Михайлов.

генераторы сигналов низкочастотные – Прибор Ресурс

Сортировка: По умолчаниюНазвание (А – Я)Название (Я – А)Цена (низкая > высокая)Цена (высокая > низкая)Рейтинг (начиная с высокого)Рейтинг (начиная с низкого)Модель (А- Я)Модель (Я – А)

Показать: 25506075100

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-101 Также этот прибор может называться: Г3101, Г3 101, ГЗ-101, ГЗ101, ГЗ 101, Г-3101, Г 3101. Г3-101 генератор сигналов низкочастотный является специальным прибо..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-102 (Г3102, Г 3 102, Г-3-102, Г3 102) Генератор сигналов низкочастотный Г3-102 с плавной установкой частоты в пределах каждого из четырех поддиапазо..

• Генератор сигналов Г3-104 низкочастотный (Г3104, Г3 104, Г-3104, Г 3104, ГЗ104, ГЗ-104, ГЗ 104)Гетеродинного типа (на биениях) с системой автоматической развертки по частоте.Диапазон частот -&nbs..

• Г3-105 генератор сигналов низкочастотный Также этот прибор может называться: Г3105, Г3 105, ГЗ-105, ГЗ105, Г-3105, Г 3105. Г3-105 генератор сигналов низкочастотный является прецизионным декадным ген..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-106 Также этот прибор может называться: Г3 106, Г3106, Гз-106, g3-106, g3 106, g3106. Г3-106 генератор сигналов низкочастотный является источником синусоидальных..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-107 (Г3107, Г3 107, ГЗ-107) Генератор сигналов низкочастотный Г3-107 с плавной установкой частоты в пределах каждого из четырех поддиапазонов. Приме..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-108 Также этот прибор может называться: Г3108, Г3 108, ГЗ-108, ГЗ108, Г-3108, Г 3108. Г3-108 генератор сигналов низкочастотный является прецизионным декадным ге..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-109 (Г3109, Г3 109, ГЗ-109) Генератор сигналов низкочастотный Г3-109 с плавной установкой частоты в пределах каждого из четырех поддиапазонов.Симмет..

• Генератор Г3-110 низкочастотный (Г3 110, Г3110) Является источником синусоидальных электрических колебаний в диапазоне 0,01 Гц-2 МГц с высокой точностью и стабильностью частоты. Диапазон ..

• Генератор сигналов Г3-111 (Г3111, Г3 111, ГЗ-111, ГЗ 111) Предназначен для регулировки и испытания различных радиотехнических устройств в лабораторных и цеховых условиях. Диапазон частот 2..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-112 (Г3112, Г3 112, ГЗ-112) Генератор сигналов низкочастотный Г3-112 с плавной установкой частоты в пределах каждого из шести поддиапазонов.Выход ге..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-112/1 (Г3112/1, Г3 112/1, ГЗ-112/1)Генератор сигналов низкочастотный Г3-112/1 с плавной установкой частоты в пределах каждого из шести поддиапазонов.Выхо..

• Генератор Г3-113 (Г3113, Г3 113, Гз-113, Гз 113) Предназначен для исследования, настройки и испытаний систем и приборов используемых в радиоэлектронике, связи, автоматике, вычислительной и изм..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-117 (Г3117, Г3 117, ГЗ-117) Генератор сигналов низкочастотный Г3-117 используется для работы в автоматизированных системах с записью результатов на ..

• Генератор сигналов Г3-118 низкочастотный (Г3118, Г3 118) Генератор Г3-118 сигналов низкочастотный RC-типа с дискретной установкой частоты в пределах каждого из пяти ..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-119 (Г3119, Г3 119, ГЗ-119) Генератор сигналов низкочастотный Г3-119 является источником синусоидальных электрических сигналов. Отличается высокой т..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-120 (Г3120, Г3 120, ГЗ-120) Генератор сигналов низкочастотный Г3-120 представляет собой источник синусоидального (основной режим) и прямоугольного (..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-121 (Г3121, Г3 121, ГЗ-121) Генератор сигналов низкочастотный Г3-121 представляет собой источник синусоидального (основной режим) и прямоугольного (дополни..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-122 (Г3122, Г 3 122, Г-3-122, Г3 122) Генератор сигналов низкочастотный Г3-122 представляет собой источник синусоидальных электрических колебаний с ..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-123 (Г3123, Г3 123, ГЗ-123) Генератор сигналов низкочастотный Г3-123 представляет собой источник синусоидального сигнала с повышенной выходной мощно..

• Низкочастотный генератор сигналов Г3-129 Также этот прибор может называться: Г3 129, Г3129, Гз-129, g3-129, g3129, g3 129. Г3-129 генератор сигналов низкочастотный предназначен для генерирования син..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-131 Также этот прибор может называться: Г3 131, Г3131, Гз-131, Гз 131, Гз131. Г3-131 генератор сигналов низкочастотный – источник сигналов синусоидальной и прямо..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-135 Также этот прибор может называться: Г3135, Г 3135, Гз-135, Гз 135, Гз135, g3-135, g3135, g3 135. Г3-135 генератор сигналов низкочастотный предназначен для фо..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-136 Также этот прибор может называться: Г3136, Г 3136, Гз-136, Гз 136, Гз136, g3-136, g3136, g3 136. Г3-136 генератор сигналов низкочастотный предназначен для фо..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-137Также этот прибор может называться: Г3137, Г 3137, Гз-137, Гз137, Гз 137, g3-137, g3137, g3 137. Г3-137 генератор сигналов низкочастотный предназначен..

• Генератор сигналов Г3-33 (Г-3-33; Г 3-33). Генератор Г3-33 – представляет собой источник синусоидальных электрических колебаний звуковых и ультразвуковых частот. Прибор предназначенный для рег..

• Генератор звуковой Г3-34 Также этот прибор может называться: Г334, Г3 34, Г-334, ГЗ-34, ГЗ 34, Г З34, Г-З34. Генератор звуковой Г3-34 является источником синусоидальных колебаний звуково..

• Генератор Г3-36 (Г-3-36; Г 3 36; Г-3-36; ГЗ-З6; Г-З-З6; Г З З6; Г-З-З6) Г3-36 – генератор низкочастотных сигналов, который являет портативный источник синусоидальных электрических колебаний звуковых и..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-36А Также этот прибор может называться: Г3 36А, Г336А, Г-336А, Г 336А, Г3-36-А, Г3-36 А, ГЗ-36А, ГЗ36А, ГЗ 36А, g3-36a, g336a, g3 36a. Г3-36А генератор сигналов ..

• Генератор сигналов Г3-39 Также этот прибор может называться: Г3 39, Г339, Гз-39, g3-39, g3 39, g339. Г3-39 генератор сигналов инфранизких и низких частот декадный предназначен для использования при ..

• Генератор инфразвуковых и звуковых частот Г3-47 Также этот прибор может называться: Г347, Г3 47, ГЗ-47, ГЗ47, ГЗ 47. Г3-47 генератор инфразвуковых и звуковых частот – источник электрического сигнала..

• Генератор звуковых и ультразвуковых частот Г3-48 (ГЗ 48; g3-48; g3 48)Генератор звуковых и ультразвуковых частот Г3-48 – источник синусоидальных сигналов, предназначенный для контроля параметров радио..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-49Также этот прибор может называться: Г3 49, Г349, Гз-49, g3-49, g3 49, g349. Г3-49 генератор сигналов низкочастотный предназначен для исследования и рег..

• Генератор низкочастотных сигналов Г3-49А Также этот прибор может называться: Г349А, Г3 49А, ГЗ-49А, ГЗ49А, ГЗ 49А. Г3-49А генератор низкочастотных сигналов (низкочастотный синтезатор) – источник син..

• Генератор сигналов инфранизкой частоты Г3-54Также этот прибор может называться: Г3 54, Г354, Г-3-54, Г 3 54, Гз 5ч, g3-54, g3 54, g354. Г3-54 генератор сигналов инфранизкой частоты предназна..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-56Также этот прибор может называться: Г3 56, Г356, g3-56, g3 56, g356. Г3-56 генератор сигналов низкочастотный предназначен для получения электрических к..

• Генератор сигналов низкочастотный Г3-56/1 (Г3561, Г3 56 1, Г3-56-1, Г3 56/1) Генератор сигналов низкочастотный Г3-56/1 используется при регулировке и испытании каскадов радиоаппаратуры в лабор..

• Генератор Г3-7А (Г 3-7А; Г-3-7А; g3-7a; g 3-7a; g-3-7а). Генератор Г3-7А – измерительный прибор, используемый для испытания и настройки различных широкополосных систем видеочастоты, проверки..

• Генератор сигналов низкочастотный ГФ-05 Также этот прибор может называться: ГФ 05, ГФ05, ГФ-о5, gf-05, gf 05, gf05. ГФ-05 генератор сигналов низкочастотный предназначен для исследования, настройки,..

• Генератор функциональный ГФ-07 (ГФ 07; ГФ07)Генератор ГФ-07 – изделие для исследования, настройки, испытания и ремонта систем и приборов, работающих в области инфранизких и низких частот. Генерац..

• Прецизионный низкочастотный генератор ПНГ-1.0 (ПНГ-1, ПНГ 1, ПНГ1) Предназначен для генерации высокостабильных синусоидальных и пилообразных сигналов. Диапазон частот 10 – 4…30 Гц, программируемые ре..

ГЕНЕРАТОР СИГНАЛОВ НИЗКОЧАСТОТНЫЙ Г3-135 – Научно-внедренческий центр «НавгеоТест»

Наименование характеристики	Значение
Диапазон частот (в диапазоне  (0,001 – 0,01) Гц  параметры не нормируются)	0,001 Гц – 10 МГц
Дискретность перестройки частоты до 500 кГц свыше 500 кГц до 10 МГц	0,001 Гц 0,02 Гц
Коэффициент гармоник КГ, %, не более
на нагрузке 50 Ом в диапазоне частот 0,001 Гц – 200 Гц в диапазоне частот 0,2 кГц – 20 кГц в диапазоне частот 20 кГц – 60 кГц в диапазоне частот 60 кГц – 200 кГц в диапазоне частот 200 кГц – 500 кГц в диапазоне частот 500 кГц – 2000 кГц в диапазоне частот 2 МГц – 5 МГц в диапазоне частот 5 МГц – 10 МГц	0,03 0,003 0,01 0,03 0,1 0,5 2 4
на нагрузке 600 Ом в диапазоне частот 0,001 Гц – 200 Гц в диапазоне частот 0,2 кГц – 10 кГц в диапазоне частот 10 кГц – 20 кГц в диапазоне частот 20 кГц – 60 кГц в диапазоне частот 60 кГц – 200 кГц в диапазоне частот 200 кГц – 500 кГц в диапазоне частот 0,5 МГц – 10 МГц	0,03 0,003 0,005 0,02 0,05 0,1 Не нормируется
Нестабильность частоты F за 12 мес *	1·10 -5 F  Гц
Абсолютная погрешность установки частоты	±1·10-5F  Гц
Выходное сопротивление	5 Ом; 50 Ом; 600 Ом
Диапазон установки выходного напряжения:
При выходном сопротивлении генератора 5 Ом на нагрузке 50 Ом в диапазоне частот 0,001 Гц – 5 МГц в диапазоне частот свыше 5 – 10 МГц	10 мВ – 5 В 10 мВ – 2,5 В
на нагрузке 600 Ом в диапазоне частот 0,001 Гц – 5 МГц в диапазоне частот свыше 5 – 10 МГц	10 мВ – 10 В 10 мВ – 5 В
При выходном сопротивлении генератора 50 Ом на нагрузке 50 Ом в диапазоне частот 0,001 Гц – 5 МГц в диапазоне частот свыше 5 – 10 МГц	200 мкВ – 5 В 200 мкВ – 2,5 В
на нагрузке 600 Ом в диапазоне частот 0,001 Гц – 5 МГц в диапазоне частот свыше 5 – 10 МГц	200 мкВ – 9 В 200 мкВ – 4,5 В
При выходном сопротивлении генератора 600 Ом на нагрузке 600 Ом в диапазоне частот 0,001 Гц – 5 МГц в диапазоне частот свыше 5 – 10 МГц	200 мкВ – 5 В 200 мкВ – 2,5 В
Дискретность установки напряжения	1 мкВ – 1 мВ
Погрешность установки уровня	(3 – 9) %
Уровень  модуляционных и комбинационных помех, не более	– 70 дБ
Интерфейс с ЭВМ	USB-2.0; RS 232
Масса	4 кг
Габаритные размеры	250х311х116 мм
Заменяет Г3-102, Г3-111, Г3-112, Г3-118, Г3-120 (питание 220 В), Г3-131

Прейскурант метрологической службы АО НИИ ТМ

Наименование СИ	Тип СИ	Цена за поверку (руб)*
Средства измерений электротехнических и магнитных величин
Мультиметры	В7-84	2682
Мультиметры	APPA-107; GDM-354; MY 64	2079
Мегаомметры	Е6-16 ; Е6-24/1; М503; М4100/1-4; М1101 Ф 410; М372	927
Мегаомметры	Е6-31/1	3213
Мегаомметры	Е6-13А	990
Вольтметры цифровые	В7-38; В7-40; В7-41; GDM-8245	2682
Миллиомметры	АМ-6000	1710
Микроомметры	Е6-25	1809
Микроомметры	Ф 415; М4100/1…4	801
Магазины сопротивлений	Р33; Р4002; Р40102; Р4831; МСР-60М	1314
Измерители иммитанса	Е7-25	4212
Амперметры переносные малогабаритные	М109	990
Вольтметры переносные	С50	990
Вольтамперметры	М2038; М1106; М2015	1890
Амперметры, вольтметры	М4200	171
Амперметры	Э377	171
Амперметры	Э59	1890
Вольтметры	Э532; Э533	1890
Радиотехнические и радиоэлектронные средства измерений
Частотомеры электронно-счетные, универсальные до 1 ГГц
Частотомеры электронно-счетные	Ч3-32; Ч3-34; Ч3-34А;Ч3-38; Ч3-44; Ч3-47; Ч3-54; Ч3-57; Ч3-63	1728
Частотомеры универсальные	CNT-90	3240
Осциллографы с полосой не более 500 МГц
Осциллографы цифровые 2-х кан.	GDS-820S; GDS-2102; GDS-806S; GDS-73252; TDS210;TDS1002; TDS1012; TDS1012B; MSO2022B; TDS2012C; DSO-X- 2022A; Agilent 54642D	3591
Осциллографы универсальные 2-х кан.	С1-55;C1-64А;С1-69;С1-77;С1-82; С1-83; С1-94;С1-96; С1-114/1; С1-117; С1-118; С1-127/1	2655
Осциллографы универсальные одноканальные	С1-67; С1-72; С1-73; С1-76	1908
Осциллографы цифровые 4-х канальные	WS 24Xs; WS 424; WJ 334А; GDS-2104; TDS2024; TPS2024; MSO2014; MSO2024B; DSO1024A	3591
Осциллографы мультиметры	АКИП-4125/3; С1-114; С1-112А	3294
Осциллографы цифровые 8-ми кан.	HDO8038R	3717
Генераторы звуковые	Г3-36; Г3-48; Г3-112; Г3-112/1	1728
Генераторы сигналов НЧ	Г3-102 Г3-109; Г3-111; Г3-113; Г3-118; Г3-123; Г3-139	2430
Генераторы сигналов НЧ прецизионные	Г3-110	2664
Генераторы сигналов ВЧ	Г4-102; Г4-102А; Г4-106; Г4-116; Г4-117; Г4-118; Г4-158	2664
Генераторы импульсов	Г5-54; Г5-60; Г5-80; Г5-82	2664
Вольтметры электронные аналоговые от 5 Гц до 50 МГц	В3-38; В3-40; В3-48; В3-57	1332
Вольтметры селективные до 30 МГц	В6-9; В6-10	2664
Секундомеры-калибраторы	СК-3	2277
Секундомеры электронные	Интеграл С-01	486
Счетчики импульсов микропроцессорные	СИ10	1602
Источники питания	Б5-7; Б5-8; Б5-9; Б5-10; Б5-11; Б5-12; Б5-45М; Б5-46; Б5-47; Б5-48; Б5-50; Б5-69; Б5-71/1М; Б5-71/2М; Б5-71/3М; Б5-84/1; Б5-92; GPR-7510	1566
Средства измерений геометрических величин
Индикаторы часового типа	ИЧ-5; ИЧ-10; ИЧ-25; ИЧ-50	819
Индикаторы рычажно-зубчатые	ИРБ	612
Микрометры гладкие	МК	936
Микрометры гладкие	МКЦ	936
Микрометры рычажные	МР	1242
Штангенциркули	ШЦ-I; ШЦ-II; ШЦ-III	936
Штангенциркули с цифровым отсчетом	ШЦЦ	936
Штангенглубиномеры	ШГЦ	936
Штангенглубиномеры	ШГ	936
Штангенрейсмасы	ШР	936
Штангенрейсмасы цифровые	ШРЦ	936
Скобы с отсчетным устройством	СР	936
Меры длины концевые разряд 4	№1	12609
Меры длины концевые разряд 4	№3	16767
Меры длины концевые разряд 4	№7	1638
Меры длины концевые разряд 4	№20	3348
Меры длины концевые разряд 4	№21	2889
Меры длины концевые разряд 4	№2	6084
Угломеры нониусные	УН	612
Линейки измерительные, за шкалу	Любой тип	100
Средства измерений давления, вакуумные измерения
Мановакуумметры	ДВ2005С; МКО	252
Манометры для точных измерений	МТИ	216
Манометры избыточного давления	МТП-100; МТП-160; МП-100	252
Манометры показывающие	KFM; ТМ	216
Манометры показывающие	ЭКВ-160; ЭКВ-1У; ЭКМ-1У; ЭКМ-2У; ЭКМВ-1У; ЭКМ-У2	252
Манометры показывающие, вакуумметры и мановакуумметры показывающие	МП4-У; МП4-У2; МП4-УУ2; МП3	252
Манометры, вакуумметры и мановакуумметры показывающие деформационные	ДМ	252
Манометры	МОШ1-100; МОШ1-160; ОБМ1-100; ОБМ1-160	252
Манометры технические	МТ; МТ-100	252
Средства теплофизических и температурных измерений
Измерители-регуляторы микропроцессорные одноканальные	2ТРМ0, ТРМ1, 2ТРМ1, ТРМ-10, ТРМ12, ТРМ0-PiC, TPM1-PiC, TPM5-PiC, TPM10-PiC, TPM12-PiC	1917
Измерители-регуляторы микропроцессорные многоканальные	2ТРМ0, ТРМ1, 2ТРМ1, ТРМ-10, ТРМ12, ТРМ0-PiC, TPM1-PiC, TPM5-PiC, TPM10-PiC, TPM12-PiC	2853
Приборы для измерения и регулирования температуры многоканальные	Термодат	4725
Приборы электроизмерительные контактные	М333К	1026
Милливольтметры регулирующие	МР-64	1026
Милливольтметры показывающие	Ш4500, Ш4501	1026
Милливольтметры для измерения и регулирования температуры	Ш4541	1026
Регуляторы температуры	Е5СWL, Е5СN	1917

