Квт ws 06: КВТ Стриппер WS-06 (КВТ)

497 000,00

• Название продукта: WS-S06M
• Артикул: WS-S06M
• Размер: 5900X2200X1600 мм

ДОСТАВКА НЕ ВКЛЮЧЕНА

ОТПРАВИТЬ НАМ СООБЩЕНИЕ

Описание

Сопутствующие товары

Вирусная РНК из исходных мазков, рекомендованных лабораторией AFCD, была независимо извлечена в HKU с использованием мини-набора вирусных РНК QIAamp (Qiagen, Hilden, Германия) в соответствии с инструкциями производителя.Супернатант мазка (160 мкл) использовали для экстракции РНК, при этом конечный объем элюции составлял 60 мкл. Одностадийные анализы RT – qPCR были проведены для ранее опубликованных генов nsp14 и N , которые выявляют SARS-CoV, SARS-CoV-2 и SARS-CoV ⁴ летучих мышей. Кроме того, также использовались анализы RT – qPCR для nsp16 и M , специфичных для SARS-CoV-2 без перекрестной реакции с SARS-CoV. Прямой праймер (5′-GGWCAAATCAATGATATGATTTT), обратный праймер (5′-GTTGTTAACAAGAACATCACTAGA) и зонд (5′-FAM-AAGTCTRCCTTTACTAAGAAGAGA-TAMRA-3 ‘) были использованы для пробы ORF’1b- nspay и прямого праймера (5’16- nspay). GGYTCTAARTCACCCATTCA-3 ‘), обратный прайм (5′-TGATACTCTARAAAGTCTTCATA-3′) и зонд (5’-FAM-AATTTAGGTTCCTGGCAATTAATT-TAMRA-3 ‘) использовали для анализа гена M .Условия термоциклирования были идентичны тем, которые опубликованы для анализов генов nsp14 и N ⁴ . Положительные, отрицательные и ингибиторные контроли были включены в каждый запуск RT – qPCR, и были приняты меры предосторожности в рабочем процессе, чтобы минимизировать контаминацию PCR ¹³ .

Носовые, оральные, ректальные мазки и образцы фекалий от 21 контрольной собаки были проанализированы с помощью всех шести анализов RT – qPCR с отрицательными результатами. Никаких доказательств ингибирования ПЦР не наблюдалось ни в одном из этих экстрактов РНК.

Секвенирование вирусных геномов

Для амплификации вирусного генома были установлены реакции обратной транскрипции с использованием обратной транскриптазы с надстрочным индексом IV (Thermo Fisher Scientific) с несколькими специфичными для генов праймерами, нацеленными на различные области вирусного генома (дополнительная таблица). Синтезированную кДНК затем подвергали множественным перекрывающимся ПЦР с использованием ДНК-полимеразы Platimum Taq (Thermo Fisher Scientific), используя протокол, предоставленный производителем. Проведенные ПЦР были размером около 2000 п.н., чтобы охватить весь геном вируса.ПЦР-ампликоны визуализировали электрофорезом в агарозном геле. При необходимости для амплификации генома проводили вложенные ПЦР. Аликвоты 5 мкл продуктов ПЦР и лестницы ДНК загружали в лунки в 2% агарозном геле. Электрофорез проводили при 120 В в течение 20 минут в буфере TAE, и полосу ДНК визуализировали с помощью красителя из геля для ДНК, безопасного для SYBR.

ампликонов ПЦР, полученных из одних и тех же образцов, были объединены и секвенированы с использованием платформы для секвенирования MiSeq (Illumina). Библиотеку секвенирования получали с помощью набора для подготовки библиотеки ДНК Nextera XT (Illumina) в соответствии со стандартными протоколами.Сгенерированные считывания секвенирования были сопоставлены с геномом эталонного вируса с помощью BWA ¹⁴ , и геномный консенсус был получен с помощью Geneious версии 11.1.4 (https://www.geneious.com) с минимальной глубиной покрытия 20. Процент нуклеотидов на каждом положение генома было рассчитано с помощью bam-readcount (https://github.com/genome/bam-readcount) с минимальной базовой оценкой качества 20 и минимальной оценкой качества картирования 20.

Тесты нейтрализации уменьшения зубного налета

BetaCoV / Гонконг / VM20001061 / 2020, выделенный из аспирата из носоглотки и мазка из зева пациента с COVID-19 в Гонконге, был выращен в клетках Vero E6 (ATCC CRL-1586).Клетки регулярно тестировались, чтобы исключить заражение микоплазмами. Исходный вирус готовили, делили на аликвоты и хранили при -80 ° C до использования. Запас вируса титровали в четырех повторностях в клетках Vero-E6 в 24-луночных планшетах для культур тканей (TPP Techno Plastic Products) в установке с уровнем биобезопасности 3. После одного часа инкубации в инкубаторе с 5% CO ₂ планшеты покрывали 1% агарозой в среде для культивирования клеток и инкубировали в течение 3 дней, после чего планшеты фиксировали и окрашивали и определяли бляшкообразующие единицы на мл исходного вируса.Затем последовательные разведения образцов сыворотки инкубировали с 30-40 бляшкообразующими единицами вируса в течение 1 ч при 37 ° C. Смеси вирус-сыворотка добавляли к монослоям клеток Vero, инкубировали, накладывали и окрашивали, как указано выше. Титры антител определялись как максимальное разведение сыворотки, которое приводило к снижению количества бляшек ⁷ более чем на 90% (PRNT ₉₀ ).

