Универсальный внешний накопитель для всех iOS-устройств, совместим с PC/Mac, Android
Header Banner
8 800 100 5771 | +7 495 540 4266
c 9:00 до 24:00 пн-пт | c 10:00 до 18:00 сб
0 Comments

Содержание

Наши объекты | Мостострой-11

Показаны 77 объектов

Подробно карточками Кратко списком

Мостовой переход через реку Пур "Пуровский мост"

  • Длина мостового перехода: 2720м
  • Схема моста: 84,0+8х105,0+84,0 м
  • Год постройки: 2020
  • Местоположение: ЯНАО

Пешеходный переход Комарова

  • Год постройки: 2020
  • Местоположение: Тюмень

Москва Цкад 3

  • Год постройки: 2020
  • Местоположение: Тюмень

пк-120 (Боровский богандинский)

  • Год постройки: 2019
  • Местоположение: Тюмень

Мельникайте-Монтажников(Ткад)

  • Протяженость: 55 км
  • Мосты и Путепроводы : 29 шт
  • Год постройки: 2019
  • Местоположение: Тюмень

Капитальный ремонт здания "Музейный комплекс им И.Я.Словцова"

  • Общая площадь здания: 6 878,6 м²
  • Год постройки: 2019
  • Местоположение: Тюмень

Окружная автомобильная дорога г.Тюмени. IV пусковой комплекс. Путепровод на ПК87

  • Длина путепровода: 145,75 м
  • Год постройки: 2019
  • Местоположение: Тюмень

Строительство окружной автомобильной дороги г. Тюмени. I этап. Участок от а/д Тюмень – Ханты – Мансийск с транспортной развязкой по ул. Дамбовской

  • Длина моста через р.Туру: 729,24м
  • Длина путепровода с транспортной развязкой по ул.Дамбовской: 89,33м
  • Начало строительства: 4 кв. 2014г.
  • Год постройки: 2018
  • Местоположение: Тюмень

Жилой дом "на Орловской"

  • Общая площадь : 22 951,55 м²
  • Количество квартир: 132
  • Количество машино-мест: 135
  • Год постройки: 2018
  • Местоположение: Тюмень

Реконструкция мостового перехода через р. Туру 2 очередь

  • Длина моста: 345,90 м
  • Год постройки: 2018
  • Местоположение: Тюмень

Жилой дом по улице Кузнецова 13, город Тюмень

  • Общая площадь: 13 488,4 м²
  • Количество квартир: 64
  • Количество машиномест: 78
  • Год постройки: 2017
  • Местоположение: Тюмень

Набережная реки Туры, город Тюмень

  • Общая протяженность: 2,5 километра
  • Высота набережной: 24 метра
  • Год постройки: 2017
  • Местоположение: Тюмень

Мостовой переход через реку Тобол на км 123+349 а/д Тюмень-Тобольск-Ханты-Мансийск, I очередь

  • Длина моста: 632,57м
  • Год постройки: 2017
  • Местоположение: Тюмень

Реконструкция проспекта Молодежный до Нижегородского аэропорта в автозаводском районе г.Нижний Новгород

  • Год постройки: 2017
  • Местоположение: Н-Новгород

Смотреть видео

Реконструкция мостового перехода через р. Угра на а/д М-3 "Украина", Калужская область

  • Год постройки: 2017
  • Местоположение: Калуга

Смотреть видео

Транспортная развязка на пересечении ул. Пермякова с а/д «Тюмень – Боровский – Богандинский»

  • Длина путепровода: 511,455 м
  • Год постройки: 2017
  • Местоположение: Тюмень

Смотреть видео

Мостовой переход через реку Тобол на км 123+349 а/д Тюмень-Тобольск-Ханты-Мансийск, II очередь

  • Длина моста: 632,57м
  • Год постройки: 2017
  • Местоположение: Тюмень

Смотреть видео

Реконструкция площади им. "400-летия Тюмени"

  • Год постройки: 2017
  • Местоположение: Тюмень

Смотреть видео

Строительство окружной автомобильной дороги г.Тюмени. III пусковой комплекс. Участок от транспортной развязки на пересечении с а/д Тюмень-Быково до а/д Тюмень-Криводанова. I этап

  • Год постройки: 2017
  • Местоположение: Тюмень

Строительство (реконструкция) а/д «Обход г. Павлодар» - Мостовой переход через реку Иртыш с регуляционными сооружениями. 3-й участок» (арочный мост)

  • Габарит: 2(Г-11,5)+2х1,0
  • Длина моста: 476 м
  • Начало строительства: 29.10.2013 г.
  • Год постройки: 2016
  • Год постройки: 2016
  • Местоположение: Казахстан

Авария, которой не было? / Хабр

Посадка «Союза МС-11» 25 июня дополнилась интригой — сначала в СМИ появилась информация об аварии, затем Роскосмос официально заявил, что посадка прошла штатно, а некоторые информационные агентства дошли аж до формулировок
"«Роскосмос» скрыл происшествие с «Союз МС-11»"
. Опираясь на открытые источники попробуем разобраться, что же произошло.


«Союз» тормозит для схода с орбиты, скриншот из симулятора Orbiter

Хронология


Полный процесс посадки корабля, на наше счастье, записан и выложен на YouTube.


25 июня «Союз МС-11» отстыковался от МКС в 02:25 московского времени (4:10:34 на видео).
В 04:55 начался следующий важный этап — корабль начал торможение (06:40:12). Маневр успешно завершился спустя четыре минуты и 39 секунд, скорость корабля, как и планировалось, снизилась на 127,98 метров в секунду. А спустя три минуты (6:48:06) прозвучало тревожное:
Прошла обобщенная авария К1Б, 05:02:54.
ЦУП уточнил «перешли на второй коллектор?». А дальше, увы, переговоры были перекрыты переводчиком и комментатором NASA-TV, и разобрать их невозможно.

Разделение отсеков прошло штатно в 05:22, как и было запланировано. Корабль совершил успешную посадку в расчетном районе в ожидаемое время (05:48 МСК).

А уже после посадки Роскосмос опубликовал официальное сообщение:

По результатам анализа телеметрической информации при проведении посадки экипажа транспортного пилотируемого корабля все бортовые системы и агрегаты «Союза МС-11» (в том числе комбинированная двигательная установка) отработали в штатном режиме, в строгом соответствии с программой полёта. Замечаний нет.

После полного выполнения задач посадки был подготовлен к использованию (в случае возможного возникновения необходимости) резервный коллектор (контур пневмогидросистемы КДУ).

Таким образом, сообщения, распространяемые некоторыми СМИ о возникновении при посадке неких «нештатных ситуаций», являются недостоверными.

Матчасть


Что такое «К1Б»? Это первый коллектор двигателей причаливания и ориентации большой тяги. На предыдущей версии корабля, «Союзе ТМА-М», для управления положением корабля в пространстве и маневрированием при сближении/стыковке стояли 16 двигателей большой тяги ДПО-Б и 12 — малой (ДПО-М). На летающем сейчас «Союзе-МС» реализовали полностью дублированную систему из двух наборов по 14 двигателей большой тяги с одним коллектором (распределительное устройство) на набор.


«Союз ТМА-М», красным закрыты ДПО-Б, видны ДПО-М


«Союз-МС», все двигатели одинаковые

Соответственно, в случае отказа основного коллектора корабль переключается на резервный и продолжает полет.

Вопросы и ответы


Попробуем ответить на наиболее очевидные вопросы.

А была ли вообще авария?
Судя по трансляции NASA-TV был сигнал об аварии, потому что о нем сообщили космонавты. Информационное сообщение Роскосмоса признает, что был подготовлен резервный коллектор, но недостаточно информативно, чтобы однозначно сказать, что именно произошло. Например, сигнал мог оказаться ложным или исчезнуть спустя какое-то время. Переговоры в трансляции перекрыты дикторами NASA-TV, и что происходило дальше, неизвестно.

Насколько это было опасно?

Сценарий «у космического корабля отказал тормозной двигатель, и он не может вернуться на Землю» смертельно опасен, поэтому инженеры закладывали аварийные системы на этот случай еще на заре космонавтики. Советские «Востоки» запускали на такую орбиту, с которой они бы сошли в приемлемые сроки даже в случае полного отказа тормозной двигательной установки, американские «Меркурии» несли три твердотопливных тормозных двигателя, которые были надежны благодаря простоте, а их суммарный импульс был выбран с большим запасом — корабль вернулся бы даже в случае отказа двух двигателей из трех. А конкретно в случае «Союза-МС» корабль штатно тормозит маршевым двигателем СКД (на фото ниже на корме по центру, закрыт крышкой), а в случае его отказа остаются еще два набора двигателей ДПО-Б.

Кроме того, «Союз МС-11» уже успел выполнить тормозной маневр на маршевом двигателе СКД. Двигатели причаливания и ориентации в любом случае были бы сброшены вместе с агрегатным отсеком через двадцать минут, а после разделения отсеков спускаемый аппарат управляется уже своими двигателями ориентации. Еще одно подтверждение того, что программа полета не нарушилась — корабль сел в штатном районе в ожидаемое время. В случае проблем автоматика спускаемого аппарата переходит в режим баллистического спуска, и корабль садится с большим недолетом, в резервный район посадки. Так что общий вывод — опасности для космонавтов не было.

Были ли похожие происшествия в истории космонавтики?

В 2015 году стыковка корабля «Союз ТМА-19М» с МКС получилась только с третьей попытки и в ручном режиме, потому что один из двигателей ДПО не выдавал полную тягу. На «Союзе МС» аналогичная авария бы никак не повлияла на стыковку, потому что автоматика переключилась бы на двигатель дублирующего коллектора.

6 сентября 1988 года достаточно неприятная ситуация возникла на «Союзе ТМ-5». Неуверенная работа датчика ориентации была воспринята бортовым компьютером как отказ, и торможение в расчетное время было заблокировано. Ориентация восстановилась спустя 7 минут, и пришлось выключать вручную запущенные компьютером двигатели, чтобы не сесть в Китае. Спустя два витка бортовой компьютер стал выполнять ошибочно загруженную программу стыковки, и пришлось не только выключать двигатель вручную, но и срочно блокировать включившуюся автоматику разделения, чтобы не остаться на орбите без двигателей и запасов кислорода. Космонавтам пришлось ждать сутки без туалета (бытовой отсек был планово сброшен заранее), но посадка на следующий день, 7 сентября, прошла без проблем.

10 апреля 1979 года проблемы возникли с основным двигателем «Союза-33». Космонавты успешно вернулись на дублирующем. У этой модификации корабля еще были два маршевых двигателя и отдельный контур ДПО на другом топливе. Единая топливная система для СКД и ДПО появилась в 1986 году на «Союзах ТМ».

Заключение


В целом надо отметить, что огромное количество космических полетов, которые остались в истории как «штатные», в реальности сталкивались с разнообразными проблемами, слишком мелкими, чтобы попасть на страницы энциклопедий. Это нормально — космическая техника сложна и никогда не может быть надежной на все 100%.

И, наконец, истории вроде приключившейся 25 июня говорят, как бы это ни казалось парадоксальным, о надежности «Союзов» и том, что их хорошо спроектировали.

P.S. В конце мая на Хабре перевели хабы бывшего Гиктаймс в непрофильные. Вместе с изменениями в правилах, разрешившими репост, на мой взгляд, это выглядит как прямая рекомендация «попробуй написать в профильные издания, а потом уже можешь репостить сюда». Я благодарен Хабру за хорошую и приятную площадку, и принимаю тот факт, что время идет, и все меняется. По счастливому совпадению одновременно с этими новостями на меня вышли представители аж нескольких ресурсов, так что даже не пришлось кидать клич в соцсетях «а не нужен ли кому космический колумнист?» Я никуда не делся и продолжаю заниматься популяризацией, но традиция еженедельных публикаций, увы, приказала долго жить, и теперь материалы будут выходить без какого-либо расписания.

Корабль "Союз МС-11" начал сходить с орбиты

https://ria.ru/20190625/1555876846.html

Корабль "Союз МС-11" начал сходить с орбиты

Корабль "Союз МС-11" начал сходить с орбиты

Пилотируемый корабль "Союз МС-11" с россиянином Олегом Кононенко, канадцем Давидом Сен-Жаком и американкой Энн Макклейн, проработавшими на Международной... РИА Новости, 03.03.2020

2019-06-25T05:08

2019-06-25T05:08

2020-03-03T14:44

россия

космос

наука

/html/head/meta[@name='og:title']/@content

/html/head/meta[@name='og:description']/@content

https://cdn23.img.ria.ru/images/153979/90/1539799022_0:111:3072:1838_1920x0_80_0_0_4f04f64c482610fb6337c81043114523.jpg

КОРОЛЕВ (Московская область), 25 июн - РИА Новости. Пилотируемый корабль "Союз МС-11" с россиянином Олегом Кононенко, канадцем Давидом Сен-Жаком и американкой Энн Макклейн, проработавшими на Международной космической станции (МКС) семь месяцев, включил двигатель для торможения и схода с орбиты, сообщает корреспондент РИА Новости из Центра управления полетами, где ведется прямая трансляция.Ранее сообщалось, что корабль "Союз МС-11" отчалил от модуля "Поиск" МКС. На станции остались россиянин Алексей Овчинин и американцы Ник Хейг и Кристина Кук.Двигатель должен проработать около пяти минут, в результате чего корабль сойдет с орбиты.Как сообщается на сайте "Роскосмоса", в 05.22 мск намечается разделение "Союза МС-11" на три отсека: бытовой и приборно-агрегатный отсеки впоследствии сгорят в атмосфере, а спускаемый аппарат с экипажем войдет в атмосферу в 05.25 мск. В 05.33 мск у спускаемого аппарата должен раскрыться парашют.В 05.49 мск планируется приземление спускаемого аппарата в 148 километрах юго-восточнее казахстанского города Жезказган.Кононенко, Сен-Жак и Макклейн прилетели на МКС в декабре 2018 года. Во время их полета на станции были приняты беспилотный корабль Crew Dragon, грузовые корабли "Прогресс МС-11", Cygnus и Dragon. Были выполнены пять выходов в открытый космос: два по российской программе и три - по американской. С борта МКС с помощью манипулятора запускались малые спутники, а с использованием двигателей грузовых кораблей "Прогресс" поднималась орбита станции.

https://ria.ru/20190625/1555876678.html

россия

космос

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

2019

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

Новости

ru-RU

https://ria.ru/docs/about/copyright.html

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

https://cdn21.img.ria.ru/images/153979/90/1539799022_168:0:2899:2048_1920x0_80_0_0_911c00e9769a4870df81fb7bbf1261ad.jpg

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

россия, космос

КОРОЛЕВ (Московская область), 25 июн - РИА Новости. Пилотируемый корабль "Союз МС-11" с россиянином Олегом Кононенко, канадцем Давидом Сен-Жаком и американкой Энн Макклейн, проработавшими на Международной космической станции (МКС) семь месяцев, включил двигатель для торможения и схода с орбиты, сообщает корреспондент РИА Новости из Центра управления полетами, где ведется прямая трансляция.

Ранее сообщалось, что корабль "Союз МС-11" отчалил от модуля "Поиск" МКС. На станции остались россиянин Алексей Овчинин и американцы Ник Хейг и Кристина Кук.

Двигатель должен проработать около пяти минут, в результате чего корабль сойдет с орбиты.

Как сообщается на сайте "Роскосмоса", в 05.22 мск намечается разделение "Союза МС-11" на три отсека: бытовой и приборно-агрегатный отсеки впоследствии сгорят в атмосфере, а спускаемый аппарат с экипажем войдет в атмосферу в 05.25 мск. В 05.33 мск у спускаемого аппарата должен раскрыться парашют.

В 05.49 мск планируется приземление спускаемого аппарата в 148 километрах юго-восточнее казахстанского города Жезказган.