Gulfstream III Устав | G3 Технические характеристики и почасовые тарифы

Чартерные рейсы на Gulfstream III / G3

Летайте частным образом на Gulfstream III (G3) , более длинной и модернизированной версии бизнес-джетов G-100 и G-200 от Gulfstream Aerospace.

G-III был первоначально разработан Gruman Aerospace, и, несмотря на то, что он является более старым самолетом по сравнению со многими тяжелыми самолетами, доступными для чартера, G-III является классическим вариантом по цене и комфорту, а также обычно имеет низкую ежедневную полетные минимумы.

Основные характеристики

• Широкая кабина для 12–16 пассажиров
• Дальность полета более 3000 миль
• Полностью закрытая ванная комната
• Впечатляющая крейсерская скорость

Галерея фотографий Gulfstream 3

Gulfstream III Цены, производительность и характеристики

• Производство: 1979–1986
• Количество мест: 14–16 пассажиров
• Рекомендуемая производителем розничная цена: 32000000 долларов
• Б / у: 700000 – 110020 долларов США (2018)
• Диапазон: 3458 морских миль
• Почасовая ставка: 4500 – 6000 долларов США *

Технические характеристики

• Экипаж: 2 или 3
• Длина: 83 фута 1 дюйм (25.32 м)
• Размах крыла: 77 футов 10 дюймов (23,72 м)
• Высота: 24 фута 4 1/2 дюйма (7,43 м)
• Максимальный взлетный вес: 31,615 кг (69,700 фунтов)
• Крыло Площадь: 934,6 кв. Футов (86,83 кв. М)
• Масса пустого: 38000 фунтов (17236 кг)

Производительность

• Максимальная скорость: 576 миль / ч (501 узел, 928 км / ч) (макс. )
• Крейсерская скорость: 508 миль / ч (442 узла, 818 км / ч) (дальний крейсерский полет)
• Скороподъёмность: 3800 фут / мин (19.3 м / с)
• Диапазон: 4200 миль (3650 миль, 6760 км) (восемь пассажиров, резерв по IFR)
• Сервисный потолок: 45000 футов (13716 м)
• Двигатели: 2x Rolls-Royce Spey RB.163 Mk 511-8, 11400 фунтов

Интерьер

• Количество мест: 12-16 пассажиров
• Высота салона: 6 футов 2 дюйма
• Ширина салона: 7 футов 3 дюйма
• Длина салона: 41 фут 3 дюйма
• Объем салона: 1844 куб футов
• Вместимость багажа: 157 куб футов
• Ванная комната: Полностью закрытый салон

Детали самолета

Самолет> Heavy Jet

Самолет Gulfstream 3 уже почти 3 десятилетия обслуживает как путешественников класса «люкс», так и корпоративных пассажиров.Этот тяжелый реактивный самолет с широким салоном может перевозить 8 пассажиров, преодолевать 3800 морских миль со скоростью 0,8 Маха и совершать круизы на максимальной высоте 45 000 футов, с легкостью справляясь как с внутренними, так и с трансконтинентальными рейсами.

Интерьер

Каюты Gulfstream известны во всем мире своей изысканностью, комфортом и производительностью. В салоне Gulfstream III есть полностью регулируемые кресла и диваны, закрытый туалет в передней или задней части, полноразмерный камбуз и большое багажное отделение, доступное во время полета.G-III обычно рассчитан на размещение от 11 до 13 пассажиров, а в салоне с высокой плотностью пассажиров могут разместиться до 16.

Performance

G-III оснащен двумя двигателями Rolls-Royce Spey Mark 511-8 и был разработан. с модернизированной конструкцией крыла с увеличенным размахом, что обеспечивает улучшенную дальность полета по сравнению с G200. G-III также имеет измененную носовую часть, обеспечивающую дополнительное пространство для третьего пилота на дальних рейсах, а кабина оснащена двойным комплектом авионики электронной бортовой приборной системы Sperry ED-800.GIII предлагает дальность полета 4200 миль (3650 морских миль, 6760 км) с 8 пассажирами и резервом IFR.

Купить или продать Gulfstream III

Air Charter Advisors может помочь с покупкой или продажей Gulfstream III с помощью наших услуг по продаже и приобретению самолетов.

Стоимость владения Gulfstream G3 с общим налетом 200 часов в год предполагает годовой бюджет около 1,66 миллиона долларов, включая постоянные расходы в размере около 575-675 тысяч долларов и эксплуатационные / переменные расходы в размере около 1 доллара.1 миллион. Стоимость эксплуатации Gulfstream III составляет около 5500 долларов в час.

Этот бизнес-джет дебютировал в 1979 году с рекомендованной розничной ценой в 32 миллиона долларов и был основным продуктом бизнес-авиации и авиации класса люкс из-за своих экономических затрат по сравнению с более крупными и новыми моделями Gulfstream. Подержанные модели обычно продаются по цене от 795 000 до 1 500 000 долларов.

Ищете ли вы личный самолет или дополнение к корпоративному летному отделу, мы предлагаем советы, рекомендации и профессиональные услуги, чтобы сделать каждую транзакцию максимально гладкой.Позвоните нам или напишите нам по электронной почте для получения дополнительной информации о покупке или продаже Gulfstream III.

Дополнительные фотографии

Услуги Gulfstream III / G3 | Чартер, продажи и управление

Чтобы узнать о почасовых тарифах на чартер и наличии мест на Gulfstream 3, позвоните по телефону 1-888-987-5387 (JETS). Чтобы поговорить с одним из наших брокеров. Наслаждайтесь мгновенным доступом к самолетам GIII в вашем регионе, конкурентоспособными ценами и высочайшим уровнем безопасности и обслуживания в деловой авиации.

---

* Средняя почасовая оплата зависит от марки, модели и года выпуска; удобства, маршруты и расписание / доступность, и не включают топливо, налоги, сборы с экипажа, рампу, ангар, FBO, ночевки, дневные минимумы, налоги, международные сборы, питание, наземный транспорт или защиту от обледенения.Если вам нужна точная цитата, позвоните или напишите по электронной почте. Картинки только для примера. Возраст, цвет, внутренняя планировка, почасовая оплата, технические характеристики и размеры могут варьироваться в зависимости от самолета. Все изображения любезно предоставлены компанией Gulfstream Aerospace, если не указано иное.

Сравнение опухолевых свойств прямо и косвенно радиоактивно йодированных вариантов белка G3 с анкириновыми повторами (DARPin) для молекулярной визуализации HER2

Введение

Молекулярная визуализация мишеней, ассоциированных с раком облегчает диагностику и стратификацию пациентов для адресное лечение.У пациентов с раком груди сверхэкспрессия рецептора 2 эпидермального фактора роста человека (HER2) является предиктором плохого прогноза. HER2 является установленной терапевтической мишенью в рак молочной железы и желудочно-пищеводный рак (1,2). Терапевтические агенты против HER2, включая моноклональные антитела трастузумаб, конъюгаты трастузумаб-DM1 и тирозинкиназа ингибитор лапатиниб, значительно улучшить выживаемость пациентов с раком груди и желудка (1,3-5). Однако только ~ 20% опухолей молочной железы имеют достаточно высокий уровень HER2 для успешного нацеливания (6).Следовательно, точное определение уровень HER2 в опухолях имеет решающее значение для принятия решения о таргетная терапия.

Текущий клинический метод оценки HER2 экспрессия – забор биопсии с последующим иммуногистохимическим анализом и / или флуоресцентный гибридизационный анализ in situ (7). Главный недостаток диагностика на основе биопсии – это заболеваемость, связанная с инвазивность процедуры, ограничивающая количество образцов взятый; выражение только в нескольких метастазах, таким образом, может быть определенный.Неоднородность экспрессии HER2 и расхождения в экспрессия между первичной опухолью и метастазами делает точное определение экспрессии HER2 при диссеминированном заболевании сложный (8-10).

Молекулярная визуализация – это неинвазивный метод для глобальное обнаружение экспрессии HER2, которая может преодолеть ограничения текущих процедур. Терапевтические антитела радиоактивно меченные γ- или позитронными излучателями, могут быть перепрофилированы для однофотонная эмиссионная компьютерная томография (ОФЭКТ) или позитронная эмиссионная томография (ПЭТ) с меньшими трансляционными затратами, поскольку профили безопасности и токсичности одобренных антител хорошо определен.Однако основная проблема с использованием антител к изображение опухолей отличается низкой контрастностью из-за их медленного накопления и долгий период полураспада. Малые инженерные каркасные белки (ESP) представляют собой многообещающие нацеленные зонды для молекулярной визуализации благодаря их потенциально высокое сродство к целям и быстрое очищение от кровь и нормальные ткани (11). Различные ESP, включая affibody молекулы (12), производные от ABD аффинные белки (ADAPT) (13), фибронектиновые домены (14), кноттины (15) и антикалины (16) продемонстрировали высокую чувствительность радионуклидной визуализации в доклинических исследованиях.Молекулы Affibody, меченные галлием-68, были успешно используется для количественной оценки экспрессии HER2 в организме с использованием ПЭТ / компьютерная томография (КТ) в клинике (17).

Сконструированные белки с анкириновыми повторами (DARPins) имеют небольшие размеры. ESP, выбранные из-за их высокоаффинного связывания с многочисленными мишени, связанные с раком. Однако количество исследований относительно их возможности для визуализации ограничены. DARPins – это построены из плотно упакованных повторяющихся модулей из 33 аминокислот (18). Их в целом высокая стабильность, растворимость и устойчивость к агрегации сделали их важными инструменты в ряде исследовательских приложений.Клинические испытания оценка эффективности и безопасности DARPin против VEGF в пациенты с дегенерацией желтого пятна сообщили о многообещающих результатах (19). DARPin G3 (14,5 кДа) представляет собой вариант, который связывается с доменом IV HER2 с пикомолярным сродством (20). Бипаратопический на основе G3 DARPins продемонстрировали эффективное подавление роста Ксенотрансплантаты, экспрессирующие HER2, и отсутствие токсичности при высоких дозах (до до 60 мг / кг) в доклинических исследованиях (21,22), и в настоящее время проходят клинические испытания (23). DARPin G3, меченный индием-111, технеций-99m и радиоактивный йод продемонстрировали эффективность опухоли нацеливание с благоприятным профилем биораспределения (20,24).

Высококонтрастная молекулярная визуализация достигается, когда Поглощение визуализирующего зонда в опухолях в несколько раз выше по сравнению с поглощением в здоровых тканях. Наше предыдущее исследование указали, что интернализация анти-HER2 DARPin в опухолях относительно медленно; однако интернализация в органах выделения (печень и почки) быстрое (25). Сравнение остаточной и неостидуализирующие метки для DARPin продемонстрировали, что использование неостаточные этикетки (этикетки, производящие липофильные катаболиты которые вытекают из клеток после интернализации и лизосомного протеолиз) привел к быстрому удалению радиокатаболитов из печень и почки, снижая активность этих органов и повышенная контрастность.

Радиоизотопы йода обеспечивают универсальный неостидуализирующие метки для доклинических исследований (йод-125) и клиническая ОФЭКТ (йод-123) и ПЭТ (йод-124) изображения. Радиойодирование белков можно проводить с использованием ряда стратегии маркировки. Прямая маркировка с использованием хлорамина-Т – надежный и простой метод. Однако электрофильный окислительный радиоактивное йодирование тирозинов обеспечивает случайное прикрепление радионуклид к белку. Модификация тирозинов в связке сайт может отрицательно повлиять на близость.Например, в В случае с молекулами аффитела против HER2 этот метод не применялся. применимы, поскольку они потеряли специфичность связывания после прямого радиоактивное йодирование (26). Косвенный маркировка с использованием бифункционального линкера упрощает работу с конкретными сайтами. прикрепление этикетки с контролем положения и номера меток на белок. Выбор этикетки и метода маркировки может влиять на биораспределение меченого белка и перераспределение радиокатаболитов. Косвенная маркировка была сообщается о снижении накопления радиокатаболитов в органах с экспрессией симпортеров йодида натрия, включая слюнную железы, щитовидная железа и желудок (27,28).Следовательно, выбор оптимальной стратегии может привести к существенное улучшение контрастности изображения.

Целью настоящего исследования было выбрать метод мечения для радиоактивного йодирования DARPin G3, обеспечивающий лучший контраст изображения. Прямые и непрямые методы радиойодирования сравнивались. Ранее сообщалось о прямой маркировке G3. Голдштейна и др. (24). Для сайт-специфичной маркировки цистеин вводили через триглициновый спейсер -GGGC на С-конце G3.Как DARPin каркас не содержит цистеинов, тиоловую группу сконструированный цистеин был использован для сайт-специфичного малеимидетиола связь. Малеимидное производное тирамина, [(4-гидроксифенил) этил] малеимид (HPEM) использовали в качестве бифункциональный линкер в этом исследовании.

Материалы и методы

Общие материалы и инструменты

Молекулярная масса DARPin была измерена с помощью жидкостная хроматография-ионизация электрораспылением-масс-спектрометрия на 6520 Accurate Q-TOF LC / MS (Agilent Technologies, Inc., Санта Клара, Калифорния, США) с диапазоном масс 250-2,500 m / z и положительным режим ионизации. Метод был разделен на три сегмента: 0-3. мин, 3-7 мин и 7-10 мин. Параметры были установлены следующим образом: Температура газообразного азота 350 ° C для всех сегментов; распылитель давление: 15 фунтов на кв. дюйм, 25 фунтов на квадратный дюйм и 40 фунтов на квадратный дюйм; и расход сушильного газа, 5 л / мин, 5 л / мин и 9 л / мин. Радиоизотопы йода [124I] NaI, [125I] NaI и [131I] NaI были приобретены у PerkinElmer Sverige AB (Upplands Väsby, Швеция). Анализ методом мгновенной тонкослойной хроматографии (iTLC) выполняется с использованием полосок силикагеля iTLC (Varian Medical Systems, Пало-Альто, Калифорния, США).Распределение активности измеряли с помощью Система накопления люминофора Cyclone и проанализирована с помощью изображения OptiQuant программное обеспечение для анализа (версия 2.5) (оба от PerkinElmer, Waltham, Массачусетс, США). Эксклюзионную хроматографию выполняли с использованием NAP-5. колонки (GE Healthcare, Чикаго, Иллинойс, США). Радио-высокая производительность Анализ жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) выполнялся с использованием Hitachi. Системы ВЭЖХ Chromaster с детектором радиоактивности и Vydac RP Колонка C18 (300 Å; 3 × 150 мм; 5 мкм) при комнатной температуре (20 ° С).Количество пробы, использованной для анализа, составляло 5 мкл. Растворитель A представлял собой 0,1% трифторуксусную кислоту (TFA) в h3O; растворитель B – 0,1% TFA в ацетонитриле. Скорость потока составляла 1 мл / мин, с градиентом от 5% B до 80% B за 20 мин. Активность была измерена с помощью автоматического γ-спектрометра с детектором NaI (TI) (1480 Волшебник; PerkinElmer Wallac Oy, Турку, Финляндия). СКОВ3, БТ474, ДУ145 и клетки A431 были приобретены у American Type Culture Коллекции и культивировали в среде RPMI-1640 (Biochrom GmbH, Берлин, Германия) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки. (Sigma-Aldrich; Merck KGaA, Дармштадт, Германия), 2 мМ L-глутамин, 100 МЕ / мл пенициллина и 100 мкг / мл стрептомицина в увлажненный инкубатор с 5% CO2 при 37 ° C, если не указано иное иначе.