Выделение вируса

Свежая жидкость мазков из носа и полости рта, собранная у собак, подтвержденных ПЦР SARS-CoV-2, в вирусной транспортной среде использовалась в качестве инокулята для выделения вируса.Вкратце, клетки Vero E6 (ATCC CRL-1586) перед инокуляцией культивировали в течение 24 часов в 24-луночном планшете (TPP Techno Plastic Products). Культуральная среда представляла собой минимальную эссенциальную среду, содержащую 2% фетальной бычьей сыворотки, 100 мл ^-1 пенициллина и 100 мкг мл ^-1 стрептомицина. Жидкости мазков центрифугировали при 5000 об / мин в течение 10 минут при 4 ° C в настольной центрифуге, и супернатант отделяли и инокулировали на клетки Vero E6 в альтернативных лунках 24-луночного планшета.После двух часов инкубации для адсорбции в инкубаторе при 37 ° C, содержащем 5% CO ₂ , добавляли свежую среду для выращивания вируса до конечного объема 1 мл и затем инкубировали в инкубаторе при 37 ° C, содержащем 5% CO ₂ для шесть дней. Наличие цитопатического эффекта (ЦПЭ) проверяли ежедневно. Кроме того, аликвоты образцов культурального супернатанта собирали в буфер AVL через 0, 24, 48 и 72 часа после инокуляции для ПЦР. При необходимости культуральную среду заменяли свежей культуральной средой.Культуры клеток, которые были отрицательными на рост вируса, снова пропускали вслепую через шесть дней. Культуры, которые были положительными в отношении роста вируса, о чем судили по цитопатическому эффекту и увеличению вирусной нагрузки с помощью RT-qPCR, собирали и переносили в новые лунки для отбраковки культур в 24-луночных планшетах, а затем постепенно на клетки в колбах для культивирования T25 (Greiner Bio-one ). Ложно инокулированные клетки Vero E6 использовали в качестве отрицательного контроля для каждого эксперимента по выделению.

Краткое изложение отчета

Дополнительная информация о дизайне исследования доступна в Резюме отчета по исследованию природы, связанном с этим документом.

Таблица C-6 Малая запись для

Список загрузок Страница

Товар: СОЛАНО ATELECTRON STFORTE S3HOT JET SHOTWIND PREMIUMWELDING ПЭН SWELDING ПЭН RDIODE PIDDIODE SDIODE ПИД-мит MINORDIODE S мит MINORTRIAC ATTRIAC STGHIBLIGHIBLI AWLABOR S мит AnschlusskastenLABOR S мит Geblaese MINORFUSION 1FUSION 2FUSION 3FUSION 3CWELDPLAST 200-я 600-iWELDPLAST S1WELDPLAST S2WELDPLAST S2 PVCWELDPLAST S2 TPOWELDPLAST S4WELDPLAST S6BITUMAT B2COMETCOMET USBGEOSTAR G5_G5 LQSGEOSTAR G7_G7 LQSMINIFLOOR привод unitTAPEMATTAPEMAT SPRIEGELTWINNY T7TWINNY T5TWINNY STWINNY TTWINNY Т USBUNIDRIVE 500UNIFLOOR 500UNIPLAN 300UNIPLAN 500UNIROOF ATUNIROOF STVARIANT Т1 BANDVARIANT Т1 UeberlappVARIMAT V2SEAMTEK 900 ATSEAMTEK W-900 ATHEMTEK STHEMTEK К-STMINORAIRSTREAM STROBUSTCOUPON РЕЗАК 500MEMBRANE PULLEREXAMO USBTest игла с коническая needleTest needleVACCUM PUMPVACUUM BELLVACUUM BOXGROOVYGROOVERGROOVER 500-LPBITUMATCOSMOELECTRONTAPEMATTRIAC BTTRIAC PIDTWINMATUNIFLOORUNIMATUNIMAT VUNIPLAN EUNIROOFUNIVERSALVARIANTVARIMATVARIMAT VX84UNIPLAN EUNIPLAN SLHS 15 CLASSICLHS 15 PREMIUMLHS 15 SY STEMLHS 21L CLASSICLHS 21L PREMIUMLHS 21L SYSTEMLHS 21S CLASSICLHS 21S PREMIUMLHS 21S SYSTEMLHS 41L CLASSICLHS 41L PREMIUMLHS 41L SYSTEMLHS 41S CLASSICLHS 41S PREMIUMLHS 41S SYSTEMLHS 61L CLASSICLHS 61L PREMIUMLHS 61L SYSTEMLHS 61S CLASSICLHS 61S PREMIUMLHS 61S SYSTEMLHS 91 BASICLHS 91 SYSTEMLE 10000 DFLE 10000 DF ДЗ 10000 DFLE 10000 DF RLE 10000 DFLE 10000 HTLE 5000 DFLE 5000 DF RLE 5000 DF HTLE 5000 HTLE MINILE MINI SENSORLE MINI SENSOR KITHOTWIND PREMIUMHOTWIND SYSTEMMISTRAL 2 PREMIUMMISTRAL 4 PREMIUMMISTRAL 6 PREMIUMMISTRAL 6 PREMIUM 50 ммMISTRAL 6 PREMIUM 50 мм.