Кононенко, Сен-Жак и Макклейн прилетели на МКС в декабре 2018 года. Во время их полета на станции были приняты беспилотный корабль Crew Dragon, грузовые корабли "Прогресс МС-11", Cygnus и Dragon. Были выполнены пять выходов в открытый космос: два по российской программе и три - по американской. С борта МКС с помощью манипулятора запускались малые спутники, а с использованием двигателей грузовых кораблей "Прогресс" поднималась орбита станции.

25 июня 2019, 04:50НаукаВоенная авиагруппа вылетела к месту посадки капсулы "Союз МС-11"

Экипаж "Союз МС-11" вернулся на Землю

25 июня 2019 г., AEX.RU –  Члены экипажа пилотируемого корабля "Союз МС-11", отстыковавшегося сегодня от Международной космической станции (МКС), благополучно вернулись на Землю. Об этом сообщает пресс-служба Роскосмоса.

Спускаемый аппарат с космонавтом Олегом Кононенко, астронавтами Давидом Сен-Жаком и Энн Макклейн совершил посадку 25 июня 2019 года в 05:48 мск.

Как отмечается в сообщении, все операции по спуску с орбиты и приземлению прошли штатно, самочувствие экипажа хорошее. Пилотируемый корабль "Союз МС-11" находился в составе станции с 3 декабря 2018 года. Продолжительность пребывания в полете экипажа экспедиции МКС-58/59 составила 204 суток.

За время пребывания на Международной космической станции экипаж полностью выполнил программу научно-прикладных исследований и экспериментов по программе длительных экспедиций МКС-58 и МКС-59, поддерживал работоспособность станции и проводил работы по ее дооснащению оборудованием, доставленным грузовыми кораблями.

Для командира корабля Олега Кононенко это был четвертый полет на околоземную орбиту. На данный момент он является рекордсменом по продолжительности пребывания на Международной космической станции — 737 суток. Космонавт Роскосмоса провел свыше полусотни экспериментов и исследований по российской научной программе. В частности, он установил на борту МКС "умную полку", которая позволит облегчить работу экипажей, и провел уникальный эксперимент по печати живых тканей на 3D-биопринтере. 

В этой экспедиции Олег Кононенко совершил два выхода в открытый космос. Первый — 11-12 декабря 2018 года — вместе с космонавтом Сергеем Прокопьевым продолжительностью 7 часов 45 минут. Основной задачей было обследование внешней поверхности МКС и бытового отсека корабля "Союз МС-09". Это была уникальная и сложная работа, которая, несомненно, войдет в историю мировой космонавтики.

Второй — 29-30 мая 2019 года — вместе с космонавтом Алексеем Овчининым продолжительностью 6 часов 1 минуту. В рамках эксперимента "Тест" они демонтировали устройства экспонирования и взяли пробы для оценки возможных микроповреждений оболочки станции, изменили ориентацию блока контроля давления и осаждений, а также демонтировали неиспользуемые кабели и измерительные блоки.

 

В NASA сообщили о нештатной ситуации при возвращении космонавтов с МКС :: Общество :: РБК

Нештатная ситуация произошла с пилотируемым кораблем «Союз МС-11», на котором с МКС вернулись на Землю три космонавта: россиянин, канадец и американка

Посадка пилотируемого корабля «Союз МС-11» (Фото: Сергей Мамонтов / ТАСС)

Сообщение о возникших проблемах появилось во время трансляции, которую вело американское аэрокосмическое агентство NASA, сообщает «РИА Новости». Комментатор рассказал, что у пилотируемого корабля «Союз МС-11» после схода с орбиты отказал комплект топливных баков с магистралями и клапанами двигательной установки.

Это в итоге не повлияло на спуск корабля, поскольку система автоматически перешла на резервный коллектор.

В «Роскосмосе» пока не комментировали сообщение NASA. Глава ведомства Дмитрий Рогозин в Twitter поздравил всех причастных к возвращению экипажа, который отправился в космос сразу после аварии «Союза МС-10» 11 октября прошлого года. «Экипаж выполнил свою задачу полностью, ребята достойны уважения», — написал он.

«Роскосмос» составил кодекс поведения для ‎космонавтов

В ночь на 25 июня на Землю с МКС вернулся экипаж в составе космонавта Олега Кононенко, астронавтов Давида Сен-Жака и Энн Макклейн. Аппарат приземлился в Казахстане.

Протокол N МС-11-06 заседания Межведомственного совета по ценовой политике в строительстве при Правительстве Москвы (с изменениями на 8 ноября 2012 года), Протокол Межведомственного совета по ценовой политике в строительстве при Правительстве Москвы от 17 ноября 2006 года №МС-11-06

Протокол N МС-11-06 заседания Межведомственного совета по ценовой политике в строительстве при Правительстве Москвы



УТВЕРЖДАЮ
Председатель
Межведомственного совета
по ценовой политике в строительстве
при Правительстве Москвы
А.Л.Воронин
21 ноября 2006 года

(с изменениями на 8 ноября 2012 года)

____________________________________________________________________
Документ с изменениями, внесенными:
приказом Москомэкспертизы от 6 февраля 2012 года N 3;
приказом Москомэкспертизы от 8 ноября 2012 года N 64.
____________________________________________________________________

от 17 ноября 2006 года



Присутствовали:

Члены Межведомственного совета и приглашенные, согласно прилагаемому списку*.

________________

* Список в рассылке не приводится. - Примечание "КОДЕКС".

1. О рассмотрении обобщенных индексов изменения стоимости строительно-монтажных работ в ноябре 2006 года в связи с инфляционными процессами.

2. О согласовании Сборника коэффициентов пересчета стоимости строительства, определенной в нормах и ценах МТСН 81-98 в текущий уровень цен ноября 2006 года. Сборник N 11/2006-98 (выпуск 67).

3. О применении Сборника показателей стоимости ремонтно-строительных работ в текущем уровне цен ноября 2006 года (выпуск 66).

4. О применении Сборника показателей стоимости строительно-монтажных работ в текущем уровне цен ноября 2006 года (выпуск 57).

5. О согласовании "Методики расчета стоимости разработки раздела естественного освещения и инсоляции жилых и общественных помещений проектируемых (реконструируемых) и существующих зданий прилегающей застройки. МРР-3.2.42.02-06".

6. О согласовании "Временной методики определения стоимости работ по разработке среднесрочных отраслевых схем размещения объектов строительства на территории города Москвы. МРР-3.2.17-06".

7. Пункт утратил силу - приказ Москомэкспертизы от 8 ноября 2012 года N 64..

8. О согласовании "Сборника базовых цен на работы и услуги по обработке данных и ведению Банка данных дистанционного зондирования по территории города Москвы. МРР-3.2.28.02-06".

9. О согласовании изменений и дополнений, внесенных в "Перечень цен (тарифов) за работы (услуги), выполняемые Департаментом земельных ресурсов города Москвы по подготовке документов, выдаваемых в режиме "одного окна" и согласовании базовых цен на отдельные элементы работы по оформлению документов о предоставлении земельных участков в собственность (дополнение к "Методике определения стоимости изготовления проектной и изыскательской продукции землеустройства в городе Москве" (письмо Департамента земельных ресурсов города Москвы от 16.11.2006 N 33-И-2989/6).

Решение Межведомственного совета по ценовой политике в строительстве при Правительстве Москвы

1. О рассмотрении обобщенных индексов изменения стоимости строительно-монтажных работ в октябре 2006 года в связи с инфляционными процессами.

1.1. Согласовать для аналитического сопровождения в процессе реализации городской инвестиционной программы 2006 года обобщенные индексы изменения стоимости строительно-монтажных работ в октябре 2006 года.

Обобщенные индексы изменения стоимости строительно-монтажных работ за 2006 год

Месяц

Дата и номер протокола

Индексы изменения

январь

27.01.2006 N МС-1-06

0,983

февраль

26.02.2006 N МС-2-06

1,0033

март

27.03.2006 N МС-3-06

1,0188

апрель

26.04.2006 N МС-4-06

1,0066

май

25.05.2006 N МС-5-06

1,0094

июнь

27.06.2006 N МС-6-06

1,0171

июль

26.07.2006 N МС-7-06

1,0109

август

21.08.2006 N МС-8-06

1,0117

сентябрь

25.09.2006 N МС-9-06

1,0208

октябрь

19.10.2006 N МС-10-06

1,0093

ноябрь

17.11.2006 N МС-11-06

1,014



Применение обобщенных индексов изменения стоимости строительно-монтажных работ для расчетов за выполненные работы не допускается.

2. О согласовании Сборника коэффициентов пересчета стоимости строительства, определенной в нормах и ценах МТСН 81-98, в текущий уровень цен ноября 2006 года. Сборник N 11/2006-98 (выпуск 67).

2.1. Согласовать применение для определения сметной стоимости строительства объектов городского заказа города Москвы в текущих ценах ноября 2006 года и расчета обобщенных индексов изменения стоимости строительно-монтажных работ за 2006 год "Сборник N 11/2006-98 (выпуск 67) коэффициентов пересчета стоимости строительства, определенной в нормах и ценах МТСН 81-98, в текущий уровень цен".

3. О применении Сборника показателей стоимости ремонтно-строительных работ в текущем уровне цен ноября 2006 года (выпуск 66).

3.1. Согласовать для определения стоимости ремонтно-строительных работ по объектам городского заказа в текущих ценах ноября 2006 года Сборник показателей стоимости ремонтно-строительных работ в текущем уровне цен выпуск 66/2006 (в качестве справочного материала).

Взаиморасчеты за выполненные работы следует осуществлять по расценкам МТСН 81-98 с применением коэффициентов пересчета в текущий уровень цен в установленном порядке.

4. О применении Сборника показателей стоимости строительно-монтажных работ в текущем уровне цен ноября 2006 года (выпуск 57).

4.1. Согласовать для определения в текущем уровне цен ноября 2006 года стоимости строительно-монтажных работ, выполняемых при обустройстве квартир в домах-новостройках, Сборник показателей стоимости строительно-монтажных работ в текущем уровне цен выпуск 57 (в качестве справочного материала).

Взаиморасчеты за выполненные работы следует осуществлять по расценкам МТСН 81-98 с применением коэффициентов пересчета в текущий уровень цен в установленном порядке.

5. Пункт утратил силу - приказ Москомэкспертизы от 6 февраля 2012 года N 3..

6. О согласовании "Временной методики определения стоимости работ по разработке среднесрочных отраслевых схем размещения объектов строительства на территории города Москвы. МРР-3.2.17-06".

6.1. Согласовать и ввести в действие "Временную методику определения стоимости работ по разработке среднесрочных отраслевых схем размещения объектов строительства на территории города Москвы. МРР-3.2.17-06" сроком на 1 год.

6.2. ГУП "НИАЦ" Москомархитектуры обеспечить издание и реализацию "Временной методики определения стоимости работ по разработке среднесрочных отраслевых схем размещения объектов строительства на территории города Москвы. МРР-3.2.17-06", в IV квартале 2007 года проанализировать опыт применения данной "Временной методики ..." и при необходимости откорректировать ее в 2008 году в установленном порядке с учетом замечаний и предложений, поступивших от заинтересованных организаций.

7. Пункт утратил силу - приказ Москомэкспертизы от 8 ноября 2012 года N 64..

8. О согласовании "Сборника базовых цен на работы и услуги по обработке данных и ведению Банка данных дистанционного зондирования по территории города Москвы. МРР-3.2.28.02-06".

8.1. Согласовать и ввести в действие "Сборник базовых цен на работы и услуги по обработке данных и ведению Банка данных дистанционного зондирования по территории города Москвы. МРР-3.2.28.02-06".

9. О согласовании изменений и дополнений, внесенных в "Перечень цен (тарифов) за работы (услуги), выполняемые Департаментом земельных ресурсов города Москвы по подготовке документов, выдаваемых в режиме "одного окна" и согласовании базовых цен на отдельные элементы работы по оформлению документов о предоставлении земельных участков в собственность (дополнение к "Методике определения стоимости изготовления проектной и изыскательской продукции землеустройства в городе Москве" (письмо Департамента земельных ресурсов города Москвы от 16.11.2006 N ЗЗ-И-2989/6).

9.1. Согласовать изменения и дополнения к "Перечню цен (тарифов) за работы (услуги), выполняемые Департаментом земельных ресурсов города Москвы по подготовке документов, выдаваемых в режиме "одного окна" на возмездной основе" и дополнения к "Методике определения стоимости изготовления проектной и изыскательской продукции землеустройства в городе Москве" утвержденной Региональной Межведомственной комиссией по ценовой и тарифной политике при Правительстве Москвы (протокол от 22.11.2002 N 6-86-1003/2-30).

Заместитель председателя
Межведомственного совета
по ценовой политике в строительстве
при Правительстве Москвы
А.А.Шанин

Редакция документа с учетом
изменений и дополнений подготовлена
АО "Кодекс"

Обзор МС МТО-11 10/1000. Тест объектива МС МТО-11 10/1000

За возможность обзора МС МТО-11 10/1000 огромная благодарность Alexander Gradovsky.

МС МТО-11 10/1000 с светофильтром

ТТХ МТО-11 10/1000
Фокусное расстояние: 1000mm
Диафрагме: F/10
Вес: 2.5кг
Диаметр светофильтров: 120mm
Оптическая схема: 3линзы, 2 зеркала, 5 элементов и 3 группах
Крепление: сменное, в данном случае “Н” (подобие PRE-AI без управления диафрагмой для Nikon)

Существует несколько вариантов объектива МТО-11 10/1000. В данном обзоре представлен именно МС МТО-11 10/1000 1983 года выпуска, Лыткаринский завод оптического стекла. Есть еще вариант “СА”, а также разные объективы МС и не МС, и еще в чем-то подобный объектив МТО 1000А 10.5/1100. Странно, но обе версии МТО-11 10/1000 СА (буква А указана) и МТО-11 10/1000 (без буквы А) могут иметь сменный хвостовик.

МС МТО-11 10/1000 индикаторы и крепление для штатива

Фокусировка

Объектив имеет очень большое (огромное) кольцо фокусировки, которое вращается на все 360 градусов, от 8 метров до бесконечности. На самом деле объектив имеет перебег за бесконечность и перебег в сторону МДФ меньше 8 метров. Фокусировка очень плавная, при фокусировке передняя часть объектива выезжает всего на 1 см вперед. Бесконечность начинается после 200м на шкале дистанций фокусировки.

МС МТО-11 10/1000 вид от первого лица

Диафрагма и шкала ГРИП

МС МТО-11 10/1000 не имеет кольца управления диафрагмой и не имеет шкалы ГРИП. Диафрагма всегда находится в одном значении и изменять ее нельзя, такая вот конструкция объектива

Пример фотографии на МС МТО-11 10/1000

Конструкция

У объектива имеется замечательная телескопическая бленда, которая немного помогает ему улучшить изображения при боковом и контровом свете. Весь объектив выполнен очень добротно, как кусок металлической трубы. Очень полезным свойством МС МТО-11 10/1000 является два типа гнезд под штативы – широкое и узкое. Узкое гнездо подходит для современных штативов. А еще, выступ с гнездами продублирован на объективе со сдвигом на 90 градусов, что позволяет использовать объектив и в пейзажной и в портретной ориентации камеры. Это реально очень хорошая конструкция. Передняя линза (мениск) просто огромен – 120мм. В наборе объектив идет с несколькими светофильтрами (просто огромными) и приятным черным кейсом для транспортировки. Недостатком является передняя крышка, которая просто одевается, а не защелкивается в резьбу передней линзы, крышка часто сама по себе слетает с объектива.