Производство белка

DARPins G3-H6 и G3-GGGC были произведены в штамме Escherichia coli BL21 (DE3) (Novagen; EMD Миллипор, Биллерика, Массачусетс, США). Гены DARPin G3-H6 и G3-GGGC были выведены из аминокислоты DARPin G3. кислотная последовательность, депонированная в базе данных Protein Data Bank (PDB) (https://www.rcsb.org; регистрационный номер PDB 2JAB), с учетом использования кодонов у высокоэкспрессированных E. coli гены. Аминокислотная последовательность, кодируемая DARPin Ген G3-H6 был следующим: MDLGKKLLEAARAGQDDEVRILMANGA. DVNAKDEYGLTPLYLATAHGHLEIVEVLLKNGADVNA VDAIGFTPLHLAAFIGHLEIAEVLLKHGADVNAQDKFG KTAFDISIGNGNEDLAEILQKLNGSHHHHHH.Ген был клонирован в плазмидный вектор pET39b (Novagen; EMD Millipore) между рестрикцией сайты NdeI и HindIII. Аминокислотная последовательность G3 содержащий три глицинового спейсера и цистеин на С-конце (G3-GGGC) был следующим: DLGKKLLEAARAGQDDEVRILMANGADVNAKDEYGL TPLYLATAHGHLEIVEVLLKNGADVNAVDAIGFTPLHL AAFIGHLEIAEVLLKHGADVNAQDKFGKTAFDISIGNG NEDLAEILQKLNGGGGC. В Ген DARPin G3-GGGC был слит с 3′-концом небольшого ген модификатора, родственного убиквитину (SUMO) (29), путем перекрывания полимеразной цепи реакция (30).Процедура была выполняется в два приема. Во-первых, фрагменты ДНК, содержащие Гены SUMO и DARPin G3-GGGC амплифицировали с помощью ПЦР с использованием праймеров. T7dir (5′-GCGAAATTAATACGACTCACTATAGGG-3 ‘) и Sur (5’-GCCACCAATCTGCTCAC-3 ‘) для гена SUMO и праймеров SG (5’-GTGAGCAGATTGGTGGCGACCTGGGCA AGAAACTG-3 ‘) и T7rev (5’-GGGTTATGCTAGTTATTG CTCAGC-3 ‘) для гена DARPin G3-GGGC. В праймеры Sur и SG содержали комплементарные последовательности (подчеркнуто). Во-вторых, фрагменты были слиты методом ПЦР с использованием пара праймеров T7dir и T7rev.ПЦР-реакции проводили с термостабильная полимераза Tersus (ООО Евроген, Москва, Россия), соблюдая условия, рекомендованные поставщиком. Соединение между двумя генами кодируется следующая аминокислотная последовательность (SUMO) -QIGG † DLGKK- (DARPin G3-GGGC). 5’-конец СУМО ген был расширен кодирующей последовательностью GHHHHHHGS. Гибрид Ген SUMO-DARPin G3-GGGC был клонирован в плазмидный вектор pET39b. между сайтами рестрикции NdeI и HindIII. Вкратце, E. coli выращивали в среде с автоиндукцией ZYM-5052, приготовленной по данным Studier (31) содержащий 100 мкг / мл канамицина при 25 ° C.Клетки были собирают центрифугированием при 10000 × g при 4 ° C в течение 20 мин, и ресуспендировали в буфере для лизиса [200 мМ Трис-HCl, 500 мМ сахарозы, 1 мМ EDTA (pH 8,0), 1 мМ PMSF и 60 мкг / мл лизоцима]. В суспензию разбавляли в 2 раза дистиллированной водой и инкубировали при комнатная температура в течение 30 мин. Клетки разбивали на льду с помощью вибратора. Клеточный ультразвуковой жидкостный процессор VCX130 (Sonics & Materials, Inc., Ньютаун, Коннектикут, США). Клеточный дебрис осаждали на 70000 × g при 4 ° C в течение 30 мин. После добавления имидазола (30 мМ) и NaCl (500 мМ) супернатант фильтровали через фильтр 0.22 мкм мембраны и наносили на колонку HisTrap HP 1 мл (GE Healthcare), уравновешенный 20 мМ NaPi (pH 7,5), 500 мМ NaCl и 30 мМ имидазол. Связанные белки элюировали линейной Градиент имидазола 30-500 мМ. Решение DARPin G3-H6, разбавленный в 5 раз 25 мМ Трис-Cl (pH 8,0), загружали в MonoQ Колонка 10/100 GL (GE Healthcare), уравновешенная тем же буфером. Связанные белки элюировали линейным градиентом 0-1 М NaCl. Фракции анализировали с помощью 15% -ного восстановления SDS-PAGE.Протеин концентрацию определяли УФ-спектроскопией с использованием ε280 = 2,560 M − 1 см − 1.

Гидролаза СУМО собственного производства (ULP1) (29) добавлен в Раствор SUMO-G3-GGGC в молярном соотношении 1: 100 (фермент: субстрат). Раствор инкубировали при 6 ° C в течение ночи, разбавляли 5-кратно с 20 мМ NaPi (pH 7,5) и нанесено на HisTrap HP 1 мл. колонку уравновешивают тем же буфером. Проточный элюат был собран, 2-меркаптоэтанол был добавлен до конечной концентрации 50 мМ, и образец белка загружали на Mono Q 10/100 GL колонка, уравновешенная 20 мМ NaPi, 50 мМ 2-меркаптоэтанолом (рН 7.5). Связанный белок элюировали линейной 0-1 М NaCl. градиент. Фракции, содержащие DARPin G3-GGGC, объединяли и концентрировали с помощью центробежного фильтра Amicon Ultra-15 (Merck КГаА). Центрифугирование проводили при 4000 × g при 4 ° C в течение 20 минут. мин. Полученный белковый раствор стерилизовали фильтрацией. через мембрану 0,22 мкм. Концентрация белка была определено УФ-спектроскопией с использованием ε280 = 2,980 M − 1 см − 1.

Радиомаркировка и стабильность

Прямое радиоактивное йодирование G3-H6 с йод-125, йод-131 или йод-124 с использованием метода хлорамина-Т выполняли, как описано ранее для DARPin 9_29 (25).

Маркировка G3-GGGC йодом-125 для конкретных мест выполняли в три этапа с использованием конъюгации малеимид-цистеин. На первом этапе восстановление G3-GGGC дитиотреитолом (DTT) было выполняется для обеспечения доступности цистеина для конъюгации. К раствору G3-GGGC (550 мкг; 41 нмоль) в дегазированном PBS (45 мкл), 1000-кратный молярный избыток DTT (4,1 мкл 1 Раствор М; 632 мкг; 4,1 нмоль). Следующий инкубация при 40 ° C в течение 1 ч, G3-GGGC очищали с использованием NAP-5 колонка для исключения размеров, предварительно уравновешенная дегазированным 0.2 млн Nh5OAc (pH 6,0).

На втором этапе HPEM метили йодом-125. с использованием метода хлорамина-Т. К раствору HPEM (5 мкг; 23 нмоль) в MeOH, содержащем 1% Ch4COOH (10 мкл), [125I] NaI (16 мкл; 40-60 МБк) и хлорамин-Т (5 мкл 8 мг / мл в h3O; 40 мкг; 142 нмоль) были добавлены. После инкубации при комнатной температуре в течение 5 мин. добавляли метабисульфит натрия (5 мкл 12 мг / мл в h3O; 60 мкг; 316 нмоль). Выход этикеток был определено радио-ТСХ-анализом, который проводился с использованием диоксида кремния пластины на алюминиевой подставке в этилацетате.Помеченный радиоактивной меткой HPEM имел Rf = 0,8, в то время как свободный радиоактивный йод оставался на уровне точка приложения.

На третьем этапе очищенный G3-GGGC (550 мкг; 41 нмоль; 900 мкл) добавляли в [125I] I-HPEM (5 мкг; 23 нмоль) в молярном соотношении 1,8: 1 соотношение и инкубировали при 40 ° C в течение 1 ч. Помеченный радиоактивной меткой [125I] I-HPEM-G3-GGGC очищали с использованием колонки NAP-5, предварительно уравновешивают и элюируют PBS. Выход этикеток был определено радио-iTLC анализом в смеси ацетон: вода 4: 1 система.

Тест стабильности in vitro был проведен инкубирование [125I] I-HPEM-G3-GGGC и [125I] I-G3-H6 с 5000-кратным молярным избытком KI в PBS при комнатной температуре в течение 3 ч (контрольные образцы инкубировали в PBS).Образцы были проанализированы с помощью iTLC в соотношении 4: 1. ацетон: водная система.

Для оценки аффинности связывания G3-GGGC было помечены [125I] I с использованием прямого йодирования, как описано ранее (25). К предотвращают образование димеров через дисульфидные связи, радиоактивно меченый [125I] I-G3-GGGC (40 мкг; 3 нмоль) был восстановлен DTT (46 мкг; 300 нмоль) и очищен с использованием Колонна НАП-5. Конечный цистеин [125I] I-G3-GGGC (11 мкг; 0,8 нмоль) блокировали алкилированием йодацетамид (IAA; 74 мкг; 400 нмоль) при 40 ° C в течение 30 мин.В меченный радиоактивным изотопом [125I] I-G3-GGGC-IAA очищали с использованием Колонка NAP-5, предварительно уравновешенная и элюированная PBS.

Анализ специфичности связывания и клеточного процессинга. Исследования in vitro проводились с использованием клеточных линий с высоким Выражение HER2, включая SKOV3 (1,6 × 106 рецепторы / клетка) (32) и BT474 (1,2 × 106 рецепторов на клетку) (33) и клетки с низкой экспрессией HER2, включая DU145 (5 × 104 рецепторов / клетку) (34) и A431 (1,5 × 105 рецепторы / клетка) (35). Ячейки были высевают в чашки Петри диаметром 3 см (~ 106 клеток / чашку) и три блюда использовались для каждой группы.

Специфичность связывания с HER2 оценивалась как описано ранее (25). Два наборы посуды использовали для каждой клеточной линии. 100-кратное превышение немеченый DARPin G3-H6 (100 нМ) был добавлен к первому группа клеток для насыщения рецепторов HER2, и только среда была добавлен во вторую группу. Через 30 мин радиоактивно 125I [I] -G3-H6 или [125I] I-HPEM-G3-GGGC добавляли к каждой группе в концентрации 1 нМ. концентрация. Через 1 час в увлажненном инкубаторе при 37 ° C клеточную среду собирали, клетки промывали 1 мл свежей среду и 1 мл 1 М NaOH добавляли для лизирования клеток.После 30 мин инкубации собирали клеточный лизат. Радиоактивность в каждой фракции измеряли, чтобы вычислить процентное содержание радиоактивность, связанная с клетками. Среднее количество клеток на чашку при рассчитывали время анализа и значение связанного с клетками Радиоактивность рассчитывалась на 106 клеток. Сотовая связь удержание и обработка радиоактивно меченных белков с помощью SKOV3 клетки изучали во время непрерывной инкубации с помощью кислотной промывки. метод (25). Клетки (~ 1 × 106 клеток / чашку) высевали в три чашки для каждой момент времени.Меченые радиоактивным изотопом DARPins (1 нМ) добавляли к клеткам и инкубируют при 37 ° C в увлажненном инкубаторе. В 1, 2, 4, 8 и 24 часа после добавления среду собирали из одного набора чашек и клетки промывали один раз бессывороточной средой (1 мл). Коллекционировать мембраносвязанные DARPins, клетки обрабатывали 0,2 М глициновый буфер, содержащий 4 М мочевину, pH 2,0 (1 мл) на льду в течение 5 мин, буфер собирали, и клетки промывали один раз тот же буфер (1 мл). Чтобы собрать интернализованные DARPins, клетки обрабатывали 1 М NaOH (1 мл) в течение 30 мин, после чего клетки собирали и промывали еще 1 мл.В активность в каждой фракции была измерена. Процент была рассчитана клеточно-ассоциированная активность. Максимальное значение связанная с ячейкой активность в каждом наборе данных (индивидуально для [125I] I-HPEM-G3-GGGC и для [125I] I-G3-H6) было принято за 100%, а данные были нормализованы к этому.

Измерения сродства с использованием LigandTracer

Кинетика связывания радиоактивно меченных DARPin [125I] I-G3-H6, [125I] I-G3-GGGC-IAA и [125I] I-HPEM-G3-GGGC для живых клеток SKOV3. измерено с помощью LigandTracer (Ridgeview Instruments AB, Vänge, Швеция), как описано ранее (36).Кинетика связывания с и диссоциацию клеток регистрировали при комнатной температуре в реальных условиях. время. Повышение концентрации радиоактивно меченных DARPin (0,5 и 2 нМ) добавляли к клеткам с последующей заменой среды и измерения удерживания в фазе диссоциации. TraceDrawer Программное обеспечение (версия 1.7.1; Ridgeview Instruments AB) использовалось для рассчитать константы диссоциации на основе ассоциации и скорости диссоциации.

Исследования на животных

Эксперименты на животных планировались и проводились в в соответствии с национальным законодательством о лабораторных животных защита.Исследования на животных были одобрены местной этикой. комитет по исследованиям на животных в Упсале, Швеция (Uppsala djurgörsöketiska nämnd), решение № C4 / 2016.

Самки мышей BALB / c nu / nu (n = 14) в возрасте 6 недель, с средний вес на момент прибытия 16-17 г, были поставлены Scanbur A / S (Карлслунде, Дания). Мышей содержали в стандартных условиях. при 22 ° C, влажности 48%, с циклом свет / темнота 12/12 ч. Стандарт лабораторное питание и вода предоставлялись ad libitum. Мыши имели период адаптации за 1 неделю до начала Экспериментальные процедуры.Для имплантации опухолей, 107 клеток SKOV3 с высокой экспрессией HER2 или 5 × 106 клеток A431 с низкой экспрессией HER2 в 100 В правую заднюю ногу подкожно вводили мкл среды. Эксперименты проводились через две с половиной недели после имплантация. Средний вес животного на момент жертвоприношения составляла 19 ± 0 г в группе SKOV3, 18 ± 1 г в группе A431. В средний вес опухоли в исследованиях биораспределения составил 0,08 ± 0,03 г. для ксенотрансплантатов SKOV3 и 0,16 ± 0,06 г для ксенотрансплантатов A431.В максимальный диаметр опухоли (в исследованиях визуализации) составлял 1,0 см в Группа SKOV3 и 1,1 см в группе A431. Объем опухоли был <1 см3. Множественных опухолей не наблюдалось. Для сравнительное биораспределение [131I] I-G3-H6 и [125I] I-HPEM-G3-H6-GGGC, двойная метка подход был использован. Мышам внутривенно вводили смесь [131I] I-G3-H6 и [125I] I-HPEM-G3-H6-GGGC в 100 мкл 1% бычий сывороточный альбумин (Sigma-Aldrich; Merck KGaA) в PBS на мышь (27 кБк для [131I] I-G3-H6, 20 кБк для [125I] I-HPEM-G3-H6-GGGC).В дополнение биораспределение [125I] I-G3-H6 было изучено у SKOV-3-несущих мышей BALB / c nu / nu с Na / I-симпортерами, блокированными добавление в питьевую воду 1% KI за 3 дня до эксперимент. Количество введенного белка доводили до 4 мкг. немаркированным G3-H6. Через 4 часа после инъекции (пи) мыши были под наркозом путем внутрибрюшинной инъекции кетамина и раствор ксилазина и умерщвление пункцией сердца. Доза кетамин составлял 250 мг / кг, а доза ксилазина составляла 25 мг / кг.В средний объем крови, взятой при сердечной пункции с гепаринизированный шприц 0,7 ± 0,2 мл. Слюнные железы, легкие, печень, селезенка, желудок (без содержимого), почки, опухоль, образцы мышцы и кости от контралатеральной ноги до опухоли место имплантации, желудочно-кишечный тракт с содержимым и хвост были заготовлены. Органы взвешивались и измерялась активность. с помощью автоматического γ-спектрометра. Процент введенной дозы на грамм образца (% ID / г). Данные для кишечника с содержимым и тушей рассчитывали как% ID на весь образец.Записывали спектры стандартов и образцов. Для двойное изотопное исследование активности йода-125 и йода-131 рассчитывались интегрированием отсчетов в диапазонах энергий 5-100 кэВ и 150-500 кэВ соответственно. Данные были исправлены для мертвого времени гамма-спектрометра, фона и перетока йод-131 учитывается в энергетическом окне йода-125.

ПЭТ и ОФЭКТ-томография была выполнена для получения визуального подтверждение измерений биораспределения ex vivo. А всего за 3 дня до визуализации питьевая вода была с добавлением 1% йодида калия.

Исследование SPECT выполнено с использованием 125I-маркированный G3-H6. Хотя 131I также потенциально подходит для получения изображений SPECT, он излучает высокий энергия γ-квантов (364 и 637 кэВ) (37). Для этого требуется специализированный высокоэнергетический коллиматор всего тела, которого не было в устройство, используемое в настоящем исследовании. Следовательно, низкоэнергетический γ эмиттер 125I использовался в качестве метки.

Мышь с ксенотрансплантатами SKOV3 с высоким HER2 экспрессии вводили [125I] I-G3-H6 (7 мкг; 19,7 МБк).Визуализация SPECT была выполнена с использованием nanoScan SPECT / CT (Mediso Medical Imaging Systems Ltd., Будапешт, Венгрия) через 1, 2 и 4 часа после инъекции. Время приобретения было 15 мин. КТ были получены с использованием следующих параметров: Пик энергии рентгеновского излучения 50 кэВ; 670 мкА; 480 прогнозов; а также Время сбора данных 5,26 мин. Мышь с ксенотрансплантатом A431 с низким В экспрессию HER2 вводили [125I] I-G3-H6 (7 мкг, 19,7 МБк). В визуализацию проводили через 4 часа после инъекции с теми же настройками. как у мыши с ксенотрансплантатом SKOV-3.Необработанные данные ОФЭКТ были реконструированы с использованием реконструкции Тера-Томо ™ 3D ОФЭКТ технология (версия 3.00.020.000; Mediso Medical Imaging Systems ООО): Нормальный динамический диапазон; 48 итераций; 1 подмножество. Площадь соответствующий активности в мочевом пузыре был удален из изображения SPECT после реконструкции, чтобы облегчить визуализация поглощения опухолью. Данные КТ были восстановлены с использованием Фильтр обратной проекции в программном обеспечении Nucline 2.03 (Mediso Medical Imaging Systems Ltd.). Файлы ОФЭКТ и КТ были объединены с помощью Nucline. 2.03 Программное обеспечение и представлены в виде прогнозов максимальной интенсивности (MIP) в цветовой шкале RGB.

ПЭТ-визуализация всего тела была выполнена с помощью наноскана. ПЭТ / МРТ (система медицинской визуализации Mediso). Мышь на подшипнике SKOV3 ксенотрансплантатам вводили [124I] I-G3-H6 (7 мкг; 4,7 МБк) и визуализация через 4 часа после инъекции. ПЭТ сканирование было выполняется 90 мин; впоследствии была проведена компьютерная томография с использованием nanoScan SPECT / CT (Mediso Medical Imaging Systems Ltd.) с использованием то же положение кровати, что и при ПЭТ-сканировании. Компьютерная томография была сделана используя те же параметры, что и для изображений SPECT / CT и CT данные были реконструированы таким же образом.Данные ПЭТ были реконструирован с помощью программы реконструкции Тера-3D. ПЭТ и КТ файлы были объединены с использованием программного обеспечения Nucline 2.03 и представлены как проекции максимальной интенсивности (MIP) в цветовой шкале RGB.

Статистический анализ данных

Специфичность in vitro и обработка клеток данные представлены как среднее ± стандартное отклонение трех образцы. Данные были проанализированы с использованием непарного двустороннего t-критерия. найти существенные отличия. Парный двусторонний t-тест был выполняется с помощью GraphPad Prism (версия 7.02; Программное обеспечение GraphPad, Inc., Ла-Хойя, Калифорния, США) за анализ данных биораспределения. из исследования с двумя метками, чтобы найти существенные различия. P <0,05 считалось показателем статистически значимого разница.

Результаты

Радиомаркировка и стабильность

Всего два метода радиоактивного йодирования Использовались варианты DARPin G3: прямое мечение G3-H6. и непрямое мечение G3-GGGC с использованием линкера HPEM. Данные относительно выделенных радиохимических выходов и радиохимических чистота конъюгатов представлена ​​в таблице I.

Таблица I Маркировка разработанного анкиринового повтора белки G3-H6 и G3-GGGC с использованием прямого и непрямого радиоактивное йодирование.

Таблица I

Маркировка разработанного анкиринового повтора белки G3-H6 и G3-GGGC с использованием прямого и непрямого радиоактивное йодирование.

Маркировка метод	Маркированный белок	Радионуклид	Радиохимический выход,%	Радиохим. чистота,%
Прямая случайная маркировка	G3-H 6	125 I	98 ± 1 (n = 3)	99 ± 1 (n = 3)
	G3-H 6	124 I	87 (n = 1)	99 (n = 1)
	G3-H 6	131 I	99 (n = 1)	99 (n = 1)
Косвенный сайт-специфическая маркировка	G3-GGGC (конъюгированный в HPEM)	125 I	31 ± 1 (n = 2, всего доходность)	95 ± 0 (n = 2)

Прямое мечение G3-H6 йодом-125 выполняли, как описано ранее для DARPin 9_29 (22), с высоким радиохимическим выходом.Предусмотрена эксклюзионная хроматография на колонке NAP-5. радиоактивно меченые белки с радиохимической чистотой> 98%. Для исследования биораспределения и визуализация, прямое йодирование G3-H6 с йодом-131 и йодом-124 проводили с использованием тот же протокол маркировки с хорошими радиохимическими выходами. Очистка с использованием колонки NAP-5. [131I] I-G3-H6 и [131I] I-G3-H6 с 99% радиохимическим чистота.

Непрямая маркировка была проведена в двухступенчатая процедура без промежуточной очистки (рис.1). Во-первых, бифункциональный линкер с активированное фенольное кольцо и малеимидная группа (HPEM) были йодированный, с радиохимическим выходом 95 ± 3%. Впоследствии [125I] I-HPEM конъюгировали с G3-GGGC. с общим радиохимическим выходом 31 ± 1%. Помеченный радиоактивной меткой конъюгат очищен на колонке NAP-5 радиохимической чистоты 95 ± 0%. Достигнута удельная активность 33 кБк / мкг.

Радио-ВЭЖХ анализ [125I] I-G3-H6 и [125I] I-HPEM-G3-GGGC показал единственный пик на 14.5 мин. Инкубация [125I] I-G3-H6 и [125I] I-HPEM-G3-GGGC с 5000-кратным молярным избытком холодный йодид не продемонстрировал какого-либо измеримого высвобождения меченое соединение по сравнению с контролем PBS (Таблица II).

Таблица II Стабильность in vitro [125I] I-HPEM-G3-GGGC и [125I] I-G3-H6.

Таблица II

Стабильность in vitro [125I] I-HPEM-G3-GGGC и [125I] I-G3-H6.

Тестовый раствор	Связанный с DARPin Мероприятия, %
	[ 125 I] I-HPEM-G3-GGGC		[ 125 I] I-G3-H 6
	1 час	3 час	1 час	3 час
PBS (контроль)	97 ± 1 97 ± 1	99 ± 0	99 ± 0
5,000X KI	98 ± 0	95 ± 2	99 ± 0	99 ± 0

Исследования in vitro.Специфичность связывания [125I] I-G3-H6 и [125I] I-HPEM-G3-GGGC в HER2 оценивали при раке. линии клеток, обладающие разным уровнем экспрессии HER2 (рис. 2). Насыщаемая привязка символов два радиоактивно меченных DARPin к HER2 продемонстрировали специфичность. Связанная с клеткой активность была пропорциональна уровню HER2. экспрессия в клетках и была выше для SKOV3 и BT474 по сравнению с с ячейками A431 и DU145.

Кинетика связывания [125I] I-G3-H6, [125I] I-G3-GGGC-IAA и [125I] I-HPEM-G3-GGGC в HER2-экспрессирующие клетки SKOV3 измеряли с помощью LigandTracer.Связывание всех меченых G3 варианты живых клеток лучше всего соответствовали взаимодействию 1: 2 модель, как ранее опубликовано для анти-HER2 DARPin 9_29 (25). Два типа взаимодействий наблюдались: высокое сродство взаимодействия в пикомолярном диапазоне, и низкоаффинное взаимодействие в однозначном наномолярном диапазоне (Таблица III). Одни и те же типы связывающие взаимодействия наблюдались ранее для DARPin 9_29 (25). Все три варианта имели аналогичные значения для взаимодействия с высоким сродством, а [125I] I-G3-GGGC-IAA имел немного меньшую диссоциацию. константа для второго взаимодействия.Эти данные подтвердили, что [125I] I-G3-H6 имел такое же сродство к связыванию. в HER2 как [125I] I-HPEM-G3-GGGC, и что прямой йодирование не оказало отрицательного воздействия на связывание.

Таблица III Константы равновесия диссоциации (KD) для взаимодействия между радиоактивно мечеными разработанными белки с анкириновыми повторами и рецептор эпидермального фактора роста человека 2-экспрессирующие клетки SKOV3.

Таблица III

Константы равновесия диссоциации (KD) для взаимодействия между радиоактивно мечеными разработанными белки с анкириновыми повторами и рецептор эпидермального фактора роста человека 2-экспрессирующие клетки SKOV3.

	К D1 (пМ)	K D2 (нМ)
[ 125 I] I-HPEM-G3-GGGC (n = 3)	99 ± 5	3,5 ± 0,4
[ 125 I] I-G3-GGGC-IAA (n = 2)	146 ± 20	1,5 ± 0,4
[ 125 I] I-G3-H 6 (n = 3)	163 ± 41	3,9 ± 1,5

Обработка радиоактивно меченных DARPin Экспрессирующие HER2 клетки SKOV3 показаны на рис.3. Схема обработки была типично для не остаточной этикетки с низким уровнем интернализации фракция для двух белков. Уменьшение клеточно-ассоциированного активность после максимального накопления была связана с высвобождением радиокатаболиты из клеток. Связанная с клетками активность была> 85%. максимум от 1 до 8 часов после добавления.

Исследования на животных

Для изучения биораспределения радиоактивных йодированных белков бок о бок in vivo, подход с использованием двойных изотопов был использовал. HPEM-G3-GGGC был мечен йодом-125 и G3-H6. был мечен йодом-131.Биораспределение и нацеливание на опухоли были изучены на мышах BALB / C nu / nu, несущих HER2-экспрессирующий SKOV3 ксенотрансплантаты через 4 часа после инъекции (рис. 4). В два радиоактивно меченных DARPin имели быстрый вывод из крови и низкий задержка в органах выделения. В частности, [125I] I-HPEM-G3-GGGC продемонстрировал в 2 раза меньшее накопление в опухолях по сравнению с [131I] I-G3-H6 (3,7 ± 1,0 против 8,2 ± 2,0% ID / г; P = 0,003; парный t-тест). Помимо более низкого поглощения опухолью, низкий уровень Радиокатаболиты йода-125 наблюдались в органах с экспрессией Na / I-симпортеров (слюнные железы, желудок) по сравнению с йод-131.Накопление активности йода-125 в кишечнике. был примерно в семь раз выше по сравнению с йод-131.

Большое скопление опухоли [131I] I-G3-H6 приводил к значительному (P <0,05, определено парным t-критерием) выше от опухоли к органу соотношения для большинства органов, кроме органов, экспрессирующих симпортеры йодида натрия, мышцы и кости, по сравнению с [125I] I-HPEM-G3-GGGC (фиг. 5).

Настоящее исследование дополнительно исследовало биораспределение [125I] I-G3-H6 в SKOV3-несущие мыши BALB / c nu / nu, когда Na / I-симпортеры были заблокирован холодным КИ.Принятие [125I] I-G3-H6 в опухоли и почках был на одном уровне как поглощение [131I] I-G3-H6 (P> 0,05; непарный t-критерий). Блокирование Na / I-симпортеров привело к заметное снижение поглощения в слюнных железах и желудке. Там было достоверным (P <0,05; непарный t-критерий) улучшение соотношение опухолей и органов для каждого органа, кроме почек и кости (Таблица IV).

Таблица IV Биораспределение и от опухоли к органу отношения [125I] I-G3-H6 (Na / I-симпортеры были заблокирован холодным KI) и [131I] I-G3-H6 (нет блокада Na / I-симпортеров) через 4 часа после инъекции в BALB / C nu / nu мыши с ксенотрансплантатами SKOV3.

Таблица IV

Биораспределение и от опухоли к органу отношения [125I] I-G3-H6 (Na / I-симпортеры были заблокирован холодным KI) и [131I] I-G3-H6 (нет блокада Na / I-симпортеров) через 4 часа после инъекции в BALB / C nu / nu мыши с ксенотрансплантатами SKOV3.

1,4

Расположение	Поглощение [ 125 I] I-G3-H 6 ,% ID / г	От опухоли к органу соотношение для [ 125 I] I-G3-H 6	Поглощение [ 131 I] I-G3-H 6 ,% ID / г	От опухоли к органу соотношение для [ 131 I] I-G3-H 6
Кровь	0.3 ± 0,1a	37 ± 13a	1,3 ± 0,4	7 ± 2
Слюнной сальники	0,23 ± 0,08a	45 ± 14a	13,0 ± 5,4	0,7 ± 0,2
Легкое	0,4 ± 0,1a	29 ± 8a	1,0 ± 0,3	8 ± 1	8 ± 1
Печень	0,16 ± 0,05a	48 ± 22a	0,6 ± 0,2	14 ± 2
Селезенка	0,22 ± 0,07a	48 ± 13a	0.8 ± 0,3	11 ± 3
Желудок	0,6 ± 0,2a	18 ± 7a	6,7 ± 4,6	2 ± 1
Почки	1,5 ± 0,4	6,7	1,6 ± 0,3	5,3 ± 0,6
Мышца	0,19 ± 0,03a	53 ± 9a	0,6 ± 0,3	17 ± 7
Кость	0,4 ± 0,2	0,8 ± 0,4	14 ± 10
Опухоль	9 ± 3	–	8 ± 2	–

Специфичность нацеливания на HER2 радиоактивным йодом DARPins был подтвержден на мышах BALB / C nu / nu с ксенотрансплантатами A431 с низким уровнем экспрессии HER2 (рис.6). Поглощение опухолью [125I] I-HPEM-G3-GGGC и [131I] I-G3-H6 был значимым (P = 0,007 и P = 0,005 соответственно; непарный t-тест) ниже в ксенотрансплантатах A431 по сравнению с ксенотрансплантатами SKOV3.

Данные измерений ex vivo были подтверждено экспериментальными изображениями (рис. 7-9). Данные ОФЭКТ / КТ выявили высокий накопление активности в ксенотрансплантатах SKOV-3 с уже высоким HER2 экспрессия через 1 ч после инъекции (фиг. 7A). Помимо опухоли, заметны Наблюдалось накопление активности в почках и желудке.Поглощение активности в других тканях было ниже по сравнению с таковым в опухоль в этот момент времени. В более поздние моменты времени, через 2 часа после инъекции (рис. 7B) и через 4 ч после впрыска (рис. 7C), высокий поглощение активности в опухоли осталось, но активность в почки были значительно сокращены. Активность в других нормальных тканей также уменьшилось, что привело к заметному увеличению в контрасте изображения. Активность в желудке оставалась высокой. в течение всего эксперимента по визуализации. После визуализации Желудочно-кишечный тракт иссекали и измеряли активность.Наибольшее накопление активности наблюдалось в желудке. содержание (данные не показаны). Поглощение ксенотрансплантатами A431 с низкая экспрессия HER2 (фиг. 8B) была ниже, чем в ксенотрансплантате SKOV3, как и ожидалось (Рис. 8A), в то время как поглощение другие ткани следовали той же схеме, что и у мыши с Ксенотрансплантат SKOV3.

Для демонстрации возможности получения изображений с помощью ПЭТ HER2-экспрессирующие ксенотрансплантаты с использованием наиболее эффективного варианта, G3-H6 был мечен эмиттером позитронов йодом-124.Изображение MicroPET с [124I] I-G3-H6, четкое визуализировали ксенотрансплантат SKOV-3, экспрессирующий HER2, через 4 часа после рождения (фиг. 9). Низкое накопление активности было наблюдается в других органах, кроме желудка содержимое в верхней части живота.

Обсуждение

В настоящем исследовании прямая и косвенная маркировка методы радиоактивного йодирования DARPin G3 сравнивались по порядку выбрать зонд для визуализации с лучшим биораспределением и опухолью свойства таргетинга.