Пример фотографии на МС МТО-11 10/1000

Вторая жизнь на цифре

Объектив МТО 10\1000А получил самую настоящую вторую жизнь на цифрозеркальных камерах, при чем, на ЦЗК круг его применения значительно расширился. Большие возможности объектив получил благодаря наличию у современных ЦЗК возможности снимать на очень высоких ISO. При этом очень сильно уменьшается выдержка, при которой можно снимать на объектив, что позволяет «заморожавать» днем быстро меняющиеся сцены. Обычно, МТО 10\1000 применялся для сильно статических сцен, где можно было использовать длинные выдержки, которые были единственным решением борьбы с маленькой диафрагмой объектива. Так, на МТО 10\1000 был популярен в качестве астрономического объектива, на который производилась съемка Луны и звезд. Снять днем более-менее сцену с быстро меняющимися деталями в кадре было очень сложно. Для примера, в солнечный день, используя пленку с ISO 100 из-за фиксированной диафрагмы объектива, выдержка должна быть 1\100. Чтобы снимать днем нужен очень крепкий штатив для избежания шевеленки. В те времена даже пленку со значеним ISO 800 было найти довольно сложно, потому проблема шевеленки была очень и очень серьезной. Используя на современных камерах короткие выдержки от 1\1000 до 1\4000 с объективом МТО 10\1000А и высокими значениями ISO можно не бояться за смаз, пользуясь моноподом, что сильно увеличивает мобильность объектива.

Пример фотографии на МС МТО-11 10 1000мм

Мифы:

Говорят, что зеркально-линзовые объективы имеют на самом деле куда меньшую эффективную диафрагму, чем указано. Связано это с тем, что при расчете значения числа F не берется во внимание переднее компенсирующее зеркало, которое не учитывается в расчетах. Потому, реальная диафрагма МС МТО-11 10/1000 имеет значение порядка F/16.0. Если у Вас есть информация по этому поводу, я буду признателен за информативную ссылку в комментариях.

Пример фотографии на МС МТО-11 10 1000мм

Как снимать на современные камеры и МС МТО-11 10/1000?

Объектив МС МТО-11 10/1000 имеет сменный хвостовик (заднюю часть). К сожалению, в названии объектива нет буквы «А», которая отвечает за такую возможность, потому, это просто нужно знать. Сменный хвостовик можно подобрать какой угодно. Для системы Nikon я использовал КП-А\Н, в результате у меня получился объектив с родным креплением для Nikon. Как пользоваться старыми объективами на Nikon можете почитать в разделе советская оптика. Для системы Canon проще всего использовать два переходника: КП-А\42 + М42-Canon EOS, более детально в разделе старые объективы на Canon.

МТО-11 на моноподе. Не для женских рук такой тяжелый объектив.

Лично я умудрился снимать на МС МТО-11 10/1000 держа объектив в руках, используя автоматическое ISO до 6400 и минимальную выдержку от 1\1000 до 1\4000, правда, чтобы попасть в резкость мне пришлось использовать брекетинг по фокусировке и приложить нечеловеческие усилия по удержанию объектива в руках. Таким образом я получил снимки природы в движении, например, полет бабочки, чего раньше, в эпоху пленочных камер, было очень и очень сложно сделать на МС МТО-11 10/1000. Конечно, снимать со штатива гораздо легче.

Пример фотографии на МС МТО-11 10 1000мм. Бубликообразное боке.

Внимание 1: при использовании на современных ЦЗК Nikon подтверждение с помощью зеленой точки не работает, также, не работает электронный дальномер. Фокусироваться в режиме Live View можно только со штатива, при чем, штатив должен быть очень и очень крепким. Используя хлипкие штативы и Live View, картинка на дисплее будет очень сильно «дергаться», что доставляет неудобства и заставляет нервничать. Снимать с рук в Live View не получиться. Снимая с рук, объектив будет реагировать на любое Ваше движение, даже удары сердца будут отображаться в видоискателе легкими рывками изображения. Я не вижу вообще никакой возможности пользоваться объективом с рук. Лично у меня получилось побегать с МС МТО-11 10/1000 без штатива ровно 30 минут, после чего я уже не рад был, что выбрался на природу.

Внимание 2: из-за своих размеров и веса объектив может выломать байонет камеры, потому, настоятельно рекомендуется держать в руках сам объектив с одетой на него камерой (по другому и не получится). Также, из-за размеров теряется возможность хвата за рукоятку камеры и теряется доступ до кнопок, которые находятся слева и справа от байонета. Очень непривычно, что не можешь взять камеру за ручку. Кнопку спуска нажимать в таком состоянии не очень удобно. Но, зато объектив не цепляет вспышку на моих Nikon D40, D80 (точно проверено). Вообще, МС МТО-11 10/1000 противопоказан девушкам фотографам.

Пример фотографии на МС МТО-11 10 1000мм. Фоток крупным планом

Качество изображения

Объектив дает вполне нормальное качество изображения, слегка мало контрастное, но для цифровой камеры это не проблема. Контраст падает при сильном боковом и контровом свете. Резкость средняя, но достаточная для нормальной съемки. Самое главное – никаких хроматических аберраций, дисторсии и виньетирования и уникальное боке в виде бубликов.

Пример фотографии на МС МТО-11 10 1000мм. Неплохая резкость объектива.

Примеры фотографий на кропнутую ЦЗК

Все снято на APS-C Nikon D200 DX, без обработки, накамерный JPEG L, в режиме обработки снимков VI. Уменьшен размер до 1600*1200 и впечатаны данные из EXIF. На камере с кроп фактором 1.5х ЭФР составляет 1500мм (полтора метра фокусного расстояния). Все снято с монопода.

Примеры фотографий на полный кадр (Full Frame)

Все снято на APS Nikon D700 FX, без обработки, накамерный JPEG L, в режим обработки снимков VI. Уменьшен размер до 1600*1200 и впечатаны данные из EXIF. Все снято со штатива и с рук.


Каталог современных объективов марки 'Zenitar' и 'Helios' можете посмотреть по этой ссылке.

В комментариях можно задать вопрос по теме и вам обязательно ответят, а также можно высказать свое мнение или описать свой опыт. Для подбора фототехники я рекомендую большие каталоги, например E-katalog. Много мелочей для фото можно найти на Aliexpress.


Выводы:

МС МТО-11 10/1000 необычный винтажный супер фикс телевик. Его сложно использовать, у объектива очень маленькая светосила, но МС МТО-11 10/1000 интересен своей возможностью снимать удаленные предметы и интересным бубликообразным боке.

Материал подготовил Аркадий Шаповал. Мой Youtube-канал, а также группа Радоживы на Facebook и VK.

преобразовать 11 миллисекунд в секунды

Метрические преобразования 11 мс в с. Введите число в поле, и результаты будут рассчитаны автоматически.

Сколько секунд в 11 миллисекундах? Сколько? Что переводится из 11 миллисекунд в секунды? Используйте калькулятор выше, чтобы преобразовать миллисекунды в секунды. Введите 11,5 для 11 с половиной, 11,25 для 11 с четвертью, 11,75 для 11 и трех четвертей и т. Д.

Сколько? Миллисекунды в Секунды.Таблица преобразования из ms в s

Примечание: результаты округлены

11,00 мс = 0,01100 с 11,25 мс = 0,01125 с 11,50 мс = 0,01150 с 11,75 мс = 0,01175 с
11,01 мс = 0,01101 с 11,26 мс = 0,01126 с 11,51 мс = 0,01151 с 11,76 мс = 0,01176 с
11,02 мс = 0,01102 с 11,27 мс = 0,01127 с 11,52 мс = 0.01152 с 11,77 мс = 0,01177 с
11,03 мс = 0,01103 с 11,28 мс = 0,01128 с 11,53 мс = 0,01153 с 11,78 мс = 0,01178 с
11,04 мс = 0,01104 с 11,29 мс = 0,01129 с 11,54 мс = 0,01154 с 11,79 мс = 0,01179 с
11,05 мс = 0,01105 с 11,30 мс = 0,01130 с 11,55 мс = 0,01155 с 11,80 мс = 0,01180 с
11.06 мс = 0,01 · 106 с 11,31 мс = 0,01131 с 11,56 мс = 0,01156 с 11,81 мс = 0,01181 с
11,07 мс = 0,01107 с 11,32 мс = 0,01132 с 11,57 мс = 0,01157 с 11,82 мс = 0,01182 с
11,08 мс = 0,01108 с 11,33 мс = 0,01133 с 11,58 мс = 0,01158 с 11,83 мс = 0,01183 с
11,09 мс = 0,01109 с 11,34 мс = 0.01134 с 11,59 мс = 0,01159 с 11,84 мс = 0,01184 с
11,10 мс = 0,01110 с 11,35 мс = 0,01135 с 11,60 мс = 0,01160 с 11,85 мс = 0,01185 с
11,11 мс = 0,01111 с 11,36 мс = 0,01136 с 11,61 мс = 0,01161 с 11,86 мс = 0,01186 с
11,12 мс = 0,01112 с 11,37 мс = 0,01137 с 11,62 мс = 0,01162 с 11.87 мс = 0,01187 с
11,13 мс = 0,01113 с 11,38 мс = 0,01138 с 11,63 мс = 0,01163 с 11,88 мс = 0,01188 с
11,14 мс = 0,01114 с 11,39 мс = 0,01139 с 11,64 мс = 0,01164 с 11,89 мс = 0,01189 с
11,15 мс = 0,01115 с 11,40 мс = 0,01140 с 11,65 мс = 0,01165 с 11,90 мс = 0,01190 с
11.16 мс = 0,01116 с 11,41 мс = 0,01141 с 11,66 мс = 0,01166 с 11,91 мс = 0,01191 с
11,17 мс = 0,01117 с 11,42 мс = 0,01142 с 11,67 мс = 0,01167 с 11,92 мс = 0,01192 с
11,18 мс = 0,01118 с 11,43 мс = 0,01143 с 11,68 мс = 0,01168 с 11,93 мс = 0,01193 с
11,19 мс = 0,01119 с 11,44 мс = 0.01144 с 11,69 мс = 0,01169 с 11,94 мс = 0,01194 с
11,20 мс = 0,01120 с 11,45 мс = 0,01145 с 11,70 мс = 0,01170 с 11,95 мс = 0,01195 с
11,21 мс = 0,01121 с 11,46 мс = 0,01146 с 11,71 мс = 0,01171 с 11,96 мс = 0,01196 с
11,22 мс = 0,01122 с 11,47 мс = 0,01147 с 11,72 мс = 0,01172 с 11.97 мс = 0,01197 с
11,23 мс = 0,01123 с 11,48 мс = 0,01148 с 11,73 мс = 0,01173 с 11,98 мс = 0,01198 с
11,24 мс = 0,01124 с 11,49 мс = 0,01149 с 11,74 мс = 0,01174 с 11,99 мс = 0,01199 с

THE ROBOT SPIRITS < SIDE MS > MS-11 ACT ZAKU ver. АНИМЕ. | GUNDAM

*** Важное примечание: (2020/02/24) ***
Из-за задержки производства месяц доставки переносится с 03 2020 на 04 2020.
Пожалуйста, проверьте подробную информацию, которая была отправлена ​​на вашу электронную почту, зарегистрированную на PREMIUM BANDAI.
Приносим извинения за доставленные неудобства.

21 ноября 2019 г .: обновленное изображение продукта.

Из MS-X Act Zaku выпущен в вер. АНИМЕ. !
Act Zaku - это мобильный костюм, разработанный как серия Zaku с общим улучшением мобильности в результате Плана Пезуна.
Он поставляется с разнообразным новым оружием, предлагающим большую игровую ценность.

Описание продукта ・ Основной корпус
・ Сменная рука слева / справа, 4 типа
・ Лучевая винтовка
・ Буллпап пистолет
・ Лучевая сабля x 2
・ Рукоятка для лучевой сабли
・ Большой тепловой ястреб (светящийся)
・ Большой тепловой ястреб (в комплекте)
・ Крекер x 2
parts Детали с эффектом луча
parts Детали с эффектом сабли x 2
・ Детали с эффектом сабли (изгиб)
・ Набор различных шарнирных деталей
・ Маркировочные пломбы
deck Палуба для хранения запястья
Материал изделия АБС, ПВХ
Размер продукта Высота: около 125 мм
Целевой возраст Для детей от 15 лет и старше.
Примечания

Пожалуйста, прочтите перед покупкой:

* Может незначительно отличаться от реального продукта.
* Внешний вид каждого предмета может немного отличаться, например, цвет
.
* Технические характеристики продукта и дата отгрузки могут быть изменены без предварительного уведомления.
* Заказы могут быть выполнены, как только наберется установленное количество.
Также могут быть получены повторные заказы на товары, запрашиваемые в больших количествах.

Пожалуйста, прочтите и примите во внимание вышеизложенное.

Ограниченное количество Максимум 12 шт на человека

дистрибьюторов автоматизированных систем контроля, включая систему MS-11 In-Line SPI.

Подпишитесь на рассылку новостей по электронной почте
Новости

Мастерская «Будущее SMT Inspection».

' var pauseit = 1 // Внизу ничего не меняем! scrollerspeed = (document.all)? scrollerspeed: Math.max (1, scrollerspeed-1) // замедлить скорость на 1 для NS var copyspeed = скорость прокрутки var iedom = document.all || document.getElementById var actualheight = '' var cross_scroller, ns_scroller var pausespeed = (pauseit == 0)? скорость копирования: 0 function populate () { if (iedom) { cross_scroller = документ.getElementById? document.getElementById ("iescroller"): document.all.iescroller cross_scroller.style.top = parseInt (высота прокрутки) +8+ «пикселей» cross_scroller.innerHTML = scrollercontent actualheight = cross_scroller.offsetHeight } else if (document.layers) { ns_scroller = document.ns_scroller.document.ns_scroller2 ns_scroller.top = parseInt (высота прокрутки) +8 ns_scroller.document.write (содержимое прокрутки) ns_scroller.document.Закрыть() actualheight = ns_scroller.document.height } lefttime = setInterval ("scrollscroller ()", scrollerDelay) } window.onload = заполнить function scrollscroller () { if (iedom) { если (parseInt (cross_scroller.style.top)> (фактическая высота * (- 1) +8)) cross_scroller.style.top = parseInt (cross_scroller.style.top) -copyspeed + «px» еще cross_scroller.style.top = parseInt (высота прокрутки) +8+ «пикселей» } иначе, если (документ.Layers) { если (ns_scroller.top> (фактическая высота * (- 1) +8)) ns_scroller.top- = copyspeed еще ns_scroller.top = parseInt (высота прокрутки) +8 } } if (iedom || document.layers) { с (документ) { if (iedom) { записывать('') } else if (document.layers) { записывать('') записывать('') записывать('') } } }
Свяжитесь с нами
3 Morse Road 2A
Oxford, CT 06478

Тел .: 203-881-5559
Факс: 203-881-3322

  • Эксклюзивная система камер CoaXPress 15MP / 25MP
  • Технология двойной проекции без тени муара
  • Прецизионный составной телецентрический объектив камеры
  • Автоматическая система калибровки высоты по оси Z
  • Автоматизированная печатная плата под системой поддержки платы
  • Прецизионная компенсация коробления печатной платы
  • Замкнутая связь с принтером экрана
  • Абсолютная повторяемость и воспроизводимость
  • INTELLISYS® Industry 4.0 Интеллектуальная система автоматизации производства

Распространенность РС в США

Реферат

Цель Сгенерировать национальную оценку распространенности рассеянного склероза (РС) в Соединенных Штатах путем применения проверенного алгоритма к множеству наборов данных административных заявлений о состоянии здоровья (AHC).

Методы Утвержденный алгоритм был применен к частным, военным и общедоступным наборам данных AHC для выявления случаев РС у взрослых в период с 2008 по 2010 год. В каждом наборе данных мы определили 3-летнюю кумулятивную распространенность в целом и стратифицировали по возрасту, полу, и регион переписи. Мы применили оценки по конкретным видам страхования и по стратам к данным переписи населения США 2010 г. и объединили результаты для расчета распространенности РС в США в 2010 г., накопленной за 3 года. Мы также оценили распространенность в 2010 г., накопленную за 10 лет, используя 2 модели, и экстраполировали нашу оценку на 2017 г.