Прямое радиойодирование белков с использованием хлорамин-Т – простой, быстрый и надежный метод маркировки что обеспечивает высокие радиохимические выходы и высокую удельную виды деятельности.Однако количество меток и их положение в белок не контролируется. Непрямое радиоактивное йодирование с использованием бифункциональные линкеры позволяют прикреплять метки к сайту и обеспечивает четко определенные конъюгаты. Подбор линкеров позволяет оптимизировать свойства биораспределения, включая внутриклеточную задержку и выведение радиокатаболиты. Кроме того, накопление радиокатаболиты в органах с экспрессией Na / I-симпортеров (щитовидная железа, слюнные железы и желудок) обычно снижается при непрямое йодирование (27,28).

Бифункциональный линкер HPEM с активированным фенольное кольцо и группа малеимида подходят для «одного горшка» радиогалогенирование и конъюгация с реактивными тиоловыми группами на белки. Авторы настоящего исследования ранее продемонстрировали, что сайт-специфичное радиобромирование affibody молекулы, использующие HPEM, уменьшают их задержку в почках больше более чем в 7 раз по сравнению с другим линкером, N-сукцинимидилом 4-бромбензоат (38). В другое исследование, использование метки [125I] I-HPEM было еще более благоприятен для снижения почечной радиоактивности другой сконструированный каркасный белок, ADAPT (39).Эта привлекательная особенность светодиодов HPEM к его оценке для сайт-специфического радиоактивного йодирования DARPin G3, с целью улучшения выведения и очистки катаболиты радиоактивного йода in vivo.

Два подхода к маркировке, используемые в настоящее время исследование предоставило радиоактивно меченные варианты G3 с достаточно высоким радиохимические выходы и удовлетворительная радиохимическая чистота. В стабильность этикетки была высокой после прямых и косвенных маркировка.

Анализ насыщения связывания HER2 продемонстрировал специфичность связывания двух радиоактивно меченных DARPin [125I] I-HPEM-G3-GGGC и [125I] I-G3-H6 в клетки, экспрессирующие HER2.Связанная с клеткой активность была пропорциональна уровню экспрессии HER2. в исследуемых клеточных линиях для двух конъюгатов. Каждый вариант имел столь же высокое сродство к HER2-экспрессирующим клеткам in vitro. Эти результаты продемонстрировали, что метод непрямой маркировки действительно не изменять специфичность связывания и сродство G3-GGGC к HER2.

Для двух обозначенных вариантов образец клеточный процессинг был аналогичным и характерным для этикетка без остатка. Белки, меченные не остаточным этикетки производят липофильные радиокатаболиты, которые диффундируют из клеток после интернализации и внутриклеточной деградации (40).После максимального накопления снижение ассоциированной активности клеток было связано с высвобождением радиокатаболиты из клеток. Высокая клеточно-ассоциированная активность до 8 h пост-добавление указывало на актуальность использования этих вариантов для клиническая визуализация.

HER2-опосредованное нацеливание на опухоль было подтверждено для два радиоактивно меченных DARPin у мышей, несущих ксенотрансплантаты с разными уровни экспрессии HER2. Значительно более низкое поглощение DARPin наблюдалась в ксенотрансплантатах A431 (низкая экспрессия HER2) по сравнению с ксенотрансплантатами SKOV3 (высокая экспрессия HER2).

Сравнительные исследования биораспределения на мышах, вынашивающих Ксенотрансплантаты SKOV3 продемонстрировали высокое накопление [125I] I-HPEM-G3-GGGC в кишечнике, что предполагает быстрый гепатобилиарный клиренс конъюгата. Несмотря на похожие размер и близость двух вариантов G3 к HER2, [125I] I-HPEM-G3-GGGC продемонстрировал в 2 раза меньшее накопление в опухолях по сравнению с [131I] I-G3-H6. Эти результаты показали, что [125I] I-HPEM-G3-GGGC быстро удалялся из крови. кровообращение через секвестрацию в печени.Это, в свою очередь, вероятно привело к низкой биодоступности и меньшему количеству конъюгата. доставлен в опухоль.

Повышенное поглощение печенью ранее отмечалось наблюдали для конъюгата радиобромированных HPEM-affibody в сравнение с аффективным элементом N-сукцинимидил-4-бромбензоата; однако общий уровень поглощения был довольно низким (1,32 ± 0,31 vs. 0,22 ± 0,03% ИА / г соответственно) (38). В случае ADAPT C-терминал размещение [125I] I-HPEM обеспечило лучшее поглощение опухолью по сравнению с размещением N-терминала, хотя это также привело к более высокому задержка печени (1.6 ± 0,8 против 0,6 ± 0,3% ИА / г через 4 часа после инъекции, соответственно) (39).

Хелаторы на основе пептидов, содержащие три глицина GGG на С-конце аффитных молекул, помеченных технеций-99m (41) и рений-188 (42) обеспечивают неостидуализирующие метки с высоким захватом опухоли и низким удержанием в нормальных органах. С другой стороны, N-концевое размещение GGG в молекуле affibody, меченной технецием-99m, приводит к высокий уровень гепатобилиарной экскреции (43). Поэтому было высказано предположение, что размещение GGG на C-конце в DARPin G3-GGGC обеспечит низкое сохранение активности выделительных органов и органов с экспрессия симпортеров йодида натрия.Принятие активности в слюнные железы и желудок действительно были ниже для [125I] I-HPEM-G3-GGGC по сравнению с [125I] I-G3-H6. Однако возможно, что комбинация аминокислотной последовательности GGG и линкера HPEM на С-конце G3 приводит к повышенной локальной гидрофобности конъюгат и прежде всего гепатобилиарная экскреция меченый белок.

Использование прямого радиоактивного йодирования для мечения G3-H6 обеспечил значительно более высокое соотношение опухоли к крови и соотношение опухолей и органов для легких и печени, которые важны метастатические сайты по сравнению с непрямой маркировкой.Повторное освоение радиокатаболитов в слюнных железах, щитовидной железе и желудке. в значительной степени блокируется холодным йодидом, как показано изображение microSPECT / CT с использованием [125I] I-G3-H6 и с помощью визуализации microPET / CT с использованием [124I] I-G3-H6. Блокирование Na / I-симпортеров еще больше улучшило передачу опухоли к органу. соотношения для G3-H6. Примечательно, что блокировка Na / I-симпортер в желудке не был полным при дозах KI. используется в настоящем исследовании. Ранее это было продемонстрировано на крысах. что введение «холодного» йодида подавляло накопление 131I в щитовидной железе, но не в желудочный сок, что свидетельствует о более низком сродстве желудочного сока. симпортеры к йодиду по сравнению с таковыми из щитовидной железы (44).G3-H6 с маркировкой йод-124 предоставил высококонтрастные ПЭТ-изображения экспрессии HER2 в человеческие ксенотрансплантаты мышам вскоре после инъекции. Прямой радиоактивное йодирование DARPin G3-H6 является простым и хорошо зарекомендовавший себя метод, применимый к ряду радиоактивного йода изотопы, в том числе 123I и 124I. Йод-123 имеет период полураспада 13,2 часа и излучает гамма-лучи с энергией 159 кэВ (84%). Этот энергия излучения идеальна для современных γ-камер и позволяет использование низкоэнергетических коллиматоров высокого разрешения. Йод-124 – это позитронный излучатель, обеспечивающий количественную ПЭТ-визуализацию с высоким пространственное разрешение для повышения точности диагностики рака.

В заключение, прямые и косвенные методы обеспечивали стабильную маркировку DARPin с сохраненной емкостью для связывания HER2 in vitro и in vivo. Однако заметный уровень гепатобилиарной экскреции [125I] I-HPEM-G3-GGGC наблюдали in vivo, что препятствует эффективному нацеливанию на опухоль. Использование прямого поэтому радиоактивное йодирование является предпочтительным подходом для маркировки DARPin G3-H6 с йодом-123 и йодом-124 для дальнейшего клиническая ОФЭКТ и ПЭТ-визуализация экспрессии HER2.

Финансирование

Настоящее исследование финансировалось гранты Шведского онкологического общества (гранты № CAN 2015/350 и 2017/425), Шведский исследовательский совет (гранты № 2015-02353 и 2015-02509), Шведское агентство инноваций VINNOVA (грант № 2016-04060), гранты РФФИ № 17-00-00121 (комфи), 18-04-00365 А и 18-34-00899 мол_а для белковой инженерии и очистки, Государственный контракт Российской Федерации № 14.N08.11.0163, а по Программа CE Томского политехнического университета.

Наличие данных и материалов

Наборы данных, использованные и / или проанализированные во время Текущее исследование доступно у соответствующего автора на разумная просьба.

Вклад авторов

А.В. участвовал в исследовании дизайн, конъюгация и маркировка развития химии, in vitro и in исследования vivo, обработка и интерпретация данных, а также составление первой версии рукописи. AS и EK выполнили производство и очистка белков.RG и JL выполнили биохимическая и биофизическая характеристика белков. BM, JG, SR и AO участвовали в планировании и проведении in vivo эксперименты, включая визуализацию, обработку и интерпретацию данных. SD участвовал в молекулярном дизайне зондов, и курировал производство и очистку белков, биохимических и биофизических характеристик, и координировал проект. VT участвовал в исследовании дизайна, маркировки химии разработка, исследования in vivo, обработка данных и устный перевод и координация работ на Уппсальском участке.Все соавторы отредактировали рукопись и одобрили финальную версию. версия.

Одобрение этических норм и согласие на участвовать

Эксперименты на животных были запланированы и проведены. в соответствии со шведским национальным законодательством о лабораториях защиты животных и были одобрены местным комитетом по этике по исследованиям на животных в Упсале, Швеция.

Согласие пациента на публикацию

Не применимо.

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересы.

Благодарности

Авторы выражают благодарность г-ну Джошуа Джентри. для вычитки статьи.

Сокращения:

DARPin	конструированный белок с анкириновым повтором
HER2	фактор роста эпидермиса человека рецептор 2
HPEM	[(4-гидроксифенил) этил] малеимид
ПЭТ	позитронно-эмиссионная томография
CT	компьютерная томография
ОФЭКТ	Вычислено однофотонной эмиссии томография
ВЭЖХ	высокоэффективная жидкость хроматография