Результаты Расчетная распространенность РС среди взрослого населения США за 10 лет составила 309,2 на 100 000 (95% доверительный интервал [ДИ] 308,1–310,1), что составляет 727 344 случая. За тот же период распространенность РС составила 450,1 на 100 000 (95% ДИ 448,1–451,6) для женщин и 159,7 (95% ДИ 158,7–160,6) для мужчин (соотношение женщин: мужчин 2,8). Расчетная распространенность РС в 2010 г. была самой высокой в ​​возрастной группе от 55 до 64 лет. Был выявлен градиент снижения распространенности с севера на юг США.Расчетная распространенность рассеянного склероза также представлена ​​на 2017 год.

Заключение Расчетная национальная распространенность рассеянного склероза в США в 2010 году является самой высокой на сегодняшний день и свидетельствует о сохранении градиента север-юг. Наш строгий, основанный на алгоритмах подход к оценке распространенности эффективен и может быть использован при других хронических неврологических состояниях.

Глоссарий

AHC =
административных заявлений о состоянии здоровья;
CI =
доверительный интервал;
МКБ-9 =
Международная классификация болезней 9-го пересмотра ;
KPSC =
Kaiser Permanente Southern California;
MEPS =
Панельное обследование медицинских расходов;
MS =
рассеянный склероз;
NMSS =
Национальное общество рассеянного склероза;
OP =
Optum;
TH =
Truven Health;
VA =
Департамент по делам ветеранов

Заболеваемость хроническими заболеваниями сложно оценить в Соединенных Штатах, поскольку в них отсутствует единая система здравоохранения и существует ограниченная инфраструктура для выявления и отслеживания пациентов на протяжении всей их жизни.Варианты определения оценок заболеваемости и распространенности включают обследования, регистры или наборы данных административных заявлений о состоянии здоровья (AHC). У каждого метода есть свои сильные и слабые стороны; однако увеличение доступности больших наборов данных AHC сделало этот подход эффективным и рентабельным. 1

Рассеянный склероз (РС) - наиболее распространенное прогрессирующее неврологическое заболевание молодых людей во всем мире. 2,3 Текущие оценки показывают, что от 300 000 до 400 000 человек затронуты в Соединенных Штатах, но это в значительной степени основано на пересмотре оценок на основе более старых данных. 2, -, 6 Эти оценки не отражают меняющуюся демографическую ситуацию в Соединенных Штатах или потенциальные изменения в выявлении РС из-за модификаций диагностических критериев и новых вариантов лечения. Более того, исследования в соседней Канаде сообщили о резком росте распространенности РС за последние несколько десятилетий в нескольких провинциях. 7, -, 9

Из-за проблем с оценкой распространенности рассеянного склероза в Соединенных Штатах Национальное общество рассеянного склероза (NMSS) сформировало Рабочую группу по распространенности рассеянного склероза, состоящую из ученых и сторонников политики с целью создания научно обоснованная и экономически обоснованная оценка распространенности рассеянного склероза на национальном уровне.Применяя проверенный алгоритм случая для РС к множеству больших наборов данных AHC, мы стремились создать надежную национальную оценку распространенности РС среди взрослого населения, стратифицированную по возрасту, полу и региону.

Методы

Настройки и источники данных

США включают 48 смежных штатов, Гавайи и Аляску. 48 смежных штатов находятся в диапазоне от ≈24,52 ° N до 49,28 ° N широты и от ≈66,95 ° W до 124,77 ° W долготы. Население США, охватывающее все 50 штатов, неуклонно растет, увеличившись с 309.3 миллиона в 2010 году до 325,8 миллиона в 2017 году. 10 В Соединенных Штатах медицинское страхование можно получить из нескольких частных или государственных (государственных) источников, и часть населения не застрахована. Мы приобрели несколько наборов данных AHC, представляющих частные и спонсируемые государством страховые программы США, исходя из того, что почти все люди с РС, за исключением незастрахованных, коренных американцев, пользующихся услугами службы здравоохранения для индейцев, и заключенных, будут получать медицинские услуги в рамках одной из этих программ.В каждую из них входило взрослое население (≥18 лет) и их использование здравоохранения в период с 2008 по 2010 год. Распределение населения в рамках конкретных программ медицинского страхования варьируется в зависимости от дохода, пола, инвалидности и возрастной группы. 1

Частное страхование

В 2016 году большинство взрослых моложе 65 лет (73%) получали медицинское страхование по планам частного страхования. 11 Поскольку наборы данных AHC, доступные для частного страхового сектора, различаются по географическому охвату и типам представленных поставщиков, мы получили доступ к трем наборам данных: Optum (OP), Truven Health (TH) и Kaiser Permanente Southern California (KPSC). .Эти 3 набора частных медицинских данных представляют собой обширную выборку всех таких планов на рынке страхования США. Два из этих наборов данных (OP и TH за 2008–2010 гг.) Использовались в расчетах распространенности и в совокупности охватывают ≈35% частных застрахованных лиц в США.

Государственное страхование

Взрослые с низким доходом и лица с особыми ограниченными возможностями могут получить медицинское страхование через финансируемые государством планы Medicaid. В 2016 году 96% взрослого населения США старше 65 лет были зарегистрированы в программе Medicare, финансируемой государством. 11 В государственном секторе наборы данных Центров Medicare и Medicaid Services охватили всех правомочных лиц (100%), зарегистрированных в Medicare или Medicaid в Соединенных Штатах (> 50 миллионов человек). 12 Все военнослужащие, поступающие на действительную военную службу, получают медицинское обслуживание от Министерства обороны, и в соответствии с текущими критериями отбора от ≈30% до 40% переводятся в систему здравоохранения и пособий Департамента по делам ветеранов (VA) после их ухода. действующая служба. Для оценки военного сектора мы использовали базу данных VA, в которую вошли все лица, зачисленные в систему здравоохранения VA.В совокупности эти наборы данных предоставили медицинскую информацию для> 125 миллионов человек.

Наборы данных AHC различались в зависимости от собранной информации. Поэтому для этого исследования мы разработали словарь общих данных и список переменных. Они включали файл знаменателя для всех зачисленных, включая даты получения права на страхование, пол, год рождения и географический регион проживания. Поскольку раса и этническая принадлежность не были доступны во всех источниках данных, они не учитывались в этом анализе.Мы также получили доступ к данным о обращениях за медицинской помощью в стационарных и амбулаторных условиях, а также о заявках на лекарства, отпускаемые по рецепту. Каждое стационарное и амбулаторное обращение включало ≥1 диагностических кодов, записанных с помощью системы МКБ-9, а также дату обращения. В системе ICD-9 MS однозначно идентифицируется кодом 340. Для стационарных обращений мы использовали дату поступления. Заявления о лекарствах, отпускаемых по рецепту, включали название лекарства и дату выпуска.

Диагностический алгоритм для MS

Как описано в другом месте, 13 мы разработали и протестировали несколько алгоритмов для идентификации людей с РС с использованием наборов данных AHC по сравнению с установленными врачом случаями РС в качестве эталонного стандарта.Оптимальный алгоритм с точки зрения чувствительности, специфичности и простоты требовал накопления ≥3 госпитализаций, связанных с РС, амбулаторных посещений или обращений за выдачей рецептов на терапию, модифицирующую РС, в любой комбинации в течение 1-летнего периода. В отношении рецептурных препаратов мы рассматривали только терапию, модифицирующую заболевание, одобренную Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США к 2010 году, включая бета-интерферон, глатирамера ацетат, натализумаб и финголимод. 14 Чтобы избежать ошибочной классификации, заявки на натализумаб не включались, если у человека также был код МКБ-9 для воспалительного заболевания кишечника, другого заболевания, для лечения которого одобрен этот препарат.

При тестировании среди лиц с хотя бы одним заявлением о РС чувствительность алгоритма РС составила от 86% до 92%, а специфичность - от 66% до 83%, в зависимости от набора данных. 13 При тестировании на канадской популяции, которая включала людей с и без каких-либо заявлений о РС (то есть, общая популяция), чувствительность составила 96,0%, а специфичность - 99,5%. 13

Оценки распространенности

Для наборов данных TH, OP, VA и KPSC участники, которые также имели покрытие Medicare, были удалены как из числителей, так и из знаменателей в каждом наборе данных, чтобы предотвратить двойной учет.Годовая распространенность в рамках данного набора данных была разделена как все те, кто соответствовал определению случая рассеянного склероза, разделенный на ежегодную группу риска, определяемую как все участники в возрасте ≥18 лет на начало календарного года и имеющие право на участие в плане медицинского страхования в целом. 6 месяцев в календарном году. Поскольку люди с РС могут иметь различные контакты с системой здравоохранения, после того, как участник соответствует определению случая и сохраняет право на лечение, он или она впоследствии считается заболевшим.Применяя алгоритм к каждому набору данных, мы определили распространенность в конце 3-летнего периода исследования путем выявления всех людей, которые соответствовали определению случая в любой 1 из 3 лет исследования, которые были еще живы и имели право на лечение в последний год. периода исследования (2010 г.) и разделив полученное значение на группу риска в 2010 г. Эти трехлетние оценки распространенности были стратифицированы по полу, возрасту (18–24, 25–34, 35–44, 45–54, 55–64 , 67–74 и ≥75 лет) и регион переписи США (север, восток, юг и запад).Они были напрямую стандартизированы по возрасту и полу для переписи населения США 2010 года. 10 Доверительные интервалы (ДИ) были рассчитаны для окончательного общего числа случаев с использованием биномиальных ДИ (± 1,96 × √ (NPQ, где P и Q - это доли случаев и не случаев, а N - расчетное население США в 2010 году). Затем 95% доверительные интервалы были скорректированы с учетом коэффициента на 100000, а факторы инфляции были рассчитаны с помощью модели фиксированных эффектов. Проверка оценок распространенности была выполнена для каждого набора данных двумя независимыми экспертами (W.E.K. и L.W.) для контроля качества.

Чтобы получить национальную оценку распространенности РС в США, мы предприняли несколько аналитических шагов. Во-первых, мы рассматривали оценки OP и TH как случайные выборки, взятые из одного и того же основного населения (коммерчески застрахованного), поэтому их стратифицированные по возрасту и полу оценки были объединены с использованием модели случайных эффектов для представления данных частного страхования в США. населения. Поскольку KPSC был включен в знаменатель общей численности населения в Западном регионе, он не был включен в эти расчеты.Был проведен анализ чувствительности, изучающий эффекты включения или исключения KPSC из Западного региона, и результаты существенно не различались (данные не показаны). Во-вторых, мы использовали данные переписи населения США, чтобы определить общую численность населения США в каждом возрастном и половом слое, а также долю населения, охваченного частным, государственным и военным медицинским страхованием. 15 Оценки распространенности программ Medicaid, Medicare и ветеранов вооруженных сил полностью охватили эти группы населения. 10,15 Оценка для конкретной страты была умножена на общее количество застрахованного населения США в этой страте, чтобы определить количество пострадавших.В 2010 году 16% населения США не было застраховано, но доля незастрахованных варьируется в зависимости от условий. 11,16 Чтобы учесть незастрахованную популяцию с РС, мы использовали данные когортного исследования Сони Слифка 17 и NMSS, которые сообщили о 5,0% незастрахованной популяции среди РС до вступления в силу Закона о доступном медицинском обслуживании. Таким образом, количество людей, затронутых в каждой страте, было суммировано, увеличено на 5,0%, чтобы учесть незастрахованных во всех стратах, а затем разделено на общую численность населения США, чтобы получить итоговую оценку распространенности для Соединенных Штатов.

Термин совокупная распространенность применяется к нашему подходу к выявлению случаев заболевания в наборах данных в том смысле, что, как только человек соответствует определению случая рассеянного склероза для данного года, этот человек считается заболевшим в последующие годы до 2010 года, если он или она остается активным в отношении здоровья. строить планы. Этот метод установления случая эффективно отражает распространенность в течение ограниченного периода времени (3 года). В конечном счете, представляющая интерес оценка распространенности - это распространенность в течение жизни, которая представляет собой долю населения, у которой в какой-то момент жизни (до момента оценки) развился РС.При хронических, преимущественно рецидивирующих заболеваниях, таких как РС, которые начинаются в раннем взрослом возрасте, люди могут отказаться от контактов с системой здравоохранения в течение длительного времени. Таким образом, необходимы длительные периоды наблюдения (минимум 10 лет), чтобы приблизиться к показателям распространенности в течение жизни при оценке наборов данных AHC, как описано ранее для системной красной волчанки 18 и широко признано в литературе по раку. 19 Как отмечалось в другом месте, 13 с использованием наборов данных AHC, доступных от Intercontinental Marketing Services, VA и провинции Манитоба за период с 2000 по 2016 год, мы определили долю пропущенных случаев, используя трехлетний и Оценка совокупной распространенности за 10 лет.На основе этих выводов потребовались поправочные коэффициенты недоучета для 10-летней кумулятивной распространенности, которые оценивались в диапазоне от 1,37 (нижняя граница, 95% ДИ 1,13–1,66) до 1,47 (верхняя граница, 95% ДИ 1,23–1,76). . Мы применили эти факторы для получения оценок распространенности РС в 2010 г., накопленной за 10 лет. 13

Дополнительный анализ

Совокупная распространенность РС растет с переменной скоростью и в конечном итоге выравнивается, когда алгоритм применяется к данному набору данных AHC системы здравоохранения. 7,13 Мы показали, что среднегодовой рост показателя распространенности РС в период с 2010 по 2017 год для 2 наборов данных AHC составил 2,3% / год. 13 Этот темп роста можно применить к оценкам распространенности за 2010 г., чтобы получить более свежие данные о распространенности.

SAS версии 9.4 (SAS Institute Inc, Кэри, Северная Каролина) и SPSS версии 22 (IBM Inc, Армонк, Нью-Йорк) использовались для проведения статистического анализа.

Утверждения стандартных протоколов, регистрации и согласия пациентов

Исследование было одобрено институциональным наблюдательным советом Медицинского центра VA в Балтиморе / Медицинском центре Мэрилендского университета, KPSC, Colorado Multiple Institutional Review Board, Stanford University и Quorum Review .Стандартные контракты и соглашения об использовании данных были получены для анализа всех наборов данных.

Доступность данных

Наборы данных для этого исследования были приобретены и принадлежат NMSS. В настоящее время нет соглашений о совместном использовании, и данные хранятся в соответствии с контрактом на использование данных с NMSS.

Результаты

Характеристики наборов данных AHC за исследуемый период обобщены в таблице 1; Всего ими было охвачено 125 миллионов человек в возрасте ≥18 лет. Три набора данных по частному страхованию в совокупности охватили 58 миллионов человек, примерно половину застрахованного в частных страховых компаниях взрослого населения США (возраст 18–64 лет).В совокупности государственные (государственные) источники страхования охватили всех 68 миллионов человек по всей стране, которые застрахованы по этим планам.

Таблица 1

Характеристики наборов данных AHC, использованных для оценки распространенности РС в США

Приведенные оценки распространенности относятся к взрослому населению. Оценки стратифицированной по возрасту и полу распространенности РС в 2010 г., накопленные за 3 года (2008–2010 гг.), И количество случаев из этих наборов данных отображены в таблицах с e-1 по e-5 (доступны от Dryad, https: // doi .org / 10.5061 / dryad.pm793v8). Распространенность OP и TH удивительно схожа, в то время как оценки VA с разбивкой по полу являются самыми высокими среди наборов данных. Данные знаменателя переписи населения США 2010 года показаны в таблице e-6 (можно получить на сайте Dryad, https://doi.org/10.5061/dryad.pm793v8).

Годовая кумулятивная распространенность РС в США с 2008 по 2010 год с использованием алгоритма MS отображается для 2 наборов данных частного медицинского страхования (OP и TH) и 3 наборов данных государственного страхования (Medicaid, Medicare и VA) на рисунке. 1.Среднегодовое увеличение распространенности за этот трехлетний период для всех наборов данных составило 6,3% (стандартное отклонение 3,8%). Оценка распространенности РС в 2010 г., накопленная за 3 года для объединенных наборов данных, составила 199,84 (95% ДИ 199,83–199,85), что соответствует 470 053 людям с РС.

Рисунок 1 Среднегодовая распространенность РС в США за 2008, 2009 и 2010 годы на 100 000 населения для частных (OP и TH, черные линии) и государственных (Medicaid, Medicare и VA, красные линии) наборов данных медицинского страхования

Множественное Отображаются случаи склероза (РС), полученные с помощью алгоритма РС в год 1, а также новые случаи, совокупно добавленные в последующие годы.OP = Optum; TH = Truven Health; VA = Департамент по делам ветеранов.

После корректировки на незастрахованных и применения нижнего предела коэффициента инфляции для учета занижения из-за ограниченного периода наблюдения расчетная распространенность РС в 2010 г., накопленная за 10 лет, составила 265,1 на 100 000 (95% ДИ 264,3–265,8) , что соответствует 623 437 людям с РС. Точно так же после поправки на незастрахованных и применения верхнего предела инфляционного фактора распространенность РС в 2010 г., накопленная за 10 лет, составила 309.2 на 100 000 (95% ДИ 308,1–310,1), что в общей сложности составляет 727 344 человека с РС. Оценки распространенности РС за 2010 г., накопленные за 10 лет, 95% доверительных интервалов и количество случаев в США, стратифицированных по возрасту и полу (более низкие и высокие оценки), показаны в таблице e-7 (доступна от Dryad, https: // doi .org / 10.5061 / dryad.pm793v8). На Рисунке 2 показан нижний, а на Рисунке 3 - более высокие оценки распространенности РС в 2010 г., накопленные за 10 лет в Соединенных Штатах, с разбивкой по возрасту и полу. Общее соотношение распространенности женщин: мужчин в 2010 году составляло 2.8. Пик повозрастной распространенности рассеянного склероза составлял от 55 до 64 лет, а затем от 65 до 74 лет.

Рисунок 2 Распространенность РС в 2010 г., накопленная за 10 лет в США на 100 000 населения в разбивке по возрасту и полу

Более высокие и низкие оценки скорректированы по данным переписи населения США 2010 г., основанные на комбинированных наборах данных из алгоритма рассеянного склероза (РС), включая следующее: Truven , Optum, Департамент по делам ветеранов, Medicare и Medicaid (полные данные для всех оценок возраста и пола доступны в таблице данных e-7, доступной на сайте Dryad, https: // doi.org / 10.5061 / dryad.pm793v8). (A) нижняя оценка и (B) верхняя оценка распространенности рассеянного склероза в США в 2010 г. на 100 000 населения.

Рис. 3 Высокая оценка распространенности РС в США в 2010 г. на 100 000 населения (перепись США 2010 г.) по регионам переписи с 95% ДИ и соотношением распространенности F: M

ДИ = доверительный интервал; F: M = женщина: мужчина; MS = рассеянный склероз.

В таблицах 2 и 3 показаны оценки распространенности РС за 2010 год, накопленные за 10 лет, 95% доверительных интервалов и количество случаев в США в разбивке по возрасту, полу и географическому положению (более низкие и высокие оценки).Рисунок 3 иллюстрирует более высокую оценку за 2010 год, накопленную за 10 лет по регионам переписи, вместе с соответствующими соотношениями полов. Распространенность в северных регионах переписи США (Северо-восток и Средний Запад) была статистически значимо выше, чем в южных регионах переписи, о чем свидетельствуют неперекрывающиеся 95% доверительные интервалы.

Таблица 2

2010 г. Распространенность РС, накопленная за 10 лет в Соединенных Штатах на 100 000 населения по возрасту, полу и географическому положению

Таблица 3

Распространенность РС в 2010 г., накопленная за 10 лет в США на 100 000 населения по возрасту, полу и geography

Обсуждение

Мы сообщаем текущую национальную оценку распространенности РС среди взрослого населения с использованием проверенного алгоритма на основе 5 больших наборов данных AHC в США, которые также учитывали незастрахованное население и ограниченное (трехлетний период) наблюдение .Наши оценки были основаны на стратегии выявления случаев, которая выявляла случаи РС ежегодно, в сочетании с данными переписи 2010 года для знаменателя. В целом, было оценено почти 45% населения США, в том числе 100% тех, кто имеет страхование, финансируемое государством. В 2010 году наша более высокая оценка 10-летней распространенности составила 309,2 на 100 000 населения, что составляет 727 344 взрослых, страдающих РС. Эта более высокая оценка на 2010 год основана на корректировке (3 года по сравнению с 10 годами), наблюдаемой в единой системе плательщиков медицинского страхования, охватывающей все население.Оценка нижнего уровня основана на корректировке набора данных (3 года против 10 лет) для государственной страховой компании для определенного сегмента населения. Наш подход учитывал демографические характеристики населения страны, периодическое наблюдение за хроническим заболеванием с началом у молодых взрослых, различные страховые компании в системе здравоохранения и незастрахованных.

В сочетании с предыдущими оценками распространенности РС в США наши результаты показывают, что за последние 5 десятилетий наблюдается устойчивый рост распространенности РС, что распространенность РС остается выше среди женщин, чем среди мужчин, и что географический градиент север-юг все еще сохраняется. 2 Согласно самой ранней опубликованной национальной оценке распространенности рассеянного склероза в США для взрослого и педиатрического населения вместе взятых, было 58 на 100 000 за 1976 год, 4 , что соответствует 123 000 случаев с соотношением женщин: мужчин 1,7. В этом исследовании для оценки распространенности использовались опросы больниц, врачей и пациентов. Последующие исследователи использовали эту распространенность 58 на 100000 в качестве исходного уровня и оценили количество диагностированных врачом случаев РС в Соединенных Штатах в 300000 к 1990 году с учетом изменений населения и более современных оценок распространенности по регионам. 5 Используя Национальное обследование здоровья, исследователи подсчитали национальный уровень распространенности РС в 85 на 100 000 за период с 1989 по 1994 год. 20 Соответствующее соотношение женщин: мужчин составило 2,6: 1, что намного выше, чем в 1976 году. соотношение полов. 4 Авторы более позднего исследования сообщили о распространенности национального годового периода на уровне 0,21% за 10-летний период (1998–2009 гг.), При этом случаи РС были идентифицированы по крайней мере по 1 коду МКБ-9 340 в Обзоре медицинских расходов ( MEPS). 21 Это соответствует 572 312 пациентам с РС. Совсем недавно группа специалистов с более строгим алгоритмом в течение 5 лет (2008–2012 гг.), Использующая базу данных коммерчески застрахованных претензий PharMetrics, дала оценку распространенности РС за год в 149 случаев на 100 000 с 403 630 отдельными случаями, 22 , что в достаточной степени согласуется с нашими 3-летняя оценка в 2010 году - 470 053 случая. Соответствующее соотношение женщин и мужчин составило 3,1. Более высокая оценка распространенности в базе данных MEPS за более длительный период установления, чем в исследовании PharMetrics, подчеркивает необходимость учета занижения при ограниченных периодах наблюдения.Это также объясняет тот факт, что наша цифра распространенности наиболее соответствует оценке 10-летней базы данных MEPS, но с преимуществом официально утвержденного алгоритма и более широкой демографической выборки.

Мы не оценивали распространенность РС у детей, и это следует учитывать при сравнении наших результатов с результатами, полученными в других популяциях. Если мы воспользуемся нашими стратифицированными по возрасту коэффициентами на 2010 год (низкие и высокие оценки), они попадут в диапазон оценок распространенности РС в 2006 году в Манитобе, Канада, 7 для всех 10-летних возрастных групп.Аналогичным образом, стратифицированные по возрасту оценки распространенности для Северной Ирландии, Соединенное Королевство, в 2004 году были немного выше, чем наши возрастные оценки для следующих возрастных децилей: от 25 до 34, от 25 до 44 и от 45 до 54 лет. 23 Распространенность РС в старших возрастных группах была немного выше среди населения США в 2010 году. По сравнению с оценками распространенности с разбивкой по возрасту из Британской Колумбии, Канада, за 2008 г., 8 наши показатели в США были значительно выше (2–30%) для всех возрастных категорий. Таким образом, наши оценки с разбивкой по возрасту соответствуют недавним данным по Северной Америке и Европе.Если бы мы предположили, что распространенность РС у детей была равна нулю, хотя это консервативное предположение, наши оценки распространенности в 2010 г. были бы в диапазоне от 218,6 (низкая оценка) до 234,5 (высокая оценка) на 100 000 населения.

Таким образом, наши результаты по распространенности согласуются с недавними сообщениями о распространенности РС из других регионов, в которых исследовалось все население. В Канаде наблюдалось резкое увеличение распространенности РС: по оценкам, 266,9 на 100 000 в Новой Шотландии 9 в 2010 году и распространенность 179.9 на 100 000 в провинции Британская Колумбия в 2008 году. 8 В европейских регионах распространенность РС была переменной, причем в северных регионах оценки были выше. Например, национальный показатель распространенности в 2005 г. составил 154,5 на 100 000 (европейское стандартное население) из Дании. 24 За последнее десятилетие во Франции национальные оценки распространенности, как правило, <94,7 на 100 000 (стандартизовано для населения Франции). 25 Южноамериканские исследования распространенности в основном носят региональный характер, но исследование 2005 года в Панаме дало приблизительную оценку распространенности, равную 5.2 на 100 000, 26 значительно ниже оценок в Северной Америке.

Распространенность - это результат заболеваемости и средней продолжительности состояния. Показатели заболеваемости РС в целом были стабильными или несколько увеличились за последние 4–5 десятилетий среди белого населения, но выше в отдельных расовых группах. 27, -, 29 Таким образом, растущие оценки распространенности РС в западном мире (т.е. среди населения преимущественно европейского происхождения) в значительной степени отражают старение населения с улучшением выживаемости. 7 Кроме того, диагностические критерии для РС эволюционировали, и более ранняя диагностика РС возможна с использованием нейровизуализации, и это, вероятно, способствует наблюдаемой повышенной распространенности. 30,31

Благодаря широкой доступности электронных наборов данных в системах здравоохранения и новым методам анализа данных, в глобальном масштабе увеличилось количество исследований заболеваемости и смертности. 3 Однако методы выявления случаев и других представляющих интерес переменных не стандартизированы.Чтобы обеспечить прозрачность нашего подхода и поддержать сравнения с будущей работой в США и других юрисдикциях, мы представили годовые показатели распространенности РС для наших комбинированных и индивидуальных наборов данных.

Сильной стороной нашего исследования является проверка нашего алгоритма на соответствие имеющемуся золотому стандарту, то есть медицинским записям в нескольких наборах данных и системах здравоохранения. 13 Наш подход также учитывает сложность существующей национальной системы здравоохранения. 1 Для удовлетворения потребности в точных данных о заболеваемости и смертности при неврологических заболеваниях логичным шагом вперед могла бы стать национальная система эпиднадзора, объединяющая электронные наборы данных AHC и статистику естественного движения населения. Система наблюдения за неврологическими заболеваниями, утвержденная Конгрессом США в 2016 году, может использовать этот относительно экономичный и эффективный по времени подход. 32

На основании наблюдаемого роста распространенности с помощью наших наборов данных VA и Intercontinental Marketing Services после 2010 года мы оценили, что распространенность РС в 2017 году, накопленная за 17 лет, будет колебаться от 337.От 9 на 100 000 населения (n = 851 749 человек с РС) до 362,6 на 100 000 населения (n = 913 925 человек с РС). Эти 17-летние совокупные оценки приближаются к распространенности РС в течение всей жизни в пределах наших наборов данных AHC. Однако к этим оценкам следует относиться с осторожностью, поскольку они предполагают, что факторы, которые способствовали росту распространенности, наблюдавшемуся в Соединенных Штатах с 2010 г. на основе данных кодирования, сохранялись до 2017 г. и что существенные изменения в распределении и выживаемости населения с риском рассеянного склероза не произошло.Эти предположения включают сохраняющуюся высокую продолжительность жизни пациентов с РС и населения в целом, стабильную заболеваемость РС и аналогичные методы кодирования с 2010 по 2017 годы. Экстраполированные оценки были смоделированы для РС и системной красной волчанки в рамках канадской системы здравоохранения 17, 33 , предполагая стабильную заболеваемость, о которой постоянно сообщалось по всей Канаде. В Соединенных Штатах последние данные Центров по контролю и профилактике заболеваний показывают небольшое снижение ожидаемой продолжительности жизни населения США в 2016 году, 34 , а также меняется демографический состав населения США. 35 В будущих исследованиях можно использовать эти методы для повторной оценки распространенности РС и изучения того, как эти факторы влияют на результаты.

У нашего подхода есть ограничения. Во-первых, мы не включали детей, Службу здравоохранения Индии, пенитенциарную систему США или жителей США без документов в наши оценки распространенности. Однако эти слои населения относительно малы или, в случае детей, будут способствовать небольшому количеству случаев, и многие люди будут обнаружены другими системами здравоохранения, включая программу страхования Medicare, в какой-то момент в более позднем возрасте.Кроме того, диагностика педиатрического рассеянного склероза является сложной задачей; Эффективность предлагаемого нами алгоритма необходимо будет протестировать на этой популяции с учетом признанных различий в частоте рецидивов, более выраженных когнитивных нарушений, которые могут повлиять на обращение за медицинской помощью, и зарегистрированных различий в производительности алгоритмов среди педиатрического и взрослого населения при других хронических заболеваниях . 36, -, 38 Эта работа выходила за рамки настоящего проекта, но должна быть продолжена в будущих исследованиях. Во-вторых, больные РС, за которыми не следят в традиционной системе здравоохранения (например,g., альтернативная медицина или методы оказания денежной помощи без возмещения расходов на медицинское страхование) будут упущены с помощью нашего метода. Это привело бы к недооценке случаев рассеянного склероза. В-третьих, у нас были данные за 10 лет по системе здравоохранения VA и провинции Манитоба, но более короткие данные по другим системам здравоохранения для оценки влияния периода на распространенность. Хотя данные за десятилетие были бы оптимальными для всех наборов данных системы здравоохранения, высокие затраты на получение данных за более чем 3 года для всех страховых пулов были непомерно высокими.Наконец, мы не охарактеризовали расовую или этническую демографию нашей популяции с РС в этом отчете, потому что раса и этническая принадлежность не были единообразно собраны в используемых наборах данных AHC. Расовые и этнические различия в восприимчивости к РС могут быть фактором, способствующим географическим различиям в распространенности в регионах переписи населения США. 28 Сильные стороны нашего подхода заключаются в большой выборке, охватывающей одну треть населения США; широкая представленность системы здравоохранения; и использование проверенного алгоритма выявления случаев, который последовательно работает в разных системах здравоохранения. 13

Национальная оценка распространенности рассеянного склероза в США на 2010 год является самой высокой на сегодняшний день и обеспечивает современное понимание бремени болезни. Наш строгий, основанный на алгоритмах подход к оценке распространенности эффективен и может быть воспроизведен в других системах здравоохранения. Мы выступаем за использование этого подхода при других хронических неврологических состояниях. Необходима дальнейшая работа, чтобы лучше понять текущие различия в распространенности РС по расам и оценить возможные региональные различия в использовании медицинских услуг и заболеваемости РС.

Финансирование исследования

Это исследование финансировалось за счет гранта NMSS (HC-1508-05693).