Список литературы

1	Джордано Ш., Темин С, Киршнер Дж. Дж., Чандарлапати С., Крюз Дж. Р., Дэвидсон Н. Э., Эстева Ф. Дж., Гонсалес-Ангуло AM, Krop I., Levinson J, et al: Американское общество клинических Онкология: системная терапия для пациентов с прогрессирующим заболеванием человека. 2-положительный по рецептору эпидермального фактора роста рак молочной железы: американский Руководство по клинической практике Общества клинической онкологии.J Clin Онкол. 32: 2078–2099. 2014. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
2	Ван Катсем Э, Банг Й.Дж., Фэн-И Ф, Сюй Дж. М., Ли К.В., Цзяо С.К., Чонг Дж.Л., Лопес-Санчес Р.И., Прайс Т., Гладков О. и др. al: Данные скрининга HER2 от ToGA: Нацеливание на HER2 в желудке и рак желудочно-пищеводного перехода. Рак желудка. 18: 476–484. 2015. Просмотр статьи: Google Scholar
3	Банг Й.Дж., Ван Катсем Э., Фейереислова А, Чанг ХК, Шен Л., Саваки А., Лордик Ф, Оцу А, Омуро И, Сато Т., и др.: Исследователи исследования ToGA: трастузумаб в сочетании с химиотерапия по сравнению с одной химиотерапией для лечения HER2-положительный расширенный желудочный или гастроэзофагеальный переход рак (ToGA): открытое рандомизированное контролируемое исследование фазы 3.Ланцет. 376: 687–697. 2010. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
4	Джанни Л., Пенковски Т., Им Ю. Х., Роман Л., Ценг Л.М., Лю М.К., Люч А., Старославская Е., де ла Хаба-Родригес Дж., Im SA и др.: Эффективность и безопасность неоадъювантного пертузумаба и трастузумаб у женщин с местнораспространенным, воспалительным или ранним HER2-положительный рак молочной железы (NeoSphere): рандомизированный многоцентровый, открытое испытание фазы 2. Ланцет Онкол. 13: 25–32.2012. Просмотр статьи: Google Scholar
5	де Азамбуджа Э., Холмс А. П., Пиккар-Гебхарт M, Holmes E, Di Cosimo S, Swaby RF, Untch M, Jackisch C, Lang I, Smith I, et al: Лапатиниб с трастузумабом при раннем HER2-положительном результате рак груди (NeoALTTO): результаты выживания рандомизированного, открытое, многоцентровое исследование фазы 3 и их связь с патологический полный ответ. Ланцет Онкол. 15: 1137–1146. 2014 г. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
6	Slamon DJ, Кларк GM, Вонг С.Г., Левин В.Дж., Ullrich A и McGuire WL: Рак груди человека: корреляция рецидив и выживаемость с амплификацией онкогена HER-2 / neu.Наука. 235: 177–182. 1987. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
7	Вольф А.С., Хаммонд М.Э., Хикс Д.Г., Даусет М., МакШейн Л. М., Эллисон К. Х., Оллред Д. К., Бартлетт Дж. М., Билоус М., Фитцгиббонс П. и др. Американское общество клинической онкологии: Колледж американских патологов: Рекомендации для эпидермального Тестирование рецептора фактора роста 2 при раке груди: Американское общество клинической онкологии / Колледж американских патологов клинической обновление практических рекомендаций.J Clin Oncol. 31: 3997–4013. 2013. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
8	Фукакис Т., Остром Дж., Линдстрем Л., Hatschek T и Bergh J: Когда следует заказывать биопсию, чтобы охарактеризовать метастатический рецидив рака груди. Энн Онкол. 23 (Дополнение 10): x349 – x353. 2012. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
9	Houssami N, Macaskill P, Balleine RL, Bilous M и Pegram MD: несоответствие HER2 между первичной молочной железой рак и его парные метастазы: биология опухоли или тестовый артефакт? Понимание через метаанализ.Лечение рака груди Res. 129: 659–674. 2011. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
10	Вилкинг Ю, Карлссон Э, Скуг Л., Хатчек Т., Лидбринк Э., Эльмбергер Г., Йоханссон Х., Линдстрём Л. и Берг Дж.: Статус HER2 в когорте популяционного рака молочной железы: Расхождения во время прогрессирования опухоли. Лечение рака груди Res. 125: 553–561. 2011. Просмотр статьи: Google Scholar
11	Krasniqi A, D’Huyvetter M, Devoogdt N, Фрейд Ф.Ю., Соренсен Дж., Орлова А., Кейаертс М. и Толмачев В. Визуализация в тот же день с использованием малых белков: клинический опыт и трансляционные перспективы в онкологии.J Nucl Med. 59: 885–891. 2018. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
12	Орлова А, Магнуссон М, Эрикссон Т.Л., Нильссон М., Ларссон Б., Хёйден-Гутенберг И., Видстрём С., Карлссон Дж., Толмачев В., Столь С. и др.: Визуализация опухоли с помощью пикомолярного микроскопа. аффинность HER2 связывающая аффинная молекула. Cancer Res. 66: 4339–4348. 2006. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
13	Гаруси Дж., Линдбо С., Нильвебрант Дж., Остранд М., Буйс Дж., Сандстрём М., Хонарвар Х., Орлова А., Толмачев В. и Hober S: ADAPT, новый зонд на основе каркасного белка для радионуклидная визуализация молекулярных мишеней, которые выражаются в диссеминированный рак.Cancer Res. 75: 4364–4371. 2015. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
14	Hackel BJ, Kimura RH и Gambhir SS: использование из (64) Cu-меченного домена фибронектина со сверхэкспрессирующей EGFR опухолью ксенотрансплантат: молекулярная визуализация. Радиология. 263: 179–188. 2012 г. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
15	Цзян Л., Ту И, Кимура Р., Хабте Ф, Чен Х, Cheng K, Shi H, Gambhir SS и Cheng Z: 64Cu-меченные двухвалентные пептид цистинового узла для визуализации атеросклеротических бляшек сонных артерий.J Nucl Med. 56: 939–944. 2015. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
16	Terwisscha van Scheltinga AG, Lub-de Hooge MN, Hinner MJ, Verheijen RB, Allersdorfer A, Hülsmeyer M, Nagengast WB, Schröder CP, Kosterink JG, de Vries EG и др.: In vivo визуализация экспрессии МЕТ в опухоли и биораспределения антикалина со специфическим для МЕТ трассером антикалина 89Zr-PRS-110 P ET. J Nucl Med. 55: 665–671. 2014. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
17	Соренсен Дж., Великян И., Сандберг Д., Веннборг А., Фельдвиш Дж., Толмачев В., Орлова А., Сандстрём М., Lubberink M, Olofsson H, et al: Измерение экспрессии рецептора HER2 при метастатическом раке молочной железы с использованием [68Ga] ABY-025 Affibody PET / CT.Тераностика. 6: 262–271. 2016. Просмотр статьи: Google Scholar
18	Бинц ХК, Штумпп М.Т., Форрер П., Амштуц П. и Plückthun A: Создание повторяющихся белков: хорошо экспрессируемых, растворимых и стабильные белки из комбинаторных библиотек консенсуса белки с анкириновыми повторами. J Mol Biol. 332: 489–503. 2003. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
19	Клинические испытания Европейского Союза Регистр [Интернет]: EudraCT Number 2011-002526-43.Холостые и Исследование безопасности и эффективности AGN-150998 при повторных дозах в Пациенты с экссудативной возрастной дегенерацией желтого пятна. https://www.clinicaltrial-sregister.eu/ctr-search/search?query=2011-002526-43 По состоянию на 30 января 2012 г.
20	Занд К., Каве М., Штумпп М.Т., де Паскуале С., Тамаскович Р., Надь-Давидеску Г., Драйер Б., Шибли Р., Бинц Х. К., Вайбел Р. и др.: Эффективное нацеливание на опухоль с высоким сродством разработаны белки с анкириновыми повторами: влияние сродства и молекулярного размер.Cancer Res. 70: 1595–1605. 2010. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
21	Рагин О., Леблан Л., Коллин Б., Удо А., Мирджолет Дж. Ф., Фидлер У. и Доладо I. Биораспространение и противоопухолевое средство. Исследование эффективности нового Her2, нацеленного на DARPins. Cancer Res. 74 (Приложение 19): Abstract 5442. 2014. Просмотр статьи: Google Scholar
22	Фидлер У., Мец Ц., Зитт Ц., Бесси Р., Бехе M, Blanc A, Schibli R, Dolado I, Herbst J, Dawson KM и Kiemle-Kallee J: Доклиническая противоопухолевая активность, опухоль локализация и фармакокинетика MP0274, апоптоз индуцирующий бипаратопный HER2-нацеленный DARPin.Cancer Res. 77 (Доп. 4): Аннотация P4-21-18. 2017. Просмотр статьи: Google Scholar
23	ClinicalTrials.gov [Интернет]. Bethesda (MD): Национальная медицинская библиотека (США). Идентификатор NCT03084926. Первое исследование на людях по изучению безопасности, уровней в крови и Активность MP0274 у онкологических больных с HER2-положительным твердым веществом Опухоли. По состоянию на 18 декабря 2018 г. https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT03084926.
24	Гольдштейн Р., Сосабовски Дж., Ливанос М., Лейтон Дж., Вигор К., Бхавсар Дж., Надь-Давидеску Дж., Рашид М., Миранда E, Yeung J и др.: Разработка анкиринового повтора. белок (DARPin) G3 для молекулярной визуализации HER2.Eur J Nucl Med Mol Визуализация. 42: 288–301. 2015. Просмотр статьи: Google Scholar:
25	Воробьева А, Брагина О, Алтай М, Митран Б, Орлова А., Шульга А., Прошкина Г., Чернов В., Толмачев В., Деев S: Сравнительная оценка радиоактивного йода и меченного технецием DARPin 9_29 для радионуклидной молекулярной визуализации экспрессии HER2 при злокачественных опухолях. Contrast Media Mol Imaging. 2018.6930425: 2018.
26	Штеффен А.С., Викман М., Толмачев В., Адамс GP, Nilsson FY, Ståhl S и Carlsson J: Характеристика in vitro двухвалентного анти-HER-2 аффибоди с потенциалом радионуклидная диагностика.Биотерма для рака Радиофарм. 20: 239–248. 2005. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
27	Залуцкий М.Р., Нарула А.С.: Методика радиогалогенирование белков, приводящее к снижению щитовидной железы поглощение радиоактивного йода. Int J Rad Appl Instrum. 38: 1051–1055. 1987 г. Просмотр статьи: Google Scholar
28	Rea DW, Ultee ME, Belinka BA Jr, Coughlin DJ и Альварес VL: сайт-специфичные радиоактивные антитела к нацеленные на опухоли.Cancer Res. 50 (Дополнение 3): 857s – 861s. 1990. PubMed / NCBI
29	Малахов М.П., ​​Маттерн М.Р., Малахова О.А., Поилка M, Weeks SD и Butt TR: слияния SUMO и специфичные для SUMO протеаза для эффективной экспрессии и очистки белков. J Struct Funct Genomics. 5: 75–86. 2004. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
30	Heckman KL и Pease LR: Сплайсинг генов и мутагенез путем ПЦР-управляемого удлинения перекрытия.Nat Protoc. 2: 924–932. 2007. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
31	Studier FW: Производство протеина автоиндукция при встряхивании культур высокой плотности. Белковый экспресс Purif. 41: 207–234. 2005. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
32	Толмачев В., Тран Т.А., Росик Д., Сьёберг А., Абрамсен Л. и Орлова А. Таргетинг на опухоль с использованием аффитных молекул: Взаимодействие аффинности, целевого уровня экспрессии и сайта связывания состав.J Nucl Med. 53: 953–960. 2012. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
33	Макларти К., Корнелиссен Б., Сколлард Д.А., Сделано SJ, Chun K и Reilly RM: Связи между внедрением 111 In-DTPA-трастузумаб, плотность HER2 и ответ на трастузумаб (Герцептин) у бестимусных мышей с подкожной опухолью человека ксенотрансплантаты. Eur J Nucl Med Mol Imaging. 36: 81–93. 2009. Просмотр статьи: Google Scholar
34	Мальмберг Дж., Толмачев В. и Орлова А.: Агенты визуализации для молекулярного профилирования in vivo диссеминированных рак простаты: клеточный процессинг [(111) In] -метки CHX-A ″ DTPA-трастузумаб и анти-HER2 ABY-025 Affibody в простате линии раковых клеток.Exp Ther Med. 2: 523–528. 2011. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
35	Björkelund H, Gedda L, Barta P, Malmqvist М. и Андерссон К.: Гефитиниб индуцирует эпидермальный фактор роста димеры рецепторов, которые изменяют характеристики взаимодействия с 125I-EGF. PLoS One. 6: e2473. Просмотр статьи: Google Scholar:
36	Толмачев В., Орлова А., Андерссон К.: Методы радиоактивного мечения моноклональных антител.Методы Мол Биол. 1060: 309–330. 2014. Просмотр статьи: Google Scholar
37	Wyszomirska A: Йод-131 для лечения заболевания щитовидной железы. Физические и биологические основы Nucl Med Rev Cent East Eur. 15: 120–123. 2012.
38	Муме Э., Орлова А., Ларссон Б., Нильссон А.С., Нильссон Ф.Ю., Сьёберг С. и Толмачев В. Оценка ((4-гидроксифенил) этил) малеимид для сайт-специфичных радиобромирование аффибоди анти-HER2.Bioconjug Chem. 16: 1547–1555. 2005. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
39	Линдбо С, Гаруси Дж, Митран Б, Алтай М, Буйс Дж., Орлова А., Хобер С. и Толмачев В.: Радионуклидная опухоль. нацеливание с использованием белков каркаса ADAPT: аспекты метки позиционирующие и остаточные свойства этикетки. J Nucl Med. 59: 93–99. 2018. Просмотр статьи: Google Scholar
40	Ши Л. Б., Торп С. Р., Гриффитс Г. Л., Дирил Х., Онг Г.Л., Хансен Х.Дж., Гольденберг Д.М. и Мэттес М.Дж.: обработка и судьба антител и их радиоактивных меток, связанных с поверхностью опухолевые клетки in vitro: сравнение девяти радиоактивных меток.J Nucl Med. 35: 899–908. 1994 г., PubMed / NCBI
41	Валльберг Х, Орлова А, Алтай М, Хоссейнимер С.Дж., Видстрём К., Мальмберг Дж., Столь С. и Толмачев В.: Молекулярный дизайн и оптимизация рекомбинанта, меченного 99mTc молекулы affibody улучшают их биораспределение и визуализацию характеристики. J Nucl Med. 52: 461–469. 2011. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
42	Алтай M, Honarvar H, Wållberg H, Strand J, Varasteh Z, Rosestedt M, Orlova A, Dunås F, Sandström M, Löfblom J, и др.: Выбор оптимального цистеинсодержащего пептида на основе хелатор для мечения молекул аффитела (188) Re.Eur J Med Chem. 87: 519–528. 2014. Просмотр статьи: Google Scholar: PubMed / NCBI
43	Энгфельдт Т, Орлова А, Тран Т, Брускин А, Видстрём Ч., Карлстрём А.Е. и Толмачев В. Опухоли, экспрессирующие HER2, с использованием синтетической молекулы Affibody содержащий 99mTc-хелатирующий меркаптоацетил-глицил-глицил-глицил (MAG3) последовательность. Eur J Nucl Med Mol Imaging. 34: 722–733. 2007 г. Просмотр статьи: Google Scholar
44	Halmi NS и Stuelke RG: Сравнение насосы щитовидной железы и йодида желудка у крыс.Эндокринология. 64: 103–109. 1959. Просмотреть статью: Google Scholar: PubMed / NCBI

% PDF-1.7 % 1539 0 объект > эндобдж xref 1539 99 0000000016 00000 н. 0000008841 00000 н. 0000009036 00000 н. 0000009074 00000 н. 0000009906 00000 н. 0000010007 00000 п. 0000010148 00000 п. 0000010287 00000 п. 0000010424 00000 п. 0000010563 00000 п. 0000010704 00000 п. 0000010845 00000 п. 0000010984 00000 п. 0000011125 00000 п. 0000011266 00000 п. 0000011381 00000 п. 0000011420 00000 п. 0000011643 00000 п. 0000011756 00000 п. 0000012103 00000 п. 0000012372 00000 п. 0000015687 00000 п. 0000016034 00000 п. 0000016463 00000 п. 0000016616 00000 п. 0000017365 00000 п. 0000018061 00000 п. 0000018419 00000 п. 0000018956 00000 п. 0000019430 00000 п. 0000022716 00000 п. 0000023411 00000 п. 0000023528 00000 п. 0000023557 00000 п. 0000023970 00000 п. 0000024254 00000 п. 0000024569 00000 п. 0000024916 00000 п. 0000025593 00000 п. 0000025727 00000 п. 0000028691 00000 п. 0000028825 00000 п. 0000029163 00000 п. 0000029384 00000 п. 0000029939 00000 н. 0000032507 00000 п. 0000032899 00000 н. 0000033239 00000 п. 0000033581 00000 п. 0000033981 00000 п. 0000036263 00000 п. 0000036631 00000 п. 0000036976 00000 п. 0000040651 00000 п. 0000041378 00000 п. 0000042205 00000 п. 0000042585 00000 п. 0000043086 00000 п. 0000046933 00000 п. 0000047490 00000 н. 0000047874 00000 п. 0000051894 00000 п. 0000052292 00000 п. 0000052694 00000 п. 0000053101 00000 п. 0000053361 00000 п. 0000053700 00000 п. 0000055548 00000 п. 0000055829 00000 п. 0000056093 00000 п. 0000060511 00000 п. 0000060612 00000 п. 0000060683 00000 п. 0000063040 00000 п. 0000069926 00000 н. 0000076649 00000 п. 0000083158 00000 п. 0000084928 00000 п. 0000087578 00000 п. 0000087607 00000 п. 0000087908 00000 н. 0000088339 00000 н. 0000088362 00000 п. 0000088385 00000 п. 0000088408 00000 п. 0000088431 00000 п. 0000088454 00000 п. 0000088477 00000 п. 0000088500 00000 н. 0000088523 00000 п. 0000088600 00000 п. 0000088709 00000 п. 0000088818 00000 п. 0000088927 00000 н. 0000089010 00000 п. 0000089099 00000 н. 0000089189 00000 п. 0000089262 00000 п. 0000002276 00000 н. трейлер ] / Назад 2065128 >> startxref 0 %% EOF 1637 0 объект > поток hZ} TSg o! ĀC & j @ t (E ㆏ v

G3A3 | Armed Assault Wiki

«

G3 – это 7.62 × 51 мм боевая винтовка НАТО западногерманского происхождения. Он известен своей высокой точностью. Полевое руководство

»

G3A3 – боевая винтовка калибра 7,62 мм, используемая исключительно западногерманскими вооруженными силами в ArmA 3. Она была добавлена ​​с выпуском DLC Global Mobilization – Cold War Germany Creator.

Обзор

G3A3 – боевая винтовка селективного огня, в которой используется операционная система со свободным затвором и системой замедленного действия.Он предназначен для стрельбы повсеместным патроном НАТО 7,62 × 51 мм.

Заряжается исключительно из коробчатых магазинов на 20 патронов, разработанных специально для использования с серией G3. Он может достигать скорострельности до ~ 550 выстрелов в минуту с начальной скоростью 800 м / с. G3A3 использует крепление на клешнях и может быть оснащено оптическими прицелами и шумоглушителями.

Служебная винтовка пехоты Западной Германии, G3A3 является последней версией в семействе боевых винтовок и имеет барабанные прицелы, фиксированный пластиковый приклад и пластиковое цевье.По сравнению с другими винтовками этого класса с патронником 7,62 мм, G3A3 обеспечивает достойное сочетание огневой мощи и точности на дальностях до 500 метров.

Западногерманский стрелок с ненастроенным G3A3.

Благодаря патрону 7,62 мм, G3A3 также обладает большей останавливающей способностью по сравнению с винтовками M16A1 / M16A2 американского производства с патронами 5,56 мм. Кроме того, он может быть оснащен оптическими прицелами в дополнение к шумоглушителям по умолчанию и способен стрелять дульными винтовочными гранатами; значительно повышая его гибкость для любой роли пехоты.

Однако главный недостаток G3A3 – его чрезмерная грузоподъемность. В отличие от своего восточногерманского аналога (или даже польского АКМ), G3A3 на 33% тяжелее в обращении и возлагает на пользователя большую нагрузку на выносливость. Другая небольшая проблема заключается в том, что у G3A3 более низкая скорострельность – всего ~ 550 об / мин; медленнее своих современных собратьев почти на 50 патронов. Наконец, жалкая емкость магазина G3A3 всего на двадцать патронов значительно снижает его полезность в ближнем бою.

В целом, G3A3 не ужасная винтовка по любым меркам, но ее сдерживают присущие ей недостатки, которые в целом делают ее менее жизнеспособной, чем KM-72 или его возможная платформа-преемник, G36.

Варианты

G3A4

G3A4 – это обновленный вариант базовой винтовки G3A3. Визуально он похож на G3A3, но имеет складной приклад, а не стандартный фиксированный.

Имеет те же характеристики, что и его основное оружие; единственная разница связана с уменьшением штрафа инерции на ~ 14%, что делает его менее опасным при использовании в ближнем бою.

В остальном отличий от штатной винтовки G3A3 нет.

G3A3 DMR

G3A3 DMR – это модифицированный вариант базовой винтовки G3A3, оснащенный направляющими для аксессуаров. Он остается неиспользованным ни одной из основных фракций.

Эти направляющие дополнительно поддерживают установку совместимых с Пикатинни / Вивера фонариков, инфракрасных лазерных указателей и сошек. Однако, поскольку на верхней ствольной коробке нет направляющей, для оптических прицелов, таких как исходная винтовка, по-прежнему требуется специальное крепление.

Во всем остальном, G3A3 DMR остается неизменным как с точки зрения производительности, так и с точки зрения функциональности.

G3A4 EBR

G3A4 EBR – это модифицированная версия G3A4, но с дополнительными направляющими. Не используется ни одной из основных фракций.

Как и G3A3 DMR, рельсовые опоры G3A4 EBR оснащены множеством аксессуаров сторонних производителей. Однако, в отличие от G3A3 DMR, G3A4 EBR имеет четвертую направляющую, установленную на ствольной коробке.

Это полностью избавляет от необходимости в специальном креплении, поскольку теперь можно установить любые увеличенные / неувеличенные прицелы и оптические прицелы, совместимые с Пикатинни / Уивером.

Он сохраняет тот же бонус снижения инерции, что и G3A4, но в остальном идентичен (производительность / управляемость) во всех остальных аспектах.

GV M / 75

GV M / 75 – обозначение G3A3 датскими военными.

Как статистически, так и функционально GV M / 75 не изменился и имеет лишь незначительные косметические отличия от своей мебели.Во всем остальном GV M / 75 не отличается от своей исходной винтовки.

GV M / 75 Карабин

Карабин GV M / 75 Carbine используется некоторыми подразделениями датской армии.

Как и базовая винтовка GV M / 75, GV M / 75 Carbine также является датским обозначением G3A4. За исключением уменьшенного штрафа инерции ~ 14%, между двумя видами оружия нет никаких функциональных различий.

Существуют лишь некоторые (очень незначительные) эстетические различия в цвете мебели и отделке некоторых деталей.Во всем остальном Карабин GV M / 75 остается неизменным от G3A4.

Камуфляж

• Черный: Полностью черный цвет.
• Olive: Стандартная черная отделка с мебелью оливково-зеленого цвета.
• Зеленый: Черная отделка с плоской мебелью оливково-зеленого цвета.
• Tan: Отделка черного цвета с мебелью песочного цвета пустыни.