Раскрытие информации

М. Валлин входил в состав советов по мониторингу безопасности данных в Национальных институтах неврологических заболеваний и инсульта - NIH, является членом секции исследований по оказанию медицинской помощи и исследованиям политики NMSS, а также получает финансовую поддержку от NMSS и Программа исследования заслуг Департамента по делам ветеранов. У. Калпеппер финансирует исследования от NMSS, получает поддержку от VHA MS Center of Excellence и является членом секции NMSS Health Care Delivery and Policy Research.Дж. Кэмпбелл имеет в течение последних 5 лет гранты на консультации или исследования от Агентства по исследованиям и качеству здравоохранения, ALSAM Foundation, Amgen, AstraZeneca, Bayer, Biogen Idec, Boehringer Ingelheim, Центров по контролю и профилактике заболеваний, Colorado Medicaid, Enterprise Community Partners. Inc, Институт клинических и экономических исследований, Маллинкродт, NIH, NMSS, Kaiser Permanente, PhRMA Foundation, Teva, Research in Real Life Ltd, Respiratory Effectiveness Group и Zogenix Inc. Л. Нельсон получает гранты от Центров по контролю и профилактике заболеваний , NIH и NMSS, а также контракты с Агентством регистрации токсичных веществ и заболеваний.Она получает компенсацию за работу в качестве консультанта Acumen, Inc. и входит в комитет по мониторингу данных Neuropace. А. Лангер-Гулд был главным исследователем в двух клинических испытаниях фазы 3 (Biogen Idec и Hoffman-LaRoche), спонсируемых промышленностью, и в одном исследовании наблюдения, спонсируемом промышленностью (Biogen Idec). Она получает грантовую поддержку от NIH, Национальных институтов неврологических заболеваний и инсульта, Пациент-ориентированного исследовательского института и NMSS. Р. Марри поддерживается семейным председателем Во по рассеянному склерозу и получает финансирование исследований от Канадских институтов медицинских исследований, Исследовательского центра Манитобы, Канадского общества рассеянного склероза, Научного фонда рассеянного склероза, Консорциума центров рассеянного склероза и NMSS.Она также является членом редколлегии журнала Neurology . Г. Каттер является членом советов по мониторингу данных и безопасности для AMO Pharmaceuticals, Apotek, Horizon Pharmaceuticals, Modigenetech / Prolor, Merck, Merck / Pfizer, Opko Biologics, Neurim, Sanofi-Aventis, Reata Pharmaceuticals, Receptos / Celgene, Teva Pharmaceuticals, Национальный институт сердца, легких и крови (комитет по пересмотру протокола) и Национальный институт здоровья детей и развития человека (комитет по надзору отдела исследований акушерской аптеки), а также в консультативных или консультативных советах Atara Biotherapeutics, Argenix, Bioeq GmBH, Консорциум MS Центры (грант), Genzyme, Genentech, Innate Therapeutics, Klein-Buendel Inc, Medimmune, Medday, Novartis, Opexa Therapeutics, Roche, Savara Inc, Somahlution, Teva Pharmaceuticals, Transparency Life Sciences и TG Therapeutics.W. Kaye получает финансирование от Агентства регистрации токсичных веществ и заболеваний, NMSS и Ассоциации по аккредитации программ защиты исследований человека. Л. Вагнер получает финансирование от Агентства регистрации токсичных веществ и заболеваний и NMSS. Х. Тремлетт - канадский научный руководитель нейроэпидемиологии и рассеянного склероза. Она получает исследовательскую поддержку от NMSS, Канадских институтов исследований в области здравоохранения, Канадского общества рассеянного склероза и Фонда научных исследований рассеянного склероза.Кроме того, за последние 5 лет она получила исследовательскую поддержку от Общества рассеянного склероза Канады, Фонда Майкла Смита по исследованиям в области здравоохранения и UK MS Trust, а также оплатила дорожные расходы для посещения конференций; все гонорары докладчика либо отклоняются, либо передаются в благотворительный фонд РС или на неограниченный грант для использования ее исследовательской группой. С. Бука получает финансирование исследований от NIH и NMSS. П. Дилокторнсакул получает финансирование исследований от Pfizer Thailand и Тайского фонда традиционных медицинских знаний.Б. Тополь получает грантовую поддержку от Центров по контролю и профилактике заболеваний и NMSS и контракты с Агентством по регистрации токсичных веществ и заболеваний. Л. Чен не сообщает о каких-либо раскрытиях, относящихся к рукописи. Н. ЛаРокка работает в NMSS на постоянной основе. Посетите Neurology.org/N для получения полной информации.

Благодарность

Авторы благодарят следующих соисследователей и членов рабочей группы США по распространенности рассеянного склероза за их вклад: Альберта Ло, Роберта Макберни, Олега Муравова, Бари Таленте и Лесли Риттер.Авторы также благодарят следующих ключевых сотрудников NMSS, внесших вклад в этот проект: Кэти Карлсон, Тимоти Кутзи, Шерри Гигер, Вейман Джонсон, Эйлин Мэдрей, Грэхема Макрейнольдса и Синди Загиебойло.

Приложение 1 Авторы

Приложение 2 Соисследователи и члены Рабочей группы США по распространенности рассеянного склероза

Сноски

  • Для получения полной информации перейдите на сайт Neurology.org/N. Информация о финансировании и раскрытия, которые авторы сочтут актуальными, если таковые имеются, приведены в конце статьи.

  • Соисследователи Рабочей группы США по распространенности рассеянного склероза (MSPWG) перечислены в приложении 2 в конце статьи.

  • Сбор за обработку статьи был профинансирован Национальным обществом рассеянного склероза.

  • См. Страницу e1016

    См. Страницу 469

  • Подкаст: NPub.org/bsqqt1

  • Получено 24 февраля 2018 г.
  • Принято в окончательной форме 17 августа 2018 г.
  • Авторские права © 2019 Автор (ы). Опубликовано Wolters Kluwer Health, Inc. от имени Американской академии неврологии.

Novartis и iHeartRadio объединились для «Ночи осведомленности о РС» 11 марта

В знак признания Национального Месяца распространения информации о рассеянном склерозе (РС), который отмечается в течение всего марта, Novartis и iHeartRadio объединились на виртуальном мероприятии, чтобы отпраздновать стойкий дух людей, страдающих рассеянным склерозом.

Это мероприятие под названием «Ночь для осведомленности о РС» будет транслироваться на странице iHeartRadio на YouTube в 8 p.м. ET в четверг, 11 марта.

«Цель« Ночи осведомленности о РС »и нашего партнерства с iHeartRadio - отметить стойкий дух людей, живущих с РС, и их различных сетей поддержки», - сказал Леверн Марш, вице-президент и глава отделения нейробиологии в США компании Novartis. сказал в электронном письме Новости рассеянного склероза сегодня .

Вечер примет участие Энди Грэммер, мультиплатиновый певец и автор песен. Некоторые из наиболее известных песен Грэммера включают «Honey, I’m Good», «Fine By Me» и «Keep Your Head Up.”

К

Grammer присоединятся соведущие Скири Джонс и Кейт Милликен. Джонс - известный радиоведущий, известный благодаря «Элвису Дюрану и утреннему шоу». Милликен, предприниматель в сфере здравоохранения и кинопродюсер, является известным защитником пациентов с рассеянным склерозом, живущим с этой болезнью более 14 лет.

Джонс и Милликен будут вести беседы на такие темы, как преимущества музыки при рассеянном склерозе, делясь своими мыслями с сообществом.

«Мы надеемся, что это событие нельзя пропустить… воодушевит и расширит возможности тех, кто пострадал от РС», - сказал Марш.

Для тех, кто не сможет принять участие в мероприятии, все шоу будет доступно на канале YouTube iHeartRadio с 12 по 18 марта.

По словам Марша, мероприятие «A Night for MS Awareness» продолжает миссию недавно запущенного проекта MS Vibes.

MS Vibes, созданная в сотрудничестве между Novartis и iHeartRadio, - это бесплатная потоковая радиостанция по запросу, предназначенная для сообщества MS. На станции представлены плейлисты популярной музыки, подобранные с целью поднять настроение слушателям.

Джонс и Милликен ведут серию ежемесячных подкастов на MS Vibes под названием «MS Journeys». На этом шоу со-организаторы интервьюируют людей из сообщества РС, включая лиц, осуществляющих уход, экспертов и людей, живущих с этим заболеванием, чтобы пролить свет на повседневные проблемы жизни с РС, а также предложить рекомендации и образование.

«Я рад быть частью команды, предлагающей« Ночь для осведомленности о РС »и MS Vibes для сообщества РС», - сказал Марш.

«Нашим приоритетом является повышение осведомленности о влиянии РС как изнурительного неврологического состояния и укрепление приверженности Novartis тому, чтобы быть партнером сообщества РС помимо лечения», - добавила она.

Новартис продает ряд одобренных препаратов для лечения РС, включая Майзент (сипонимод), Гиленья (финголимод), Экставиа (интерферон бета-1b) и Кесимпта (офатумумаб). Он также участвует в разработке диагностических тестов и инструментов для отслеживания прогрессирования заболевания.

Примечание. Из-за проблем с локализацией ссылка на MS Vibes может не работать для читателей в некоторых странах.

Мариса имеет степень магистра клеточной и молекулярной патологии Университет Питтсбурга, где она изучала новые генетические факторы рак яичников.Она специализируется на биологии рака, иммунологии и генетика. Мариса начала работать с BioNews в 2018 году. написано о науке и здоровье для SelfHacked and the Genetics Общество Америки. Также она пишет / сочиняет мюзиклы и преподает. фехтовальный клуб Университета Питтсбурга.

Всего сообщений: 81

Инеш имеет докторскую степень в области биомедицинских наук в Лиссабонском университете, Португалия, где она специализируется на биологии кровеносных сосудов, стволовых клетках крови и раке.До этого она изучала клеточную и молекулярную биологию в Universidade Nova de Lisboa и работала научным сотрудником в Faculdade de Ciências e Tecnologias и Instituto Gulbenkian de Ciência. В настоящее время Инес работает главным научным редактором, стремясь донести до сообществ пациентов последние научные достижения в ясной и точной форме.

Надежный, воспроизводимый и количественный анализ тысяч протеомов с помощью микропотоковой ЖХ-МС / МС

Отбор и подготовка образцов

Образцы человека, использованные в этом исследовании, были получены после информированного согласия и соблюдения соответствующего процесса утверждения этических норм Технического университета. Мюнхена.Исследование было одобрено этическим комитетом медицинского факультета Мюнхенского технического университета. Всего у пяти здоровых доноров образцы плазмы объемом 1 мл центрифугировали в течение 10 мин при 4000 g. Всего отбирали 50 мкл супернатанта и разбавляли 5 объемами 8 М мочевинного буфера, содержащего 80 мМ Трис-HCl, pH = 7,6, а затем хранили при -80 ° C до дальнейшего использования. Второе утро в середине потока мочи собирали у здорового донора, немедленно охлаждали до 4 ° C и центрифугировали при 4000 × g при 4 ° C в течение 30 минут для удаления остатков клеток.Супернатант концентрировали в вакууме 5-кратно с использованием SpeedVac, и белки осаждали с использованием пяти объемов ледяного этанола, инкубировали при -20 ° C в течение ночи с последующим центрифугированием при 20000 × g , 4 ° C в течение 30 минут. Осадок растворяли в 8 М буфере мочевины, содержащем 80 мМ Трис-HCl, pH = 7,6, и хранили при -80 ° C до дальнейшего использования. Образцы спинномозговой жидкости (CSF) от пяти человек с рецидивирующим / ремиттирующим рассеянным склерозом (RRMS) и пяти здоровых людей были объединены, чтобы получить образец, достаточный для этого технического исследования.Объединенный CSF хранился при -80 ° C до дальнейшего использования. Поскольку концентрация белка в образце спинномозговой жидкости была очень низкой, буфер с мочевиной не использовали. Около 1 г свежезамороженной ткани плаценты человека промывали пять раз ледяным буфером PBS, содержащим ингибиторы протеаз, с последующим добавлением 3 мл буфера для лизиса, содержащего 8 М мочевину, 80 мМ трис-HCl (pH = 7,6), 1 × EDTA- свободные ингибиторы протеаз (полный мини, Roche). Лизат переносили в пробирки precellys, содержащие керамические шарики, и инкубировали на льду в течение 5 мин.Затем пробирки precellys устанавливали на устройство для измельчения шариков Precellys 24 (Bertin Instruments). Гомогенизацию ткани проводили при 5500 об / мин в течение 2 × 25 с с 5-секундной паузой в течение пяти циклов. Между каждым циклом лизат помещали на лед на 10 мин. Лизат центрифугировали при 20000 g, 4 ° C в течение 30 мин, супернатант хранили при -80 ° C до дальнейшего использования. Клетки HeLa эпителиальной карциномы шейки матки человека (ATCC, CCL-2) культивировали в среде DMEM (Gibco, Invitrogen) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки, 100 Ед / мл пенициллина (Invitrogen), 100 мкг / мл стрептомицина (Invitrogen), при 37 ° C, в увлажненном инкубаторе с 5% CO2.Клетки собирали при ~ 80% конфлюэнтности путем двукратной промывки буфером PBS с последующим добавлением буфера для лизиса, содержащего 8 М мочевину, 80 мМ трис-HCl (pH = 7,6), 1 × ингибиторы протеазы без ЭДТА (полный мини, Roche) и 1 × Ингибиторы фосфатазы (Sigma Aldrich) прямо в планшет для культивирования клеток. Планшет инкубировали на льду 5 мин. Лизат клеток собирали соскабливанием с планшета. После этого лизат центрифугировали при 20000 × g , 4 ° C в течение 30 мин. Полученный супернатант хранили при -80 ° C до дальнейшего использования.10 линий клеток поджелудочной железы (BxPC-3 (ATCC, CRL-1687), Dan-G (DSMZ, ACC 249), HPAC (ATCC, CRL-2119), HuPt-4 (DSMZ, ACC 223), IMIM-PC- 1 (PRID, CVCL_4061), MiaPaCa2 (ATCC, CRM-CRL-1420), Panc-10.05 (ATCC, CRL-2547), Pa-Tu-8998-S (DSMZ, ACC 204), Pa-Tu-8998-T (DSMZ, ACC 162) и PSN-1 (ATCC, CRL-3211)) были предоставлены Günter Schneider. Клеточные линии культивировали в соответствии с рекомендациями поставщика клеточных линий до 60–80% конфлюэнтности 47 . Клетки лизировали 8 М мочевиной, 40 мМ Трис / HCl (pH 7.6), 1 × смесь ингибиторов протеазы без ЭДТА (Complete Mini, Roche) и 1 × смесь ингибиторов фосфатазы (Sigma-Aldrich). Лизат клеток осветляли центрифугированием при 20000 × g в течение 20 мин. Супернатанты использовали для расщепления раствора трипсином.

Расщепление белка и обессоливание пептидов

Концентрацию белка измеряли с помощью анализа Брэдфорда. Белки восстанавливали 10 мМ DTT при 37 ° C в течение 60 минут и алкилировали 55 мМ хлорацетамидом (CAA) при комнатной температуре в течение 30 минут в темноте.Для образца CSF раствор белка смешивали с одним объемом 40 мМ Трис-HCl (pH = 7,6). Для всех других образцов раствор белка смешивали с пятью объемами 40 мМ Трис / HCl (pH = 7,6). Белки переваривали трипсином для секвенирования (Roche) при соотношении протеазы к белку 1: 100 (мас. / Мас.) В течение 4 часов с последующим добавлением трипсина (1: 100) и инкубацией в течение ночи при 37 ° C. Расщепление останавливали добавлением муравьиной кислоты (FA) до конечной концентрации ~ 1%, и полученную смесь пептидов центрифугировали при 5000 × g в течение 15 мин.Пептиды в супернатанте загружали в картриджи Sep-Pak C18 (Waters) и элюировали 50% ACN, 0,1% FA в воде и сушили в SpeedVac. Образцы хранили при -80 ° C до дальнейшего использования.