Следует отметить, что только западногерманские G3 имеют доступ ко всем четырем схемам маскировки.Датские G3 ограничены черной, оливковой и зеленой отделкой, в то время как невоенные конфигурации G3A3 DMR и G3A4 EBR имеют доступ только к схемам Black, Olive и Tan.

Боеприпасы

Круглое имя	Базовое значение урона	Аэродинамическое трение	Начальная скорость (м / с)	Глубина проникновения (мм)
DM21	11,76	-0,00094464002	800	4.872
DM21A1	11,76	-0,00094464002	800	4,872
DM111	11,76	-0,00087543001	800	4,692
DM41	11,76	-0,00094464002	800	4,872
DM151	15,76	-0,00077854999	800	10,452
DM22A1 (HE)	80	-0.001	80	2,4
DM22A1 (ТЕПЛО)	240	-0,28	1 000 90 2 75	261,9

Все варианты G3 могут быть заряжены одиннадцатью типами магазинов, а также (опционально) способны стрелять одиночными винтовочными гранатами из дульного среза.

Все магазины, за исключением винтовочных гранат, имеют массу 14 дюймов каждый и доступны либо в черном цвете, либо в камуфляже «Пустыня».Только винтовочные гранаты весят «массу» 13,11 единиц, хотя у них нет альтернативных схем маскировки:

7,62-мм 20Rnd Ball-T DM21 Mag

Стандартный коробчатый магазин на 20 патронов.

Снаряжен патронами калибра 7,62 мм с трассирующими снарядами.

7,62-мм 20Rnd Ball-T DM21A1 Mag

Журнал с трассирующим снарядом другого цвета.

Статистически идентичен обычным магазинам на 20 патронов.

7,62 мм 20-й шар DM111 Mag

Снаряжается снарядами DM111.

Немного уменьшено пробивание брони, но лучше сохраняет энергию на больших дистанциях.

7,62 мм 20-й шарик DM41 Mag

Снаряжается снарядами DM41.

Статистически идентичен обычным 20-гранатометам с DM21.

7,62-мм 20Rnd AP DM151 Mag

Бронебойный снаряд предназначен как для пехоты в баллистических бронежилетах, так и для легкобронированной техники.

67-мм HEAT DM22A1

67-мм винтовочная граната с осколочно-противотанковой (кумулятивной) боевой частью.

Взрывной компонент гранаты имеет радиус взрыва 6 метров и минимальную дальность взрыва 15 метров. Его кумулятивный суббоеприпас может проникать на глубину ~ 261,9 миллиметра.

Общая информация

• Способность G3 запускать винтовочные гранаты – это первый (полуофициальный) случай, когда механик вернулся в серию. Ранее только винтовка M16A2 и карабин XM-177E2 в Cold War Assault были способны заряжать винтовочные гранаты.
• До обновления 1.2, боеголовка DM22A1 на самом деле не функционировала как боеприпас кумулятивного типа, а была просто прославленной фугасной гранатой.
• Варианты DMR / EBR с креплениями на рельсах были включены только после выпуска обновления 1.3, хотя они остаются неиспользованными ни одной из основных фракций и подфракций.

Галерея

Внешние ссылки

См. Также

Оружие аналогичного назначения и конфигурации

Сравнительное исследование характеристик микроповерхности на начальной стадии окисления черных сланцев

В природных системах процесс окисления черных сланцев обычно задействован во многих факторах, таких как химические и биологические механизмы ^29,36 .Предыдущие исследования показали эффективную способность к окислению пирита, представленную в биологической системе, такой как A. ferrooxidans ²² , но лишь немногие исследования обсуждали ее прямую связь с окислением черных сланцев. Учитывая процесс окисления, инициированный на поверхности породы, мы предположили наличие корреляции между изменением характеристик микроповерхности породы и степенью окисления, особенно на начальной стадии. Таким образом, в данном исследовании разработан и проведен сравнительный эксперимент на пластах черного сланца, скорость окисления пирита используется для индекса степени окисления черного сланца, цель которого – выявить основные различия в химическом и биологическом окислении черного сланца на начальном этапе. сцена.

Основываясь на результатах морфологии микроповерхности, можно увидеть, что как раствор кислоты, так и A. ferrooxidans эффективны против окисления пирита. В G1 и G3 пиритовая ассоциация практически исчезла после реакций, тогда как в G1 она остается на поверхности породы (рис. 1). Результаты XRD показывают, что наибольшее снижение содержания пирита представлено в G3. Вообще говоря, окисление пирита в черных сланцах сопровождается разрушением микроструктуры, связанным с повреждением цемента сланцевой матрицы ^11,37 .Однако эта корреляция, по-видимому, имела место только в абиолотических системах. Более сильное окисление пирита привело к образованию большего количества глинистых минералов и неправильных хлопьевидных структур в G2 по сравнению с G1. Эти результаты согласуются с предыдущими выводами ¹⁴ о том, что кислая среда способствует окислению черных сланцев. В то время как в биолотической системе сложно оценить разрушение микроструктуры из-за большого количества ярозита, покрывающего поверхность горных пород.На основании полевого исследования Ляо и др. . ¹⁴ также сообщил о значительном выпадении ярозита на выветренную поверхность черного сланца. Следовательно, взаимосвязь между морфологией микроповерхности и скоростью окисления пирита различна в абиолотических и биолотических системах.

Черный сланец имеет низкую пористость и проницаемость, процесс окисления контролируется «активной» пористостью, которая позволяет флюиду проходить внутрь недр ¹¹ .На начальной стадии окисления мы предполагаем, что изменения пористости и проницаемости будут ограничиваться микроповерхностью. Однако классические методы измерения пористости, такие как адсорбция азота и испытания на проникновение ртути под высоким давлением, кажутся непригодными для измерения поверхностной пористости в этом исследовании. Например, предыдущие исследования с использованием анализа абсорбции азота показали, что общее распределение пористости черного сланца представляет собой крупные микро- и мезопоры с диаметром пор менее 50 нм, через которые жидкость трудно протекать, что привело к дальнейшей реакции ³⁸ , но они не могут различить вклад поверхностной пористости, которая может существенно отличаться от внутренней пористости.Используя новый метод флуоресцентного окрашивания, можно проиллюстрировать распределение жидкости на поверхности породы, поскольку этот флуоресцентный краситель может быть обнаружен только тогда, когда он находится в водной среде. Мы полагаем, что промывка нейтральным PBS может удалить жидкость, не содержащуюся в порах поверхности породы, поэтому изображения распределения жидкости могут быть использованы для выявления пористости на поверхности породы. Другой особенностью этого красителя является зависимость цвета от pH водной среды, которая желтая в кислой среде, но становится зеленой при приближении к нейтральному раствору.Таким образом, MpH может также измерять pH жидкости, распределенной в порах поверхности.

Как показано на рис. 2, плотность флуоресценции в исходных образцах низкая, что указывает на низкую пористость поверхности породы. Хотя общий квадрат флуоресцентной плотности существенно не меняется после реакций, MpH отличается от исходных изображений и варьируется между группами. Области с низким MpH увеличиваются больше в G2, чем в G1, что указывает на то, что в порах на поверхности породы в G2 содержится больше кислого раствора.Эти результаты согласуются с изменениями морфологии микроповерхностей, чем больше окисление пирита приводит к большему увеличению проницаемости кислотного раствора. Но эта интерпретация не может применяться к G3 в связи с аналогичным водным pH и скоростью окисления пирита, представленными в G2 и G3. MpH существенно не изменяется в G3 по сравнению с исходным состоянием, вероятно, потому, что покрытие поверхности ярозитом блокирует проницаемость раствора кислоты. Кроме того, карбонат также присутствует в образцах, его буферная способность может влиять на значения MpH, но, учитывая одинаковые экспериментальные условия во всех образцах, это влияние может быть одинаковым в трех группах.Тем не менее, различие MpH среди групп предполагает, что чередование пористости микроповерхности и проницаемости различно в биолотических и абиолотических системах.

Лабораторные исследования показали, что кислотная эрозия может способствовать окислению исходного вещества, и полевые исследования показали, что органические вещества почти удалены из реголита ^2,39 , эти результаты показали, что органические вещества истощились в процессе выветривания черных сланцев. Хотя биологический механизм окисления пирита А.ferrooxidans был интенсивно исследован ^{21,22,23,24,25,26,27} , очень мало работ о его роли в процессе окисления органических веществ. С помощью линейного сканирования EDX мы анализируем относительную пропорцию элементов на микроповерхности породы с аспектом до глубины 2 мкм, чтобы оценить элементные изменения на микроповерхности породы. Как показано на фиг. 3, относительная доля элементарных C, Fe, Mg, Al, S и K существенно не изменяется в G1, но заметно уменьшается в G2 после реакции.Хотя общее содержание минералов показывает небольшое изменение в G1 и G2, более очевидное растворение минералов может происходить на микроповерхности породы в G2 в соответствии с более значительным разрушением микроструктуры. Тогда как в G3, который имеет аналогичные значения pH водной среды с G2, концентрация элементарного C увеличивается после реакций. Это может быть связано с прикреплением тел клеток A. ferrooxidans к микроповерхности горных пород, поскольку в G3 на микроповерхности горных пород наблюдаются многочисленные тела клеток (рис.1). Точно так же с влажным климатом Пенсильвании, Джин и др. . ¹¹ наблюдали добавление карбонатного профиля в Роуз-Хилл, которое может быть вызвано биотурбулентностью. Несмотря на то, что EDX-анализ просто показывает относительные изменения элементарного углерода, он не может равняться количеству общего органического углерода (ТОС), но для концентрации элементарного углерода на микроповерхности он показывает характер истощения в абиолотической системе, но образец добавления в биолотической системе.

Предыдущая литература документировала более эффективную окислительную способность, представленную в A.ferrooxidans по сравнению только с кислой водой, однако большинство этих подходов основано на чистом пирите ²² . Если предположить, что биологическое окисление черных сланцев намного выше или даже равно величине химического эффекта, следует переоценить общую скорость процессов биологического окисления. Однако, исходя из полевых наблюдений, биологический эффект обычно ограничивается поверхностью породы ²⁹ . Основные механизмы могут относиться к различным изменениям микроповерхности в химическом и биологическом окислительном черном сланце, особенно на начальной стадии.В предложенных реакциях на начальной стадии окисления пирит, внедренный в черный сланец, проявлял различное окислительное поведение в химических и биологических системах. В связи с этим в данном исследовании исследуются только эффекты первых 7 дней. Несмотря на то, что предыдущие исследования продемонстрировали более очевидную разницу, имевшую место в более долгосрочных экспериментах ²² , но это не является предметом настоящего исследования.

Скорость окисления пирита используется как показатель окисления черных сланцев, который выше в биолотической системе в первые 4 дня.Как показано в Таблице 1 и на Фиг.4, содержание пирита уменьшается, а ОВП водного раствора больше всего увеличивается в G3, что сопровождается самыми высокими концентрациями ионов Fe ³⁺ , эти результаты согласуются с данными для чистого пирита ²² . Однако концентрация ОВП и ионов Fe ³⁺ снижается с 5 ^до дней, что указывает на замедление скорости окисления пирита. Судя по результатам микроповерхностных характеристик, это уменьшение в первую очередь связано с образованием ярозита и его покрытием на поверхности породы.

Образование ярозита является общей проблемой для A. ferrooxidans инженерных приложений по биовыщелачиванию ²¹ , но редко сообщается о механизме биологического окисления черных сланцев. Из приведенных выше результатов ясно, что образование ярозита является зависимостью A. ferrooxidans , лежащий в основе механизм может быть связан со следующими причинами. Первоначально поверхности клеток A. ferrooxidans служили ядрами для роста кристаллов ярозита, последующий метаболизм клеток приведет к увеличению количества аминокислот, таких как глицин и пролин, что может значительно повлиять на морфологию, выход и кристалличность ярозита ^40,41 .При продолжающемся процессе окисления пирита концентрации трехвалентного железа и серы увеличиваются, что приводит к ускорению образования ярозита ^35,40 . Наконец, сформированный ярозит предпочитает осаждаться на поверхности породы, а не растворяться в биологических водных системах ⁴⁰ . Электрокинетические исследования показали, что изменения в поверхностном заряде, такие как функция pH и трехвалентного железа, были основой окисления пирита ^21,35 , однако покрытие из ярозита могло пассивировать против этой реакции.Кроме того, накопление карбонатов на поверхности горных пород также может способствовать ингибированию дальнейших реакций.

Следовательно, две фазы реакции могут включать A. ferrooxidans окисляющий черный сланец на начальной стадии. Во-первых, клеток A. ferrooxidans в первую очередь прикрепляются к поверхности горных пород, а затем окисляют двухвалентное железо до трехвалентного железа, а также серу, на этой фазе скорость окисления пирита в значительной степени определяется величиной А.ferrooxidans , которую также называют «окисленной фазой пирита» (рис. 5а). При накоплении трехвалентного железа и серы ярозит образуется и осаждается на поверхности породы, что приводит к изменению характеристик поверхности и ингибированию дальнейших реакций. Таким образом, эта фаза является так называемой «фазой образования ярозита» (Рис. 5b).

Рис. 5

Схематическая диаграмма A. ferrooxidans биологического выветривания черных сланцев в фазе окисления пирита ( a ) и ярозита. фаза формирования ( b ).ЭПС, внеклеточные полимерные вещества.

Примечательно, что, хотя связь между характеристиками микроповерхности и степенью окисления черных сланцев на начальном этапе основана на растворе кислоты и A. ferrooxidans , все еще трудно четко интерпретировать разницу в химическом и биологическом воздействии на сланец. окисление сланцев. Например, pH в химической системе составляет 2,50, что намного кислотнее, чем коренные породы или почвы реголита в природных черных сланцах ^13,14 .Кроме того, существует множество источников микроорганизмов, представленных в местной окружающей среде, за исключением A. ferrooxidans ⁴² , нельзя игнорировать вклад других микроорганизмов, которые требуют дальнейшего изучения. Наконец, учитывая, что в черных сланцах содержится несколько минералов, будущая работа будет сосредоточена на их роли в общем процессе окисления черных сланцев.

Выращивание высококачественного гексагонального нитрида бора в масштабе пластин и селективных площадей на Ni (111) методом химического осаждения из газовой фазы

1.

Пакдел А., Бандо Ю. и Гольберг Д. Нано-нитрид бора Flatland. Chem. Soc. Ред. 43 , 934–959 (2014).

CAS Статья Google Scholar

2.

Липп А., Шветц К. А. и Хунольд К. Гексагональный нитрид бора: изготовление, свойства и применение. J. Eur. Ceram. Soc. 5 , 3–9 (1989).

CAS Статья Google Scholar

3.

Гупта, А., Сакхивел, Т. и Сил, С. Последние разработки в области 2D-материалов помимо графена. Прог. Матер. Sci. 73 , 44–126 (2015).

CAS Статья Google Scholar

4.

Сонг, Л. и др. . Крупномасштабный рост и характеристика слоев атомарного гексагонального нитрида бора. Nano Lett. 10 , 3209–3215 (2010).

ADS CAS Статья Google Scholar

5.

Ким, К. К. и др. . Синтез однослойного гексагонального нитрида бора на медной фольге методом химического осаждения из газовой фазы. Nano Lett. 12 , 161–166 (2012).

ADS Статья Google Scholar

6.

Сюй, М., Лян, Т., Ши, М. и Чен, Х. Графеноподобные двумерные материалы. Chem. Ред. 113 , 3766–3798 (2013).

CAS Статья Google Scholar

7.

Дин, К. Р. и др. . Подложки из нитрида бора для высококачественной графеновой электроники. Нат. Nanotechnol. 5 , 722–726 (2010).

ADS CAS Статья Google Scholar

8.

Майоров А.С. и др. . Баллистический транспорт микрометрового масштаба в инкапсулированном графене при комнатной температуре. Nano Lett. 11 , 2396–2399 (2011).

ADS CAS Статья Google Scholar

9.

Бритнелл, Л. и др. . Электронное туннелирование через ультратонкие кристаллические барьеры нитрида бора. Nano Lett. 12 , 1707–1710 (2012).

ADS CAS Статья Google Scholar

10.

Кубота Ю., Ватанабе К., Цуда О. и Танигучи Т. Гексагональный нитрид бора, излучающий глубокий ультрафиолетовый свет, синтезирован при атмосферном давлении. Наука 317 , 932–934 (2007).

ADS CAS Статья Google Scholar

11.

Ватанабе К., Танигучи Т. и Канда Х. Свойства прямой запрещенной зоны и доказательства ультрафиолетовой генерации монокристалла гексагонального нитрида бора. Нат. Матер. 3 , 404–409 (2004).

ADS CAS Статья Google Scholar

12.

Ши, Ю. и др. . Синтез тонкой пленки многослойного гексагонального нитрида бора методом химического осаждения из газовой фазы. Nano Lett. 10 , 4134–4139 (2010).

ADS CAS Статья Google Scholar

13.