TMT-мечение

Для мечения TMT11-plex обессоленные пептиды из HeLa и десять гидролизатов белка линии поджелудочной железы восстанавливали в 0,1% FA, и концентрацию пептида определяли с помощью NanoDrop TM 2000 (Thermo Scientific). Пептиды из клеточных линий MiaPaCa2, HuPt-4, BxPC-3, HPAC, Panc-10.05, PSN-1, Dan-G, Pa-Tu-8998-S, Pa-Tu-8998-T, IMIM-PC-1 и HeLa были помечены 126, 127 N, 127 C, 128 N, 128 C. , 129 N, 129 C, 130 N, 130 C, 131 N и 131 C реагента TMT11. Мечение TMT проводили в соответствии с опубликованным нами протоколом 48 . Вкратце, 200 мкг пептидов каждой из одиннадцати клеточных линий сушили в SpeedVac и восстанавливали в 40 мкл 50 мМ буфера HEPES (pH 8,5). Затем к каждому образцу добавляли 0,2 мг реагента TMT в 10 мкл сухого ACN и смешивали с помощью пипетки.Смесь инкубировали при 25 ° C и 400 об / мин на термомиксере в течение 1 ч. После этого к каждому образцу добавляли 4 мкл 5% раствора гидроксиламина для остановки реакции, реакцию проводили при 25 ° C и 400 об / мин на термомиксере в течение 15 мин. Наконец, меченые пептиды объединяли и добавляли 40 мкл 10% FA в 10% ACN. Чтобы избежать одной стадии SpeedVac перед обессоливанием пептидов, объединенные пептиды разбавляли 20 объемами 0,1% FA и очищали с помощью картриджа Sep-Pak C18, а элюат сушили в SpeedVac и хранили при -80 ° C до дальнейшего использования.

Автономное фракционирование пептидов с обращенной фазой с высоким pH

Система ВЭЖХ Dionex Ultra 3000, работающая на колонке Waters XBridge BEh230 C18 3,5 мкм 2,1 × 250 мм, использовалась для фракционирования пептидов при скорости потока 200 мкл / мин. Буфер A представлял собой 25 мМ бикарбоната аммония (pH = 8,0), буфер C представлял собой 100% сверхчистую воду (ELGA), буфер D представлял собой 100% ACN, буфер B в этой системе не использовался. Во время разделения доля буфера А поддерживалась на уровне 10%. Фракции собирали каждую минуту, и фракции собирали в 96-луночный планшет.Для немеченых пептидов расщепленные 200 или 400 мкг белка разделяли линейным градиентом от 5% D до 30% D за 87 минут с последующим линейным градиентом от 30% D до 80% D за 5 минут.

Чтобы иметь возможность сравнить результаты, полученные в этом исследовании, с данными из литературы, 92 фракции были собраны (от 2 мин до 94 мин) и затем объединены в 46 фракций путем добавления фракции 47 к фракции 1, фракции 48 к фракции 2 и т. Д. вперед. Расщепленный белок HeLa (200 мкг и 400 мкг) и расщепленный белок плаценты (200 мкг) фракционировали на 46 фракций для сравнения с опубликованными данными.Для переваривания плаценты, используемого для долгосрочного теста из 10 циклов, мы собрали 96 одноминутных фракций (от 1 до 97 минут) и объединили их в 48 фракций (как указано выше). Для пептидов, меченных TMT, 500 мкг объединенных пептидов разделяли линейным градиентом от 9% D до 42% D за 86 минут с последующим линейным градиентом от 42% D до 80% D за 12 минут. 96 фракций были собраны и объединены в 48 фракций (как указано выше). Пептидные фракции замораживали в морозильной камере -80 ° C в течение не менее 1 ч и сушили в SpeedVac без предварительного обессоливания.

Разделение фосфопептидов и обогащение Fe-IMAC

Всего 2 мг гидролизата белка HeLa было разделено на колонке Waters XBridge BEh230 C18 3,5 мкм размером 2,1 × 150 мм с линейным градиентом от 4% D до 32% D за 45 мин, с линейным увеличением до 80% D за 6 минут и выдерживали там в течение 3 минут перед тем, как снова увеличивать D до 5% за 2 минуты, и 96 фракций собирали с интервалами 0,5 минут. Пептиды объединяли поэтапно от 96–48 до 24–12 фракций, как в приведенной выше схеме. Фракции сушили в SpeedVac и хранили при -80 ° C до обогащения фосфопептидами.Фосфопептиды были обогащены из каждой из 12 фракций с использованием Fe (III) -IMAC-NTA (Agilent Technologies) на платформе AssayMAP Bravo (Agilent Technologies). Картриджи IMAC заправляли 100 мкл 99,9% ACN / 0,1% TFA и уравновешивали 50 мкл загрузочного буфера (80% ACN / 0,1% TFA). Образцы растворяли в 200 мкл загрузочного буфера и загружали в картриджи. Картриджи промывали 50 мкл загрузочного буфера и фосфопептиды элюировали 40 мкл 1% аммиака. Фосфопептиды сушили и хранили при -80 ° C до проведения анализа ЖХ-МС / МС.

Kinobeads, AP на основе FLAG и выпадающие списки BioID

Профилирование селективности Kinobeads для AT-9283 было выполнено с помощью стандартного протокола 49 . Клетки K-562 (ATCC, CCL-243), COLO-205 (ATCC, CCL-222) и MV-4-11 (ATCC, CRL-9591) культивировали в среде RPMI 1640 (Biochrom GmbH) с добавлением 10% (об. / об.) FBS (Biochrom GmbH) и 1% (об. / об.) антибиотики. Клетки SK-N-BE (2) (ATCC, CRL-2271) выращивали в среде DMEM / Ham's F-12 (1: 1) с добавлением 10% или 15% (об. / Об.) FBS, соответственно, и 1% (об. / v) антибиотики (Sigma).Клетки OVCAR-8 (RRID: CVCL_1629) культивировали в среде IMDM (Biochrom GmbH) с добавлением 10% (об. / Об.) FBS. Клетки лизировали в 0,8% NP40, 50 мМ трис-HCl pH 7,5, 5% глицерине, 1,5 мМ MgCl 2 , 150 мМ NaCl, 1 мМ Na 3 VO 4 , 25 мМ NaF, 1 мМ DTT, ингибиторы протеазы (SigmaFast, Sigma) и ингибиторы фосфатазы (приготовленные на месте согласно коктейлю ингибиторов фосфатазы 1, 2 и 3 от SigmaAldrich). 2,5 мг смеси белков из пяти клеточных линий предварительно инкубировали с возрастающими концентрациями соединения (Наполнитель ДМСО, 3 нМ, 10 нМ, 30 нМ, 100 нМ, 300 нМ, 1 мкМ, 3 мкМ, 30 мкМ) в течение 45 мин при 4 ° C в встряхивателе с односторонним движением.Впоследствии лизаты инкубировали с Kinobeads (18 мкл осевших шариков) в течение 30 мин при 4 ° C на встряхивателе для встряхивания. После промывания связанные белки восстанавливали с помощью 50 мМ DTT в 8 М мочевине, 40 мМ Tris HCl (pH = 7,4) в течение 30 минут при комнатной температуре. После алкилирования 55 мМ САА белки расщепляли трипсином. Пептиды обессоливали и концентрировали с использованием планшетов SepPak tC18 µEluation (Waters) и сушили в SpeedVac. Образцы аффинной очистки (AP) и BioID были приготовлены в соответствии с предыдущим протоколом 50,51 .Вкратце, образцы AP и BioID получали из линий HEK293 Flp-In T-REx, индуцирующих тестовую «приманку» или контроль, которые индуцировали в течение 24 часов с помощью 1 мкМ тетрациклина или одновременно с тетрациклином и 50 мкМ биотина, и собирали на лед. Для BioID осадки клеток ресуспендировали в соотношении клетки: буфер 1:10. Лизис клеточных гранул для очистки BioID (на стрептавидин-сефарозе) проводили в 50 мМ Трис-HCl (pH 7,5), 150 мМ NaCl, 0,1% (мас. / Об.) SDS, 1% NP-40, 1 мМ MgCl . 2 и 1 мМ ЭДТА, только что с добавлением 0.5% конечный (мас. / Об.) Дезоксихолат натрия и ингибиторы протеазы (№ по каталогу P8340, Sigma-Aldrich). Суспензию обрабатывали ультразвуком 3 раза по 5 с (перерыв 2 с) при 30% амплитуде. ТурбоНуклеазу (BioVision Cat # 9207-50KU; 250 Ед / мкл) и РНКазу (BioBasic Cat # RB0474; 10 мкг / мкл) добавляли в количестве 1 мкл / образец и инкубировали при 4 ° C в течение 30 минут. Всего к образцу добавляли 20% SDS, так что конечная концентрация SDS составляла 0,25%. Эту суспензию хорошо перемешивали и центрифугировали при 14000 × g в течение 20 минут при 4 ° C. Супернатант удаляли в новую пробирку, содержащую 30 мкл слоя стрептавидин-сефарозы, и инкубировали при 4 ° C в течение 3 часов при вращении.Осадки клеток для AP FLAG ресуспендировали в соотношении 1: 4 клетки: буфер. Аффинную очистку FLAG (на магнитных шариках анти-Flag, конъюгированных с M2-антителом, Sigma-Aldrich, M8823) проводили в течение 2 ч при 4 ° C на нутаторе 50,51 . После этого были выполнены две промывки 1 мл буфера для лизиса с последующей дополнительной промывкой 1 мл 20 мМ TrisHCl, pH 8, и 2 мМ CaCl 2 . Наконец, образцы трипсинизировали на шариках в течение ночи при 37 ° C с вращением и без алкилирования / восстановления и сушили в SpeedVac.

Настройка интерактивной микропоточной системы ЖХ-МС / МС

В данном исследовании система Dionex UltiMate 3000 RSLCnano была подключена к масс-спектрометру Q Exactive HF-X или Orbitrap Fusion Lumos (Thermo Fisher Scientific) в режиме онлайн. Для окончательной настройки ЖХ мы использовали капилляры nanoViper для всех соединений. Выход насоса был напрямую соединен с клапаном ввода пробы (подсоединенным к одному концу петли пробы) капилляром nanoViper с внутренним диаметром 75 мкм × 550 мм, другой капилляр nanoViper с внутренним диаметром 75 мкм × 550 мм использовался для подключения клапана ввода пробы (подсоединенный к другому концу пробоотборной петли) ко входу колонки.Петля для пробы объемом 20 мкл использовалась с системой микропотоковой ЖХ в режиме прямого впрыска. Во время градиентного элюирования петлю для образца удерживали на линии. Капилляр nanoViper с внутренним диаметром 50 мкм и 350 мм использовался для соединения выхода колонки с заземляющим металлическим соединением источника Ion Max API. Другой капилляр nanoViper с внутренним диаметром 50 мкм × 150 мм использовался для подключения другого конца заземляющего металлического соединения к входу для пробы зонда HESI-II (внутренний диаметр 50 мкм) Ion Max API Source. Глубина зонда была установлена ​​на линию A источника Ion Max API.

Все результаты, представленные в этом исследовании, были получены на коммерческой колонке Thermo Fisher Scientific Acclaim PepMap 100 C18 LC (размер частиц 2 мкм, внутренний диаметр 1 мм × 150 мм; каталожный номер 164711). Температура колонки поддерживалась на уровне 55 ° C с использованием встроенной печи колонок. В качестве примечания: мы оценили пять партий колонок PepMap, которые были произведены в 2012, 2013, 2017 и 2018 годах соответственно, и обнаружили, что партии 2012 и 2013 годов показали лучшие результаты. эффективность разделения, поэтому в данном исследовании использовалась периодическая колонка 2013 года.

Для подачи градиента использовались три насоса LC, доступные в системе Dionex UltiMate 3000 RSLCnano (загрузочный насос, градиентный насос NC и модифицированный насос Vanquish). Микропоточная система ЖХ-МС / МС была первоначально разработана путем создания градиентов с помощью загрузочного насоса. Эксперимент по титрованию ДМСО проводился с использованием загрузочного насоса при скорости потока 68 мкл / мин и с использованием линейных градиентов 5–28% B, 4–27% B, 3–26% B, 2–25% B, 1 –24% B, 0,1–23,1% B для растворителей с добавками 0%, 1%, 2%, 3%, 4% и 5% ДМСО соответственно.Хотя можно использовать загрузочный насос, мы наблюдали довольно длительную задержку градиента, возникающую в результате градиентного перемешивания перед напором загрузочного насоса, что приводило к мертвому объему около 220 мкл. Такие задержки градиента недопустимо велики для градиентов 15 и 30 минут. Поэтому мы установили на насос NC микрометрический расходомер (номер по каталогу 6041.7903 A, максимальный расход 50 мкл / мин) для получения градиента при максимальной скорости потока 50 мкл / мин и с использованием линейного градиента 3–28% B. и включение 3% ДМСО в растворителях 19 .Эта установка с ЧПУ-насосом использовалась для частей рукописи, посвященных разработке метода, включая градиентные тесты, серийные тесты разведения HeLa, глубинно-фракционированные тесты HeLa и анализы переваривания белков плаценты и т. Д. очень прочный.

Однако, так как максимальная скорость потока для комбинации насоса NC / микрометра составляет 50 мкл / мин, время обработки ЖХ все еще не было оптимальным и должно быть улучшено, особенно для коротких градиентов. Поэтому использовался модифицированный насос Vanquish, способный подавать градиенты до 100 мкл / мин.

Этот модифицированный насос Vanquish является бинарным градиентным насосом и имеет технические характеристики, аналогичные стандартному бинарному градиентному насосу высокого давления в модуле NCS-3500RS (https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets/CMD/Specification- Sheets / PS-71899-LC-UltiMate-3000-RSLCnano-PS71899-EN.pdf) с объемом задержки насоса <25 нл и максимальным давлением 800 бар. Между выпускным отверстием насоса и жидкостной системой не было установлено дополнительного смесителя. Все наблюдаемые задержки элюирования связаны только с объемом колонки, контуром ввода и капиллярными соединениями между насосом, колонкой, автоматическим пробоотборником, контуром ввода и зондом HESI.

Это позволяет промывать колонку со скоростью потока 100 мкл / мин и уменьшить общее время обработки до 5 мин, включая ввод пробы 3 мин и время уравновешивания колонки 2 мин. Скорость потока 50 мкл / мин была использована для получения линейных градиентов. Эта установка позволила обрабатывать 96 образцов в день с использованием времени градиента 10 минут. Модифицированный насос Vanquish использовался для долгосрочного теста производительности, включающего 1550 инъекций различных образцов, пептидов, меченных ТМТ, фосфопептидов, раскрывающихся образцов Kinobeads, образцов AP и BioID.

Конечные условия ЖХ, которые мы рекомендуем для микропоточной системы ЖХ, описанной в этом исследовании, следующие: растворитель A: 0,1% FA, 3% ДМСО в воде; растворитель B: 0,1% FA, 3% ДМСО в ACN; прямой ввод пробы с использованием растворителя А для загрузки пробы. Для немеченого полного протеомного анализа использовали линейный градиент 3–28% B для всех длин градиента. Вкратце, линейный градиент 3–28% B за 15 мин был использован для глубинного фракционирования немеченых пептидов и всех образцов с выпадающим списком (включая кинобусинки, AP и BioID).В долгосрочном тесте производительности линейный градиент 3–28% B за 30 минут использовался для пептидов мочи, спинномозговой жидкости, плазмы и PROCAL, линейный градиент 3–28% B за 60 минут использовался для пептидов HeLa, и линейный градиент 3–28% B за 15 мин использовали для глубоко фракционированных пептидов плаценты. Для обогащенных фосфопептидов использовали линейный градиент 1–25% B за 60 мин. Для пептидов, меченных ТМТ, были использованы линейные градиенты 7–32% B за 15 минут, 6–33% B за 25 минут.