О, Х. и др. . Эпитаксиальные пленки h-BN сантиметрового размера. NPG Asia Mater. 8 , e330, https://doi.org/10.1038/am.2016.178 (2016).

CAS Статья Google Scholar

14.

Ли К. Х. и др. .Масштабный синтез высококачественных нанолистов из гексагонального нитрида бора для графеновой электроники большой площади. Nano Lett. 12 , 714–718 (2012).

ADS CAS Статья Google Scholar

15.

Park, J.-H. и др. . Однослойный гексагональный нитрид бора большой площади на платиновой фольге. САУ Нано 8 , 8520–8528 (2014).

CAS Статья Google Scholar

16.

Кобаяси К., Кумакура К., Акасака Т. и Макимото Т. Многослойный нитрид бора как разделительный слой для механического переноса устройств на основе GaN. Природа 484 , 223–227 (2012).

ADS CAS Статья Google Scholar

17.

Kobayashi, K. & Akasaka, T. Эпитаксиальное наращивание гексагонального BN на сапфировой подложке (0001) с помощью MOVPE. J. Cryst. Рост 310 , 5044–5047 (2008).

ADS CAS Статья Google Scholar

18.

Падуано, К. С., Снур, М., Бонди, Дж. И Зенс, Т. У. С. Самоограничивающийся рост в гексагональном нитриде бора путем химического осаждения металлоорганических соединений из паровой фазы. Заявл. Phys. Экспресс 7 , 071004 (2014).

ADS Статья Google Scholar

19.

Paduano, Q. et al . Металлоорганическое химическое осаждение из паровой фазы малослойной пленки нитрида бора, связанной sp ² . J. Cryst. Рост 449 , 148–155 (2016).

ADS CAS Статья Google Scholar

20.

Ким Д. Ю. и др. . Зависимый от давления рост многослойного h-BN в масштабе пластины методом химического осаждения из газовой фазы. Кристалл. Рост Des. 17 , 2569–2575 (2017).

CAS Статья Google Scholar

21.

Ким, Д. Ю. и др. . Роль газа-носителя водорода в росте многослойных гексагональных нитридов бора методом химического осаждения из газовой фазы. AIP Adv. 7 , 045116, https://doi.org/10.1063/1.4982029 (2017).

ADS CAS Статья Google Scholar

22.

Накамура, К. Получение и свойства пленок нитрида бора методом химического осаждения из газовой фазы. J. Electrochem.Soc. 133 , 1120–1123 (1986).

CAS Статья Google Scholar

23.

Райс, А. и др. . Влияние температуры осаждения и потока аммиака на химическое осаждение гексагонального нитрида бора из газовой фазы. J. Cryst. Рост 485 , 90–95 (2018).

ADS CAS Статья Google Scholar

24.

Янг, А.-Р. и др. . Эпитаксиальный рост одноориентированного многослойного гексагонального нитрида бора на сапфире без образования складок и без морщин. Nano Lett. 16 , 3360–3366 (2016).

ADS CAS Статья Google Scholar

25.

Кобаяси Ю., Акасака Т. и Макимото Т. Гексагональный нитрид бора, выращенный методом MOVPE. J. Cryst. Рост 310 , 5048–5052 (2008).

ADS CAS Статья Google Scholar

26.

Динг, Д., Солис-Фернандес, П., Хибино, Х. и Аго, Х. Пространственно контролируемое зародышеобразование монокристаллического графена на Cu с помощью многослойного Ni. САУ Нано 10 , 11196–11204 (2016).

CAS Статья Google Scholar

27.

Kim, H.-J., Kim, H., Yang, S. & Kwon, J.-Y. Зерна в селективно выращенных тонких пленках MoS ₂ . Малый 13 , 1702256 (2017).

Артикул Google Scholar

28.

Thiele, S. и др. . Разработка поликристаллических пленок Ni для улучшения однородности толщины графеновых пленок, выращенных методом химического осаждения из газовой фазы. Нанотехнологии 21 , 015601 (2010).

ADS Статья Google Scholar

29.

Карел Р., Томпсон К. В. и Фрост Х. Дж. Компьютерное моделирование эффектов энергии деформации в сравнении с эффектами энергии поверхности и межфазной энергии на рост зерен в тонких пленках. Acta Mater. 44 , 2479–2494 (1996).

CAS Статья Google Scholar

30.

Чью Д. и др. . Модуляционная эпитаксия гексагонального нитрида бора. 2D Mater. 5 , 045018 (2018).

Артикул Google Scholar

31.

Jiang, H. X. & Lin, J. Y. Обзор – гексагональные эпитаксиальные слои нитрида бора: рост, оптические свойства и применение в устройствах. ECS J. Solid State Sci. Technol. 6 , Q3012 – Q3021 (2017).

CAS Статья Google Scholar

32.

Deng, B. et al. . Монокристаллическая графеновая пластина без морщин, выращенная на деформационно-сконструированных подложках. САУ Нано 11 , 12337–12345 (2017).

CAS Статья Google Scholar

33.

Преображенский, А.Б., Виноградов, А. С. и Мартенсон, Н. π-гибридизация Ni 3d – BN на границе раздела h-BN / Ni (111), наблюдаемая с помощью спектроскопии остовного уровня. Phys. Ред. B 70 , 165404 (2004).

ADS Статья Google Scholar

34.

Гейк Р., Перри К. Х. и Руппрехт Г. Нормальные моды в гексагональном нитриде бора. Phys. Ред. 146 , 543–547 (1966).

ADS CAS Статья Google Scholar

35.

Горбачев Р.В. и др. . Поиск однослойного нитрида бора: оптические и рамановские сигнатуры. Малый 7 , 465–468 (2011).

CAS Статья Google Scholar

36.

Исмач А. и др. . К управляемому синтезу пленок гексагонального нитрида бора. САУ Нано 6 , 6378–6385 (2012).

CAS Статья Google Scholar

37.

Хименес, И. и др. . Исследование фотопоглощения на уровне ядра дефектов и метастабильных конфигураций связи в нитриде бора. Phys. Ред. B: Конденс. Matter Mater. Phys. 55 , 12025–12037 (1997).

ADS Статья Google Scholar

38.

Laskowski, R., Gallauner, T., Blaha, P. & Schwarz, K. Моделирование с помощью теории функционала плотности спектров B K и N K NEXAFS границ раздела h-BN / переходный металл (111). J. Phys .: Condens. Дело 21 , 104210 (2009).

ADS CAS Google Scholar

39.

Тонких А.А. и др. . Структурные и электронные свойства эпитаксиального многослойного h-BN на Ni (111) для приложений спинтроники. Sci. Отчет 6 , 23547, https://doi.org/10.1038/srep23547 (2016).

ADS CAS Статья PubMed PubMed Central Google Scholar

40.

Петравич, М. и др. . Украшение вакансий азота атомами кислорода в нанотрубках нитрида бора. Phys. Chem. Chem. Phys. 12 , 15349–15353 (2010).

CAS Статья Google Scholar

41.

Льюис, Дж. С. и др. . Химическое осаждение из паровой фазы тонких пленок бор-углерод с использованием металлоорганических реагентов. Mater. Lett. 27 , 327–332 (1996).

CAS Статья Google Scholar

42.

Конума, М. Нанесение пленок плазменными методами гл. 7 (Springer-Verlag, Берлин, 1992).

43.

Duan, X. Z. et al. . Разложение аммиака на поверхностях Fe (110), Co (111) и Ni (111): исследование теории функционала плотности. J. Mol. Катал. A: Chem. 357 , 81–86 (2012).

ADS CAS Статья Google Scholar

44.

Лю С., ван Дуин А. К., ван Дуин Д.М., Лю, Б. и Эдгар, Дж. Х. Атомистическое понимание зарождения и образования гексагонального нитрида бора на никеле на основе моделирования реактивной молекулярной динамики на основе первых принципов. САУ Нано 11 , 3585–3596 (2017).

CAS Статья Google Scholar

45.

Лю С. С. и Стивенсон Д. А. Кинетика роста и каталитические эффекты в парофазной эпитаксии нитрида галлия. J. Electrochem.Soc. 125 , 1161–1169 (1978).

CAS Статья Google Scholar

46.

Крос, А. Эффекты заряда в рентгеновской фотоэлектронной спектроскопии. J. Electron Spectrosc. Relat. Феном. 59 , 1–14 (1992).

CAS Статья Google Scholar

Ricoh GR III обзор | Цифровая камера World

Ricoh GR был впервые выпущен более 20 лет назад… и новый GR III будет 12-м поколением этой камеры, которая была впервые задумана в аналоговую эпоху. Основы камеры остались прежними. У него фиксированный широкоугольный объектив, эквивалентный 28 мм в старых терминах 35 мм.

Эта камера класса люкс отличается небольшими размерами и качеством изображения. У серии GR есть культ поклонников, любимых туристическими фотографами и уличными специалистами, которым нужна камера, которая легко помещается в вашем кармане.

В настоящее время, конечно, у всех уже есть широкоугольная камера с ними всегда в форме телефона с камерой.Поэтому неудивительно, что Ricoh GR III потребовалось добавить больше технических приемов в свой арсенал, чтобы гарантировать, что он по-прежнему актуален в эпоху смартфонов.

• Ricoh GR Digital III (черный) на Amazon за 879 долларов

Ricoh GR III – особенности

Ricoh GR III с дополнительным видоискателем на уровне глаз и широкоугольным конвертером (Изображение предоставлено Digital Camera World)

Эта последняя цифровая версия упакован в датчик APS-C приличного размера с разрешением 24 мегапикселя. На камере нет антиалиасингового фильтра, но включение в систему системы удаления пыли означает, что датчик вибрации может использоваться в качестве электронного антиалиасингового фильтра, если вам нужно его задействовать, чтобы избежать проблем с муаром.

Чтобы понравиться серьезному стрелку, GR III предлагает полноценную 14-битную съемку в формате RAW, но запись видео ограничена Full HD (здесь нет 4K). Файлы RAW можно проявить в камере.

Объектив 18,3 мм f / 2,8 состоит из шести элементов в четырех группах и имеет девятилепестковую диафрагму для создания эффекта боке. Фиксированный объектив, конечно, не имеет возможности масштабирования, но обеспечивает режимы кадрирования 35 мм и 50 мм для тех, кто хочет приблизиться. Также имеется дополнительный сверхширокий ввинчиваемый преобразователь (GW-4), обеспечивающий эффективное фокусное расстояние 21 мм.

Новым дополнением является трехосевая стабилизация изображения, которая дает увеличение выдержки на четыре ступени, которое можно использовать при съемке с рук. ISO также был увеличен до максимального значения 102 400, что поможет закрепить характеристики камеры при слабом освещении.

Автофокус теперь также выигрывает от гибридной автофокусировки – с использованием определения фазы для скорости и определения контраста для точности. Есть режим макросъемки, позволяющий сфокусироваться на объектах в диапазоне 5–12 см.И вы также можете сфокусироваться вручную – с такими модификациями, как пиковая фокусировка, чтобы помочь вам сделать это точно.

Камера поставляется с не менее чем десятью фильтрами изображений, и все они настраиваются. Более интересным будет функция HDR и интервалометр, позволяющий снимать с 10-минутным шагом до 24 часов. Ricoh сообщает нам, что есть режим мультиэкспозиции, вы можете наложить до 2000 изображений на один и тот же кадр.

Еще один интересный трюк – наличие встроенного двухступенчатого оптического фильтра нейтральной плотности, который поможет вам использовать более широкую диафрагму при съемке видео или увеличить выдержку для фотографий.

Его учетные данные для подключения надежны. Bluetooth и Wi-Fi входят в стандартную комплектацию – позволяют подключить камеру к телефону с помощью приложения Ricoh ImageSync. А еще есть разъем USB-C для передачи данных и зарядки.

В июле 2020 года производитель представил специальную ограниченную серию камеры Ricoh GR III Street Edition. Корпус камеры покрыт металлическим серым покрытием с зернистой текстурой, призванным «отражать неровный асфальт улиц» и улучшать сцепление с дорогой.Камера также имеет характерное желтое кольцо вокруг объектива (хотя оно может быть переключено на черное, если вы того пожелаете. Повышенная стоимость этой версии частично оправдана включением видоискателя GV-2 на уровне глаз, который На нем изображено 28 желтым цветом и две батареи.

Ricoh GR III Street Edition (Изображение предоставлено Ricoh)

Лучшие на сегодняшний день Ricoh GR Digital III и Ricoh GR III Street Edition продаются

Ricoh GR III – обработка

красота этой камеры в ее размере, Ricoh приложила немало усилий, чтобы сделать ее меньше, чем ее предшественник.В результате появилась камера, которой легко пользоваться одной рукой, что превращает ее в идеальную камеру для создания снимков. Но нужно отметить, что для получения камеры такого размера GR III действительно обходится без встроенной вспышки.

Слабым местом, однако, является то, что у вас нет стандартного видоискателя на уровне глаз (доступен дополнительный видоискатель, который подключается к горячему башмаку). Поэтому вы вынуждены использовать трехдюймовый ЖК-дисплей с разрешением в один миллион точек на задней панели для всех композиций и настроек.

Этот ЖК-дисплей теперь сенсорный, что позволяет, например, легко выбрать точку, на которой вы хотите сфокусироваться.Однако экран нельзя наклонять, что может оказаться губительным при съемке под большими или низкими углами или при ярком солнечном свете.

Камера оснащена большим набором кнопок и регуляторов, которые помогают использовать полный набор функций. Например, есть колесики спереди и сзади. Кроме трех настраиваемых пользовательских режимов, на шкале режимов экспозиции также есть кнопка с настраиваемой функцией (Fn) на задней панели. Тем не менее, колесики управления не кажутся особенно существенными или приятными на ощупь, как можно было бы ожидать от камеры по такой цене.

Ricoh уделяет большое внимание времени запуска камеры… его моторизованный объектив можно снять и подготовить всего за 0,8 секунды, когда вы нажмете кнопку «Вкл.». Однако вы скоро заметите, что камера переключается сама собой достаточно быстро, что может оказаться разочарованием для тех, кто хочет, чтобы камера всегда была готова к решающему моменту.

Лабораторные испытания

Ricoh GR III – лабораторные данные

Отношение сигнал / шум:

И GR II, и GR III используют датчик одинакового размера (APS-C), но там, где GR II имел Чтобы обойтись 16MP, GR III получает 24.2 МП. Это означает, что отдельные участки для фотосъемки на датчике будут меньше, а в некоторых камерах это может привести к меньшей светочувствительности и, следовательно, к более шумным изображениям.

Инженерам Ricoh удалось избежать этой ловушки, поскольку GR III генерирует немного более чистые изображения, чем старый GR II, по всей шкале чувствительности. Не в той степени, в которой вы бы действительно заметили во время съемки в реальном мире, но приятно знать, что у вас есть дополнительное разрешение без каких-либо негативных побочных эффектов.

Лабораторные показатели немного ниже, чем у Canon G1 X Mark III, который также оснащен 24-мегапиксельным сенсором.

Динамический диапазон:

GR III не только создает изображения с минимальным шумом, но и может записывать респектабельный динамический диапазон вплоть до ISO 12800. После этого ситуация действительно падает более круто, но GR III все еще немного превосходит GR II с более низким разрешением, а также Canon G1 X III, который также оснащен датчиком APS-C на 24,2 МП.

Разрешение:

Поначалу удивительно, что 24.2MP GR III изо всех сил пытается обеспечить заметно лучшее разрешение, чем старый 16MP GR II.Однако этот график не показывает всей истории. Хотя GR III достигает максимума в 28 лвт / час на большей части своей шкалы чувствительности, только муар частично маскирует сходящиеся параллельные линии на нашей тестовой таблице разрешения, что не позволяет GR III получить более высокие баллы в этом тесте. Камера способна отображать более мелкие детали в реальных сценариях, чем GR II.

Примеры изображений

Галерея образцов

1/250 с при f / 7.1, ISO 200

1/60 с при f / 7.1, ISO 200

1/30 с при f / 7.1, ISO 640

1/400 с при f / 7,1, ISO 200

1/400 с при f / 2,8, ISO 200

1/80 с при f / 6,3, ISO 1600 Камера может фокусироваться до 6 см, но автофокус не кажется очень надежным на таких близких расстояниях

1 / 2500сек при f / 2,8, ISO 200

Вердикт

Поклонникам GR или GRists, как их называет Ricoh, понравится это обновление. культовой камеры. Но в мире многообъективных камерофонов привлекательность этого компакта с фиксированным объективом, вероятно, будет ограничена.Это компактный APS-C красивого размера, идеально подходящий для ношения в кармане и для дискретной уличной фотографии. Но он продается по роскошной цене, которая больше не оправдывается качеством сборки или набором функций.

Лучшие на сегодняшний день предложения Ricoh GR Digital III

Руководства по покупке камер
Лучшие компактные цифровые камеры
Лучшие камеры для путешествий
10 лучших экшн-камер

.