Для микропотокового ЖХ, соединенного с Q Exactive HF-X, масс-спектрометр Q Exactive HF-X (Thermo Fisher Scientific) работал следующим образом: положительная полярность; напряжение распыления 3.5 кВ, ВЧ-линза с воронкой при 40, температура капилляра 320 ° C, температура вспомогательного газового нагревателя 300 ° C. Расходы для защитного газа, вспомогательного газа и продувочного газа были установлены на 32, 5 и 0 соответственно. Если не указано иное, использовался зависимый от данных сбор данных (DDA) с использованием полной установки MS-ddMS 2 . Полное разрешение МС было установлено на 60 000 при m / z 200, а целевое значение АРУ для полной МС составляло 3E6 с максимальным временем впрыска (IT) 50 мс. Диапазон масс был 360–1300. Целевое значение AGC для спектров фрагментов было установлено на 1E5.Для спектров MS2 минимальная цель AGC сохранялась на уровне 2E3. Ширина изоляции была установлена ​​на 1,3 m / z, а первая масса была установлена ​​на 100 m / z. Нормированная энергия столкновения была установлена ​​на 28%. Было выбрано предпочтительное соответствие пептидов и включено исключение изотопов. Спектры MS1 и MS2 были получены в профильном и центроидном режимах соответственно. Дополнительные подробности соответствующих методов MS показаны и обсуждаются в рукописи. Значения динамического исключения были установлены на 10 с, 10 с, 15 с, 25 с, 40 с и 50 с для градиентов 10 мин, 15 мин, 30 мин, 60 мин, 90 мин и 120 мин соответственно.Для полного протеомного анализа использовались оптимизированные методы 28 или 41 Гц, которые были оптимизированы в предыдущей литературе 31 . Верхние значения N в методах 28 Гц и 41 Гц равны 12 и 18, разрешение спектров MS2 в методах 28 Гц и 41 Гц составляет 15000 и 7500, максимальные значения IT прекурсоров в методах 28 Гц и 41 Гц равны 22. мс и 11 мс. Метод 41 Гц использовался только для теста разведения перевариваемого белка HeLa с 30-минутным и 60-минутным градиентами. Поскольку мы обнаружили, что метод 28 Гц работает намного лучше в большинстве случаев, метод 28 Гц использовался для всех других образцов полного протеома, включая градиентный тест переваривания белка HeLa, образцы жидкости организма, глубоко фракционированный переваривание белка HeLa и плаценты, киногранулы, AP и Выпадающие образцы BioID и т. Д.Для обогащенных фосфопептидов до 12 предшественников за цикл отбирали для MS2, используя максимальное IT 120 мс, и фрагменты записывали с разрешением 15000. Минимальная цель AGC была установлена ​​на 5E3, все остальные параметры остались прежними. Для пептидов, меченных TMT, целевое значение AGC для спектров фрагментов было установлено на 2E5, до 12 предшественников на цикл было выбрано для MS2, и фрагменты были записаны с разрешением 45000 (максимальное IT 86 мс). Окно изоляции и нормализованная энергия столкновения были установлены на 0.8 m / z и 35, минимальная цель AGC сохранялась на 5E3.

Для микропоточного ЖХ, подключенного к Orbitrap Fusion Lumos, масс-спектрометр (Thermo Fisher Scientific) работал следующим образом: положительная полярность; напряжение распыления 3,5 кВ, температура капилляра 325 ° C; температура испарителя 125 ° C. Расходы защитного газа, вспомогательного газа и продувочного газа были установлены на 32, 5 и 0 соответственно. Для немеченых пептидов полное разрешение МС было установлено на 120000 при m / z 200, цель полной МС AGC была 4E5 с максимальным IT 50 мс, а значение линзы RF было установлено на 40.Диапазон масс был установлен на 360–1300, а свойства MIPS были установлены на пептид. Для спектров MS2 порог интенсивности был установлен на 5E3, заряды по умолчанию были установлены на состояние 2–6. Целевое значение AGC было установлено на 1E4, ширина изоляции была установлена ​​на 0,4 m / z, а первая масса была зафиксирована на уровне 100 m / z. IonTrap использовался для обнаружения спектров MS2 с использованием функции быстрого сканирования. Максимальный IT составлял 10 мс для 15-минутного градиента и 35 мс для 30-минутного градиента. Время цикла было установлено на 0,6 с для 15-минутного градиента и 1 с для 30-минутного градиента.Продолжительность динамического исключения составляла 12 с для 15-минутного градиента и 20 с для 30-минутного градиента, исключая через один раз. Для пептидов, меченных TMT, время цикла было установлено на 1,2 с для 15-минутного и 25-минутного градиентов. Продолжительность динамического исключения была установлена ​​на 40 с для 15-минутного градиента и 50 с для 25-минутного градиента, исключить через один раз. Полное разрешение MS было установлено на 60 000 при m / z 200, а целевое значение полной MS AGC составляло 4E5 с максимальным IT 50 мс, а значение объектива RF было установлено на 50. Диапазон масс был установлен на 360-1500, а свойства MIPS были установлены на пептид.Для спектров MS2 порог интенсивности был установлен на 1E4, заряды по умолчанию были установлены на состояние 2–6. Модель ddMS2 IT HCD использовалась для спектров MS2, ширина изоляции была установлена ​​на 0,6 m / z, тип активации был HCD, энергия столкновения HCD [%] составляла 32. Целевое значение AGC было установлено на 1E4, а первая масса была зафиксировано на 100 м / з. IonTrap использовался для обнаружения спектров MS2 с использованием функции быстрого сканирования. Максимальный IT составлял 15 мс для 15-минутного градиента, 40 мс для 25-минутного градиента. Диапазон выбора предшественников был установлен на 400–2000, ширина исключения по массе была установлена ​​на 20 m / z для низкого и 5 m / z для высокого.Свойства исключения потери изобарической метки были установлены для реагента TMT. Для спектров MS3 использовалась модель ddMS3 OT HCD. Был включен синхронный выбор предшественников, количество предшественников SPS было установлено равным 8, окно изоляции MS составляло 1,2 m / z, тип активации был HCD, а энергия столкновения HCD составляла 55%. Orbitrap использовался для обнаружения спектров MS3 с разрешением 50 000 и диапазоном сканирования 100–1000. Целью AGC было 1E5 с максимальным IT 86 мс для 15-минутного и 25-минутного градиентов.

Nano flow LC – MS / MS

Система Dionex UltiMate 3000 RSLCnano была подключена к масс-спектрометру Q Exactive HF-X или Q Exactive HF.Пептиды загружали в колонку-ловушку (100 мкм × 2 см, заполненную смолой Reprosil-Gold C18 ODS-3 5 мкм, Dr. Maisch) с растворителем A (0,1% муравьиной кислоты в воде для ВЭЖХ) при скорости потока 5 мкл / мин в течение 10 мин и разделены на аналитической колонке (75 мкм × 40 см, заполнены смолой Reprosil-Gold C18 3 мкм, Dr.Maisch) при 300 нл / мин. Аналитическую колонку нагревали до 50 ° C, используя 30-сантиметровый нагреватель капиллярной колонки (ASI, Pompton Plains, NJ). Растворитель B представлял собой 0,1% FA, 5% ДМСО в воде и растворитель C 0.1% ЖК, 5% ДМСО в ACN. Q Exactive HF-X использовали для анализа фосфопептидов и пептидов, меченных TMT. Для фосфопептидов градиент составлял 4–15% C за 40 минут, затем 15–28% C через 20 минут. Для анализа пептидов, меченных TMT, градиент составлял 8–34% C за 15 мин. Параметры MS1 и MS2 были такими же, как и для микропоточной системы ЖХ – МС / МС. Пептиды из образца kinobeads разделяли с помощью той же системы нЖК с использованием линейного градиента от 5 до 33% C за 52 мин. Спектры MS1 были получены с разрешением 60 000 (при m / z 200) в Orbitrap с использованием максимального IT 10 мс и целевого значения автоматической регулировки усиления (AGC) 3E6.Для спектров MS2 было выделено до 12 предшественников пептидов для фрагментации (ширина выделения 1,7 Th, максимальное IT 75 мс, значение AGC 2e5). Прекурсоры были фрагментированы с помощью HCD с использованием 25% нормализованной энергии столкновения (NCE) и проанализированы на орбитальной ловушке с разрешением 15000. Длительность динамического исключения фрагментированных ионов-прекурсоров была установлена ​​на 30 с.

Обработка и анализ данных

Если не указано иное, поиск данных проводился с помощью MaxQuant v1.6.2.3 52 в базе данных UniProtKB Human Reference Proteome (v22.07.13, 88381 запись). Использовались параметры MaxQuant по умолчанию. В качестве фермента был указан трипсин, расщепляющий все остатки лизина и аргинина и допускающий до двух пропущенных расщеплений. Карбамидометилирование цистеина определяли как фиксированную модификацию, а ацетилирование N-конца белка и окисление метионина рассматривали как вариабельные модификации. Уровень ложного обнаружения (FDR) был установлен на 1% для сайта, соответствия пептидному спектру (PSM) и уровней белка. Для теста производительности 1550 инъекций отдельно сравнивались наборы данных HeLa (200 необработанных файлов), мочи (200 необработанных файлов), CSF (200 необработанных файлов), плазмы (200 необработанных файлов) и PROCAL (270 необработанных файлов). база данных эталонного протеома человека UniProtKB (v22.07.13, 88381 запись) с добавлением пептидных последовательностей PROCAL 32 . 480 необработанных файлов образца плаценты были проанализированы в той же базе данных UniProtKB Human Reference Proteome без пептидных последовательностей PROCAL. Была включена функция сопоставления между запусками, временное окно сопоставления и выравнивания было установлено на 0,7 мин и 5 мин. Была включена количественная оценка без меток, а значение минимального соотношения LFQ было установлено на 2. Для повторного анализа опубликованных наборов данных мы загрузили исходные файлы необработанных данных и повторно провели в них поиск с помощью MaxQuant, как указано выше.

Для данных TMT в качестве конкретных параметров были добавлены поправочные коэффициенты TMT для конкретной партии (номер продукта: и A34807). Данные TMT, сгенерированные методами MS2 и MS3, просматривались вместе, но с разными группами параметров. Точность массы репортерных ионов была установлена ​​на значение по умолчанию 0,003 Да, а допуск MS2 был установлен на 0,4 Да для IT MS. Все остальные параметры были по умолчанию. Для фосфопептидов phopho (STY) был настроен на переменную модификацию.

Для образцов Kinobeads количественный анализ пептидов и белков выполняли с помощью MaxQuant (v.1.6.0.1) путем поиска спектров MS2 по всем каноническим последовательностям белков, как указано в справочной базе данных Uniprot (только человеческие белки, 20 230 записей, загружено 06.07.2017) с использованием встроенной поисковой системы Andromeda. Phopho (STY), окисление метионина и ацетилирование N-концевого белка были установлены как переменные модификации, а карбамидометилированный цистеин - как фиксированная модификация. Все данные были отфильтрованы для 1% PSM и 1% белка FDR. В MaxQuant была включена количественная оценка без меток и соответствие между прогонами.

Для образцов AP и BioID с выпадающим списком было шесть повторов (2 биологических повтора × 3 технических повтора) для каждого образца. Все необработанные файлы были обработаны с помощью ранее описанного конвейера 53 . Вкратце, результаты поиска Mascot и Comet были отфильтрованы с iProphet ≥ 0,95 и уникальными пептидами ≥ 2. Взаимодействующие с высокой степенью достоверности были определены как белки с BFDR ≤ 0,01 с использованием параметров по умолчанию в программном обеспечении SAINTexpress. Для SAINT-анализа набора данных AP-MS образцы как 3xFLAG-empty, так и 3xFLAG-GFP использовались в качестве контролей, а наборы данных как контроля, так и приманки были сжаты до трех экспериментов.Для SAINT-анализа набора данных BioID-MS в качестве контролей использовали образцы 3xFLAG-empty, empty-BirA * -FLAG и BirA * -FLAG-GFP. В каждом случае контроли (12 повторов из двух типов контрольных образцов для FLAG и 18 повторов из трех типов контрольных образцов для BioID, соответственно) были сжаты до шести виртуальных контролей, в то время как наборы данных приманки (шесть повторов на приманку) были сжаты до три эксперимента. Для сравнения с ранее описанными взаимодействиями с высокой степенью достоверности мы получили набор данных выпадающих образцов AP (EIF4A2 и MEPCE) из дополнительной информации опубликованной статьи 40 , а также набор данных выпадающих образцов BioID (LMNA, NIFK , и CTNNA1) был загружен с веб-сайта Human Cell Map (https: // humancellmap.org /) 42 . Для онлайн-анализа STRING пяти приманок 43 толщина линии между каждым белком указывает на силу поддержки данных, все активные источники взаимодействия, включая текстовый майнинг, эксперимент, базы данных, коэкспрессию, слияние генов, соседство и совместное использование. возникновение. Минимальный требуемый показатель взаимодействия был установлен на 0,70, а максимальное количество отображаемых взаимодействующих элементов было установлено не более 10 взаимодействующих элементов для 1-й оболочки и без взаимодействующих элементов для 2-й оболочки.Включен предварительный просмотр структуры внутри пузырей сети. Значения кратного изменения (FC) взаимодействующих элементов (по сравнению с контрольными раскрывающимися списками), оцененные с помощью анализа SAINT, были аннотированы в сети STRING (рис. 4b, c и дополнительный рис. 14, белки без аннотации FC не были идентифицированы как высоко достоверные взаимодействующие элементы в SAINT. анализ).

Анализ данных после выходных результатов MaxQuant был выполнен в R 54 . Файл результатов доказательств использовался для анализа переходящего остатка.После удаления всех обратных пептидов были суммированы интенсивности пептидов каждого исходного файла. Поскольку альбумин является одним из наиболее распространенных белков в образцах жидкостей организма, мы сохранили пептиды, сопоставленные с потенциально загрязняющими белками, для анализа переходящего остатка. Файлы результатов доказательств использовались для анализа времени удерживания (RT) PROCAL, поскольку мы искали необработанные файлы как с последовательностями человека, так и с последовательностями PROCAL, мы сначала удалили все пептиды, идентифицированные из человеческой базы данных. По техническим причинам три необработанных файла HeLa_P035214_BA1_S00_A00_R11, Plasma_P035250_BE1_S00_A00_R2 и CSF_P035234_BC1_S00_A00_R15 пришлось исключить из анализа времени удерживания.Поскольку поиск по MBR был включен, иногда для одного пептида в одном и том же необработанном файле было несколько значений времени удерживания. В таких случаях сохранялось только время удерживания с наивысшим значением интенсивности. Кроме того, из анализа исключались пептиды, значения интенсивности которых были ниже 5E7. Что касается анализа динамического диапазона образца TMT: динамический диапазон был определен как отношение максимального и минимального значений интенсивности пептида в каналах TMT11, представляющих различные линии раковых клеток человека.Если были каналы с нулевым значением, интенсивность канала с наименьшим значением выше нуля использовалась как минимальное значение интенсивности. Для обеспечения честного сравнения учитывались только пептиды, идентифицированные во всех четырех экспериментах ЖХ-МС / МС. Если пептиды были представлены более чем одним спектром МС / МС в одном эксперименте, мы суммировали их интенсивности в соответствующем канале (ах) TMT, чтобы вычислить соотношение. Анализ t-SNE был выполнен с использованием пакета Rtsne 35 и значений интенсивности без метки количественного определения (LFQ) без дальнейшей нормализации в качестве входных данных.

Сводка отчетов

Дополнительная информация о дизайне исследований доступна в Сводке отчетов по исследованиям природы, связанной с этой статьей.

Производительность инструментов управления повседневными информационными системами (PRISM) - оценка MEASURE

Скачать документ:
МС-11-46д.pdf - Документ PDF, 1,073 кБ (1,099,320 байт)

Автор (ы):

Год: 2011

Abstract:

Министерство здравоохранения было обеспокоено тем, что сотрудники округа и учреждения редко использовали обычные данные для выявления недостатков в работе, составления планов и отслеживания прогресса.Информация была доступна; почему он использовался только для заполнения отчетов, а не для принятия решений и улучшения программы? Инструменты PRISM предоставили министерству структурированный способ оценки качества данных и использования информации в его рутинной информационной системе здравоохранения. Результаты оказались показательными. Ошибки данных были очень высокими, отчасти из-за чрезмерно сложных форм сбора данных, неточной передачи данных из историй болезни пациентов и ошибок расчетов. Оценка PRISM привела к разработке простых в использовании форм, курса повышения квалификации по сбору и обработке данных для медицинских работников, а также к серии встреч и публикаций для обмена результатами деятельности и успехами.

Версия серии PRISM 2018 года, обновленная и с новыми модулями (Toolkit, User's Kit и Training Kit) доступна здесь: https://www.measureevaluation.org/prism

.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *